專利名稱：一種抗流感病毒的柴胡黃酮組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥柴胡地上部分中的抗流感病毒有效部位組合物及其制備方法，具體涉及中藥柴胡地上部分中的抗流感病毒的黃酮組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
柴胡是中國(guó)藥典收載的常見中藥，具有和解退熱、疏肝解郁的功效，其藥用部位一般為柴胡的根，是治療感冒的良藥。而部頒標(biāo)準(zhǔn)中收載的柴酮片為中藥柴胡的地上部分通過簡(jiǎn)單水煎煮、濃縮得到的總黃酮所壓成的片劑，用于治療外感風(fēng)寒、小兒呼吸道感染等。其制備方法簡(jiǎn)單，原料中的總黃酮的含量不到1％，雜質(zhì)多，易吸潮，且沒有明確的質(zhì)量指標(biāo)成分，每日口服劑量更是高達(dá)9～16片。
我國(guó)柴胡屬植物種類較多，供藥用的約20種。其地上部分含多種黃酮類成分一般均含槲皮素、異鼠李素、蕓香甙、異鼠李素3-β-D-蕓香糖甙以及水仙甙等。亦有柴胡如金黃柴胡地上部分尚含核糖醇、二十九酮、二十六醇、α-菠菜甾醇、皂甙、生物堿、抗壞血酸以及胡蘿卜素等(參見《中草藥學(xué)》中冊(cè)，第759頁(yè)，江蘇人民出版社，1976年)。眾所周知，抗壞血酸極易吸濕，而皂甙、生物堿等具有較強(qiáng)的與黃酮類不同的藥理活性。
已視撤的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)“由柴胡制備中成藥柴酮粉制劑及針劑”CN95111097.7中，僅含糊提及通過“吸附柱”分離以及反復(fù)重結(jié)晶、冷凍干燥等方法，制得柴酮粉制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是研制一種抗流感病毒有效部位黃酮含量高的組合物，以減少雜質(zhì)，提高療效。有效部位黃酮含量大提高，有利于減少臨床使用的藥量。雜質(zhì)減少不但可改善中成藥常有的吸潮性，而且使藥效顯著，不會(huì)產(chǎn)生有些雜質(zhì)所導(dǎo)致的副作用。
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題還涉及研制一種抗流感有效部位黃酮含量高的組合物的制備工藝，該方法要能夠提高活性成分含量，去除大量非黃酮類雜質(zhì)，同時(shí)要重復(fù)性、穩(wěn)定性好，并且原料的得率高，以適合工業(yè)化生產(chǎn)。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明研究制定了如下技術(shù)方案。
一種抗流感病毒的柴胡黃酮組合物，由中藥柴胡地上部分提取分離的柴胡總黃酮組成，其特征在于該組合物中，柴胡總黃酮含量為50～70％，槲皮甙含量為25～40％。
根據(jù)上述柴胡黃酮組合物，其特征在于含有上述柴胡總黃酮的片劑、膠囊、滴丸、軟膠囊、粉針或大、小針劑。
一種抗流感病毒的柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于取柴胡水提取液，加入鹽酸液調(diào)PH至2～5；取酸性濾液過大孔吸附樹脂柱，先用水洗至流入液中性；再用加入40～95％濃度的乙醇洗柱；收集洗脫液并濃縮；濃縮物水液用正丁醇萃??；濃縮正丁醇萃取溶液，得柴胡黃酮粉末。
根據(jù)上述抗流感病毒的柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于取柴胡水提取液，加入鹽酸液調(diào)PH至3～4；所用大孔吸附樹脂型號(hào)是D-1300、AB-8、D-3520或NKA-9；上大孔吸附樹脂后，洗脫乙醇的濃度為50～85％。
所述柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于所柴胡黃酮粉末中，柴胡總黃酮含量為50～70％，槲皮甙含量為25～40％。
所述柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于所柴胡黃酮粉末，可以與藥學(xué)上可接受載體混合。
本發(fā)明制得的柴胡黃酮組合物，由于采用了中藥現(xiàn)代化技術(shù)中的大孔樹脂吸附技術(shù)，不但使其中的活性成分的含量提高，從而提高了藥效，而且去除了大量非黃酮類雜質(zhì)，既解決了中成藥常有的吸潮性大的問題，又減小了副作用。
采用本發(fā)明制得的柴胡黃酮組合物中，總黃酮的含量為50～70％，符合中華人民共和國(guó)《藥品管理法》規(guī)定的中藥二類的原料標(biāo)準(zhǔn)，明確了其主要成分為抗流感病毒活性成分槲皮甙，通過高效液相法測(cè)定，槲皮甙的含量占柴胡黃酮組合物的25～40％。
本發(fā)明制得的柴胡黃酮組合物的抗流感病毒實(shí)驗(yàn)證明，其有良好的抗流感病毒A及流感病毒B的活性。實(shí)驗(yàn)表明該柴胡黃酮組合物對(duì)甲型流感病毒90-15株半數(shù)有效劑量(IC50)為0.492±0.07mg/ml，選擇指數(shù)(SI)為4.93±0.71；對(duì)乙型流感病毒濟(jì)防97-13半數(shù)有效劑量(IC50)為0.458±0.054mg/ml，選擇指數(shù)(SI)為5.28±0.62；對(duì)乙型流感病毒四川B/2000-3-8半數(shù)有效劑量(IC50)為0.46mg/ml，選擇指數(shù)(SI)為5.22。以上實(shí)驗(yàn)證明由本發(fā)明制得的柴胡黃酮組合物具有良好的抗甲型流感病毒及乙型流感病毒的活性。由以上結(jié)果推算，用其制成的片劑每日口服劑量?jī)H僅只需1～3片，比原來的每日口服劑量9～16片大大減少，有利于臨床給藥。
此外，本發(fā)明克服了中藥傳統(tǒng)工藝的缺陷，運(yùn)用中藥現(xiàn)代化技術(shù)中的大孔樹脂吸附技術(shù)，提供了一種含量高、成分明確、質(zhì)量可控、藥效確切、副作用小的柴胡黃酮組合物及其制備方法，為一種高效低毒的二類中藥感冒藥。本發(fā)明的制備工藝已經(jīng)通過多批生產(chǎn)驗(yàn)證，證明其重復(fù)性、穩(wěn)定性都好，原料的得率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例中，所用的提取用水為自來水，所用乙醇為藥用級(jí)，鹽酸和正丁醇為工業(yè)級(jí)。柴胡地上部分藥材產(chǎn)地為江蘇鹽城；大孔樹脂購(gòu)自南開大學(xué)化工廠；測(cè)定總黃酮含量的對(duì)照品蘆丁由國(guó)家藥品生物制品檢定所提供；測(cè)定槲皮甙含量的對(duì)照品槲皮甙購(gòu)自SIGMA公司。
測(cè)定原料中總黃酮含量的方法，依照中國(guó)藥典2000版一部附錄VB中的比色法。
測(cè)定原料中槲皮甙含量的方法，依照中國(guó)藥典2000版一部附錄VID中的高效液相色譜法。色譜條件為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水(20∶80，磷酸調(diào)pH為2.5)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；理論板數(shù)按槲皮甙計(jì)算應(yīng)不低于2000。
實(shí)施例一取柴胡的地上部分100kg，粉碎成粗粉，放入提取罐中；分別加入水600L回流提取3次，每次2小時(shí)；提取液加入鹽酸液調(diào)PH至3.0后，靜置，濾除沉淀；濾液過D-1300大孔吸附樹脂柱，加去離子水洗脫至流出液澄清且為中性；加入50％的乙醇洗柱，收集洗脫液并濃縮，再加水80L溶解，過濾；濾液分別加入50L正丁醇萃取3次，合并醇溶液；按常規(guī)真空減壓濃縮醇溶液至干，干燥，得到棕黃色柴胡黃酮原料1.6kg。
經(jīng)高效液相色譜法測(cè)定上述實(shí)驗(yàn)所得柴胡黃酮原料中總黃酮含量為61％，其原料中抗流感病毒主要成分槲皮甙含量為36％。
實(shí)施例二取柴胡的地上部分150kg，粉碎成2～3cm的段，放入提取罐中；分別加入水900L回流提取3次，每次2小時(shí)；提取液加入鹽酸液調(diào)PH至3.5后，靜置，濾除沉淀；濾液過AB-8大孔吸附樹脂柱，加去離子水洗脫至流出液澄清且為中性；加入75％的乙醇洗柱，收集洗脫液并濃縮，在加水75L溶解，過濾。濾液分別加入75L正丁醇萃取3次，合并醇溶液。減壓濃縮醇溶液至干，干燥，得到棕黃色柴胡黃酮粉末2.2kg。
經(jīng)高效液相色譜法測(cè)定該柴胡黃酮粉末原料中總黃酮含量為55％，其原料中抗流感病毒主要成分槲皮甙含量為33％。
實(shí)施例三取柴胡的地上部分120kg，粉碎成2～3cm的段，放入提取罐中；分別加入水720L回流提取3次，每次2小時(shí)；提取液加入鹽酸液調(diào)PH至4.5后，靜置，濾除沉淀；濾液過AB-8大孔吸附樹脂柱，加去離子水洗脫至流出液澄清且為中性。加入95％的乙醇洗柱，收集洗脫液并濃縮，在加水60L溶解，過濾。濾液分別加入60L正丁醇萃取3次，合并醇溶液。減壓濃縮醇溶液至干，干燥，得到棕黃色柴胡黃酮粉末1.9kg。
經(jīng)高效液相色譜法測(cè)定該原料中總黃酮含量為70％，其原料中抗流感病毒主要成分槲皮甙含量為39％。
權(quán)利要求
1.一種抗流感病毒的柴胡黃酮組合物，由中藥柴胡地上部分提取分離的柴胡總黃酮組成，其特征在于該組合物中，柴胡總黃酮含量為50～70％，槲皮甙含量為25～40％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述柴胡黃酮組合物，其特征在于含有上述柴胡總黃酮的片劑、膠囊、滴丸、軟膠囊、粉針或大、小針劑。
3.一種抗流感病毒的柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于取柴胡水提取液，加入鹽酸液調(diào)PH至2～5；取酸性濾液過大孔吸附樹脂柱，先用水洗至流入液中性；再用加入40～95％濃度的乙醇洗柱；收集洗脫液并濃縮；濃縮物水液用正丁醇萃取；濃縮正丁醇萃取溶液，得柴胡黃酮粉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗流感病毒的柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于取柴胡水提取液，加入鹽酸液調(diào)PH至3～4。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗流感病毒的柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于所用大孔吸附樹脂型號(hào)是D-1300、AB-8、D-3520或NKA-9。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述抗流感病毒的柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于上大孔吸附樹脂后，洗脫乙醇的濃度為50～85％。
7.根據(jù)權(quán)利要求3至6之一所述柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于所柴胡黃酮粉末中，柴胡總黃酮含量為50～70％，槲皮甙含量為25～40％。
8.根據(jù)權(quán)利要求3至6之一所述柴胡黃酮組合物制備方法，其特征在于所柴胡黃酮粉末，可以與藥學(xué)上可接受載體混合。
全文摘要
一種抗流感病毒的柴胡黃酮組合物,由中藥柴胡地上部分提取分離的柴胡總黃酮組成,柴胡總黃酮含量50～70%,槲皮甙含量25～40%;其制備方法為取柴胡水提取液,調(diào)pH2－5、過大孔樹脂柱、含水醇洗脫、正丁醇萃取、濃縮;柴胡總黃酮抗流感病毒活性提高,副作用減少,吸濕性降低,并可制成各類劑型;其制備工藝重現(xiàn)性好,適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/7042GK1389212SQ0213793
公開日2003年1月8日 申請(qǐng)日期2002年7月11日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月11日
發(fā)明者楊永安, 李東方, 張錫昌, 余祖兵, 賀彥宇, 張喜全 申請(qǐng)人:江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司