專利名稱：林蛙抗菌肽噴霧劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬一種抗菌鎮(zhèn)痛藥物及其制備領(lǐng)域，特別涉及一種林蛙抗菌肽藥物和制成林蛙抗菌肽噴霧劑的方法。
背景技術(shù)：
抗菌肽(Antimicrobial peptides，AMPs)是生物體內(nèi)部防御系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分?？咕木哂锌垢锾m氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、真菌、包被病毒、原生生物和耐藥菌的能力，目前已被廣泛應(yīng)用于食品保鮮和醫(yī)藥領(lǐng)域。
兩棲類動(dòng)物生存環(huán)境復(fù)雜多樣，它們的皮膚在維持它們生存、開拓和適應(yīng)廣闊棲息地中起著重要作用。為了適應(yīng)生存環(huán)境，兩棲類動(dòng)物的皮膚中分布了種類繁多、功能復(fù)雜的活性物質(zhì)，是一個(gè)巨大的活性生物分子資源庫(kù)和藥物資源庫(kù)，1994年Jacob L.在文章中指出某些蛙類皮膚產(chǎn)生的抗菌組分能殺死各種腫瘤細(xì)胞，其ED50是LD50的十分之一，使用安全性非常高。
皮膚感染和燒傷燙傷感染多由銅綠色假單孢菌(綠膿桿菌)引起的，目前主要采用幾種抗生素聯(lián)合使用來抑制銅綠假單孢菌。從林蛙皮中提取的抗菌肽對(duì)銅綠假單孢菌有很好的殺菌抑菌作用，而且對(duì)其他革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和真菌以及臨床多重耐藥菌也有一定的殺菌抑菌作用。林蛙抗菌肽除殺菌抑菌作用外，還可以鎮(zhèn)痛消炎。
跟本發(fā)明相近的背景技術(shù)是公開號(hào)為CN1216768A的中國(guó)專利，該專利公開了林蛙抗菌肽的制備方法。該專利尚未將林蛙抗菌肽制作成藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，將林蛙抗菌肽制成噴霧劑藥品，并給出該藥品的制作方法，達(dá)到處方無配伍禁忌，給藥方便，不需特殊體位給藥，直接作用于患病部位，同時(shí)避免了肝臟的首過效應(yīng)和藥物對(duì)胃腸道的刺激，制作工藝簡(jiǎn)便，制劑質(zhì)量穩(wěn)定的目的。
本發(fā)明的林蛙抗菌肽噴霧劑，其原料、輔料及按質(zhì)量百分比的用量如下林蛙抗菌肽為5～40％；羥基酯類防腐劑為0.2～3％；聚乙二醇400(PEG400)或丙二醇為1～5％；氯化鈉為0.45～0.75％；余量為水。
輔料中，所說的水可以是蒸餾水或注射用水；所說的羥基酯類防腐劑最好選用尼泊金乙酯；聚乙二醇400或丙二醇可以促進(jìn)藥物在皮膚表面的滲透。
本發(fā)明的林蛙抗菌肽噴霧劑具有如下特征(1)外觀性淡黃色液體；(2)pH值3.5～5；(3)穩(wěn)定性在酸性條件、溫度121℃、壓強(qiáng)1.01×105Pa下20分鐘仍不失活；(4)抑菌活性采用管碟法進(jìn)行抗菌活性測(cè)定，對(duì)臨床多重耐藥的銅綠色假單胞菌和金黃色葡萄球菌有抑制作用。
本發(fā)明的林蛙抗菌肽噴霧劑通過抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖、控制皮膚或傷口感染抗炎、鎮(zhèn)痛，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。非感染傷口可將本發(fā)明直接噴于患處，感染傷口或燒傷需處理后用藥，對(duì)患處有保護(hù)作用。
本發(fā)明的林蛙抗菌肽噴霧劑的制備方法是，按用量比例稱取原料、輔料，再按如下步驟進(jìn)行配制取羥基酯類防腐劑溶解于適量水中，加熱至40～50℃使之全部溶解；加入聚乙二醇400或丙二醇、氯化鈉，攪拌使全溶，高溫滅菌，制成輔料溶液備用；將林蛙抗菌肽加入輔料溶液中，添加水至全量，混勻，分裝于定量噴霧器。
定量噴霧器可以是5mL或10mL或20mL的。
本發(fā)明的林蛙抗菌肽噴霧劑主要用于由銅綠假單孢菌引起的各類皮膚疾病和燒傷燙傷感染，有較好的治療作用，對(duì)由其他病菌引起的感染也有一定的療效。
本發(fā)明的有益效果在于，處方工藝簡(jiǎn)便，制劑質(zhì)量穩(wěn)定，處方無配伍禁忌，給藥方便，不需特殊體位給藥，直接作用于患病部位，同時(shí)避免了肝臟的首過效應(yīng)和藥物對(duì)胃腸道的刺激；與皮膚粘附效果極佳，在皮膚表面吸收和滲透性強(qiáng)，利于藥效的發(fā)揮，不污染衣物。本發(fā)明與抗生素類藥物相比具有毒副作用小、不易產(chǎn)生細(xì)菌的耐藥性及使用方便等優(yōu)點(diǎn)。本制劑采用有定量裝置的噴霧瓶灌裝藥液，易于在臨床推廣使用。本發(fā)明可廣泛用于臨床燒傷燙傷、皮膚感染、以及日常家居消毒等。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明以分子量5000～20000的林蛙抗菌肽為原料，具體實(shí)施步驟如下，但并不意味著對(duì)本發(fā)明范圍的限制。
實(shí)施例1林蛙抗菌肽用量對(duì)抑菌活性的影響選用尼泊金乙酯2.0克、聚乙二醇400(PEG400)10克，氯化鈉2.0克，先將尼泊金乙酯溶解于注射用水中，加熱至45℃左右，加入PEG400、氯化鈉，攪拌使全溶，高溫滅菌后制成輔料溶液等分四份備用；分別將林蛙抗菌肽5克、15克、30克、40克加入到四份輔料溶液中，添加注射用水，配制成林蛙抗菌肽按質(zhì)量占約5％、15％、30％、40％的林蛙抗菌肽噴霧劑。
采用管碟法進(jìn)行銅綠假單孢菌抗菌活性測(cè)定，結(jié)果表明隨著林蛙抗菌肽用量的增加，抗菌活性也在增強(qiáng)；但是用量超過35％抗菌活性的增強(qiáng)已經(jīng)緩慢。
林蛙抗菌肽噴霧劑的原料、輔料比較好的用量如下(1)林蛙抗菌肽為15～25％；(2)羥基酯類防腐劑為0.5～2％；(3)聚乙二醇400或丙二醇為1.5～3.5％；(4)氯化鈉為0.55～0.65％；(5)余量為注射用水。
實(shí)施例2最佳配比、抑菌圈試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)1、林蛙抗菌肽噴霧劑的原料、輔料最佳用量如下(1)林蛙抗菌肽為18％；(2)尼泊金乙酯為1％；(3)聚乙二醇400為2.5％；(4)氯化鈉為0.6％。
(5)余量為注射用水。
2、抑菌圈試驗(yàn)下面實(shí)驗(yàn)是使用實(shí)施例2配制的林蛙抗菌肽噴霧劑(1)菌種銅綠假單孢菌Pseudomonas aeruginosa ATCC27853大腸埃希氏菌Escherichia coli ATCC25922金黃色葡萄球菌Staphylocouus aureus ATCC25923臨床多重耐藥性的銅綠假單孢菌(主要耐藥名稱哌拉西林、氧氟沙星、頭孢噻肟、新諾明、三代頭孢、哌酮)臨床多重耐藥性的金黃色葡萄球菌(主要耐藥名稱青霉素、紅霉素、氧氟沙星、甲氧西林)(2)方法將上述各菌種培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，用液體培養(yǎng)基稀釋105～106CFU/ml，用無菌棉蘸取稀釋菌液均勻涂于無菌平皿中的固體培養(yǎng)基上。將無菌牛津杯(10×7.8×6mm)置于平皿中，每個(gè)平皿中放四個(gè)牛津杯，中心牛津杯為陰性對(duì)照，周圍三個(gè)放林蛙抗菌肽噴霧劑，每個(gè)牛津杯中放加入藥品量為100μl，蓋上陶瓦蓋后，置37℃培養(yǎng)16～24小時(shí)，用游標(biāo)卡尺量抑菌圈直徑，每一實(shí)驗(yàn)重復(fù)3～5次。
(3)結(jié)果抑菌圈直徑(mm)菌名林蛙抗菌肽噴霧劑(100μl)陰性對(duì)照(100μg)ATCC27853 15～17.2 -ATCC25923 14～15.8 -ATCC25922 14.6～15.8 -臨床多重耐藥性 14.2～16 -的銅綠假單孢菌臨床多重耐藥性 13～15 -的金黃色葡萄球菌注抑菌圈標(biāo)準(zhǔn)——大于8mm有抑菌作用；
小于8mm無抑菌作用。
3、穩(wěn)定性試驗(yàn)將本發(fā)明分別在室溫、37℃、50℃下依次放置3個(gè)月、2個(gè)月、1個(gè)月，每周用上述方法做抑菌試驗(yàn)，菌種為臨床多重耐藥性的銅綠假單孢菌。
抑菌圈直徑(mm)時(shí)間 室溫 37℃ 50℃1～4周14.4～1614.5～15.8 14.2～15.15～8周14.8～15.6 14.2～15.9 ——9～12周 14.2～15.3 —— ——
權(quán)利要求
1.一種林蛙抗菌肽噴霧劑，其特征在于，由原料和輔料及按質(zhì)量百分比的用量組成林蛙抗菌肽為5％～40％；羥基酯類防腐劑為0.2％～3％；聚乙二醇400或丙二醇為1％～5％；氯化鈉為0.45％～0.75％；余量為水。
2.按照權(quán)利要求1所述的林蛙抗菌肽噴霧劑，其特征在于，所說的原料和輔料及按質(zhì)量百分比是林蛙抗菌肽為15～20％；羥基酯類防腐劑為1～4％；聚乙二醇400或丙二醇為1.0～2.0％；氯化鈉為0.2～0.8％；余量為水。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的林蛙抗菌肽噴霧劑，其特征在于，所說的羥基酯類防腐劑是尼泊金乙酯；所說的水是注射用水。
4.一種權(quán)利要求1的林蛙抗菌肽噴霧劑的制備方法，其特征在于，按用量比例稱取原料、輔料，再按如下步驟進(jìn)行配制取羥基酯類防腐劑溶解于適量注射用水中，加熱至40～50℃使之全部溶解；加入聚乙二醇400或丙二醇、氯化鈉，攪拌使全溶，高溫滅菌，制成輔料溶液備用；將林蛙抗菌肽加入輔料溶液中，添加水至全量，混勻，分裝于定量噴霧器。
5.一種權(quán)利要求1的林蛙抗菌肽噴霧劑的應(yīng)用，其特征在于，用于由銅綠假單孢菌引起的皮膚疾病和燒傷燙傷感染。
全文摘要
本發(fā)明的林蛙抗菌肽噴霧劑及其制備方法屬抗菌鎮(zhèn)痛藥物及其制備領(lǐng)域。其原料和輔料按質(zhì)量百分比的用量為林蛙抗菌肽5－40％；尼泊金乙酯1－5％；PEG
文檔編號(hào)A61P31/00GK1583166SQ20041001087
公開日2005年2月23日 申請(qǐng)日期2004年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月25日
發(fā)明者李青山, 滕利榮, 孟慶繁, 田曉樂, 周杰 申請(qǐng)人:吉林大學(xué)