專利名稱：一種用于防治奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于防治奶牛干奶期和產(chǎn)后期隱性和臨床乳房炎的新型獸藥。具體地說(shuō)，是一種預(yù)防干奶牛乳房炎的乳房灌注劑。
背景技術(shù)：
乳房炎是奶牛的一種常見病，四季流行。在奶牛飼養(yǎng)管理中，當(dāng)對(duì)奶牛群的管理措施不當(dāng)時(shí)，會(huì)導(dǎo)致奶牛乳房炎的發(fā)生。乳房炎是奶牛疾病中花費(fèi)最大的疾病之一，往往奶牛一個(gè)乳區(qū)被感染即可降低10％～20％的產(chǎn)奶量。另外，加上所報(bào)廢的牛奶，用去的抗生素和因此病而早期淘汰的乳牛，損失更大。
奶牛乳房炎分為臨床乳房炎和隱性乳房炎。臨床乳房炎具有臨床表現(xiàn)，易于發(fā)現(xiàn)，便于治療。隱性乳房炎為沒(méi)有臨床表現(xiàn)的乳房感染，主要在奶牛干奶期誘發(fā)，如果得不到有效的處理，極易在奶牛產(chǎn)后轉(zhuǎn)化成臨床乳房炎。據(jù)估計(jì)，奶牛隱性乳房炎的發(fā)生比例是奶牛臨床乳房炎的8～20倍。
隱性乳房炎的發(fā)病原因主要是兩個(gè)一是細(xì)菌感染，二是乳腺組織的炎性損傷，如長(zhǎng)期泌乳、微生物毒素、化學(xué)刺激等。因此，預(yù)防奶牛隱性乳房炎的關(guān)鍵一是要防止干奶期奶牛感染，二是要防止乳腺組織的炎性反應(yīng)。干奶期對(duì)牛進(jìn)行干奶處理(治療)因牛已停止產(chǎn)奶，乳房組織處于修復(fù)階段，既利于處理效果，又避免了對(duì)牛奶的影響。
為避免奶牛的細(xì)菌感染，目前國(guó)內(nèi)所用的均為單一抗生素類藥物。如青霉素、鏈霉素等。這類藥物存在作用時(shí)間短，僅對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌或革蘭氏陰性菌發(fā)生作用的缺點(diǎn)，即不具有廣譜性，對(duì)預(yù)防奶牛隱性乳房炎的效果并不明顯。也有些奶牛場(chǎng)利用國(guó)外的干奶牛灌注劑(如法國(guó)、澳大利亞產(chǎn)的干奶牛乳房灌注劑)防治，但這些灌注劑多是由幾種抗生素構(gòu)成的復(fù)合劑，沒(méi)有消炎成分，僅對(duì)特異性的細(xì)菌性感染有預(yù)防作用，對(duì)奶牛干奶期乳房組織不具消炎作用，且大多價(jià)格較貴。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有強(qiáng)烈的廣譜性抑菌、殺菌作用和顯著的組織抗炎、消炎作用，對(duì)奶牛干奶期乳房組織的修復(fù)、預(yù)防奶牛隱性乳房炎、降低產(chǎn)后乳房炎發(fā)生率有良好效果的復(fù)方干奶牛乳房灌注劑。該灌注劑具有藥效可靠，無(wú)毒副作用，無(wú)殘留，不影響奶牛正常妊娠，對(duì)產(chǎn)后牛奶質(zhì)量安全的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的目的是通過(guò)如下技術(shù)解決方案實(shí)現(xiàn)的一種用于防治奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注劑，其特征在于每10ml處方量中含有(1)氨芐西林或阿莫西林100mg——150mg， 最佳為125mg；(2)醋酸氫化潑尼松4mg——7mg， 最佳為4.5mg；(3)氯化鈉400mg——550mg， 最佳為450mg；(4)植物油6ml——6.5ml，最佳為6.5ml；(5)聚山梨醇 0.75ml——0.82ml，最佳為0.8ml；其余量為滅菌蒸餾水。
上述用于防治奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注劑，可按照上述處方量之比例取各組份，采用如下制備方法制得(1)將植物油、氯化鈉、滅菌蒸餾水三者混合，攪拌均勻；(2)在所得混合液中加入聚山梨醇，使混合液充分乳化30分鐘以上；(3)在上述乳化液中再加入醋酸氫化潑尼松，充分混合均勻后，加入氨芐西林或阿莫西林，再混合均勻，于5℃-15℃的低溫乳化20-25分鐘；(4)將最后乳化液無(wú)菌密封包裝，即得成品。
按照本發(fā)明所述的乳房灌注劑，對(duì)預(yù)防和治療干奶牛干奶期隱性乳房炎具有明顯的作用，使產(chǎn)后牛奶體細(xì)胞數(shù)顯著降低、臨床乳房炎發(fā)生率明顯降低，同時(shí)具有費(fèi)用低、無(wú)殘留的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明具有強(qiáng)烈的抗菌效果。抑菌實(shí)驗(yàn)證明，對(duì)導(dǎo)致奶牛乳房炎的多種微生物，包括革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌均有強(qiáng)大的抗菌作用，其中對(duì)牛無(wú)乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌的最低藥效濃度在1μg/ml以下，對(duì)大腸桿菌也具有強(qiáng)抑菌效果。
本發(fā)明具有明顯的抗炎效果，測(cè)定用藥后牛奶中的體細(xì)胞數(shù)變化，結(jié)果證明可以大大的降低牛奶中的體細(xì)胞數(shù)尤其是白細(xì)胞數(shù)。藥殘實(shí)驗(yàn)證明停藥48小時(shí)后牛奶即無(wú)藥物殘留，比同類灌注液短24小時(shí)以上。
本發(fā)明還具有無(wú)毒副作用，無(wú)藥殘隱患，可保障動(dòng)物源性食品安全，生產(chǎn)成本低，治療費(fèi)用低的優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的優(yōu)點(diǎn)和效果作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明按照本發(fā)明所述的技術(shù)方案，取如下實(shí)施例實(shí)施例1 實(shí)施例2按每10ml處方量，取 按每10ml處方量，取(1)氨芐西林125mg； (1)氨芐西林130mg；(2)醋酸氫化潑尼松4.5mg； (2)醋酸氫化潑尼松5mg；(3)氯化鈉450mg； (3)氯化鈉420mg；(4)植物油6.2ml； (4)植物油6.5ml；(5)聚山梨醇0.8ml； (5)聚山梨醇0.75ml；其余量為滅菌蒸餾水。
其余量為滅菌蒸餾水。
實(shí)施例3 實(shí)施例4按每10ml處方量，取 按每10ml處方量，取(1)阿莫西林105mg (1)阿莫西林145mg
(2)醋酸氫化潑尼松5mg；(2)醋酸氫化潑尼松6.5mg；(3)氯化鈉420mg； (3)氯化鈉520mg；(4)植物油6.2ml； (4)植物油6.5ml；(5)聚山梨醇0.75ml； (5)聚山梨醇0.8ml；其余量為滅菌蒸餾水。
其余量為滅菌蒸餾水。
將上述四個(gè)實(shí)施例中的各組份，按照如下工藝制成灌注劑(1)將植物油、氯化鈉、滅菌蒸餾水三者混合，攪拌均勻；(2)在所得混合液中加入聚山梨醇，使混合液充分乳化30分鐘；(3)在上述乳化液中再加入醋酸氫化潑尼松，充分混合均勻后，加入氨芐西林，再混合均勻，于10℃的低溫下乳化20分鐘；(4)將最后乳化液無(wú)菌密封包裝。
通過(guò)上述工藝即制得四成品A(對(duì)應(yīng)實(shí)施例1)、B(對(duì)應(yīng)實(shí)施例2)、C(對(duì)應(yīng)實(shí)施例3)、D(對(duì)應(yīng)實(shí)施例4)。
(一)藥效試驗(yàn)[用法與用量]在奶牛最后一次手工擠凈牛奶后(即干奶時(shí))，用70％酒精(或碘酒)嚴(yán)格消毒奶牛乳頭末端，干燥后，用專用注射器和灌注管乳腺內(nèi)灌注藥物，每個(gè)乳室灌注5ml(每頭奶牛用藥量為20ml)，用石蠟(或金霉素藥膏)封閉乳頭口。
所有無(wú)臨床乳房炎感染癥狀的干奶牛。
對(duì)患臨床乳房炎的奶牛，必須先治療，待無(wú)臨床癥狀后，再在干奶時(shí)使用本發(fā)明。
灌注多個(gè)乳區(qū)時(shí)，必須對(duì)奶牛每個(gè)乳頭嚴(yán)格消毒，處理人員亦必須嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生程序。
1、抑菌實(shí)驗(yàn)[實(shí)驗(yàn)方法]將成品藥物A稀釋10倍、B稀釋100倍、C稀釋1000倍、D稀釋10000倍，分別加到普通營(yíng)養(yǎng)肉湯和普通THB培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)基中接種不同濃度的大腸桿菌(M944，M314RH)、金黃色葡萄球菌(99330，94RH-1)和牛無(wú)乳鏈球菌(76LF，98071LF、從牛乳分離已純化的菌珠)，每種細(xì)菌接種兩株，然后劃培養(yǎng)平板，觀察其細(xì)菌數(shù)來(lái)看抑菌、殺菌效果。
實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)(見表1)本發(fā)明對(duì)金黃色葡萄球菌、牛無(wú)乳鏈球菌具有強(qiáng)殺菌效果，對(duì)大腸桿菌亦有強(qiáng)抑菌效果。其中對(duì)牛無(wú)乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌的最低藥效濃度在1/1000倍以上，對(duì)大腸桿菌也具有強(qiáng)抑菌效果。
2、體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)牛奶中的體細(xì)胞數(shù)含量反映乳房的組織狀況乳房出現(xiàn)炎癥時(shí)，體細(xì)胞數(shù)增加，且隨炎癥的嚴(yán)重性而提高。因此，對(duì)用本發(fā)明處理的干奶牛在產(chǎn)犢后10天、15天和20天每天第一次擠奶采集奶樣10ml，測(cè)定其中的體細(xì)胞數(shù)的變化，以判定本發(fā)明的抗炎效果。
體細(xì)胞數(shù)測(cè)定將奶樣涂抹于載玻片上一定的面積處，將涂片經(jīng)過(guò)干燥、脫脂、固定、染色、脫色后在顯微鏡油鏡下計(jì)數(shù)。
結(jié)果表明，本乳劑具有顯著減少產(chǎn)后奶牛牛奶體細(xì)胞數(shù)、降低產(chǎn)后奶牛乳房炎發(fā)生率的作用(見表二)。
3、藥物殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)[實(shí)驗(yàn)方法]藥物殘留檢測(cè)按TTC法操作程序進(jìn)行。TTC法的原理是，牛奶中有抗生素存在時(shí)，接種了嗜熱鏈球菌(streptococcusther-mophilus)后，細(xì)菌的生長(zhǎng)被抑制，牛奶不能成形。若牛奶中無(wú)抗生素存在，則細(xì)菌增殖，使得牛奶成形。采集用A、B、C、D四種藥物處理12、24、36、48、60、72小時(shí)的奶樣，吸取10ml放到已滅菌的試管中，然后將試管放在電爐上水浴加熱，當(dāng)達(dá)到100℃時(shí)，維持6min后取出試管，放在冷水中冷卻至42℃，向每一個(gè)試管中加入嗜熱鏈球菌菌種2.5ml，混勻后放在42℃的烘箱中2.5h，觀察結(jié)果。
見表三，在停藥12小時(shí)檢測(cè)的奶樣中有37.5％無(wú)殘留，停藥24小時(shí)檢測(cè)的奶樣中有50％無(wú)殘留，停藥36小時(shí)檢測(cè)的奶樣中有87.5％無(wú)殘留，停藥48小時(shí)以后檢測(cè)的奶樣均無(wú)藥物殘留。因此，在停藥的48小時(shí)后牛奶中無(wú)藥物殘留，可以繼續(xù)用奶。
4、穩(wěn)定性試驗(yàn)對(duì)上述A、B、C、D四種藥物保存1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、1年、1年以上，分別進(jìn)行乳劑的pH值、抑菌效果和乳化效果穩(wěn)定性測(cè)定，證明本發(fā)明的pH值和乳化效果在1年內(nèi)穩(wěn)定，抑菌效果組間差異不顯著，表明本發(fā)明主要成分在1年內(nèi)的含量穩(wěn)定。
表一藥物抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表二體細(xì)胞和臨床乳房炎發(fā)生率檢查結(jié)果

表三藥物殘留檢測(cè)結(jié)果

(二)實(shí)用驗(yàn)證本發(fā)明研制后，先后在南京、無(wú)錫等地的4個(gè)奶牛場(chǎng)進(jìn)行了試用驗(yàn)證。根據(jù)實(shí)驗(yàn)記錄統(tǒng)計(jì)，用本發(fā)明處理的干奶牛共376例，證明奶牛產(chǎn)后體細(xì)胞數(shù)顯著下降(降低27％)，臨床乳房炎發(fā)生率降低70％(見表二)。
(三)藥效總結(jié)本發(fā)明為一種用于預(yù)防干奶牛乳房炎的乳房灌注劑，對(duì)金黃色葡萄球菌、牛無(wú)乳鏈球菌具有強(qiáng)殺菌效果，對(duì)大腸桿菌也有強(qiáng)抑菌效果，可有效預(yù)防奶牛干奶期乳房炎，顯著減少產(chǎn)后牛奶體細(xì)胞數(shù)、降低奶牛產(chǎn)后乳房炎的發(fā)生率且具有無(wú)殘留、穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.一種用于防治奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注劑，其特征在于每10ml處方量中含有(1)氨芐西林或阿莫西林 100mg-150mg；(2)醋酸氫化潑尼松 4mg-7mg；(3)氯化鈉 400mg-550mg；(4)植物油 6ml-6.5ml；(5)聚山梨醇0.75ml-0.82ml；其余量為滅菌蒸餾水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于防治奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注劑，其特征在于每10ml處方量中含有(1)氨芐西林或阿莫西林 125mg；(2)醋酸氫化潑尼松 4.5mg；(3)氯化鈉 450mg；(4)植物油 6.5ml；(5)聚山梨醇0.8ml；其余量為滅菌蒸餾水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于防治奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注劑之制備方法，系按照所述處方量之比例取各組份，采用如下工藝步驟制得(1)將植物油、氯化鈉、滅菌蒸餾水三者混合，攪拌均勻；(2)在所得混合液中加入聚山梨醇，使混合液充分乳化30分鐘以上；(3)在上述乳化液中再加入醋酸氫化潑尼松，充分混合均勻后，加入氨芐西林或阿莫西林，再混合均勻，于5℃-15℃的低溫下乳化20-25分鐘；(4)將最后乳化液無(wú)菌密封包裝，即得成品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于防治奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注劑及其制備方法，其特點(diǎn)是灌注劑每10ml處方量中含氨芐西林或阿莫西林100mg－150mg；醋酸氫化潑尼松4mg－7mg；氯化鈉400mg－550mg；植物油6ml－6.5ml；聚山梨醇0.75ml－0.82ml；其余量為滅菌蒸餾水。其制備方法是將植物油、氯化鈉、滅菌蒸餾水三者混合，攪拌均勻后加入聚山梨醇，使混合液充分乳化；再加入醋酸氫化潑尼松混勻后，加入氨芐西林或阿莫西林混勻，低溫乳化；無(wú)菌密封包裝之，即得成品。其優(yōu)點(diǎn)是對(duì)奶牛干奶期隱性乳房炎具有明顯的預(yù)防和治療作用，同時(shí)具有無(wú)殘留、生產(chǎn)成本低，治療費(fèi)用低的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/57GK1666744SQ20041001428
公開日2005年9月14日 申請(qǐng)日期2004年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月11日
發(fā)明者王根林, 閻玉琴, 宋維龍 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)