專利名稱：喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的為抗癌藥喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
喜樹堿、羥基喜樹堿及其衍生物是從我國特有樹種喜樹(Camptothecaaeuminata Decne)中提取、分離而得及以此為原料經(jīng)半合成的系列衍生物，具有廣譜抗癌作用。其抗癌活性與拓撲異構(gòu)酶的作用有關(guān)，是拓撲異構(gòu)酶I/II抑制劑。已知許多腫瘤細胞中拓撲異構(gòu)酶含量高于正常細胞，喜樹堿、羥基喜樹堿及其系列衍生物對拓撲異構(gòu)酶具有抑制作用而產(chǎn)生抗癌作用。但由于它水不溶性以及其重要活性功能團δ內(nèi)酯環(huán)在血液循環(huán)中不穩(wěn)定，較快地開環(huán)為羧基型，故影響臨床使用的順應(yīng)性及其療效，國內(nèi)外研究者一方面從對其化學(xué)結(jié)構(gòu)進行修飾，增加其水溶性從而研究出其一系列衍生物，但仍存在著需要保護內(nèi)酯環(huán)的問題，如新衍生物拓撲替康<Topotecan>已上市，國外還在研究如何保護其內(nèi)酯環(huán)；另一方面也從遞藥系統(tǒng)方面研究解決其水溶性并對這一類化合物的活性基團δ內(nèi)酯環(huán)進行保護研究，以期能解決其水不溶性及對活性基團δ內(nèi)酯環(huán)不使開環(huán)成為羧基而影響臨床療效，并能降低毒副作用。
目前市售喜樹堿、羥基喜樹堿注射液是使其成為鈉鹽而制成水針劑，但其溶液的穩(wěn)定性較粉針凍干劑為差，國內(nèi)已有申報羥基喜樹堿鈉鹽凍干粉針劑，可提高貯存期間的穩(wěn)定性，但是，這種羥基喜樹堿鈉鹽劑型并不能起到保護其活性基團δ內(nèi)酯環(huán)的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物凍干粉針劑，使它能與水相溶，可直接用5％或10％葡萄糖輸液復(fù)溶供靜脈注射或滴注。
本發(fā)明的另一目的是提供該喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物的制備方法。
本發(fā)明的進一步目的是通過喜樹堿、羥基喜樹堿包裹脂質(zhì)體的過程，采用了藥用可注射的枸櫞酸鈉、枸櫞酸組成的酸性水溶液使脂質(zhì)體膜內(nèi)外呈相同酸度環(huán)境，促進其化學(xué)結(jié)構(gòu)中的δ內(nèi)酯環(huán)與磷脂雙分子層作用以達到最大程度地保護δ內(nèi)酯環(huán)，不產(chǎn)生開環(huán)形成羧基而影響療效，從而保持其抗癌活性，同時也可以降低其毒性。
本發(fā)明的又一目的是采用高純度的天然蛋黃卵磷脂或大豆卵磷脂，其中磷脂酰膽堿(PC)的含量在98％以上，也可以用合成的二硬脂酸磷脂酰膽堿作膜材。用此等膜材制成的脂質(zhì)體具有一年半以上的穩(wěn)定性(2-10℃)。
本發(fā)明的目的可以通過以下措施來達到一種治療惡性腫瘤的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物，其特征是以下述重量配比原料及輔料組成喜樹堿、羥基喜樹堿1-5份，磷脂80-1000份，膽固醇0.3-7份，枸櫞酸鈉2.7-42份，枸櫞酸0.7-14份，凍干賦形劑100-1500份。
進一步的，本發(fā)明治療惡性腫瘤的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物可由下述重量配比原料及輔料組成喜樹堿、羥基喜樹2-5份，磷脂90-900份，膽固醇0.35-6份，枸櫞酸鈉3.5-38份，枸櫞酸0.74-12份，凍干賦形劑110-1300份。
再進一步，本發(fā)明治療惡性腫瘤的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物可由下述重量配比原料及輔料組成喜樹堿、羥基喜樹堿2-4份，磷脂120-800份，膽固醇0.4-5份，枸櫞酸鈉4.0-34份，枸櫞酸0.8-9份，凍干賦形劑120-1250份。
本發(fā)明為治療惡性腫瘤的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物凍干粉針劑，可以按以下方法制備，包括以下述重量配比原料以及輔料組成喜樹堿、羥基喜樹堿1-5份，磷脂80-1000份，膽固醇0.3-7份，枸櫞酸鈉2.7-42份，枸櫞酸0.7-14份，凍干賦形劑100-1500份。
在無菌條件下，將喜樹堿、羥基喜樹堿，磷脂、膽固醇分別按比例稱取相應(yīng)的重量放入適當?shù)娜萜髦校缓蠹尤攵康臒o水乙醇或甲醇，容器置恒溫水浴中，溶解成溶液，然后將此溶液轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓除去溶劑后成膜，加入溶有上述比例計算量的含枸櫞酸鈉、枸櫞酸的凍干賦形劑水溶液，洗膜，洗膜液的PH2.5-6.5，水化，超聲波或勻漿機粉碎其壓力為35-135MPa，控制粒徑在0.05-5微米，用0.22微米濾膜過濾除菌，分裝入安瓿或西林瓶容器內(nèi)，進行冷凍干燥，即得淺黃色或黃色疏松的喜樹堿，羥基喜樹堿脂質(zhì)體組合物凍干疏松塊狀物，封口或壓蓋時可通氮氣，氦氣或氬氣。
本發(fā)明所述的凍干賦形劑為葡萄糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、海藻糖或巖藻糖等。可以單用，也可以兩種或兩種以上合用。所述的磷脂是注射用的蛋黃卵磷脂、大豆磷脂，或合成的二硬脂酸磷脂酰膽堿。
本發(fā)明所述的采用勻漿機粉碎方法優(yōu)化的壓力參數(shù)為50-130Mpa，特別優(yōu)化的壓力參數(shù)為60-120Mpa。
本發(fā)明的優(yōu)點本發(fā)明在制備過程中改變了文獻報導(dǎo)的PH梯度法與離子梯度法制備喜樹堿類的脂質(zhì)體方法，而采用自行設(shè)計含可注射用的枸櫞酸鈉及枸櫞酸的酸性溶液為洗膜液，使喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)體膜內(nèi)外呈相同酸性環(huán)境，促進它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)中δ內(nèi)酯環(huán)與磷脂雙分子層作用以達到最大程度地保護δ內(nèi)酯環(huán)。本發(fā)明的脂質(zhì)體中主藥的δ內(nèi)酯環(huán)經(jīng)采用高效液相方法測定可達到98％以上(見表一)，不產(chǎn)生開環(huán)形成羧基而影響療效，從而保持其抗癌活性，同時也可以降低其毒性。本方法制備工藝簡便，易于工業(yè)化生產(chǎn)，避免了文獻報導(dǎo)的PH梯度法及離子梯度法在制過程步驟多、周期長、不易于工業(yè)化生產(chǎn)的缺點。此外，比較測定了市售羥基喜樹堿鈉的水針劑中δ內(nèi)酯環(huán)的含量，結(jié)果表明羥基喜樹堿鈉鹽水針劑中δ內(nèi)酯環(huán)遠遠低于羥基喜樹堿脂質(zhì)體中的δ內(nèi)酯環(huán)(見表二)。
表一高效液相法測定羥基喜樹堿脂質(zhì)體中δ內(nèi)酯環(huán)含量

表二高效液相法測定市售羥基喜樹堿及本發(fā)明羥基喜樹堿脂質(zhì)體中的δ內(nèi)酯環(huán)含量

具體實施方式
以下通過具體實施例來進一步說明本發(fā)明，但實施例僅用來說明，并不能限制本發(fā)明范圍。
在本發(fā)明中，若非特別指明，所有的份量均以總重量為基礎(chǔ)的重量單位。
實施例1在無菌條件下取注射用喜樹堿、羥基喜樹堿1克，注射用精制大豆磷脂100克，膽固醇0.8克，上述物料置于適當容器中，在水浴中加入無水乙醇5000毫升加熱攪拌至完全溶解成溶液，將上述無水乙醇溶液置恒溫水浴中旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干，成膜，用葡萄糖300克，枸櫞酸鈉5克及枸櫞酸0.9克，溶于2000毫升水中，制成洗膜液，洗膜液為PH6.5，緩緩洗膜，洗膜液，用勻漿機粉碎其壓力約為60MPa，控制粒徑在0.05-5微米。用0.22微米濾膜過濾除菌，濾液分裝于安瓿或西林瓶中，使每瓶含喜樹堿2、5或10毫克，羥基喜樹堿2、5或10毫克，進行冷凍干燥，通惰性氣體后封口或壓蓋即得淺黃色疏松塊狀脂質(zhì)體制劑。
實施例2在無菌條件下取注射用喜樹堿、羥基喜樹堿1.5克，取注射用精制大豆磷脂250克，膽固醇1.2克，置適當容器中，在水浴中加入無水乙醇6000毫升，加熱攪拌至完全溶解成溶液，將上述無水乙醇溶液置恒溫水浴中旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干，成膜，葡萄糖550克，枸櫞酸鈉7克及枸櫞酸1.4克，溶于3000毫升水中制成洗膜液，洗膜液為PH6.2，緩緩洗膜，洗膜液用勻漿機粉碎其壓力約為70MPa，控制粒徑在0.05-5微米。用0.2微米濾膜過濾除菌，濾液分裝于安瓿或西林瓶中，使每瓶含喜樹堿2、5或10毫克，羥基喜樹堿2、5或10毫克，進行冷凍干燥，通惰性氣體后封口或壓蓋即得淺黃色疏松塊狀脂質(zhì)體制劑。
實施例3在無菌條件下取注射用喜樹堿、羥基喜樹堿3.2克，取注射用精制大豆磷脂460克，膽固醇3.5克，置適當容器中，在水浴中加入無水乙醇7000毫升，加熱攪拌至完全溶解成溶液，將上述無水乙醇溶液置恒溫水浴中旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干，成膜，甘露醇350克，枸櫞酸鈉21.9克及枸櫞酸4.1克，溶于3000毫升水中制成洗膜液，洗膜液為PH6.1，緩緩洗膜，洗膜液用勻漿機粉碎其壓力約為80MPa，控制粒徑在0.05-5微米。用濾膜過濾除菌，濾液分裝于安瓿或西林瓶中，使每瓶含喜樹堿2、5或10毫克，羥基喜樹堿2、5或10毫克，進行冷凍干燥，通惰性氣體后封口或壓蓋即得類白色或淺黃色疏松塊狀脂質(zhì)體制劑。
實施例4在無菌條件下去注射用喜樹堿、羥基喜樹堿及其衍生物2.8克，取注射用精制大豆磷脂400克，膽固醇3.0克，置適當容器中，在水浴中加入無水乙醇6000毫升，加熱攪拌至完全溶解成溶液，將上述無水乙醇溶液置恒溫水浴中旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干，成膜，將甘露醇340克，枸櫞酸鈉23克及枸櫞酸4.8克，溶于3000毫升水中制成洗膜液，洗膜液為PH5.5，緩緩洗膜，水化，用勻漿機粉碎，其壓力約為65MPa，控制粒徑在0.05-5微米。用0.22微米濾膜過濾除菌，濾液分裝于安瓿或西林瓶中，使每瓶含喜樹堿2、5或10毫克，羥基喜樹堿2、5或10毫克，進行冷凍干燥，通惰性氣體后封口或壓蓋即得淺黃色疏松塊狀脂質(zhì)體制劑。
實施例5在無菌條件下取注射用喜樹堿、羥基喜樹堿4.5克，注射用精制蛋黃卵磷脂900克，膽固醇6.0克，置適當容器中，在水浴中加入無水乙醇9000毫升，加熱攪拌至完全溶解成溶液，將上述無水乙醇溶液置恒溫水浴中旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干，成膜，將葡萄糖850克，枸櫞酸鈉41克及枸櫞酸9.1克，溶于4000毫升水中制成洗膜液，洗膜液為PH5.2，緩緩洗膜，水化，制成洗膜液，用勻漿機粉碎其壓力約為90MPa，控制粒徑在0.05-5微米。用0.22微米濾膜過濾除菌，濾液分裝于安瓿或西林瓶中，使每瓶含喜樹堿2、5或10毫克，羥基喜樹堿2、5或10毫克，進行冷凍干燥，通惰性氣體后封口或壓蓋即得淺黃色疏松塊狀脂質(zhì)體制劑。
實施例6在無菌條件下取注射用喜樹堿、羥基喜樹堿3克，取注射用精制蛋黃卵磷脂450克，膽固醇3.4克，置適當容器中，在水浴中加入無水乙醇6000毫升，加熱攪拌至完全溶解成溶液，將上述無水乙醇溶液置恒溫水浴中旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干，成膜，將甘露醇200克，枸櫞酸鈉32克及枸櫞酸8.9克，溶于1800毫升的水中制成洗膜液，洗膜液為PH5.0，緩緩洗膜，水化，用勻漿機粉碎其壓力約為38MPa，控制粒徑在0.05-5微米。用0.22微米濾膜過濾除菌，濾液分裝于安瓿或西林瓶中，使每瓶含喜樹堿2、5或10毫克，羥基喜樹堿2、5或10毫克，進行冷凍干燥，通惰性氣體后封口或壓蓋即得淺黃色疏松塊狀脂質(zhì)體制劑。
實施例7在無菌條件下取注射用喜樹堿、羥基喜樹堿1克，取注射用精制蛋黃卵磷脂150克，膽固醇0.5克，置適當容器中，在水浴中加入無水乙醇4000毫升，加熱攪拌至完全溶解成溶液，將上述無水乙醇溶液置恒溫水浴中旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干，成膜。將葡萄糖150克枸櫞酸鈉4.0克及枸櫞酸1.2克溶于2000毫升的水中制成洗膜液，洗膜液為PH4.5，緩緩洗膜，水化，用勻漿機粉碎其壓力約為50MPa，控制粒徑在0.05-5微米。用0.22微米濾膜過濾除菌，濾液分裝于安瓿或西林瓶中，使每瓶含喜樹堿2、5或10毫克，羥基喜樹堿2、5或10毫克，進行冷凍干燥，通惰性氣體后封口或壓蓋即得類白色或淺黃色疏松塊狀脂質(zhì)體制劑。
實施例8在無菌條件下取注射用喜樹堿、羥基喜樹堿1克，取注射用精制蛋黃卵磷脂130克，膽固醇0.45克，置適當容器中，在水浴中加入無水乙醇4000毫升，加熱攪拌至完全溶解成溶液，將上述無水乙醇溶液置恒溫水浴中旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)至干，成膜。將葡萄糖210克，枸櫞酸鈉3.2克及枸櫞酸0.95克溶于2000毫升的水中制成洗膜液，洗膜液為PH4.0，緩緩洗膜，水化，用勻漿機粉碎其壓力約為28MPa，控制粒徑在0.5-5微米。用0.22微米濾膜過濾除菌，濾液分裝于安瓿或西林瓶中，使每瓶含喜樹堿2、5或10毫克，羥基喜樹堿2、5或10毫克，進行冷凍干燥，通惰性氣體后封口或壓蓋即得淺黃色疏松塊狀脂質(zhì)體制劑。
權(quán)利要求
1.一種治療惡性腫瘤的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物，其特征是以下述重量配比原料及輔料組成喜樹堿、羥基喜樹堿1-5份，磷脂80-1000份，膽固醇0.3-7份，枸櫞酸鈉2.7-42份，枸櫞酸0.7-14份，凍干賦形劑100-1500份。
2.如權(quán)利要求1所述的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物，其特征是以下述重量配比原料及其輔料組成喜樹堿、羥基喜樹堿2-5份，磷脂90-900份，膽固醇0.35-6份，枸櫞酸鈉3.5-38份，枸櫞酸0.74-12份，凍干賦形劑110-1300份。
3.如權(quán)利要求1所述的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物，其特征是以下述重量配比原料及輔料組成喜樹堿、羥基喜樹堿2-4份，磷脂120-800份，膽固醇0.4-5份，枸櫞酸鈉4.0-34份，枸櫞酸0.8-9份，凍干賦形劑120-1250份。
4.如權(quán)利要求1所述的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物，其特征在于所述的磷脂是注射用的蛋黃卵磷脂、大豆磷脂或合成的二硬脂酸磷脂酰膽堿。
5.如權(quán)利要求1-3所述的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物，其特征在于所述的凍干賦形劑為葡萄糖、甘露醇、乳糖、海藻糖或巖藻糖。
6.權(quán)利要求1-3之一所述的抗惡性腫瘤的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物的制備方法，其特征是在無菌條件下，將喜樹堿、羥基喜樹堿、磷脂、膽固醇，分別按比例稱取相應(yīng)的重量放入適當容器中，然后加入定量無水乙醇或甲醇，容器置恒溫水浴中，溶解成溶液，將此溶液轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓除去溶劑后成膜，加入溶有上述比例量的含枸櫞酸鈉、枸櫞酸的凍干賦形劑的水溶液，洗膜，洗膜液的PH為2.5-6.5，水化、超聲波或勻漿機粉碎，其壓力為35-135MPa，控制粒徑在0.05-5微米，用0.22微米濾膜過濾除菌，分裝入安瓿或西林瓶容器內(nèi)，冷凍干燥，即得淺黃或黃色疏松的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)體組合物的凍干疏松塊狀物，封口或壓蓋時可通氮氣、氦氣或氬氣。
7.如權(quán)利要求6所述的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物的制備方法，其特征在于所述磷脂是注射用蛋黃卵磷脂、大豆磷脂或合成的二硬脂酸磷脂酰膽堿。
8.如權(quán)利要求6所述的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物的制備方法，其特征在于所述凍干賦形劑為葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、海藻糖或巖藻糖，可以單用，也可以兩種或兩種以上合用。
9.如權(quán)利要求6所述的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物的制備方法中，其特征在于采用勻漿機粉碎方法優(yōu)化的壓力參數(shù)為50-130MPa。
10.如權(quán)利要求9所述的喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物的制備方法，其特征在于采用勻漿機粉碎方法特別優(yōu)化的壓力參數(shù)為60-120Mpa。
全文摘要
本發(fā)明涉及的為抗癌藥喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物及其制備方法。喜樹堿、羥基喜樹堿脂質(zhì)組合物優(yōu)點在于既可解決主藥水不溶性，同時，又可保護主藥化學(xué)結(jié)構(gòu)中活性功能團δ內(nèi)酯不使開環(huán)而影響療效。
文檔編號A61K9/127GK1554344SQ20031011277
公開日2004年12月15日 申請日期2003年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月26日
發(fā)明者翁幗英, 程培元, 陳文忠, 荘翌, 程光, 郝翌 申請人:南京康海藥業(yè)有限公司, 翁幗英