專利名稱：新化合物、包含該化合物的藥物組合物及該化合物的應(yīng)用方法
背景技術(shù)：
脂肪酸合酶脂肪酸在細(xì)胞生理中具有三個(gè)主要作用。首先，它們是生物膜的構(gòu)件，第二，脂肪酸衍生物起激素和細(xì)胞內(nèi)信使的作用。第三，這一點(diǎn)對(duì)本發(fā)明特別重要，脂肪酸是燃料分子，能以三酰甘油的形式貯存在脂肪組織中，三酰甘油也被稱為中性脂肪。
有四種重要的酶參與脂肪酸合成途徑脂肪酸合酶(FAS)、乙酰輔酶A羧酶(ACC)、蘋(píng)果酸酶、檸檬酸裂合酶。主要的酶FAS，催化前體丙二酰-輔酶A與乙酰-輔酶A的NADPH依賴性縮合，產(chǎn)生脂肪酸。NADPH是還原劑，通常在FAS反應(yīng)循環(huán)中的兩個(gè)點(diǎn)起主要電子供體的作用。其它三個(gè)酶(即就是ACC、蘋(píng)果酸酶和檸檬酸裂合酶)產(chǎn)生必需的前體。其它酶，例如，生成NADPH的酶，也參與脂肪酸合成。
FAS具有酶學(xué)委員會(huì)(E.C.)編號(hào)No.2.3.1.85，也被稱為脂肪酸合成酶，脂肪酸連接酶，其系統(tǒng)名稱為乙酰-輔酶A丙二酰輔酶AC-酰基轉(zhuǎn)移酶(去羧基，氧?；拖；?還原和硫代酸酯水解)。7種不同的酶-或催化域-參與脂肪酸的FAS催化合成乙酰轉(zhuǎn)酰酶、丙二酰轉(zhuǎn)酰酶、β-酮脂酰合成酶(縮合酶)，β-酮脂酰還原酶，β-羥?；撍?，烯酰還原酶和硫酯酶(Wakil，S.J.，Biochemistry，284523-4530，1989)。這七種酶一起構(gòu)成FAS。
盡管在低等生物如細(xì)菌和在高等生物如分支桿菌、酵母菌和人中FAS催化的脂肪酸合成是類似的，但存在一些重要區(qū)別。在細(xì)菌中，七種酶促反應(yīng)是通過(guò)七種沒(méi)有結(jié)合的獨(dú)立多肽進(jìn)行的。這種被分類為II型FAS。相反，在分支桿菌、酵母菌和人中的酶反應(yīng)是通過(guò)多功能的多肽完成的。例如，酵母菌具有由兩種獨(dú)立的多肽構(gòu)成的復(fù)合體，然而在分支桿菌和人中，所有的七種反應(yīng)都是通過(guò)單一多肽完成的。這些被分類為I型FAS。
FAS抑制劑已經(jīng)表明，多種化合物能抑制脂肪酸合酶(FAS)。FAS抑制劑可由化合物抑制純化的FAS酶活性的能力而鑒定的。FAS的活性可根據(jù)測(cè)量放射性標(biāo)記前體向脂肪酸中的加入(即，乙酰輔酶A或丙二酰輔酶A)或根據(jù)分光光度法測(cè)量NADPH的氧化來(lái)檢測(cè)(Dils，et al.，MethodsEnzymol.，3574-83)。
表1，如下所示，列出了幾種FAS抑制劑。
表1脂肪酸合成途徑的酶的代表性抑制劑脂肪酸合酶抑制劑1，3-二溴丙酮淺藍(lán)菌素Ellman′s試劑(5，5′-二硫基雙(2-硝基 苯基淺藍(lán)菌素(phenyocerulenin)苯甲酸)，DTNB) 米拉索普4-(4′-氯芐氧基)芐基煙酸鹽(KCD-232) 碘乙酸酯4-(4′-氯芐氧基)苯甲酸(MII) 苯基胂化氧2(5(4-氯苯基)戊基)環(huán)氧乙烷-2-羧化物 銻酰葡糖酸鈉(POCA)和它的輔酶A衍生物 蜂毒肽乙氧基甲酸酐 硫乳霉素檸檬酸裂合酶抑制劑蘋(píng)果酸酶抑制劑(-)羥基檸檬酸鹽 高碘酸鹽氧化的磷酸3-氨基吡啶腺嘌呤-二(R，S)-S-(3，4-二羧基-3-羥基-3-甲基- 核苷酸丁基)-輔酶A 5，5′-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)S-羧基甲基輔酶A 對(duì)羥基苯甲酸汞N-乙基馬來(lái)酰亞胺乙二酰硫羥酸酯如S-乙二酰谷胱甘肽棉子酚苯甲酰甲醛2，3-丁二酮溴代丙酮酸酯孕烯諾龍乙酰輔酶A羧化酶抑制劑稀禾定 9-癸烯基-1-戊烯二酸haloxyfop及其輔酶A酯 癸烯基-2-戊烯二酸diclofop及其輔酶A酯 癸烯基-1-戊烯二酸clethodim(S)-ibuprofenyl-輔酶Aalloxydim(R)-ibuprofenyl-輔酶Atrifop fluazifop及其輔酶A酯祛酯酸 clofop2，4-D甲氯丙酸 5-(十四烷氧基)-2-糠酸茅草枯 β，β′-四甲基十六二酸2-烷基戊二酸 tralkoxydim2-十四基戊二酸(TDG) β，β伯-甲基-取代的2-辛基戊二酸2-辛基戊二酸 取代的十六二酸(MEDICA 16)的N6，O2-二-丁?；h(huán)腺苷酸 游離或一硫代酯N2，O2-二丁酰基環(huán)鳥(niǎo)苷酸 α-cyanco-4-羥基肉桂酸鹽5-(十四氧基)-2-糠酸 S-(4-溴基-2，3-二氧丁基)-輔酶A輔酶A衍生物(TOFA)對(duì)羥基苯甲酸汞(PHMB)2，3，7，8-四氯二苯并-p-二噁英 N6，O2-二丁酰基環(huán)腺苷酸在脂肪酸合成途徑中的四種酶中，F(xiàn)AS是抑制的優(yōu)選靶點(diǎn)，因?yàn)镕AS只在脂肪酸合成途經(jīng)內(nèi)起作用，而其它的三種酶參與其它的細(xì)胞功能。因此，其它三種酶中的一種的抑制劑更可能影響正常細(xì)胞。由FAS執(zhí)行的七種酶促步驟中，縮合酶(即，β-酮?；铣擅?和烯酰還原酶催化的步驟已經(jīng)成為減少或阻止脂肪酸合成的抑制劑的最普通的候選者。FAS復(fù)合體的縮合酶的結(jié)構(gòu)和功能被充分表征。縮合酶的活性位點(diǎn)包括關(guān)鍵的半胱氨酸硫醇，其是抗血脂劑，如，例如抑制劑淺藍(lán)菌素的靶點(diǎn)。
優(yōu)選的縮合酶抑制劑包括大量的化學(xué)化合物，包括烷基化劑、氧化劑、和能進(jìn)行二硫化物交換的試劑。酶的結(jié)合口袋優(yōu)選長(zhǎng)鏈E，E，二烯。
首要的是，含有側(cè)鏈雙烯和表現(xiàn)出與硫醇鹽陰離子反應(yīng)性基團(tuán)的試劑可能是良好的縮合酶抑制劑。淺藍(lán)菌素[(2S，3R)-2，3-環(huán)氧-4-氧代-7，10十二碳二烯?；０穄是一個(gè)例子 淺藍(lán)菌素與脂肪酸合酶的縮合酶的活性位點(diǎn)中關(guān)鍵的半胱氨酸硫醇基共價(jià)結(jié)合，滅活這一關(guān)鍵酶促步驟(Funabashi，et al.，J.Biochem.，105751-755，1989)。盡管注意到淺藍(lán)菌素具有其它的活性，但這些活性發(fā)生在可能不是人細(xì)胞相關(guān)模型的微生物中(如，真菌內(nèi)的膽固醇合成的抑制，Omura(1976)，Bacteriol.Rev.，40681-697；或病毒內(nèi)RNA合成的減少，Perez，et al.(1991)，F(xiàn)EBS，280129-133)，發(fā)生在基本上更高的藥物濃度(在5mg/ml的病毒HIV蛋白酶的抑制，Moelling，et al.(1990)，F(xiàn)EBS，261373-377)或可為內(nèi)源性脂肪酸合成抑制的直接結(jié)果(B淋巴和巨噬細(xì)胞內(nèi)抗原加工的抑制，F(xiàn)alo，et al.(1987)，J.Immunol.，1393918-3923)。一些數(shù)據(jù)顯示，淺藍(lán)菌素不特異性抑制蛋白的肉豆蔻?；?Simon，etal.，J.Biol.Chem.，2673922-3931，1992)。
更多一些的FAS抑制劑被公開(kāi)于美國(guó)專利申請(qǐng)No.08/096,908和它的1994年1月24日申請(qǐng)的CIP中，其中公開(kāi)的內(nèi)容被引入本文作為參考。所包括的是脂肪酸合酶、檸檬酸裂合酶、輔酶A羧化酶及蘋(píng)果酸酶的抑制劑。
Tomoda及其同事(Tomoda et.al.，Biochim.Biophys.Act 921595-598 1987；Omura el.al.，J.Antibiotics 391211-1218 1986)描述了三氮菌素C(有時(shí)稱WS-1228A)，一種天然存在的?；?輔酶A合成酶抑制劑，其是Streptomyces sp.，SK-189的產(chǎn)物。TriacsinC的化學(xué)結(jié)構(gòu)是1-羥基-3-(E，E，E-2′，4′，7′-undecatrienylidine)三氮烯。8.7μM的三氮菌素C導(dǎo)致大鼠肝?；o酶A合成酶50％的抑制；相關(guān)化合物，三氮菌素A通過(guò)與長(zhǎng)鏈脂肪酸競(jìng)爭(zhēng)的機(jī)制抑制?；o酶A合成酶。?；o酶A合成酶的抑制對(duì)動(dòng)物細(xì)胞是有毒的。Tomoda et al.(Tomoda el.al.，J.Biol.Chem.2664214-4219，1991)教導(dǎo)1.0μM的三氮菌素C引起Raji細(xì)胞生長(zhǎng)抑制，并顯示出抑制Vero和Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)。Tomoda el.al.進(jìn)一步教導(dǎo)?；o酶A合成酶是動(dòng)物細(xì)胞中所必需的，以及酶的抑制具有致命效應(yīng)。
美國(guó)專利No.5,981,575(被引入本文作為參考)顯示了抑制脂肪酸合成、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和引起體重減少的一族化合物(γ-取代-α-亞甲基-β-羧基-γ-丁內(nèi)酯)。在′575專利中公開(kāi)的化合物用于治療應(yīng)用具有優(yōu)于天然產(chǎn)物淺藍(lán)菌素的幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)[1]它們不包含淺藍(lán)菌素的高反應(yīng)性環(huán)氧基，[2]它們?cè)谒匀芤褐惺欠€(wěn)定的和可溶解的，[3]它們可由兩步合成反應(yīng)生成，因此容易大量制備，和[4]它們易被氚化，達(dá)到生化和藥理分析的高比活性。在′575專利中描述了為脂肪酸合成酶抑制劑的該族化合物的合成，以及它們作為處理表達(dá)FAS的腫瘤細(xì)胞的方法的應(yīng)用，和它們作為減少體重的方法的應(yīng)用。′575專利還公開(kāi)了任一脂肪酸合酶抑制劑全身性減少脂肪細(xì)胞物質(zhì)(脂肪細(xì)胞數(shù)量和大小)的應(yīng)用，作為減少體重的方法。
小鼠和人中脂肪酸合成的主要部位是肝臟(參見(jiàn)Roncari，Can.J.Biochem.，52221-230，1974；Triscari et al.，1985，Metabolism，34580-7；Barakat et al.，1991，Metabolism，40280-5)、泌乳期乳腺(參見(jiàn)Thompson，et al.，Pediatr.Res.，19139-143，1985)和脂肪組織(Goldrick et al.，1974，Clin.Sci.Mol.Med.，46469-79)。
脂肪酸合成抑制劑用作抗微生物劑淺藍(lán)菌素最初是作為可能的抗真菌劑抗生素從Cephalosporiumcaerulens培養(yǎng)液中分離的。結(jié)構(gòu)上淺藍(lán)菌素被表征為[(2S，3R)-環(huán)氧-4-氧代-7，10-反式，反式十二二酸酰胺]。顯示它的作用機(jī)制是通過(guò)不可逆結(jié)合，抑制脂肪酸生物合成需要的縮合酶β-酮脂?；?ACP合酶。淺藍(lán)菌素被分類為抗真菌劑，主要抗念球菌屬(Candida)和Saccharomyces sp。而且，盡管發(fā)現(xiàn)它對(duì)結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)沒(méi)有活性，但是表明抗某些細(xì)菌、放線菌類、分枝桿菌的一些體外活性。沒(méi)有評(píng)價(jià)脂肪酸合成抑制劑，特別是淺藍(lán)菌素對(duì)原生動(dòng)物如鼠弓形體(Toxoplasma gondii)或其它感染性真核病原體如卡氏肺囊蟲(chóng)(Pneumocystis carini)、蘭伯賈第蟲(chóng)(Giardialamblia)、Plasmodium sp.、陰道毛滴蟲(chóng)(Trichomonas vaginalis)、隱孢子蟲(chóng)屬(Cryptosporidium)、錐蟲(chóng)屬(Typanosoma)、利氏曼蟲(chóng)屬(Leishmania)和血吸蟲(chóng)屬(Schistosoma)的活性。
對(duì)治療特別敏感的感染性疾病引起被感染的動(dòng)物外部可接近的表面損害的疾病。外部可接近的表面包括通過(guò)非侵入性方法(不切開(kāi)或刺破皮膚)可到達(dá)的所有表面，包括皮膚表面自身，粘膜，如覆蓋鼻腔、口腔、胃腸道或泌尿生殖器表面的那些，和肺部表面如肺泡囊。易感疾病包括(1)皮膚真菌病或皮膚癬，特別是由小孢子菌屬(Microsporum)，發(fā)癬菌屬(Trichophyton)，表皮癬菌屬(Epidermophyton)或粘膜皮膚念珠菌(Mucocutaneous candidiasis)引起的；(2)mucotic角膜炎，特別是由曲霉屬(Aspergillus)，鐮刀菌屬(Fusarium)或念球菌屬引起的；(3)阿米巴性角膜炎，特別是由棘阿米巴屬(Acanthamoeba)引起的；(4)胃腸道疾病，特別是由蘭伯賈第蟲(chóng)、內(nèi)變形蟲(chóng)屬(Entamoeba)、隱孢子蟲(chóng)屬、Microsporidium或念珠菌屬(在無(wú)免疫應(yīng)答的動(dòng)物內(nèi)最普遍)引起的；(5)泌尿生殖器感染，特別是由白色念珠菌(candida albicans)或陰道毛滴蟲(chóng)引起的；和(6)肺病，特別是由結(jié)核分枝桿菌、曲霉屬或卡氏肺囊蟲(chóng)引起的。對(duì)用脂肪酸合成抑制劑治療敏感的生物包括結(jié)核分支桿菌，特別是多藥耐受性菌株和原生動(dòng)物如弓形體屬(Toxoplasma)。
抑制脂肪酸合成的任意化合物可以用于抑制微生物細(xì)胞生長(zhǎng)。然而，給予患者的化合物必須不對(duì)患者和靶微生物細(xì)胞同等毒。因此，選擇僅僅或主要作用于靶微生物細(xì)胞的抑制劑是有益的。
依靠它們自身內(nèi)源性合成的脂肪酸的真核微生物細(xì)胞表達(dá)I型FAS。這是通過(guò)以下兩個(gè)事實(shí)顯示的FAS抑制劑是生長(zhǎng)抑制的和外源性加入的脂肪酸可保護(hù)正?；颊呒?xì)胞而不保護(hù)這些微生物細(xì)胞免受FAS抑制劑作用。因此，阻止細(xì)胞脂肪酸合成的藥劑可用于治療感染。在真核生物中，脂肪酸是由利用底物乙酰輔酶A、丙二酰輔酶A和NADPH的I型FAS合成的。因而，其它可將底物供入這種途徑的酶也可能影響脂肪酸合成的速度，從而在依賴內(nèi)源性合成的脂肪酸的微生物中是重要的。這些酶中任意一個(gè)的活性或表達(dá)的抑制，都將影響那些依靠?jī)?nèi)源性合成的脂肪酸的微生物細(xì)胞的生長(zhǎng)。
不同生物中的I型FAS產(chǎn)物是不同的。例如，在真菌S.Cerevisiae中，產(chǎn)物主要是與輔酶A酯化的棕櫚酸酯和硬脂酸酯(sterate)。在恥垢分枝桿菌(Mycobacterium smegmatis)中，產(chǎn)物是長(zhǎng)度為16到24個(gè)碳的飽和脂肪酸輔酶A酯。這些脂類經(jīng)常被進(jìn)一步處理以滿足細(xì)胞對(duì)多種脂類成分的需要。
在脂肪酸下游處理或利用中關(guān)鍵步驟的抑制可被期望抑制細(xì)胞功能，無(wú)論該細(xì)胞是依靠?jī)?nèi)源性脂肪酸還是應(yīng)用從細(xì)胞外供給的脂肪酸，因此這些下游步驟的這類抑制劑對(duì)依靠?jī)?nèi)源性脂肪酸的微生物細(xì)胞可能不是充分選擇性的。然而，已發(fā)現(xiàn)給予這種微生物細(xì)胞I型脂肪酸合成抑制劑，使它們對(duì)下游脂肪酸處理和/或應(yīng)用的抑制劑的抑制作用更加敏感。因?yàn)檫@種協(xié)同作用，在脂肪酸合成抑制劑與一種或多種脂質(zhì)生物合成和/或應(yīng)用中下游步驟的抑制劑聯(lián)合給藥，將選擇性地影響依靠?jī)?nèi)源性合成的脂肪酸的微生物細(xì)胞。優(yōu)選的組包括FAS抑制劑和乙酰輔酶A羧化酶或FAS和MAS抑制劑。
當(dāng)確定哺乳動(dòng)物被表達(dá)I型FAS的生物的細(xì)胞感染時(shí)，或如果在來(lái)自患者的生物流體中發(fā)現(xiàn)了FAS時(shí)，可通過(guò)給予脂肪酸合成抑制劑來(lái)治療該哺乳動(dòng)物或患者(專利No.5,614,551)。
國(guó)際專利申請(qǐng)No.PCT/US01/05316中描述了抑制神經(jīng)肽-Y降低食欲并刺激體重減少，其中公開(kāi)的內(nèi)容被引入本文作為參考。然而，該申請(qǐng)并沒(méi)有描述或公開(kāi)本申請(qǐng)中公開(kāi)的任一化合物。
序列號(hào)為No.60/354,480的美國(guó)專利申請(qǐng)中描述了刺激肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-1(CPT-1)以刺激體重減少，其中公開(kāi)的內(nèi)容被引入本文作為參考。該申請(qǐng)也沒(méi)有描述或公開(kāi)本申請(qǐng)中公開(kāi)的任一化合物。
美國(guó)專利No.5,759,837中描述了FAS抑制劑抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)的應(yīng)用，其中公開(kāi)的內(nèi)容被引入本文作為參考。該申請(qǐng)沒(méi)有描述或公開(kāi)在此公開(kāi)的任一化合物。
發(fā)明概述發(fā)現(xiàn)了新類型化合物，其具有多種治療學(xué)上有價(jià)值的性質(zhì)，如FAS-抑制、NPY-抑制、CPT-1刺激、引起體重減少的能力，以及抗癌和抗微生物特性。
本發(fā)明的還一個(gè)目的是通過(guò)給予一種包含藥物稀釋劑和式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX化合物的藥物組合物，提供一種引起動(dòng)物和人中體重減少的方法，下面對(duì)它們作詳細(xì)描述。
本發(fā)明的還一個(gè)目的是通過(guò)給予人或動(dòng)物一種包含藥物稀釋劑和式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX化合物的藥物組合物，提供一種刺激CPT-1活性的方法。
本發(fā)明的還一個(gè)目的是通過(guò)給予一種包含藥物稀釋劑和式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX化合物的藥物組合物，提供一種抑制人或動(dòng)物中神經(jīng)肽Y合成的方法。
本發(fā)明的還一個(gè)目的是通過(guò)給予一種包含藥物稀釋劑和式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX化合物的藥物組合物，提供一種抑制人或動(dòng)物中脂肪酸合酶活性的方法。
本發(fā)明的還一個(gè)目的是通過(guò)給予一種包含藥物稀釋劑和式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX化合物的藥物組合物，提供一種治療人和動(dòng)物中癌癥的方法。
本發(fā)明進(jìn)一步的目的是通過(guò)給予一種包含藥物稀釋劑和式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX化合物的藥物組合物，提供一種預(yù)防人和動(dòng)物中癌細(xì)胞生長(zhǎng)的方法。
本發(fā)明進(jìn)一步的目的是通過(guò)給予一種包含藥物稀釋劑和式I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX化合物的藥物組合物，提供一種抑制侵入性微生物細(xì)胞生長(zhǎng)的方法。
附圖簡(jiǎn)述

圖1顯示制備根據(jù)本發(fā)明的某些化合物的合成圖。
圖2顯示制備根據(jù)本發(fā)明的某些化合物的合成圖。
圖3顯示根據(jù)本發(fā)明的某些化合物抗腫瘤性質(zhì)的體內(nèi)測(cè)試結(jié)果。
圖4顯示根據(jù)本發(fā)明的不同化合物抗腫瘤性質(zhì)的體內(nèi)測(cè)試結(jié)果。
圖5顯示根據(jù)本發(fā)明的某些化合物體重減少的體內(nèi)測(cè)試結(jié)果。
發(fā)明詳述本發(fā)明的化合物可以采用常規(guī)的方法制備。實(shí)施例中公開(kāi)了許多化合物的合成。所述化合物可用于治療肥胖、癌癥或微生物引起(microbially-based)的感染。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案是式I化合物 其中R1＝H、或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、＝CHR3、-C(O)OR3、-C(O)R3、-CH2C(O)OR3、-CH2C(O)NHR3，其中R3是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基；R2＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；X1＝NHR4，其中R4是H、C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基，所述R4基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基、或醚基，所述R4基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、或＝CH2。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1是-CH3或＝CH2。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4是-CH2C(O)OR5或-CH2C(O)NHR5，其中R5是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式II化合物 其中R6＝H、或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、-C(O)OR8、-C(O)R8、-CH2C(O)OR8、-CH2C(O)NHR8，其中R8是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基或鏈烯基；R7＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；X2＝NHR9，其中R9是H、C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基，所述R9基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基或醚基，所述R9基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子；條件是當(dāng)R6是-CH3，且R7是n-C13H27時(shí)，X2不是-NHC2H5。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R6是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R6是-CH3。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，R9是-CH2C(O)OR10或-CH2C(O)NHR10，其中R10是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式III化合物 其中R11＝H、或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、＝CHR13、-C(O)OR13、-C(O)R13、-CH2C(O)OR13、-CH2C(O)NHR13，其中R13是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基或鏈烯基；R12＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；X3＝OR14，其中R14是C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基，所述R14基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基或醚基，所述R14基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R11是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基、或＝CH2。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R11是-CH3或＝CH2。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，R14是-CH2C(O)OR15或-CH2C(O)NHR15，其中R15是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式IV化合物 其中R16＝H或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、-C(O)OR18、-C(O)R18、-CH2C(O)OR18、-CH2C(O)NHR18、其中R18是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基；R17＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基；X4＝OR19，其中R19是C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基，所述R19基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基或醚基，所述R19基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子；條件是當(dāng)R16是-CH3，且19是-CH3時(shí)，R17不是取代或未取代的苯基、-nC3H7、-nC5H11或-nC13H27，并且，進(jìn)一步的條件是當(dāng)R16是H且R19是-CH3時(shí)，R17不是取代或未取代的苯基、或-CH3，并且當(dāng)R16是H且R19是-CH2CH3時(shí)，R17不是-iC3H7或取代或未取代的苯基。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R16是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基。在更加優(yōu)選的實(shí)施方案中，R16是-CH3。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，R18是-CH2C(O)OR20或-CH2C(O)NHR20，其中R20是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式V化合物 其中R21＝C2-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、＝CHR23、-C(O)OR23、-C(O)R23、-CH2C(O)OR23、-CH2C(O)NHR23，其中R23是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基，但當(dāng)R21是＝CHR23時(shí)，R23不是H；R22＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；條件是當(dāng)R21是-COOH時(shí)，R22不是-CH3、-nC5H11或C13H27，并且進(jìn)一步的條件是當(dāng)R21是-CH2COOH時(shí)，R22不是-CH3、-CH2CH3或-iC5H11，以及進(jìn)一步的條件是當(dāng)R21是＝CHCH3時(shí)，R22不是n-C5H11。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R21是C2-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式VI化合物 其中R24＝C2-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、C(O)OR26、-C(O)R26、-CH2C(O)OR26、-CH2C(O)NHR26、，其中R26是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基；R25＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；條件是當(dāng)R24是-COOH時(shí)，R25不是-CH3、-nC5H11、或C13H27，并且進(jìn)一步地條件是當(dāng)R24是-CH2COOH時(shí)，R25不是-CH3、-CH2CH3、或-iC5H11。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R21是C2-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式VII化合物 其中R27＝C3-C4烷基、C6-C10烷基、C12烷基、C14烷基、C16-C20烷基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是式VIII的化合物 其中R28是C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基，條件是R28不是-CH3、-nC3H7、-nC11H23或-nC13H27。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是包括藥學(xué)稀釋劑和式I、1I、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX的化合物的藥物組合物 R29＝H或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基、＝CHR31、-C(O)OR31、-C(O)R31、-CH2C(O)OR31、-CH2C(O)NHR31，其中R31是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基；R30＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基；X5＝-OR32或-NHR32，其中R32是H、C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基，所述R32基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基或醚基，所述R32基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子；條件是當(dāng)R29是＝CH2時(shí)，X5不是-OH。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R29是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、或＝CH2。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R29是-CH3或＝CH2。
在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，R32是-CH2C(O)OR33或-CH2C(O)NHR33，其中R33是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
本發(fā)明的組合物可以以單元?jiǎng)┝啃问浇o予人和其它動(dòng)物，比如片劑、膠囊、散劑、顆粒劑、無(wú)菌腸胃外溶液或混懸液、口服溶液或混懸液、包含有適量化合物的水包油或油包水乳液、栓劑或流體懸浮液或溶液。在本說(shuō)明書(shū)中，使用的術(shù)語(yǔ)“藥物稀釋劑”和“藥物載體”具有相同的意思?？诜o藥，可制備成固體或流體單元?jiǎng)┝啃问?。制備固體組合物，如片劑，該化合物可以與常規(guī)組分如滑石粉、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硅酸鋁鎂、硫酸鈣、淀粉、乳糖、阿拉伯膠、甲基纖維素及作為藥學(xué)稀釋劑或載體的功能上類似的材料混合。膠囊是通過(guò)將化合物與惰性藥學(xué)稀釋劑混合并將混合物填充入合適大小的硬明膠膠囊中而制備的。軟明膠膠囊是通過(guò)將化合物與可接受的植物油、輕液體石蠟或其它的惰性油的漿液由機(jī)器包囊而制備的。
可制備成流體單元?jiǎng)┝啃问交蚩诜o藥如糖漿、酏劑和懸浮劑。該形式與糖、芳香調(diào)味劑和防腐劑一起溶于水性載體中制成糖漿。混懸液可借助于阿拉伯膠、黃芪膠、甲基纖維素等助懸劑用水性載體制備。
采用化合物和滅菌載體可制備腸胃外給藥流體單元?jiǎng)┝啃问健Ｔ谥苽淙芤褐?，可將化合物溶于注射用水中，過(guò)濾滅菌，然后裝入適合的小瓶或安瓿中封口?？蓪⑤o助劑如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑溶于載體中。將組合物裝入小瓶后，冷凍組合物，真空除水，然后可以稱重小瓶中的冷凍粉末，在使用前重構(gòu)。
預(yù)期的本發(fā)明化合物的臨床治療適應(yīng)癥包括(1)由侵入性微生物如葡萄球菌屬(Staphylococci)和腸球菌屬(Enterococci)引起的感染；(2)細(xì)胞過(guò)度表達(dá)脂肪酸合酶的許多組織中出現(xiàn)的癌癥；(3)攝取過(guò)量熱量引起的肥胖。治療劑量和時(shí)間將取決于多種因素，包括(1)患者的年齡、體重和器官功能(如肝和腎功能)；(2)待治療的疾病過(guò)程的屬性和程度，及任何存在的共同發(fā)病和服用的伴隨藥物，和(3)藥物相關(guān)參數(shù)如產(chǎn)生治愈所需的給藥途徑、給藥頻率和持續(xù)時(shí)間及藥物的治療指數(shù)?？傊x擇劑量以獲得血清水平1ng/ml到100ng/ml，實(shí)現(xiàn)在靶位獲得大約1μg/ml到10μg/ml有效濃度的目標(biāo)。
實(shí)施例通過(guò)下述實(shí)施例來(lái)闡述，但不限制本發(fā)明。
如下所述合成了根據(jù)本發(fā)明的一系列化合物。某些化合物的生物活性描述如下測(cè)試化合物(1)純化的人FAS的抑制，(2)整細(xì)胞中脂肪酸合成活性的抑制，(3)對(duì)培養(yǎng)的MCF-7人乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性，已知這種細(xì)胞具有高水平的FAS和脂肪酸合成活性，采用結(jié)晶紫和XTT測(cè)定法，和(4)抗微生物活性。選擇具有低水平細(xì)胞毒性的化合物，然后測(cè)試Balb/C小鼠體重減少。此外，在Balb/C小鼠中測(cè)試來(lái)自表現(xiàn)出明顯體重減少和低水平細(xì)胞毒性組的代表性化合物對(duì)脂肪酸氧化、和肉堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶-1(CPT-1)活性、以及通過(guò)Northern分析的下丘腦NPY表達(dá)的影響。還測(cè)試了某些化合物抗革蘭氏陽(yáng)性和/或陰性菌的活性。還測(cè)試了某些化合物體內(nèi)抗腫瘤活性。
化合物的制備 (±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-烯丙基酰胺(1)。將三(2-氧代-3-噁唑啉基)氧化膦1(91.7mg，0.2mmol)、烯丙胺(12μl，0.2mmol))和NEt3(0.04mL，0.3mmol)加到(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧酸(C75)，(40mg，0.16mmol)的CH3CN(0.9mL)溶液中，允許溶液在室溫下攪拌30分鐘。將混合物倒入NH4Cl(sat)/1N HCl(10mL，3∶1)溶液中，用Et2O(3×15mL)提取。干燥(MgSO4)合并的有機(jī)物，過(guò)濾，蒸發(fā)并色譜分析(35％EtOAc/己烷)，得到純的1(26.2mg，54％)mp.66-68℃。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.84(t，J＝6Hz，3H)，1.23(m，11H)，1.34-1.47(m，1H)，1.60-1.71(m，2H)，3.43-3.46(m，1H)，3.87(dt，J＝1.4，5.7Hz，2H)，4.74(dt，J＝5，7Hz，1H)，5.12(d，J＝10.6Hz，1H)，5.16(d，J＝17.3Hz，1H)，5.72-5.85(m，1H)，5.76(d，J＝2.6Hz，1H)，6.34(d，J＝2.6Hz，1H)，6.50(bs，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ14.0，22.6，24.9，29.1，29.2，29.4，31.8，35.9，42.3，52.2，80.5，117.0，124.3，133.5，135.4，168.6，168.6。IR(NaCl)2922，1771，1756，1642，1557cm-1。C17H27NO3的分析計(jì)算值C，69.5；H，9.28；實(shí)測(cè)值C，69.5；H，9.09。
(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-己基-4-烯丙基酰胺(2)。按照上述步驟，由(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-己基-4-羧酸(60mg，0.27mmol)與烯丙胺(33μl，0.29mmol)開(kāi)始，經(jīng)急驟色譜(30-40％EtOAc/己烷)后，得到2(51.8mg，74％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.86(t，J＝6Hz，3H)，1.26-1.52(m，8H)，1.63-1.77(m，2H)，3.40-3.43(m，1H)，3.91(app tt，J＝5.76，1.44Hz，2H)，4.72-4.78(m，1H)，5.14-5.20(m，2H)，5.75-5.87(m，1H)，5.78(d，J＝2.4Hz，1H)，5.93(bt，11H)，6.41(d，J＝2.9Hz，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ13.7，22.3，24.7，28.8，31.5，35.9，42.3，52.4，80.3，116.9，123.9，133.5，135.6，168.4，168.5.IR(NaCl)2923，1755，1641，1557cm-1。C15H23NO3的分析計(jì)算值C，67.9；H，8.74；實(shí)測(cè)值C，67.8；H，8.67。

(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-丁基-4-烯丙基酰胺(3)。按照上述步驟，由(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-丁基-4-羧酸(100mg，0.50mmol)與烯丙胺(41μl，0.55mmol)開(kāi)始，經(jīng)急驟色譜(30-40％EtOAc/己烷)后，得到3(68mg，57％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.87(t，J＝6Hz，3H)，1.28-1.50(m，4H)，1.66-1.74(m，2H)，3.41-3.45(m，1H)，3.90(app tt，J＝5.7，1.4Hz，2H)，4.72-4.78(m，1H)，5.14-5.20(m，2H)，5.74-5.87(m，1H)，5.78(d，J＝2.5Hz，1H)，6.12(bt，1H)，6.39(d，J＝2.8Hz 1H)；13C NMR(75MHz，CDC13)δ13.6，22.2，26.8，35.5，42.3，52.5，80.3，117.0，123.9，133.5，135.5，168.3，168.5。IR(NaCl)2958，1768，1652，1548。C13H19NO3的分析計(jì)算C，65.8；H，8.07；實(shí)測(cè)值C，65.8；H，8.07。
(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧基-甲基氨基乙酸酯(4)。按照上述步驟，由C75(39mg，0.15mmol)與甲基氨基乙酸酯鹽酸鹽(20mg，0.16mmol)開(kāi)始，經(jīng)急驟色譜(35％EtOAc/己烷)后，得到4(28mg，56％)。mp.94.5-95.5℃。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.85(t，J＝6.9Hz，3H)，1.23(s，11H)，1.41-1.49(m，1H)，1.63-1.74(m，2H)，3.46-3.49(m，1H)，3.75(s，3H)，3.97-4.14(dd，J＝5.4，8Hz，2H)，4.75(dt，J＝5.7，7Hz 1H)，5.88(d，J＝2Hz，1H)，6.41(d，J＝2Hz，1H)，6.55(bs，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ14.1，22.6，24.8，29.2，29.2，29.4，31.8，35.8，41.4，52.0，52.6，80.2，124.8，134.9，168.6，169.0，169.9。IR(NaCl)2915，1768，1737，1644cm-1；C17H27NO5的分析計(jì)算值C，62.7；H，8.36；實(shí)測(cè)值C，62.7；H，8.27。
(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧基-叔-丁基-氨基乙酸酯(5)。按照上述步驟，由C75(100mg，0.39mmol)與叔-丁基氨基乙酸酯鹽酸鹽(66mg，0.4mmol)開(kāi)始，經(jīng)急驟色譜(35％Et2O-30％EtOAc/己烷)后，得到5(108mg，75％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.84(t，J＝6.8Hz，3H)，1.25(s，12H)，1.44(s，9H)，1.65-1.73(m，2H)，3.44-3.48(m，1H)，3.92-3.95(dd，J＝3.6，5Hz，2H)，4.76(dt，J＝5.7，7Hz，1H)，5.88(d，J＝2Hz，1H)，6.41(d，J＝2Hz，1H)，4.47(bt，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ13.9，22.5，24.8，28.0，29.1，29.2，29.3，31.7，35.8，42.2，51.9，80.2，82.6，124.6，135.1，168.5，168.6，168.8。C20H33NO6的分析計(jì)算值C，65.4，H，9.05；實(shí)測(cè)值C，65.3；H，9.02。
(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧基-氨基乙酸酯(6)。向化合物5(100mg，0.27mmol)的CH2CI2(2.0mL)溶液中加入TFA(1.3mL)，允許溶液在室溫下攪拌3小時(shí)。蒸發(fā)溶劑后，柱色譜分析(50％EtOAc/2％CH3CO2H/己烷)，獲得純的6(61mg，73％)。1H NMR(300MHz，MeOD)δ0.82(t，J＝7Hz，3H)，1.22(s，10H)，1.28-1.38(m，2H)，1.57-1.69(m，2H)，3.55-3.59(m，2H)，3.78-3.95(ab-q，J＝17Hz，2H)，4.63(qapp，J＝6.4Hz，1H)，4.88(bs，1H)，5.87(d，J＝2.6Hz，1H)，6.19(d，J＝2.6Hz，1H)。13C NMR(75MHz，MeOD)δ14.6，23.8，26.1，30.5，30.5，30.6，33.2，36.6，42.2，52.8，81.7，124.8，137.4，170.8，]72.6，172.5.IR(NaCl)2915，1769，1731，1644cm-1.C16H25NO5分析計(jì)算值C，61.7；H，8.09；實(shí)測(cè)值C，61.7；H，8.05。
(±)-α-亞甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧酸乙醇酰胺(7)。按照上述步驟，由C75(30mg，0.12mmol)與乙醇胺(7.8μl，O.13mmol)開(kāi)始，經(jīng)急驟色譜(50％EtOAc/己烷-100％EtOAc/2％CH3CO2H)后，得到7(32mg，91％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.86(t，J＝6.9Hz，3H)，1.24(s，10H)，1.35-1.48(m，2H)，1.64-1.75(m，2H)，3.40-3.57(m，3H)，3.74(t，J＝5Hz，2H)，4.73-4.79(dt，J＝5.7，7Hz，1H)，5.82(d，J＝2Hz，1H)，6.42(d，J＝2Hz，1H)。
10.少量副產(chǎn)物(8，9)向C75(100mg，0.39mmol)的EtOAc(3.0mL)溶液中加入Pd(30mg，10％在碳上)，并通H2(50psi)2小時(shí)。通過(guò)C鹽過(guò)濾混合物，蒸發(fā)得到非對(duì)映異構(gòu)體的混合物(1.8∶1，反式9順式8)。柱色譜(20％EtOAc/2％CH3CO2H/己烷)得到分開(kāi)的具有不可分的異構(gòu)化副產(chǎn)物的反式對(duì)映異構(gòu)體(9∶10，3.8∶1，59.5mg)和純的順式異構(gòu)體(8，32.7mg，)(總產(chǎn)率92％)。
(±)-α-甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧酸(反式非對(duì)映體)(9)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.85(t，J＝7Hz，3H)，1.23(s，10H)，1.31(d，J＝7Hz，3H)，1.41-1.50(m，2H)，1.64-1.69(m，2H)，2.62-2.69(dd，J＝9.6，11.3Hz，1H)，2.91-3.0(dq，J＝11.3，7Hz，1H)，4.42-4.49(td，J＝4，9Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ13.9，14.5，22.6，25.2，29.1，29.2，29.3，31.8，32.7，39.9，53.9，79.5，176.0，176.9。C14H24O4Na+(M+Na+)的HRMS(ES)m/z計(jì)算值279.1566，觀察值279.1562。
(±)-α-甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧酸(順式非對(duì)映體)(8)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.86(t，J＝6.9Hz，3H)，1.25(bs，10H)，1.29(d，J＝7.4Hz，3H)，1.36-1.49(m，2H)，1.63-1.71(m，2H)，3.14(dd，J＝6，9Hz，1H)，3.02(dq，J＝7，9Hz，1H)，4.69(qapp，J＝6.3Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ11.8，14.0，22.6，25.3，29.1，29.2，29.3，31.8，34.7，37.0，49.9，79.5，175.4，177.3。C14H24O4Na+(M+Na+)的HRMS(ES)m/z計(jì)算值為279.1566，觀察值279.1568。
(±)-α-甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧酸烯丙基酰胺(11)。按照上述步驟，由9(52mg，0.20mmol)與烯丙基胺(16μl，0.22mmol)開(kāi)始，經(jīng)急驟色譜(40％Et2O/己烷-30％EtOAc/己烷)后，得到11(30mg，51％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.86(t，J＝7Hz，3H)，1.23-1.30(m，13H)，1.38-1.49(m，2H)，1.6 1-1.69(m，2H)，2.29-2.36(dd，J＝9.3，11.3 Hz，1H)，3.00-3.09(dq，J＝7，11Hz，1H)，3.92(tt，J＝1.5，5.7Hz，2H)，4.45-4.52(m，1H)，5.15-5.22(dd，J＝10，17Hz，2H)，5.76-5.88(m，2H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ13.9，14.0，22.6，25.4，29.1，29.3，29.3，31.8，34.7，40.5，42.2，57.4，80.4，116.9，133.5，169.3，177.4。C17H29NO3Na+(M+Na+)的HRMS(ES)m/z計(jì)算值318.2039，觀察值318.2040。
(±)-α-甲基-γ-丁內(nèi)酯-5-辛基-4-羧酸烯丙基酰胺(12)。按照上述步驟，由8(32mg，0.12mmol)與烯丙基胺(10μl，0.13mmol)開(kāi)始，經(jīng)急驟色譜(40％Et2O/己烷-30％EtOAc/己烷)后，得到12(20mg，53％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.86(t，J＝7Hz，3H)，1.21-1.25(m，13H)，1.41-1.47(m，2H)，1.58-1.67(m，2H)，2.81-2.91(m，2H)，3.83-3.96(tt，J＝1.5，5Hz，2H)，4.71-4.77(m，1H)，5.13-5.21(dd，J＝10，17Hz，2H)，5.75-5.87(m，2H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ11.5，14.0，22.6，25.4，29.1，29.2，29.4，31.8，34.8，37.4，42.0，51.2，80.3，116.9，133.8，169.1，177.9。C17H29NO3Na+(M+Na+)的HRMS(ES)m/z計(jì)算318.2039；觀察值318.2041。
3-甲基-5-辛基-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-3-羧酸烯丙基酰胺(13)。按照上述步驟，由3-甲基-5-辛基-5-氧代-2，5-二氫-呋喃-4-羧酸(46mg，0.18mmol)與烯丙基胺(14μl，0.19mmol)開(kāi)始，經(jīng)急驟色譜(40％EtOAC/己烷)后，得到13(30mg，55％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.85(t，J＝6.9Hz，3H)，1.22(s，10H)，1.46-1.55(m，2H)，1.90-1.95(m，2H)，2.04(s，3H)，4.02(td，J＝1.4，5.7Hz，2H)，5.13-5.15(m，1H)，5.18-5.25(dd，J＝10.6，17.3Hz，2H)，5.80-5.92(ddt，J＝10.3，17，5.7Hz，1H)，6.07(t，J＝1.4Hz，1H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ10.3，14.0，22.6，24.8，29.1，29.2，29.3，31.8，32.7，42.0，81.7，117.5，128.8，133.1，153.7，162.1，173.3。C17H27NO3Na+(M+Na+)的HRMS(ES)m/z計(jì)算值316.1883，觀察值316.1895。
參考文獻(xiàn)1.Kunieda，T.；Nagamatsu，T.；Higuchi，T.Hirobe，M.Tetrahedron Lett.1988，29，2203-2206。
生物學(xué)和生物化學(xué)方法從ZR-75-1人乳腺癌細(xì)胞中純化FAS從培養(yǎng)的獲自美國(guó)典型培養(yǎng)物中心的ZR-75-1人乳腺癌細(xì)胞中純化人FAS。修改自1981年Linn等和1994年Kuhajda等的所述方法，利用低滲裂解、連續(xù)聚乙二醇(PEG)沉淀和陰離子交換色譜。在37℃，5％CO2下，在含10％胎牛血清、青霉素和鏈霉素的RPMI培養(yǎng)基中培養(yǎng)ZR-75-1細(xì)胞。
將十個(gè)T150燒瓶的匯合細(xì)胞用1.5ml裂解緩沖液(20mM Tris-HCI，pH7.5，1mM EDTA，0.1mM苯甲基磺酰氟(PMSF)，0.1％Igepal CA-630)溶解和在冰上勻漿20次的dounce裂解。在JA-20轉(zhuǎn)動(dòng)件(Beckman)中，在4℃以20,000rpm離心裂解產(chǎn)物30分鐘，用裂解緩沖液使上清液至42ml。將50％PEG 8000的裂解緩沖溶液緩慢地加到上清液中，使得終濃度為7.5％。在4℃搖動(dòng)60分鐘后，在JA-20轉(zhuǎn)動(dòng)件(Beckman)中，在4℃以15,000rpm離心溶液30分鐘。然后往上清液中加入固體PEG 8000，使終濃度為15％。搖動(dòng)和如上重復(fù)離心，將吐棄塊重新懸浮在10ml緩沖液A(20mM K2HPO4，pH7.4)中，在4℃下過(guò)夜。在0.45μM過(guò)濾之后，將蛋白質(zhì)溶液應(yīng)用到Mono Q 5/5陰離子交換柱(Pharmacia)上。用緩沖液A以1ml/分鐘洗柱15分鐘，用60分鐘內(nèi)線性60-ml梯度至1M KCl洗脫結(jié)合的物質(zhì)。FAS(MW-270kD)通常在0.25M KCl三個(gè)0.5ml的組分洗脫出，使用以考馬斯G250染色(Bio-Rad)的4-15％SDS-PAGE鑒定這些組分。根據(jù)制造商的說(shuō)明，用考馬斯加蛋白質(zhì)分析試劑(Pierce)，以BSA作為標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)定FAS蛋白質(zhì)濃度。該方法得到基本上純的FAS制備物(＞95％)，如通過(guò)考馬斯-染色的凝膠判定。
FAS酶活性的測(cè)量和化合物IC50的測(cè)定在96孔板中，通過(guò)分光光度法以O(shè)D340監(jiān)測(cè)丙二酰-輔酶A依賴性NADPH氧化來(lái)測(cè)量FAS的活性(Dils等和Arslanian等，1975)。每孔含有2μg純化的FAS、100mM K2HPO4、pH6.5，1mM二硫蘇糖醇(Sigma)和187.5μMβ-NADPH(Sigma)。以2、1和0.5mg/ml在DMSO溶液中制備抑制劑的儲(chǔ)備液，使得當(dāng)每孔加入1μl儲(chǔ)備液時(shí)，終濃度為20、10和5μg/ml。對(duì)于每次試驗(yàn)，使用淺藍(lán)菌素(Sigma)作為陽(yáng)性對(duì)照，它與DMSO對(duì)照、抑制劑和空白(不含F(xiàn)AS酶)都是-式兩份。
在Molecular Devices SpectraMax Plus分光光度計(jì)上進(jìn)行該試驗(yàn)。將含有FAS、緩沖液、抑制劑和對(duì)照的板放入加熱至37℃的分光光度計(jì)中。運(yùn)用動(dòng)力學(xué)程序，將雙份含有100μl 100mM K2HPO4，pH6.5的孔作為空白對(duì)照，在OD340處每隔10秒讀數(shù)，讀數(shù)5分鐘，測(cè)量任何丙二酰-輔酶A非依賴性NADPH氧化。從分光光度計(jì)中取出板，除了空白外，向每孔中加入丙二酰-輔酶A(每孔終濃度為67.4uM)和乙酰-輔酶A(每孔終濃度為61.8μM)。如上所述，再次用動(dòng)力學(xué)程序讀板以測(cè)量丙二酰-輔酶A依賴性NADPH氧化。丙二酰-輔酶A依賴性和非丙二酰-輔酶A依賴性NADPH氧化的ΔOD340之間的差就是特異FAS活性。因?yàn)镕AS制備物的純度，非丙二酰-輔酶A依賴性NADPH氧化可以忽略不計(jì)。
通過(guò)對(duì)每個(gè)被測(cè)抑制劑濃度的ΔOD340值繪圖，進(jìn)行線性回歸和求解最佳擬合線、r2值和95％置信區(qū)間來(lái)測(cè)定化合物的抗FAS IC50。產(chǎn)生50％FAS抑制的化合物濃度為IC50。用SOFTmax PRO軟件(MoleCularDevices)繪制每個(gè)化合物濃度的ΔOD340值對(duì)時(shí)間的曲線圖。線性回歸、最佳擬合線、r2和95％置信區(qū)間的求解是用Prism Version 3.0(GraphPad Software)計(jì)算的。
結(jié)晶紫細(xì)胞生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)晶紫試驗(yàn)測(cè)量細(xì)胞生長(zhǎng)但不測(cè)量細(xì)胞毒性。該試驗(yàn)使用結(jié)晶紫對(duì)在96孔板上的固定細(xì)胞染色，隨后溶解并在分光光度計(jì)上測(cè)量OD490值。OD490值對(duì)應(yīng)每被測(cè)量單位時(shí)間的細(xì)胞生長(zhǎng)。用目的化合物或載體對(duì)照處理細(xì)胞，計(jì)算每個(gè)化合物的IC50值。
為測(cè)量具體化合物對(duì)癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性，將每孔5×104個(gè)MCF-7人乳腺癌細(xì)胞(從美國(guó)典型培養(yǎng)物中心獲得)置于24孔板中的含10％牛胎血清、青霉素和鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中。在37℃和5％CO2下過(guò)夜培養(yǎng)之后，將溶于DMSO中的待測(cè)試化合物，以下面的濃度往孔中加1μl體積50、40、30、20和10μg/ml一式三份。如果需要，測(cè)試另外的濃度。往一式三份孔中加入1μl DMSO作為載體對(duì)照。一式三份以5和10μg/ml使用C75作為陽(yáng)性對(duì)照。
孵育72小時(shí)后，每孔中的細(xì)胞用0.5ml的結(jié)晶紫染色劑(0.5％的25％甲醇)染色。10分鐘后，清洗孔，風(fēng)干，然后用0.5ml 10％的十二烷基硫酸鈉振蕩2小時(shí)溶解。從每孔中轉(zhuǎn)移100μl至96孔板中，在Molecular Device s SpectraMax Plus Spectrophotometer上在OD490處讀板。平均OD490值用SOFTmax Pro Software(Molecular Devices)計(jì)算，用Prism version 3.02(Graph Pad Software，San Diego)通過(guò)線性回歸分析測(cè)定IC50值。
XTT細(xì)胞毒性試驗(yàn)XTT試驗(yàn)是[51Cr]釋放細(xì)胞毒性試驗(yàn)的一種非放射性替代。XTT是一種四唑鹽，它只被代謝活潑、活細(xì)胞還原成甲臢染料。以分光光度法測(cè)量XTT的還原為OD490-OD650。
為測(cè)量具體化合物對(duì)癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性，將每孔9×103個(gè)MCF-7人乳腺癌細(xì)胞(從美國(guó)典型培養(yǎng)物中心獲得)置于96孔板中的含10％牛胎血清、胰島素、青霉素和鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中。在37℃和5％CO2下過(guò)夜培養(yǎng)之后，將溶于DMSO中的待測(cè)化合物，以下面的濃度往孔中加1μl體積80、40、20、10、5、2.5、1.25和0.625μg/ml一式三份。如果需要，測(cè)試另外的濃度。往一式三份孔中加入1μlDMSO作為載體對(duì)照。一式三份以40、20、10、15、12.5、10和5μg/ml使用C75作為陽(yáng)性對(duì)照。
孵育72小時(shí)后，按照制造商的說(shuō)明，將細(xì)胞與XTT試劑(細(xì)胞增殖試劑盒II(XTT)Roche)一起孵育4小時(shí)。在Molecular DevicesSpectraMax Plus分光光度計(jì)上在OD490和OD650處讀板。含有XTT試劑但不含細(xì)胞的三個(gè)孔作為板空白。以O(shè)D490-OD650報(bào)告XTT數(shù)據(jù)。平均值與平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差是用SOFTmax Pro軟件(Molecular Dynamics)計(jì)算的。
化合物的IC50被定義為與對(duì)照相比導(dǎo)致OD490-OD650值50％減小的藥物濃度。通過(guò)SOFTmax PRO軟件(Molecular Devices)計(jì)算每個(gè)化合物濃度的OD490-OD650。IC50是通過(guò)線性回歸，將以對(duì)照百分比表示的FAS活性對(duì)藥物濃度作圖來(lái)計(jì)算的。線性回歸、最佳擬合線、r2和95％置信區(qū)間使用Prism Version 3.0(Graph Pad Software)測(cè)定。
摻入總脂的[14C]醋酸酯的測(cè)量和化合物IC50的測(cè)定該試驗(yàn)測(cè)量向總脂中[14C]醋酸酯的摻入，是脂肪酸合成途徑活性的體外測(cè)量。用它體外測(cè)量脂肪酸合成的抑制。
將按照上面方法培養(yǎng)的MCF-7人乳腺癌細(xì)胞，以每孔5×104個(gè)細(xì)胞置入24孔板中。過(guò)夜孵育之后，以5、10和20μg/ml的濃度一式三份加入溶于DMSO中的待測(cè)化合物，如果需要，用更低的測(cè)試濃度。向一式三份孔中加入DMSO作為載體對(duì)照。一式三份以5和10μg/ml使用C75作為陽(yáng)性對(duì)照。孵育4小時(shí)后，往每個(gè)孔中加入0.25μCi的[14C]醋酸酯(10μl體積)。
另外孵育2小時(shí)后，從孔中吸出培養(yǎng)基，然后往每孔中加入800μl氯仿∶甲醇(2∶1)和700μl 4mM MgCl2。將每孔中的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至1.5mlEppendorf管中，在高速Eppendorf微型離心機(jī)5415D中全速離心2分鐘。在移去水層(上層)后，向每管中加入另外700μl氯仿∶甲醇(2∶1)和500μl 4mM MgCl2，然后按照上面的方法離心1分鐘。用Pasteur移液管移出水層，棄去。向每管中加入另外400μl氯仿∶甲醇(2∶1)和200μl 4mM MgCl2，然后離心并棄去水層。將下層(有機(jī))相轉(zhuǎn)移至閃爍瓶中，在40℃N2氣下干燥。一經(jīng)干燥，加入3ml閃爍劑(APB#NBC5104)，對(duì)小瓶進(jìn)行14C計(jì)數(shù)。用Beckman閃爍計(jì)數(shù)儀計(jì)算一式三份的平均cpm值。
化合物的IC50被定義為與對(duì)照相比導(dǎo)致向脂中摻入的[14C]醋酸酯50％減少的藥物濃度。這是通過(guò)繪制每個(gè)待測(cè)抑制劑濃度的平均cpm圖，進(jìn)行線性回歸和求解最佳擬合線、r2值和95％置信區(qū)間而測(cè)定的。用Beckman閃爍計(jì)數(shù)儀(Model LS6500)計(jì)算每個(gè)化合物濃度的平均cpm值。線性回歸、最佳擬合線、r2和95％置信區(qū)間的求解通過(guò)PrismVersion 3.0(Graph Pad Software)來(lái)計(jì)算。
肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-1(CPT-1)試驗(yàn)CPT-1催化長(zhǎng)鏈脂肪酸由?；?輔酶A向?；?肉堿的ATP依賴性轉(zhuǎn)移，丙二酰-輔酶A抑制該轉(zhuǎn)移。由于CPT-1活性需要線粒體膜，所以在可滲透化的細(xì)胞或線粒體中測(cè)量酶活性。該測(cè)試使用可滲透化的細(xì)胞來(lái)測(cè)量[甲基-14C]L-肉堿向有機(jī)可溶的?；?肉堿衍生物的轉(zhuǎn)移。
以106個(gè)細(xì)胞將MCF-7細(xì)胞放入24孔板中的含有10％胎牛血清的DMEM中，對(duì)照、藥物和丙二酰-輔酶A一式三份。開(kāi)始測(cè)試前兩小時(shí)，以由10mg/ml DMSO中的儲(chǔ)備溶液制備的所示濃度加入藥物，載體對(duì)照由DMSO組成，不含藥物。由于丙二酰-輔酶A不能進(jìn)入完整的細(xì)胞，所以僅將它加入到尚未與藥物預(yù)孵育的細(xì)胞測(cè)試緩沖液中。37℃孵育過(guò)夜后，取出培養(yǎng)基并替換為700μl的測(cè)試緩沖液，該緩沖液由50mM咪唑、70mM KCl、80mM蔗糖、1mM EGTA、2mM MgCl2、1mM DTT、1mM KCN、1mM ATP、0.1％不含脂肪酸的牛血清白蛋白、70μM棕櫚酰-輔酶A、0.25μCi[甲基-14C]L-肉堿、40ug洋地黃皂甙組成，具有藥物、DMSO載體對(duì)照或20μM丙二酰-輔酶A。測(cè)試緩沖液中的藥物和DMSO的濃度與2小時(shí)預(yù)孵育中采用的相同。37℃孵育6分鐘后，加入500μl冰冷4M高氯酸終止反應(yīng)。然后收獲細(xì)胞，并在13000×g離心5分鐘。用500μl的冰冷2mM高氯酸清洗吐棄塊，并再次離心。將得到的吐棄塊再懸浮在800μldH2O中，然后用150μl丁醇提取。丁醇相通過(guò)液體閃爍計(jì)數(shù)并代表?；鈮A衍生物。
新FAS抑制劑的體重減少篩選利用Balb/C小鼠(Jackson實(shí)驗(yàn)室)進(jìn)行最初的體重減少篩選。在溫度和12小時(shí)白天/黑夜循環(huán)的房間內(nèi)飼養(yǎng)動(dòng)物，并且自由供給小鼠食物和水。每種測(cè)試化合物和載體對(duì)照利用三只小鼠，每個(gè)試驗(yàn)一式三份。關(guān)于實(shí)驗(yàn)，將每種測(cè)試化合物的小鼠分開(kāi)飼養(yǎng)，三只小鼠一籠。用DMSO稀釋化合物，當(dāng)給藥劑量為30mg/kg時(shí)，化合物被稀釋為10mg/ml，當(dāng)給藥劑量為60mg/kg時(shí)被稀釋為30mg/ml，并且腹膜內(nèi)注射小鼠大約100μlDMSO中的60mg/kg或者單獨(dú)注射載體。每天觀察小鼠并且稱重；用Excel(Microsoft)計(jì)算平均體重和標(biāo)準(zhǔn)誤差。實(shí)驗(yàn)繼續(xù)直到動(dòng)物達(dá)到它們的預(yù)處理體重為止。在利用飼養(yǎng)在代謝籠中的動(dòng)物中測(cè)試選擇化合物。
圖5顯示了體重減少的一些體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果。動(dòng)物的劑量與篩選試驗(yàn)的一致，一個(gè)代謝籠中三只動(dòng)物。每天測(cè)量動(dòng)物的體重、水和食物的消耗以及尿和糞便的產(chǎn)生。在0天以所示劑量的化合物或者等體積的載體(DMSO)對(duì)照處理以小鼠糧維持的三只瘦Balb/C小鼠(Harlan)。將化合物6溶解在40μl的DMSO中，而將化合物8溶解在60μl DMSO中。全部腹膜內(nèi)注射。在所示的天測(cè)量體重。誤差線表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差。
抗微生物性質(zhì)利用培養(yǎng)液微稀釋試驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)所述化合物的抗微生物活性。以兩倍連續(xù)稀釋來(lái)測(cè)試化合物，并將抑制可視生長(zhǎng)的濃度(10％對(duì)照的OD600)定義為MIC。測(cè)試的微生物包括金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(ATCC#29213)，糞腸道球菌(Enterococcus faecalis)(ATCC#29212)，綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)(ATCC#27853)，和大腸桿菌(Escherichia coli)(ATCC#25922)。該試驗(yàn)是在兩種生長(zhǎng)培養(yǎng)基，Mueller Hinton培養(yǎng)液和Trypticase Soy培養(yǎng)液中進(jìn)行的。
由在含有10％甘油的T大豆培養(yǎng)液中維持的冰凍原液接種血液(T大豆/5％綿羊血)瓊脂板并在37℃孵育過(guò)夜。將菌落懸浮在無(wú)菌培養(yǎng)液中，以便渾濁度符合O.5McFarland標(biāo)準(zhǔn)的混濁度。將接種物使用無(wú)菌培養(yǎng)液(Mueller Hinton或Trypticase soy)稀釋1∶10，96孔板的每孔分散195μl。將溶于DMSO中的測(cè)試化合物，以下列濃度加入孔中5μl體積25、12.5、5.25、3.125、1.56和0.78μg/ml，一式兩份。如果需要，測(cè)試另外的濃度。加入復(fù)制孔的5μl DMSO為載體對(duì)照。在每次操作中包括陽(yáng)性對(duì)照化合物、萬(wàn)古霉素(糞腸道球菌和金黃色葡萄球菌)與托普霉素(大腸桿菌和綠膿桿菌)的連續(xù)稀釋。
37℃孵育24小時(shí)后，在Molecular Devices SpectraMax Plus分光光度計(jì)上在OD600處讀板。用SOFTmax Pro Software(MolecularDevices)計(jì)算平均OD600值，使用Prism version 3.02(Graph PadSoftware，San Diego)通過(guò)線性回歸分析測(cè)定MIC值。MIC被定義為產(chǎn)生與載體對(duì)照讀數(shù)10％相等的OD600讀數(shù)所需的化合物濃度。抗腫瘤活性的體內(nèi)測(cè)試使用人結(jié)腸癌細(xì)胞系，HCT-166在nu/nu雌性小鼠(Harlan)中的皮下側(cè)面異種移植研究化合物1的體內(nèi)抗腫瘤作用。所有動(dòng)物試驗(yàn)遵守規(guī)定的動(dòng)物保護(hù)指南。從補(bǔ)充有10％FBS的DMEM中的培養(yǎng)物中將107個(gè)HCT-116細(xì)胞(～0.1ml細(xì)胞疊集)，異種移植到20只無(wú)胸腺小鼠體內(nèi)。接種后大約3天，當(dāng)可測(cè)量的腫瘤發(fā)育時(shí)，處理開(kāi)始。將化合物1(10mg/kg)稀釋到40μl DMSO中，腹膜內(nèi)注射(i.p.)處理。在箭頭所示的天，11只動(dòng)物接受JMM-III-231 10mg/kg，i.p.，以及11只動(dòng)物接受DMSO對(duì)照。在所示的天測(cè)量腫瘤。1只化合物1處理的小鼠在第10天死于重復(fù)的腹膜內(nèi)注射。結(jié)果顯示在圖4中。誤差線代表平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差。
使用人結(jié)腸癌細(xì)胞系的皮下側(cè)面異種移植物，nu/nu雌性小鼠(Harlan)中的HCT-116研究化合物7和化合物3的體內(nèi)抗腫瘤作用。所有動(dòng)物試驗(yàn)遵守規(guī)定的動(dòng)物保護(hù)指南。從補(bǔ)充有1O％FBS的DMEM中的培物中將107個(gè)HCT-116細(xì)胞(～0.1ml細(xì)胞疊集)，異種移植到15只無(wú)胸腺小鼠體內(nèi)。接種后大約4天，在可測(cè)量的腫瘤發(fā)育時(shí)，處理開(kāi)始。將化合物7和化合物3(10mg/kg)稀釋到20μl DMSO中，供腹膜內(nèi)(i.p.)注射。在箭頭所示的天，5只動(dòng)物接受藥物i.p.，以及5只動(dòng)物接受DMSO對(duì)照。在所示的天測(cè)量腫瘤。結(jié)果顯示在圖3中。誤差線代表平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤。
生物測(cè)試的結(jié)果



權(quán)利要求
1.式I化合物 其中R1＝H、或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、＝CHR3、-C(O)OR3、-C(O)R3、-CH2C(O)OR3、-CH2C(O)NHR3，其中R3是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基；R2＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；X1＝NHR4，其中R4是H、C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基，所述R4基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基、或醚基，所述R4基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、或＝CH2。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R1是-CH3或＝CH2。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中所述化合物選自由下列化合物組成的組
5.權(quán)利要求1的化合物，其R4是-CH2C(O)OR5或-CH2C(O)NHR5，其中R5是H、C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中所述化合物選自由下列化合物組成的組
7.式II化合物 其中R6＝H、或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、-C(O)OR8、-C(O)R8、-CH2C(O)OR8、-CH2C(O)NHR8，其中R8是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基或鏈烯基；R7＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；X2＝NHR9，其中R9是H、C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基，所述R9基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基或醚基，所述R9基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子；條件是當(dāng)R6是-CH3，且R7是n-C13H27時(shí)，X2不是-NHC2H5。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R6是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R6是-CH3。
10.權(quán)利要求7的化合物，其中R9是-CH2C(O)OR10或-CH2C(O)NHR10，其中R10是H、C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基A或烷芳基。
11.式IV化合物 其中R16＝H或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、-C(O)OR18、-C(O)R18、-CH2C(O)OR18、-CH2C(O)NHR18、其中R18是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基；R17＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基；X4＝OR19，其中R19是C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基，所述R19基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基或醚基，所述R19基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子；條件是當(dāng)R16是-CH3且R19是-CH3時(shí)，R17不是取代或未取代的苯基、-nC3H7、-nC5H11、-nC13H27，并且，進(jìn)一步的條件是當(dāng)R16是H且R19是-CH3時(shí)，R17不是取代或未取代的苯基或-CH3，以及當(dāng)R16是H且R19是-CH2CH3時(shí)，R17不是-iC3H7或取代或未取代的苯基。
12.權(quán)利要求11的化合物，其中R16是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中R16是-CH3。
14.權(quán)利要求11的化合物，其中R19是-CH2C(O)OR20或-CH2C(O)NHR20，其中R20是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
15.式V化合物 其中R21＝C2-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、＝CHR23、-C(O)OR23、-C(O)R23、-CH2C(O)OR23、-CH2C(O)NHR23，其中R23是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基，但當(dāng)R21是＝CHR23時(shí)，R23不是H；R22＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；條件是當(dāng)R21是-COOH時(shí)，R22不是-CH3、-nC5H11或C13H27，并且進(jìn)一步的條件是當(dāng)R21是-CH2COOH時(shí)，R22不是-CH3、-CH2CH3或-iC5H11。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中R21是C2-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中R21是＝CH2。
18.式VI化合物 其中R24＝C2-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、-C(O)OR26、-C(O)R26、-CH2C(O)OR26、-CH2C(O)NHR26，其中R26是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基；R25＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；條件是當(dāng)R24是-COOH時(shí)，R25不是-CH3、-nC5H11、或C13H27，并且進(jìn)一步的條件是當(dāng)R24是-CH2COOH時(shí)，R25不是-CH3、-CH2CH3、或-iC5H11。
19.權(quán)利要求I8的化合物，其中R21是C2-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
20.式VII化合物 其中R27＝C3-C4烷基、C6-C10烷基、C12烷基、C14烷基、C16-C20烷基。
21.權(quán)利要求20的化合物，選自由下列化合物組成的組 和
22.式VIII的化合物 其中R28是C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基，條件是R28不是-CH3、-nC3H7、-nC11H23或-nC13H27。
23.藥物組合物，包含藥物稀釋劑和式IX化合物 R29＝H或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基、＝CHR31、-C(O)OR31、-C(O)R31、-CH2C(O)OR31、-CH2C(O)NHR31，其中R31是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基、或鏈烯基；R30＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基；X5＝-OR32或-NHR32，其中R32是H、C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基，所述R32基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基或醚基，所述R32基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子；條件是當(dāng)R29是＝CH2時(shí)，X5不是OH。
24.權(quán)利要求23的藥物組合物，其中R29是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基、或＝CH2。
25.權(quán)利要求24的藥物組合物，其中R29是-CH3或＝CH2。
26.權(quán)利要求23的藥物組合物，其中R32是-CH2C(O)OR33或-CH2C(O)NHR33，其中R33是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
27.權(quán)利要求23的藥物組合物，其中R29是-C6H13或-C8H17。
28.權(quán)利要求23的藥物組合物，其中所述化合物選自由下列化合物組成的組
29.藥物組合物，包括藥物稀釋劑和根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
30.藥物組合物，包括藥物稀釋劑和根據(jù)權(quán)利要求7的化合物。
31.藥物組合物，包括藥物稀釋劑和根據(jù)權(quán)利要求11的化合物。
32.藥物組合物，包括藥物稀釋劑和根據(jù)權(quán)利要求15的化合物。
33.藥物組合物，包括藥物稀釋劑和根據(jù)權(quán)利要求18的化合物。
34.藥物組合物，包括藥物稀釋劑和根據(jù)權(quán)利要求20的化合物。
35.藥物組合物，包括藥物稀釋劑和根據(jù)權(quán)利要求22的化合物。
36.藥物組合物，包括藥物稀釋劑和式III化合物 其中R11＝H、或C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基、＝CHR13、-C(O)OR13、-C(O)R13，-CH2C(O)OR13、-CH2C(O)NHR13，其中R13是H或C1-C10烷基、環(huán)烷基或鏈烯基；R12＝C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基；X3＝OR14，其中R14是C1-C20烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基，所述R14基團(tuán)選擇性地含有羰基、羧基、羧基酰胺基、醇基或醚基，所述R14基團(tuán)進(jìn)一步選擇性地含有一個(gè)或多個(gè)鹵素原子。
37.權(quán)利要求36的藥物制劑，其中R11是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、或烷芳基，或＝CH2。
38.權(quán)利要求37的藥物制劑，其中R11是-CH3或-CH2。
39.權(quán)利要求36的藥物制劑，其中R14是-CH2C(O)OR15或CH2C(O)NHR15，其中R15是C1-C10烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基或烷芳基。
40.引起動(dòng)物或人受試者重量減少的方法，該方法包括給予所述受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物。
41.權(quán)利要求40的方法，其中所述受試者是人。
42.根據(jù)權(quán)利要求40的方法，其中所述受試者是動(dòng)物。
43.權(quán)利要求41的方法，其中所述藥物組合物包含選自由下列化合物組成的組的化合物
44.權(quán)利要求42的方法，其中所述藥物組合物包含選自由下列化合物組成的組的化合物
45.抑制動(dòng)物或人受試者的癌細(xì)胞生長(zhǎng)的方法，該方法包括給予所述受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物。
46.權(quán)利要求45的方法，其中所述受試者是人。
47.權(quán)利要求45的方法，其中所述受試者是動(dòng)物。
48.權(quán)利要求46的方法，其中藥物組合物包含選自由下列化合物組成的組的化合物
49.權(quán)利要求47的方法，其中所述藥物組合物包含選自由下列化合物組成的組的化合物
50.刺激動(dòng)物或人受試者中CPT-1活性的方法，該方法包括給予所述受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物。
51.權(quán)利要求50的方法，其中所述受試者是人。
52.權(quán)利要求50的方法，其中所述受試者是動(dòng)物。
53.權(quán)利要求51的方法，其中所述化合物是
54.權(quán)利要求52的方法，其中所述化合物是
55.抑制動(dòng)物或人受試者中神經(jīng)肽-Y活性的方法，該方法包括給予所述受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物。
56.權(quán)利要求55的方法，其中所述受試者是人。
57.權(quán)利要求55的方法，其中所述受試者是動(dòng)物。
58.抑制動(dòng)物或人受試者中脂肪酸合酶活性的方法，該方法包括給予所述受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物。
59.權(quán)利要求58的方法，其中所述受試者是人。
60.權(quán)利要求58的方法，其中所述受試者是動(dòng)物。
61.權(quán)利要求59的方法，其中所述化合物選自由下列化合物組成的組
62.權(quán)利要求60的方法，其中所述化合物選自由下列化合物組成的組
63.抑制動(dòng)物或人受試者中侵入性微生物細(xì)胞生長(zhǎng)的方法，該方法包括給予所述受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求23的藥物組合物。
64.權(quán)利要求63的方法，其中所述受試者是人。
65.權(quán)利要求63的方法，其中所述受試者是動(dòng)物。
66.權(quán)利要求64的方法，其中所述化合物選自由下列化合物組成的組
67.權(quán)利要求65的方法，其中所述化合物選自由下列化合物組成的組
全文摘要
藥物組合物，包括藥學(xué)稀釋劑和式IX的化合物，R
文檔編號(hào)A61P31/00GK1705478SQ03818369
公開(kāi)日2005年12月7日 申請(qǐng)日期2003年7月1日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月1日
發(fā)明者F·P·庫(kù)哈蒂亞, S·M·麥德豪馳, J·N·蘇帕里, C·A·唐森德, J·M·麥克法頓 申請(qǐng)人:法斯根有限責(zé)任公司, 約翰斯霍普金斯大學(xué)