專利名稱：治療高血脂癥的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療高血脂癥的新的組合物，特別是含有阿昔莫司與羅蘇伐他汀鈣及藥用輔料的組合物。
背景技術(shù)：
羅蘇伐他汀(Rosuvastatin)是國內(nèi)外進行了廣泛研究并已在多國上市的HMG-CoA還原酶抑制劑，它通過在體內(nèi)選擇性地抑制膽固醇合成過程中的限速酶HMG-CoA還原酶，使膽固醇的合成減少，也使低密度脂蛋白受體合成增加，主要作用部位在肝臟，結(jié)果使血膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平降低，由此對動脈粥樣硬化和冠心病的防治產(chǎn)生作用。本品還降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。羅蘇伐他汀有5、10、20和40mg的片劑。在臨床試驗中，多數(shù)病人服用5或10mg的開始劑量就達到了國家膽固醇教育計劃(National Cholesterol Education Program)推薦的目標(biāo)LDL-C水平。20mg劑量可以作為膽固醇水平非常高的病人的初始劑量，而40mg的劑量僅應(yīng)在20mg劑量治療療效不足時使用。Shepherd教授最近完成了一項他汀類藥物降脂作用比較的臨床試驗，用藥8周的結(jié)果顯示羅蘇伐他汀10mg(n＝539)LDL-C達標(biāo)率為80％，而阿托伐他汀10mg(n＝529)達標(biāo)率為63％(P＜0.001)，阿托伐他汀20mg(n＝925)LDL-C達標(biāo)率為74％(P＜0.01)。Jones PH的研究顯示羅蘇伐他汀10mg降低LDL-C46％，而阿托伐他汀從10mg遞增到20mg、40mg，LDL-C分別降低37％(P＜0.001)、43％和48％；辛伐他汀從10mg遞增到20mg、40mg，LDL-C分別降低28％、35％和39％(P值均＜0.001)；普伐他汀從10mg遞增到20mg、40mg，降低LDL-C分別為20％、24％和30％(P值均＜0.001)。Brown WV等將羅蘇伐他汀的降脂活性和安全性與普伐他汀和辛伐他汀進行了52周的臨床隨機雙盲對照研究，結(jié)果表明，在用藥12周后，羅蘇伐他汀5mg和10mg劑量組的低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)分別下降了39.1％和47.4％，與普伐他汀20mg組(下降26.5％)和辛伐他汀20mg組(下降34.6％)有顯著差異(P＜0.05)。用藥52周后，羅蘇伐他汀5mg和10mg組達到美國國家膽固醇教育計劃推薦LDL-C目標(biāo)的比率分別為88％和87.5％，而普伐他汀組僅為60％，辛伐他汀組為72.5％，(在后40周，未達目標(biāo)的患者劑量加倍)所有實驗組患者均耐受良好[1]?？v然羅蘇伐他汀有著如此強效的優(yōu)勢，但其不良反應(yīng)和其它他汀類藥物相比較要嚴(yán)重一些，在上市之前的臨床試驗中，大劑量(80mg)組有7例患者發(fā)生了危及生命的橫紋肌溶解癥，因此當(dāng)時其安全性就受到過質(zhì)疑。上市前臨床試驗中還發(fā)現(xiàn)，羅蘇伐他汀還可損害一些患者的腎功能(未觀察到其他他汀類有類似不良反應(yīng))。最終，F(xiàn)DA因考慮到羅蘇伐他汀的優(yōu)勢(藥效稍強于其他他汀類)而批準(zhǔn)其上市，但建議服用劑量從5mg～10mg開始，最大劑量不超過40mg。
阿昔莫司(Acipimox)是一種人工合成的煙酸衍生物，該藥口服后吸收迅速，服后2小時內(nèi)血漿濃度即達高峰，半衰期為2小時。阿昔莫司與血漿蛋白結(jié)合，幾乎不變地從尿中排出，主要作用于脂肪組織，抑制脂肪組織釋放非酯化脂肪酸，減少TG、VLDL及LDL的生成。并通過激活脂蛋白脂肪酶，加速VLDL的降解，通過抑制肝脂肪酶而增高血漿HDL水平。阿昔莫司是一種安全、有效及易耐受的血脂調(diào)節(jié)藥，尤其適用于血清TG水平明顯升高、HDL-C水平明顯低下，TC水平輕度上升或正常的糖尿病患者。
目前，該領(lǐng)域的研究趨勢是將兩種不同作用機制的血脂調(diào)節(jié)藥制成復(fù)方制劑，可以發(fā)揮協(xié)同作用，同時減少毒副作用。
歐洲專利申請EP0373507公開了HMG-CoA還原酶抑制劑普伐他汀、洛伐他汀、velostatin分別為5mg、10mg、20mg、40mg和煙酸500mg的組合物的制備，但沒有公開其有益效果及最佳配比的實驗數(shù)據(jù)，更沒有涉及阿昔莫司與羅蘇伐他汀組合物及最佳配比。
《洛伐他汀和煙酸肌醇單用和合用治療高血脂癥的比較》，發(fā)表于《心血管病學(xué)進展》1996年第17卷第六期，公開洛伐他汀和煙酸肌醇合用治療高血脂癥；《普伐他汀和煙酸肌醇單用和合用治療高血脂癥的療效觀察》，發(fā)表于《中國動脈硬化雜志》1997年，第5卷第3期，公開普伐他汀和煙酸肌醇合用治療高血脂癥。二者均未涉及阿昔莫司羅蘇伐他汀組合物及最佳配比。
美國專利US5260305A公開了HMG-CoA還原酶抑制劑普伐他汀和煙酸及其衍生物的組合物，具體公開了規(guī)格為普伐他汀5mg、10mg、20mg、40mg和阿昔莫司750mg的組合物的制備，但沒有公開其有益效果及最佳配比的實驗數(shù)據(jù)，更沒有涉及阿昔莫司和羅蘇伐他汀組合物及最佳配比。
發(fā)明目的本發(fā)明的目的是通過一系列科學(xué)的篩選實驗，提供一種新的治療高脂血癥的藥物組合物，其優(yōu)點是作用強、毒副作用低和使用方便。本藥物含有特定比例阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣，由于兩種藥物作用機制不同，組成組合物后降脂作用將更加全面，并且兩類藥物合用有協(xié)同作用，其降脂作用明顯優(yōu)于相同劑量的單方；雖然羅蘇伐他汀鈣有著較強大的降脂效果，但大劑量的羅蘇伐他汀存在發(fā)生可危機生命的橫紋肌溶解癥的風(fēng)險，通過阿昔莫司伍用，顯著降低了組合物中羅蘇伐他汀鈣的用量，使組合物在有效降低血脂水平的同時，大大降低了羅蘇伐他汀的用藥風(fēng)險性，同時本組合物日只需用藥一次，用藥方便，這將大大提高患者的順應(yīng)性。
技術(shù)方案本發(fā)明的組合物由阿昔莫司和羅蘇伐他汀以及藥用輔料組成，其中阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣的重量比為5～60∶1(羅蘇伐他汀鈣的重量以游離酸計，下同)，優(yōu)選的比例是20～60∶1，進一步優(yōu)選的比例是40∶1；其中阿昔莫司優(yōu)選做成緩釋部分。該組合物的藥物制劑的劑型，包括片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、滴丸等固體制劑，可以按照本領(lǐng)域公知的一般制劑方法制備，阿昔莫司含量相當(dāng)于在將組合物給藥時約200～750mg的日劑量，羅蘇伐他汀鈣含量相當(dāng)于2～40mg的日劑量，其中優(yōu)選羅蘇伐他汀鈣含量相當(dāng)于5～20mg的日劑量。
本發(fā)明的組合物在制成固體制劑，如片劑或膠囊時，為達到持久的治療效果，優(yōu)選地將有效量的阿昔莫司制成緩釋部分，再與有效量的羅蘇伐他汀鈣共同制成緩釋制劑，如緩釋片、緩釋膠囊等。相應(yīng)地，可藥用的輔料包括稀釋劑，如淀粉、乳糖、甘露醇、預(yù)膠化淀粉、糊精、微晶纖維素；崩解劑，如羧甲基淀粉鈉、羥丙基淀粉、低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉；緩釋劑，如乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素-4M、羥丙基甲基纖維素-15M；優(yōu)特奇RS-100、RL100、RS30D、RL30D、NE30D，以及蘇麗絲(乙基纖維素的水分散體)粘合劑，如聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，潤滑劑，如硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠等。
本發(fā)明的組合物通過藥理方面的研究工作，表明當(dāng)用本發(fā)明的組合物時，尤其是采用優(yōu)選的配比時，與單獨應(yīng)用有效量的阿昔莫司或羅蘇伐他汀鈣時相比，本發(fā)明的組合物給出令人吃驚的更好效果，同時毒性沒有增加，在達到相同降脂效果的情況下，兩類藥物伍用大大降低了每種藥物的使用劑量，這就顯著降低了阿昔莫司的不良反應(yīng)和羅蘇伐他汀鈣的用藥風(fēng)險。本發(fā)明的組合物可以每日1～2次給藥，優(yōu)選為每日一次。
本發(fā)明中羅蘇伐他汀可以為任何一種可藥用的鹽，即合適的羅蘇伐他汀生理可接受的鹽，包括衍生自無機的和有機的堿所形成的鹽，如鈉鹽、鈣鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋅鹽、鐵鹽等。
具體實施例方式現(xiàn)通過如下實例進一步說明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的應(yīng)用范圍不僅限于下列實例。
實例1a、阿昔莫司200g乳糖30g羧甲基淀粉鈉30g微晶纖維素 18g6％PVP的無水乙醇溶液100g硬脂酸鎂2g制備工藝阿昔莫司過100目篩，乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP無水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、羅蘇伐他汀鈣(其重量以游離酸計，下同) 5g羥丙基纖維素15g預(yù)膠化淀粉 10g6％PVP的無水乙醇溶液30g山榆酸甘油酯1g制備工藝羅蘇伐他汀鈣過100目篩，羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉過80目篩，稱取處方量的羅蘇伐他汀鈣和羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉混合均勻，加入6％PVP的無水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機沖壓片即得雙層片。
實例2a、阿昔莫司200g乳糖30g
羧甲基淀粉鈉30g微晶纖維素 18g6％PVP的無水乙醇溶液100g硬脂酸鎂2g制備工藝阿昔莫司過100目篩，乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和乳糖、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP無水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、羅蘇伐他汀鈣10g羥丙基纖維素30g預(yù)膠化淀粉 20g6％PVP的無水乙醇溶液50g山榆酸甘油酯2g制備工藝羅蘇伐他汀鈣過100目篩，羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉過80目篩，稱取處方量的羅蘇伐他汀鈣和羥丙基纖維素、預(yù)膠化淀粉混合均勻，加入6％PVP的無水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機沖壓片即得雙層片。
實例3a、阿昔莫司300g羥丙基甲基纖維素-4M 40g微晶纖維素 30g8％PVP的無水乙醇溶液150g硬酯酸鎂2g制備工藝阿昔莫司過100目篩，羥丙基纖維素-4M、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和羥丙基纖維素-4M、微晶纖維素混合均勻，加入8％PVP無水乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、羅蘇伐他汀鈣5g羧甲基纖維素鈉 30g乳糖 20g
6％PVP的95％乙醇溶液50g硬酯酸鎂2g制備工藝羅蘇伐他汀鈣過100目篩，羧甲基纖維素鈉、乳糖過80目篩，稱取處方量的羅蘇伐他汀鈣和羧甲基纖維素鈉、乳糖混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機沖壓即得雙層片。
實例4a、阿昔莫司 500g甘露醇 10g乳糖 40g微晶纖維素 20g6％PVP的95％乙醇溶液 120g硬酯酸鎂 2g制備工藝阿昔莫司過100目篩，甘露醇、乳糖、微晶纖維素過80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和甘露醇、乳糖、微晶纖維素混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
b、羅蘇伐他汀鈣25g預(yù)膠化淀粉 50g甘露醇 50g6％PVP的95％乙醇溶液100g微粉硅膠5g制備工藝羅蘇伐他汀鈣過100目篩，預(yù)膠化淀粉、甘露醇過80目篩，稱取處方量的羅蘇伐他汀鈣和預(yù)膠化淀粉、甘露醇混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機沖壓即得雙層片。
實例5a、阿昔莫司500g乳糖30g
羥丙基甲基纖維素-15M 20g8％PVP的95％乙醇溶液 150g山榆酸甘油酯 2g制備工藝阿昔莫司過100目篩，乳糖、羥丙基甲基纖維素-15M過80目篩，稱取處方量的阿昔莫司和乳糖、羥丙基甲基纖維素-15M混合均勻，加入8％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的山榆酸甘油酯。
b、羅蘇伐他汀鈣10g羥丙基纖維素15g糊精20g6％PVP的95％乙醇溶液50g滑石粉 2g制備工藝羅蘇伐他汀鈣過100目篩，羥丙基纖維素、糊精過80目篩，稱取處方量的羅蘇伐他汀鈣和羥丙基纖維素、糊精混合均勻，加入6％PVP的95％乙醇溶液適量制粒，60℃干燥，16目篩整干顆粒，干顆粒中加入處方量的滑石粉。
c、將上述a，b兩種組分采用雙層壓片機沖壓即得雙層片。
實例6a、阿昔莫司200g空白丸芯250g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 200g制備工藝將阿昔莫司過120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開造粒包衣機(臺灣元成機械廠)，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，噴槍壓力(CYL)3bar，霧化壓力(CAP1)0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速145rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，50℃烘干，出料。
b、羅蘇伐他汀鈣15g空白丸芯90g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 50g制備工藝將羅蘇伐他汀鈣過120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開造粒包衣機，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵6％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速160rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，45℃烘干，出料。
c、將a和b制得的小丸采用硬膠囊藥物填充機按照每兩粒膠囊中含阿昔莫司與羅蘇伐他汀鈣的重量分別為200mg和30mg進行填充，即可。
實例7a、阿昔莫司300g空白丸芯250g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 200g制備工藝將阿昔莫司過120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開造粒包衣機，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速145rpm，噴7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，50℃烘干，出料。
b、a中制得的含阿昔莫司小丸Surelease90g滑石粉 1g純水 50g制備工藝將a中制得的含阿昔莫司小丸倒入轉(zhuǎn)盤，開造粒包衣機，入風(fēng)壓力1.0bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP1 1.5bar，蠕泵5％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速180rpm，噴入Surelease的純水溶液。包衣結(jié)束，50℃烘干，出料。
c、按照實例5中b的要求制得羅蘇伐他汀鈣小丸，與本例b中制得的阿昔莫司小丸采用硬膠囊藥物填充機按照每兩粒膠囊中含阿昔莫司與羅蘇伐他汀鈣的重量分別為300mg和30mg進行填充，即可。
實例8a、阿昔莫司200g空白丸芯200g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 200g制備工藝將阿昔莫司過120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開造粒包衣機，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速165rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，50℃烘干，出料。
b、羅蘇伐他汀鈣20g空白丸芯150g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 150g制備工藝將羅蘇伐他汀鈣過120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開造粒包衣機，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速120rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，45℃烘干，出料。
c、將a與b制得的小丸采用硬膠囊藥物填充機按照每兩粒膠囊中含阿昔莫司與羅蘇伐他汀鈣的重量分別為200mg和40mg進行填充，即可。
實例9a、阿昔莫司300g空白丸芯300g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 200g制備工藝將阿昔莫司過120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中。開造粒包衣機，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP10.8bar，倒入空白丸芯，造粒，下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速145rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，50℃烘干，出料。
b、a中制得的含阿昔莫司小丸乙基纖維素40g硬脂酸70g聚乙二醇-6000 6g滑石粉12g95％乙醇 1000g制備工藝將a中制得的含阿昔莫司小丸倒入下料斗中。開造粒包衣機，入風(fēng)溫度30℃，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP1 1.0bar，蠕泵6％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速175rpm，噴入乙基纖維素、硬脂酸和聚乙二醇-6000的95％乙醇溶液。包衣結(jié)束，50℃烘干，出料。
c、羅蘇伐他汀鈣20g空白丸芯150g7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇) 150g制備工藝將羅蘇伐他汀鈣過120目篩，處方量稱取，倒入下料斗中，開造粒包衣機，入風(fēng)壓力0.5bar，入風(fēng)溫度30℃，CYL3bar，CAP1 0.8bar，倒入空白丸芯，造粒。下料速度4rpm，蠕泵12％，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速120rpm，噴入7％PVP溶液(溶劑為90％乙醇)。造粒結(jié)束，45℃烘干，出料。
d、將b與c制得的小丸采用硬膠囊藥物填充機按照每兩粒膠囊中含阿昔莫司與羅蘇伐他汀鈣的重量分別為300mg和40mg進行填充，即可。
實例10 阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣復(fù)方治療大鼠高血脂癥的配比篩選[摘要]本試驗?zāi)康脑谟谕ㄟ^篩選確定毒性低、作用強和使用方便的阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣復(fù)方制劑配伍組成。采用正常Wistar大鼠或高脂飼料致大鼠高脂血癥模型。受試品煙酸、阿昔莫司均為魯南制藥股份有限公司生產(chǎn)，羅蘇伐他汀鈣由AstraZeneca公司生產(chǎn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼以高脂飼料14天后，大鼠血清中總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇均明顯升高，形成高脂血癥模型。給模型大鼠灌服阿昔莫司(100～500mg/kg)和(或)羅蘇伐他汀鈣(5～40mg/kg)14天后，血清中總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇均明顯下降，高密度脂蛋白膽固醇升高。單用其中一種藥或兩藥伍用，其效果隨劑量遞增加強。
結(jié)果表明，阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣伍用對高脂飼料所致的大鼠高脂血癥有明顯治療作用，效果與兩種藥物的劑量相關(guān)。從藥效和毒性兩方面分析，羅蘇伐他汀鈣5mg/kg和阿昔莫司200mg/kg伍用效果較好。
1 試驗?zāi)康耐ㄟ^篩選確定阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣復(fù)方制劑組成，以達到復(fù)方制劑毒副作用低、作用全面和增強、使用方便(如每日1次用藥)之目的。在上述實驗基礎(chǔ)上按有關(guān)要求，進行復(fù)方制劑的量效關(guān)系和多組份相互影響的試驗，為申報開發(fā)復(fù)方制劑提供實驗依據(jù)。
2 受試藥物2.1 阿昔莫司(Acipimox)
批號0307002純度大于99.7％生產(chǎn)單位魯南制藥股份有限公司保存條件陰涼干燥處保存，有效期1年半。
配制方法臨用前用1％CMC混勻，配成試驗所需濃度。
2.2 羅蘇伐他汀(Rosuvastatin)批號030205純度大于99.0％生產(chǎn)單位阿斯利康公司保存條件陰涼干燥處保存，有效期2年。
配制方法臨用前用1％CMC混勻，配成試驗所需濃度。
3 實驗動物3.1 品系和來源Wistar大鼠，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物中心繁殖，實驗動物質(zhì)量許可證號為醫(yī)動字D01-3039。
3.2 體重和性別年齡為9周～10周。體重180-220g。雄性。
3.3 飼養(yǎng)條件動物實驗室空氣定時排風(fēng)、光照良好，常溫。每籠飼養(yǎng)5只動物，飼以本院實驗動物中心專門為大鼠配制的膨化飼料，自由飲水。動物實驗條件合格證號為醫(yī)動字D01-2051。試驗開始前，觀察動物進食、活動及糞便等1周，選擇健康動物進入試驗。
4 大鼠高脂血癥模型制備[2]大鼠高脂血癥模型采用高脂飼料致高脂血癥法。高脂飼料配方如下基礎(chǔ)飼料87.3％、膽固醇2％、豬油10％、甲基硫氧嘧啶0.2％、豬膽鹽0.5％，各成分保證混合均勻。連續(xù)2周。給藥期間隔天給予高脂飼料，其余時間給予正常飼料。
5 阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣對正常大鼠血脂的影響[2]5.1 劑量選擇臨床上阿昔莫司劑量為250mg/次(按人體重60kg計算，上述劑量為4.2mg/kg)，2～3次/日，每日量最大不超過1200mg[3]。按體表面積為單位的劑量等效原則推算，上述人常用劑量換算成大鼠劑量約為50mg/kg/day。結(jié)合文獻報道[3]，加之本試驗采用1次/日給藥方法，故在本試驗中阿昔莫司劑量設(shè)為100、200、300、500mg/kg。
臨床上羅蘇伐他汀的劑量為5～20mg/次(按人體重60kg計算，上述劑量為0.1-0.3mg/kg)，1次/日，每日量最大不超過40mg[3]。按體表面積為單位的劑量等效原則推算，上述人常用劑量換算成大鼠劑量約為0.5-1.5mg/kg，結(jié)合文獻報道，將本試驗中羅蘇伐他汀鈣劑量(以游離酸計，下同)設(shè)為5、10、20、40mg/kg。
5.2 組別設(shè)置依據(jù)上述劑量設(shè)置，按血清總膽固醇水平均衡原則，把正常動物按照隨機原則分為(1)正常對照組；(6)阿昔莫司100mg/kg組；(7)阿昔莫司200mg/kg組；(8)阿昔莫司300mg/kg組；(9)阿昔莫司500mg/kg組；(10)羅蘇伐他汀鈣5mg/kg組；(11)羅蘇伐他汀鈣10mg/kg組；(12)羅蘇伐他汀鈣20mg/kg組；(13)羅蘇伐他汀鈣40mg/kg組；(22)阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣5mg/kg組；(23)阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣10mg/kg組；(24)阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣20mg/kg組；(25)阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣40mg/kg組；(26)阿昔莫司300mg/kg和羅蘇伐他汀鈣5mg/kg組；(27)阿昔莫司300mg/kg和羅蘇伐他汀鈣10mg/kg組；(28)阿昔莫司300mg/kg和羅蘇伐他汀鈣20mg/kg組(29)阿昔莫司500mg/kg和羅蘇伐他汀鈣10mg/kg組。每組6只，雄性。
5.4 給藥臨床給藥途徑為口服，故本試驗采用灌胃法給藥，連續(xù)灌胃4天。灌胃均在動物進食后進行。每天1次。給藥體積為0.3ml/100g體重。14:00～16:00給藥。
5.5 檢測指標(biāo)血清化學(xué)指標(biāo)包括總膽固醇(TC)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-L)。其中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)檢測試劑采用北京中生生物工程高技術(shù)公司產(chǎn)品，用SABA/18全自動生化分析儀測定；其余試劑采用日本羅氏試劑公司產(chǎn)品，用日立7020自動生化分析儀測定。測定方法參照試劑說明書取血樣前禁食16小時。
6 阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣對模型大鼠血脂的影響6.1 劑量依據(jù)同正常大鼠實驗。
6.2 組別設(shè)置依據(jù)上述劑量設(shè)置，按血清總膽固醇水平均衡原則，把正常動物按照隨機原則分為(1)正常對照組；(2)模型對照組；(7)阿昔莫司100mg/kg組；(8)阿昔莫司200mg/kg組；(9)阿昔莫司300mg/kg組；(10)阿昔莫司500mg/kg組；(11)羅蘇伐他汀鈣5mg/kg組；(12)羅蘇伐他汀鈣10mg/kg組；(13)羅蘇伐他汀鈣20mg/kg組；(14)羅蘇伐他汀鈣40mg/kg組；(23)阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣5mg/kg組；(24)阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣10mg/kg組；(25)阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣20mg/kg組；(26)阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣40mg/kg組；(27)阿昔莫司300mg/kg和羅蘇伐他汀鈣5mg/kg組；(28)阿昔莫司300mg/kg和羅蘇伐他汀鈣10mg/kg組；(29)阿昔莫司300mg/kg和羅蘇伐他汀鈣20mg/kg組(30)阿昔莫司500mg/kg和羅蘇伐他汀鈣10mg/kg組。每組10只，雄性。
6.3 給藥臨床給藥途徑為口服，故本試驗采用灌胃法給藥，連續(xù)灌胃14天。灌胃均在動物進食后進行。每天1次。給藥體積為0.3ml/100g體重。
6.4 檢測指標(biāo)同正常大鼠實驗。
7 試驗結(jié)果7.1 阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣對正常大鼠血脂的影響正常大鼠給藥4天后，阿昔莫司、羅蘇伐他汀鈣和聯(lián)合用藥組的總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇均有所降低，高密度脂蛋白膽固醇升高(表1)。給藥后血清甘油三酯略有下降，但無統(tǒng)計學(xué)差異。聯(lián)合用藥組的效果優(yōu)于單藥。
表1 阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣及配伍對正常大鼠血脂的影響
注*與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.017.2阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣對模型大鼠血脂的影響大鼠飼以高脂飼料14天后分組給藥。阿昔莫司的劑量從100～500mg/kg，羅蘇伐他汀鈣的劑量從5～40mg/kg，組成聯(lián)合用藥組。給藥14天后，與模型對照組比較，阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣各劑量組血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇均顯著下降(表2)。綜合分析，阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣5mg/kg及阿昔莫司300mg/kg和羅蘇伐他汀鈣10mg/kg聯(lián)合用藥效果顯著，對血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇均表現(xiàn)出協(xié)同作用。
部分阿昔莫司劑量組及與羅蘇伐他汀鈣聯(lián)合用藥組大鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶升高，高劑量組升高幅度大(表3)。各組大鼠血清中肌酸激酶活性變化趨勢與血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶相似。因此在復(fù)方中應(yīng)盡可能降低羅蘇伐他汀鈣的劑量，以阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣5mg/kg劑量配伍較好，對血清中肌酸激酶與血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性的影響較小。
表2 阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣及復(fù)方對模型大鼠血脂的影響
注與正常對照組比較，###P＜0.001；與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001表3 阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣及復(fù)方對模型大鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和肌酸激酶的影響
注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0018結(jié)論阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣伍用對高脂飼料所致的大鼠高脂血癥有明顯治療作用，降脂效果與兩種藥物的劑量相關(guān)，其中以阿昔莫司200mg/kg和羅蘇伐他汀鈣5mg/kg劑量伍用效果顯著，同時又無明顯的毒性作用。此外，本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高劑量的阿昔莫司每日給藥1次也有顯著的降血脂作用，且毒性小，這為阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣組成復(fù)方，實現(xiàn)每日給藥1次提供了實驗依據(jù)。
參考文獻[1]Brown WV，Bays HE et al，Efficacy and safety of rosuvastatin compared with pravastatin andsimvaststin in patients with hypercholesterolemiaa randomized，double-blined，52-week trial. 徐叔云，卞如濂，陳修主編.藥理學(xué)實驗方法學(xué)(第三版)，人民衛(wèi)生出版社出版，2002年1月，1201-1202[3]OLBETAM(acipimox)說明書(Pharmacia，New Zealand)[4]Al-Shurbaji A，et al.The effect of Acipimox on triacylglycerol metabolismin rat.Scand J Clin Lab Invest，1990，50(2)203-208[5]Crestor(Rosuvastatin)說明書
權(quán)利要求
1.一種治療高血脂癥的組合物，其特征在于所述的組合物包括a)第一個活性成分，它是阿昔莫司(Acipimox)；b)第二個活性成分，它選自羅蘇伐他汀(Rosuvastatin)、或其可藥用的鹽、酯或溶劑化物；c)一種或多種其它可藥用的活性成分或者非活性成分。
2.按照權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述的羅蘇伐他汀可以藥用的鹽為合適的羅蘇伐他汀生理可接受的鹽，包括衍生自無機的和有機的堿所形成的鹽，為鈉鹽、鈣鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋅鹽、鐵鹽。
3.按照權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述的羅蘇伐他汀可以藥用的酯為合適的羅蘇伐他汀生理可接受的酯，包括衍生自脂肪醇、芳香醇、雜環(huán)醇所形成的酯，為甲酯、乙酯、烯丙酯、苯酯。
4.按照權(quán)利要求1和2所述的組合物，其特征是第二個活性成分為羅蘇伐他汀鈣。
5.按照權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣的重量比(以游離酸計，下同)是(5～60)∶1。
6.按照權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是優(yōu)選阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣的重量比是(20～60)∶1。
7.按照權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是進一步優(yōu)選阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣的重量比是40∶1。
8.按照權(quán)利要求1～7所述的組合物制成的醫(yī)療用制劑。
9.按照權(quán)利要求8所述的醫(yī)療用制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、滴丸。
全文摘要
本發(fā)明提供一種新的治療高脂血癥的藥物組合物，其特征是含有有效量的阿昔莫司(Acipimox)和羅蘇伐他汀(Rosuvastatin)鈣，重量比(以游離酸計)為(5～60)∶1，優(yōu)選重量比為(20～60)∶1，進一步優(yōu)選重量比為40∶1。阿昔莫司和羅蘇伐他汀鈣兩藥合用，其降脂作用明顯優(yōu)于相同劑量的單方，表明兩藥合用有協(xié)同作用，同時又無明顯的毒性作用。
文檔編號A61K31/505GK1709257SQ200410047858
公開日2005年12月21日 申請日期2004年6月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月16日
發(fā)明者趙志全 申請人:魯南制藥集團股份有限公司