專利名稱：Dpiv和apn抑制劑在治療成纖維細胞超增殖和改變的分化狀態(tài)相關的皮膚病中的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明描述了通過氨基肽酶N(APN，E.C.3.4.11.2.，CD13)和/或二肽基肽酶IV(DPIV，E.C.3.4.14.5.，CD26)抑制劑分別的或同時作用來抑制細胞增殖和分化所必需的成纖]維細胞DNA合成，或在時間上，立即連續(xù)應用那些酶各自特定的抑制劑或其氨基酸衍生物、肽或肽衍生物等具有相同底物特異性(APN-和/或DPIV-類似的酶活性)的酶的抑制劑，借此抑制和調(diào)節(jié)成纖維細胞的增殖(DNA合成)和分化。
許多皮膚病伴隨著成纖維細胞的超增殖和改變的分化狀態(tài)。那些疾病包括良性成纖維細胞超增殖態(tài)(特別是感染后的、炎癥后的和外傷后的肥厚性瘢痕、疤痕疙瘩、血管纖維瘤、皮膚纖維瘤、纖維脂肪瘤、潰瘍傷疤)，其也可以表現(xiàn)為彌散性的(肌-)纖維瘤(例如先天彌散性纖維瘤)，以及惡性成纖維細胞超增殖態(tài)(如纖維肉瘤、混合腫瘤如非典型纖維黃瘤、惡性纖維組織細胞瘤、侵蝕性血管粘液瘤、副腫瘤)。另一組疾病是纖維化自身免疫疾病，如不同情況(局限的硬皮病、進行性的全身硬皮病、CREST綜合征)中的局部和全身硬皮病，伴隨其它成膠的皮膚硬化和移植物對宿主疾病的皮膚變化。成纖維細胞改變的分化狀態(tài)是許多纖維化疾病的表現(xiàn)，到目前為止這些疾病的病因學在很大程度上仍然不清楚。這些疾病包括白癜風(白斑病、硬化性萎縮性苔蘚)和不同種類的假硬皮癥(如嗜曙紅粒細胞增多的/增生性筋膜炎、外因產(chǎn)生的假硬皮癥，如毒油綜合征、硅肺病、卟啉癥、嗜曙紅粒細胞增多肌痛綜合病征、流行粘蛋白增多癥(Lichen粘-水腫)或包柔螺旋體相關的纖維化狀態(tài))。另外，發(fā)生了繼發(fā)性硬化癥，如伴隨慢性靜脈閉鎖不全或淋巴水腫(lipolymphedemas)的郁積纖維化過程中的，模擬禿頭癥(禿頭癥雄性激素)的纖維化進程中的，和罕見局部成纖維細胞疾病(杜普伊特倫病、L氏(Ledderhose’s)病、“指節(jié)墊”、陰莖硬結(佩尼羅病、硬化陰莖海綿體)。
在控制和調(diào)節(jié)細胞之間的相互作用方面，對肽酶如二肽基肽酶IV和氨基肽酶N或具有相似作用的酶特別有興趣，因為它們部分地、局部地、在細胞膜中作為外酶，與其它胞外結構相互作用，由酶-催化水解作用分別激活或失活肽能的信使物質，因此對細胞-細胞傳遞是重要的[YaronA等Proline-dependent structural and biological properties of peptides andprotein，Crit Rev Biochem Mol Biol，1993；2831～81；Vanhoof G等Proline motifs in peetides and their biological progressing，F(xiàn)ASEB J 1995；9736～744]。
已經(jīng)顯示出膜-結合肽酶如DP IV和APN在免疫細胞特別是T-淋巴細胞的激活和克隆擴大中起重要作用[Fleischer BCD26a surfaceprotease involved in T-cell activation.Immunology Today 1994；15180～184；Lendeckel U等Role of alanyl aminopeptidase in growth and functionof human T cells.International Journal of Molecular Medicine 1999；417～27；Riemann D等CD 13-not just a marker in leukemia typing.Immunology Today 1999；2083～88]。促分裂原-刺激的單核細胞(MNZ)和富集的T-淋巴細胞的許多功能如DNA合成、產(chǎn)生和分泌免疫-刺激細胞因子(IL-2，IL-6，IL-12，IFN-γ)、以及B-細胞的輔助功能(IgG和IgM的合成)，在DP IV或APN的特定抑制劑的存在下受到抑制(Schn E等The dipeptidyl peptidase IV，a membrane enzymeinvolved in the proliferation of T lymphocytes.Biochim.Acta，1985；2K9-K 15；Schn E等The role of dipeptidyl peptidase IV in human Tlymphocyte activation.Inhibitors and antibodies against dipeptidylpeptidase IV suppress lymphocyte proliferration and immunogobulinsynthesis in vitro.Eur.J.Immunol.1987；171821～1826；Reinhold D等Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV induce secretion of transforminggrowth factor β1 in PWM-stimulated PBMNC and T cells.Immunology1997；91354-360；Lendeckelu等Induction of the membrane alanylaminopeptidase gene and surface expression in human T-cells by mitogenicactivation.Biochem.J.1996；319817-823；Khne T等A cell surfacepeptidase involved in regulating T cell growth(Review).Int.J.Mol.Med.1999；43-15；Lendeckel U等Role of alanyl aminopeptidase in growthand function of human T cells(Review).Int.J.Mol.Med.1999；417-27)。
已經(jīng)知道，可以通過合成的抑制劑來抑制位于免疫細胞上的二肽基肽酶IV來獲得對自體免疫疾病和移植物對宿主排異的治療(參見，例如EPA-0764151；WO95/29691，EP-A0731789，EP-A0528858)。
本發(fā)明是基于令人驚訝的發(fā)現(xiàn)二肽基肽酶IV/DP IV或CD26(在成纖維細胞之上或之內(nèi)表達)的抑制劑，或其具有相同底物特異性(DPIV-類似酶活性)的酶的抑制劑和氨基肽酶N/APN或CD13的抑制劑，或其具有相同底物特異性(APN-類似酶活性)的酶的抑制劑的單獨或同時的作用抑制了成纖維細胞的增殖(DNA合成)。
該發(fā)明顯示出抑制DP IV和APN的物質或抑制具有相同底物特異性(APN-和/或DP IV-類似酶活性)酶的物質的單獨或同時應用，或其相應的組合物及其給藥形式的應用很好地適于治療和預防與成纖維細胞超增殖和改變的分化狀態(tài)相關的皮膚病，對于其的發(fā)展，控制成纖維細胞DNA合成的增殖和分化起關鍵作用。
詳細地，本發(fā)明是基于發(fā)現(xiàn)通過給藥二肽基肽酶IV的抑制劑或其具有相同底物特異性酶的抑制劑和/或氨基肽酶N的抑制劑或其具有相同底物特異性酶的抑制劑顯著地抑制了成纖維細胞的DNA合成。
上述疾病目前通過局部和/或全身給藥免疫抑制劑、糖皮類固醇、非特異性抗炎劑和潤膚劑來治療，以及通過受物理療法治療癥狀。特別地，對于全身藥物治療，通常產(chǎn)生不希望的副作用，尤其是柯興氏綜合征、骨質疏松癥、感染或糖尿病。對于局部治療，易獲得局部皮膚atropiae和增加的皮膚易感性。對于全身治療以及局部免疫抑制治療，可能產(chǎn)生皮膚腫瘤。
當考慮上述疾病時，特別是早期階段，DP IV和/或APN抑制劑的使用是完全新的，推測是非常有效的，可能的低成本治療形式和現(xiàn)有治療概念有價值的可替換部分。
根據(jù)本發(fā)明應用的二肽基肽酶IV的抑制劑或具有相同底物特異性(DP IV-類似酶活性)酶的抑制劑和/或氨基肽酶N的抑制劑或具有相同底物特異性(APN-類似酶活性)酶的抑制劑可以應用于藥物學上可應用的制劑復合物中如抑制劑、底物、擬底物、肽和肽衍生物，來作為抑制劑的作用，還作為這種酶的抗體。本發(fā)明的抑制劑可以單獨使用，或幾種組合使用，優(yōu)選兩種組合使用。
優(yōu)選DPIV的效應物是Xaa-Pro二肽，相應的衍生物，優(yōu)選二肽膦酸二芳酯、二肽硼酸(例如Pro-Boro-Pro)及其鹽，Xaa-Xaa-(Trp)-Pro-(Xaa)n肽(n＝0至10)，相應的衍生物及其鹽，和氨基酸-(Xaa)酰胺，相應的衍生物及其鹽，其中Xaa表示α-氨基酸/-亞氨基酸或α-氨基酸衍生物/-亞氨基酸衍生物，優(yōu)選N∈-4-硝基芐基氧化羰基-L-賴氨酸，L-脯氨酸，L-色氨基酸，L-異亮氨酸，L-纈氨酸和環(huán)胺，如吡咯烷、哌啶、噻唑烷(thiazolidine)及其表示酰胺結構的衍生物。在較早的專利(K.Neubert等，DD296,075A5)中描述了這樣的化合物及其制備。
此外，色氨基酸-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸衍生物(TSL)和(2S，2S′，2S″)-2-[2′-[2″-氨基-3″-(吲哚-3-基-)1″-氧脯氨酸-基-]1′，2′，3′，4′-四氫-6′，8′-二羥基-7-甲氧基-異喹啉-3-基-羰基氨基-]4-羥甲基-5-氫-戊酸(TMC-2A)可以有利地用作DP IV的效應物?？梢杂欣褂玫膶嵗鼶PIV抑制劑為Lys[Z(NO2)]噻唑烷(thiazolidide)，其中Lys表示L-賴氨酸殘基，Z(NO2)表示4-硝基芐基氧羰基(同樣參見DD-A296,075)。
根據(jù)本發(fā)明，可以作為丙氨酰氨基肽酶(氨基肽酶N，APN)的實例抑制劑是放線酰胺素、柳定(leuhistin)、汾必定(phebestin)、阿嗎他定(amastatin)、貝他定(bestatin)、普必定(probestin)、β-氨基硫醇、α-氨基次膦酸、α-氨基次膦酸衍生物，優(yōu)選為D-Phe-ψ-[PO(OH)-CH2]-Phe-Phe及其鹽。丙氨酰氨基肽酶的優(yōu)選抑制劑是貝他定(烏苯美司)、放線酰胺素、普必定、汾必定、RB3014或柳定。
抑制劑以及含有其的藥物制劑和已知的載體物質同時給藥。本發(fā)明還包括藥物制劑的制備，該藥物制劑包括兩種或多種DPIV的抑制劑或具有DP IV-類似酶活性的酶的抑制劑和/或APN抑制劑或具有APN-類似酶活性的酶的抑制劑，并以定距離間隔地結合本身已知的載體、佐劑和/或添加劑物質，為了聯(lián)合效應而同時或在時間上立即連續(xù)地給藥。
一方面，給藥是局部給藥，如霜劑、軟膏、糊劑、凝膠體、溶液、噴霧、脂質體和納顆粒(nanosome)、混溶洗劑、長效(pegylated)制劑、可降解(即在生理條件下可分解)儲留槽基質、水狀膠敷料、膏藥、微海綿、預聚物和相似的新載體物質、快速注射和其它包括可灌滴應用的皮膚基料/載體；以及另一方面，作為全身應用，以合適的配方或合適的蓋侖形式用于口服、透皮的、靜脈內(nèi)的、皮下的、皮內(nèi)的、肌內(nèi)應用。
根據(jù)本發(fā)明的抑制劑以及含有一種或幾種上述抑制劑和任選地更多成分如更多的抑制劑和藥物學上可接受的添加劑、佐劑或載體物質的制劑，可以預防或治療地應用于多種皮膚病和包括成纖維細胞超增殖和改變的分化狀態(tài)的病癥中。例如，提及的預防和治療良性纖維變性和硬化病(特別是感染后的和外傷后的肥厚性瘢痕、疤痕疙瘩、皮膚纖維瘤、纖維脂肪瘤、彌散性(肌-)纖維瘤)，以及惡性成纖維細胞超增殖態(tài)(如纖維肉瘤、混合腫瘤如非典型纖維黃瘤、惡性纖維組織細胞瘤、侵蝕性血管粘液瘤、副腫瘤)、纖維化自體免疫疾病如硬皮病(局限的硬皮病、進行性的全身硬皮病、CREST綜合征)、伴隨其它成膠的皮膚硬化和移植物對宿主疾病、白癜風(白斑病、硬化性萎縮性苔蘚)，和不同種類的假硬皮癥(如嗜曙紅粒細胞增多的/增生性筋膜炎、外因產(chǎn)生的假硬皮癥，如毒油綜合征、硅肺病、卟啉癥、嗜曙紅粒細胞增多肌痛綜合病征、流行粘蛋白增多癥(Lichen粘-水腫)或包柔螺旋體相關的纖維化狀態(tài))，繼發(fā)性硬化癥，如伴隨慢性靜脈閉鎖不全或淋巴水腫的郁積纖維化過程中，模擬禿頭癥(禿頭癥雄性激素)的纖維化進程中，和罕見局部成纖維細胞疾病(杜普伊特倫病、L氏病、“指節(jié)墊”、陰莖硬結(佩尼羅病、硬化陰莖海綿體)。
本發(fā)明同時還涉及治療和預防包括成纖維細胞超增殖和改變的分化狀態(tài)的皮膚病的方法，該方法包括將二肽基肽酶IV(DP IV)的抑制劑和具有相同底物特異性(DP IV-類似酶活性)的酶的抑制劑和/或丙氨酰氨基肽酶(氨基肽酶N、APN)的抑制劑和具有相同底物特異性(APN-類似酶活性)的酶的抑制劑給藥于需要預防和/或治療上述皮膚病的患者。
本發(fā)明特別優(yōu)選的實施方案中，將上述酶的一種或幾種抑制劑、或含有單獨的或優(yōu)選組合的這些抑制劑的一種或幾種藥物制劑給藥于遭受隨后提及的一種或幾種疾病的患者或需要預防隨后提及的任何疾病的患者。所述抑制劑優(yōu)選選自DP IV抑制劑，且特別優(yōu)選選自Xaa-Pro-二肽(Xaa＝α-氨基酸或側鏈-受保護的衍生物)，相應衍生物，更優(yōu)選二肽膦酸二芳酯，二肽硼酸(例如Pro-Boro-Pro)及其鹽，Xaa-Xaa-(Trp)-Pro-(Xaa)n肽(Xaa＝α-氨基酸，n＝0到10)，相應的衍生物及其鹽，氨基酸(Xaa)酰胺，相應的衍生物及其鹽，其中Xaa表示α-氨基酸或側鏈-受保護的衍生物，優(yōu)選為N∈-4-硝基芐基-氧羰基-L-賴氨酸，L-脯氨酸，L-色氨酸，L-異亮氨酸，L-纈氨酸和環(huán)胺，如吡咯烷、哌啶、噻唑烷及其衍生物，表示酰胺結構，和/或色氨基酸-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸衍生物(TSL)和(2S，2S′，2S″)-2-[2′-[2″-氨基-3″-(吲哚-3-基-)1″-氧脯氨酸-]1′，2′，3′，4′-四氫-6′，8′-二羥-7-甲氧基-異喹啉-3-基-羰基氨基-]4-羥甲基-5-氫-戊酸(TMC-2A)；和選自APN抑制劑，且特別優(yōu)選選自放線酰胺素、柳定、汾必定、阿嗎他定、貝他定、普必定、β-氨基硫醇、α-氨基次膦酸、α-氨基次膦酸衍生物，優(yōu)選為D-Phe-ψ-[PO(OH)-CH2]-Phe-Phe及其鹽。
本發(fā)明進一步優(yōu)選的方法中，抑制劑，和任選地相互組合以及含有那些抑制劑或其組合的藥物制劑備在預防和治療包括成纖維細胞的超增殖和改變的分化狀態(tài)的疾病和病癥中的應用。例如，提及的預防和治療良性纖維變性和硬化病(特別是感染后的和外傷后的肥厚性瘢痕、疤痕疙瘩、皮膚纖維瘤、纖維脂肪瘤、彌散性(肌-)纖維瘤)，以及惡性成纖維細胞超增殖態(tài)(如纖維肉瘤、混合腫瘤如非典型纖維黃瘤、惡性纖維組織細胞瘤、侵蝕性血管粘液瘤、副腫瘤)、纖維化自體免疫疾病如硬皮病(局限的硬皮病、進行性的全身硬皮病、CREST綜合征)、伴隨其它成膠的皮膚硬化和移植物對宿主疾病、白癜風(白斑病、硬化性萎縮性苔蘚)，和不同種類的假硬皮癥(如嗜曙紅粒細胞增多的/增生性筋膜炎、外因產(chǎn)生的假硬皮癥，如毒油綜合征、硅肺病、卟啉癥、嗜曙紅粒細胞增多肌痛綜合病征、流行粘蛋白增多癥(Lichen粘-水腫)或包柔螺旋體相關的纖維化狀態(tài))，繼發(fā)性硬化癥，如伴隨慢性靜脈閉鎖不全或淋巴水腫的郁積纖維化過程中阿，模擬禿頭癥(禿頭癥雄性激素)的纖維化進程中的，和罕見局部成纖維細胞疾病(杜普伊特倫病、L氏病、“指節(jié)墊”、陰莖硬結(佩尼羅病、硬化陰莖海綿體)。
根據(jù)本發(fā)明特別優(yōu)選的預防和/或治療方法中，一種或多種上述DPIV和/或APN的抑制劑以這樣的方式應用兩種或多種DP IV的抑制劑或具有DPIV-類似酶活性的酶的抑制劑和/或APN的抑制劑或具有APN-類似酶活性的酶的抑制劑以定距離間隔的形式、和本身已知的載體、佐劑和/或添加物質組合于分開的制劑同時或在時間上為了聯(lián)合效應立即連續(xù)給藥。這種給藥是全身應用的形式，和本身已知的載體、佐劑和/或添加物質一起用于口服、透皮的、經(jīng)由皮膚的、靜脈內(nèi)的、皮下的、皮內(nèi)的、肌內(nèi)的、直腸的、陰道的、舌下腺的應用和/或作為霜劑、藥膏、糊劑、凝膠體、溶液、噴霧、脂質體或納顆粒、長效制劑、可降解儲留槽基質、混溶洗劑、水狀膠敷料、膏藥、微海綿、預聚物或相似的新載體物質、快速注射或其它包括可灌滴應用的皮膚基料/載體形式的局部應用。
通過以下的實施例將更詳細地說明本發(fā)明。該實施例示出了本發(fā)明的優(yōu)選實施方案。然而，本發(fā)明并不受限于該優(yōu)選的實施方案。
實施例實施例1我們的研究表明，通過給藥DP IV的抑制劑(Lys[Z(NO2)]噻唑烷)和/或APN的抑制劑(放線酰胺素)以劑量依賴性的方式抑制了人類成纖維細胞的DNA合成。
人類成纖維細胞強烈表達DP IV和APN(

圖1)。活細胞中DP IV的酶活性為57.3±12.4pkat/106細胞，APN的酶活性為380.5±48.2pkat/106細胞(n＝4)。相應地，在這種細胞上可以檢測出APN和DPIV的mRNA(圖2)。
將健康志愿者的成纖維細胞和上述抑制劑一起孵育48h，隨后通過如Reinhold等所述的測量3[H]-胸腺嘧啶的并入來測定DNA合成(Reinhold等Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV induce secretion oftransforing growth factor β1 in PWM-stimulated PBMNC and T cells，Immunology，1997；91354-360)。圖3顯示了DNA合成的劑量依賴性抑制。
為了測量DP IV的抑制劑(Lys[Z(NO2)]噻唑烷)和/或APN的抑制劑(放線酰胺素)對人成纖維細胞DNA合成的劑量依賴性效果，用指定的抑制劑濃度將細胞孵育48h。隨后，將3[H]-甲基胸腺嘧啶加入培養(yǎng)基中，再孵育6h后測量并入DNA的3[H]-胸腺嘧啶量。結果顯示于圖3中。
權利要求
1.二肽基肽酶IV(DP IV)的抑制劑及具有相同底物特異性(DP IV-類似酶活性)的酶的抑制劑和/或丙氨酰氨基肽酶(氨基肽酶N，APN)及具有相同底物特異性(APN-類似酶活性)的酶的抑制劑在抑制人成纖維細胞增殖(DNA合成)中的用途。
2.根據(jù)權利要求1的用途，其中DP IV抑制劑為Xaa-Pro-二肽(Xaa＝α-氨基酸或側鏈受保護的衍生物)，相應的衍生物，更優(yōu)選為二肽膦酸二芳酯，二肽硼酸(例如Pro-Boro-Pro)及其鹽，Xaa-Xaa-(Trp)-Pro-(Xaa)n肽(Xaa＝α-氨基酸，n＝0到10)，相應的衍生物及其鹽，氨基酸(Xaa)酰胺，相應的衍生物及其鹽，其中Xaa表示α-氨基酸或側鏈受保護的衍生物，優(yōu)選為N∈-4-硝基芐基-氧羰基-L-賴氨酸，L-脯氨酸，L-色氨基酸，L-異亮氨酸，L-纈氨酸和環(huán)胺，例如吡咯烷、哌啶、噻唑烷及其衍生物，表示酰胺結構，和/或色氨基酸-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸衍生物(TSL)和(2S，2S′，2S″)-2-[2′-[2″-氨基-3″-(吲哚-3-基-)1″-氧脯氨酸-]1′，2′，3′，4′-四氫-6′，8′-二羥-7-甲氧基-異喹啉-3-基-羰基氨基-]4-羥甲基-5-氫-戊酸(TMC-2A)。
3.根據(jù)權利要求1的用途，其中，氨基酸酰胺，優(yōu)選為N∈-4-硝基芐基-氧羰基-L-賴氨酸噻唑烷、吡咯烷和哌啶及相應的2-氰基噻唑烷、2-氰基吡咯烷和2-氰基哌啶衍生物用作DP IV抑制劑。
4.根據(jù)權利要求1的用途，其中APN抑制劑為放線酰胺素、柳定、汾必定、阿嗎他定、貝他定、普必定、β-氨基硫醇、α-氨基次膦酸、α-氨基次膦酸衍生物，優(yōu)選為D-Phe-Ψ-[PO9(OH)-CH2]-Phe-Phe及其鹽。
5.根據(jù)權利要求1至4中任一抑制劑組合在用于預防和治療良性纖維變性和硬化病(特別是感染后的和外傷后的肥厚性瘢痕、疤痕疙瘩、皮膚纖維瘤、纖維脂肪瘤、彌散性(肌-)纖維瘤)，以及惡性成纖維細胞超增殖態(tài)(如纖維肉瘤、混合腫瘤如非典型纖維黃瘤、惡性纖維組織細胞瘤、侵蝕性血管粘液瘤、副腫瘤)、纖維化自體免疫疾病如硬皮病(局限的硬皮病、進行性的全身硬皮病、CREST綜合征)、伴隨其它成膠的皮膚硬化和移植物對宿主疾病、白癜風(白斑病、硬化性萎縮性苔蘚)，和不同種類的假硬皮癥(如嗜曙紅粒細胞增多的/增生性筋膜炎、外因產(chǎn)生的假硬皮癥，如毒油綜合征、硅肺病、卟啉癥、嗜曙紅粒細胞增多肌痛綜合病征、流行粘蛋白增多癥(Lichen粘-水腫)或包柔螺旋體相關的纖維化狀態(tài))，繼發(fā)性硬化癥，如伴隨慢性靜脈閉鎖不全或淋巴水腫的郁積纖維化過程中阿，模擬禿頭癥(禿頭癥雄性激素)的纖維化進程中的，和罕見局部成纖維細胞疾病(杜普伊特倫病、L氏病、“指節(jié)墊”、陰莖硬結(佩尼羅病、硬化陰莖海綿體)中的應用。
6.藥物制劑，其包括二肽基肽酶IV(DP IV)抑制劑及具有DPIV-類似酶活性的酶的抑制劑和/或丙氨酰氨基肽酶(氨基肽酶N，APN)的抑制劑及具有APN-類似酶活性的酶的抑制劑，以及與本身已知的載體、添加劑和/或佐劑的組合。
7.根據(jù)權利要求6的藥物制劑，其包括如DP IV抑制劑，Xaa-Pro-二肽(Xaa＝α-氨基酸或側鏈受保護的衍生物)，相應衍生物，更優(yōu)選為二肽膦酸二芳酯，二肽硼酸(例如Pro-Boro-Pro)及其鹽，Xaa-Xaa-(Trp)-Pro-(Xaa)n肽(Xaa＝α-氨基酸，n＝0到10)，相應的衍生物及其鹽，氨基酸(Xaa)酰胺，相應的衍生物及其鹽，其中Xaa表示α-氨基酸或側鏈受保護的衍生物，優(yōu)選為N∈-4-硝基芐基-氧羰基-L-賴氨酸，L-脯氨酸，L-色氨基酸，L-異亮氨酸，L-纈氨酸和環(huán)胺，如吡咯烷、哌啶、噻唑烷及其衍生物，表示酰胺結構。
8.根據(jù)權利要求6的藥物制劑，其包括如DP IV抑制劑，優(yōu)選氨基酸酰胺，例如N∈-4-硝基芐基-氧羰基-L-賴氨酸噻唑烷、吡咯烷和哌啶及相應的2-氰基噻唑烷、2-氰基吡咯烷和2-氰基哌啶衍生物。
9.根據(jù)權利要求6的藥物制劑，其包括如APN抑制劑、放線酰胺素、柳定、汾必定、阿嗎他定、貝他定、普必定、β--氨基硫醇、α-氨基次膦酸、α-氨基次膦酸衍生物，優(yōu)選為D-Phe-Ψ-[PO(OH)-CH2]-Phe-Phe及其鹽。
10.根據(jù)權利要求6至9任一的藥物制劑，其包括兩種或數(shù)種DP IV抑制劑或具有DPIV-類似酶活性的酶的抑制劑和/或APN抑制劑或具有APN-類似酶活性的酶的抑制劑，以定距離間隔的，與本身已知的載體、佐劑和/或添加物質組合同時或在時間上為達到聯(lián)合效應的目的立即連續(xù)給藥。
11.根據(jù)權利要求6至9中任一的藥物制劑，在全身應用中，其與已知的載體、佐劑和/或添加物質一起用于口服、透皮的、經(jīng)由皮膚的、靜脈內(nèi)的、皮下的、皮內(nèi)的、肌內(nèi)的、直腸的、陰道的、舌下應用。
12.根據(jù)權利要求6至10中任一的藥物制劑，在局部應用中，其以霜劑、藥膏、糊劑、凝膠體、溶液、噴霧、脂質體或納顆粒、長效制劑、可降解儲留槽基質、混溶洗劑、水狀膠敷料、膏藥、微型海綿、預聚物或包括可灌滴應用的其它皮膚基料/載體的形式給藥。
13.一種治療和預防包括成纖維細胞超增殖和改變的分化狀態(tài)的皮膚病的方法，包括給藥二肽基肽酶Iv(DP IV)的抑制劑及具有相同底物特異性(DPIV-類似酶活性)的酶的抑制劑和/或丙氨酰氨基肽酶(氨基肽酶N，APN)的抑制劑及具有相同底物特異性(APN-類似酶活性)的酶的抑制劑。
14.根據(jù)權利要求13的方法，其中將上述酶的一種抑制劑或幾種抑制劑或含有單獨的或優(yōu)選組合的那些抑制劑的一種或幾種制劑給藥于患者，所述抑制劑選自DPIV抑制劑，特別優(yōu)選為Xaa-Pro-二肽(Xaa＝α-氨基酸或側鏈受保護的衍生物)，相應的衍生物，更優(yōu)選為二肽膦酸二芳酯、二肽硼酸(例如Pro-Boro-Pro)及其鹽，Xaa-Xaa-(Trp)-Pro-(Xaa)n肽(Xaa＝α-氨基酸，n＝0到10)，相應的衍生物及其鹽，氨基酸(Xaa)酰胺，相應的衍生物及其鹽，其中Xaa表示α氨基酸或側鏈受保護的衍生物，優(yōu)選為N∈-4-硝基芐基-氧羰基-L-賴氨酸，L-脯氨酸，L-色氨基酸，L-異亮氨酸，L-纈氨酸和環(huán)胺，例如吡咯烷、哌啶、噻唑烷及其衍生物，表示酰胺結構，和/或色氨基酸-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸衍生物(TSL)和(2S，2S′，2S″)-2-[2′-[2″-氨基-3″-(吲哚-3-基-)1″-氧脯氨酸-]1′，2′，3′，4′-四氫-6′，8′-二羥-7-甲氧基異喹啉-3-基-羰基氨基-]4-羥甲基-5-氫-戊酸(TMC-2A)；和選自APN抑制劑，特別優(yōu)選放線酰胺素、柳定、汾必定、阿嗎他定、貝他定、普必定、β-氨基硫醇、α-氨基次膦酸、α-氨基次膦酸衍生物，優(yōu)選D-Phe-Ψ-[PO(OH)-CH2]-Phe-Phe及其鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過那些細胞表達的丙氨酰氨基肽酶(APN)抑制劑和二肽基肽酶IV(DPIV)抑制劑的單獨或聯(lián)合效應來抑制人成纖維細胞的DNA合成(對增殖必需的)的方法。通過給藥APN和/或DPIV抑制劑以劑量依賴性的方式抑制了人成纖維細胞的DNA合成(增殖)。根據(jù)本發(fā)明，上述酶的抑制物或含有上述抑制劑的制劑和可投藥形式的應用很適于治療和預防與成纖維細胞超增殖和改變的成纖維細胞分化狀態(tài)相關的皮膚病。
文檔編號A61P17/00GK1819840SQ200480019624
公開日2006年8月16日 申請日期2004年7月6日 優(yōu)先權日2003年7月8日
發(fā)明者S·安佐格, H·戈爾尼克, U·倫代茨魯, K·諾伊貝特, D·賴因霍爾德, R·沃得, B·施魯豐, A·添李茨, J·福斯托 申請人:Imtm股份有限公司