專利名稱：：神經(jīng)病治療組合物和方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及新的神經(jīng)精神病干預機制。更具體來說，本發(fā)明涉及用于治療多種不同的神經(jīng)病狀態(tài)，包括認知和行為障礙的藥物制劑和方法。
背景技術：
：和概述為了發(fā)現(xiàn)和在商業(yè)上提供治療神經(jīng)病的藥物，藥物工業(yè)已經(jīng)作了廣泛的研究和開發(fā)工作。這樣的病癥一般是由于腦中的化學物質失衡而導致的。據(jù)確定，相關神經(jīng)化學物質的過度產(chǎn)生或生成不足和/或受體機能障礙與神經(jīng)病學家、精神病學家、心理學家以及精神病診斷和治療領域的其它醫(yī)藥技術人員所確知的多種病癥有關。大多數(shù)發(fā)現(xiàn)神經(jīng)病活性新藥物的工作是基于下述研究激動劑/拮抗劑藥物與一種或多種腦中為數(shù)眾多的受體和/或其各自的受體配體的相互作用。本發(fā)明提供了使用藥物干預治療多種神經(jīng)病狀態(tài)以及具有相關病因的其它疾病或臨床病癥的新方法。本發(fā)明部分基于下述發(fā)現(xiàn)因具有細菌肽酶或蛋白酶、特別是轉肽基酶和/或羧肽酶抑制劑活性而眾所周知的含β-內(nèi)酰胺的化合物還是一些哺乳動物神經(jīng)肽酶的有效抑制劑，這些神經(jīng)肽酶在屬類上稱為N-乙?；?α-連接酸肽酶(NAALAD酶)，據(jù)文獻記載已鑒定了幾種這樣的酶并確定了其特征[Pangalos等人，J.Biol.Chem.，1999，274，No.13，8470-8783]。本發(fā)明還部分基于下述發(fā)現(xiàn)神經(jīng)原性NAALAD酶可以是NAALAD酶抑制劑的作用靶，以實現(xiàn)顯著的行為改進和提高認知能力。初步研究已證實，能夠識別和轉化一些神經(jīng)肽(例如N-乙?；?L-天冬氨酰基-L-谷氨酸)的一種或多種神經(jīng)原性蛋白酶—現(xiàn)在據(jù)信是NAALAD酶和相關肽酶以及轉移酶在腦功能神經(jīng)化學上起著顯著或占優(yōu)勢的作用，并且同時對患者的行為和認知能力有實質影響。先前已有報道，一些起NAALAD酶抑制劑作用的谷氨酸類似物可用于治療與一些神經(jīng)組織損傷有關的前列腺疾病和谷氨酸異?！，F(xiàn)在已經(jīng)確定，NAALAD酶抑制劑，包括特別是一些能穿越血腦屏障的包含β-內(nèi)酰胺的細菌肽酶和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑可以在非常低的濃度下在腦中起強效神經(jīng)活性藥物的作用，以減輕特征是行為失常或感知/認知機能障礙的多種神經(jīng)病的癥狀。值得注意的是，對于這樣的細菌酶抑制劑，據(jù)信在臨床上有效抑制細菌酶已知所需的濃度以下的濃度，它們是NAALAD酶和相關神經(jīng)原性肽酶的有效抑制劑。因此，預計這樣的化合物還可以用來有效地治療前列腺疾病上述對于NAALAD酶抑制劑治療有反應的與神經(jīng)組織損傷有關的疾病狀態(tài)。因此，本發(fā)明一個實施方案涉及治療溫血脊椎動物中認知和行為障礙的方法，包括施用因具有細菌蛋白酶或肽酶抑制劑活性而眾所周知的化合物，現(xiàn)在已經(jīng)確定，當以有效濃度存在于腦中時，所述化合物能夠抑制或調(diào)節(jié)一種或多種神經(jīng)原性NAALAD酶和相關神經(jīng)原性酶的活性。在相關實施方案中，本發(fā)明提供了治療需要這種治療的患者中認知和行為障礙的方法。所述方法包含抑制神經(jīng)原性肽酶，包括NAALAD酶和相關神經(jīng)原性酶的步驟。在一個實施方案中，這樣的神經(jīng)肽酶抑制是通過施用有效量的已知能結合和抑制細菌酶，例如β-內(nèi)酰胺酶或參與細菌細胞壁合成的細菌蛋白酶的β-內(nèi)酰胺化合物而實現(xiàn)的。在本領域中這樣的細菌蛋白酶是叫作“青霉素結合蛋白”。在另一個本發(fā)明實施方案中，該方法是通過施用本領域確認的NAALAD酶抑制劑，包括特別是一些去氨基谷氨酸類似物和N-取代的谷氨酸衍生物來進行的。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在溫血脊椎動物中有效地抑制這樣的神經(jīng)肽酶活性能顯著地提高認知能力和行為控制。易于依據(jù)本發(fā)明治療的認知和行為障礙的實例包括侵略性精神障礙、強迫觀念與行為精神障礙、焦慮癥、抑郁癥、ADHD、和記憶損傷。動物數(shù)據(jù)表明，本發(fā)明方法和制劑可作為抗侵略行為劑來控制患有孤獨癥、圖雷特氏綜合征、精神發(fā)育遲緩、精神病、躁狂癥、老年性癡呆的個體或有人格障礙以及不適當侵略行為史的個體中的沖動和暴力行為。臨床應用擴展到作為抗焦慮劑治療患有ADHD和行為障礙的兒童，和作為認知增強劑用于老年群體以改善學習和記憶以及改善定向力障礙。在另一個本發(fā)明實施方案中，本發(fā)明提供了治療患有或趨于患有至少部分特征是腦或其它神經(jīng)組織中細胞外谷氨酸濃度異常的病癥的患者的方法。所述方法包含給患者施用有效量的能抑制細菌源青霉素結合蛋白活性的化合物的步驟。組合物以能預防或減輕所述病癥的癥狀的有效量施用。因此，例如據(jù)報道，在中風患者或其它腦創(chuàng)傷患者的腦中存在局部高谷氨酸濃度。最近有人報道，腦和外周神經(jīng)組織中的高谷氨酸濃度與多發(fā)性硬化有關。在另一個本發(fā)明實施方案中，本發(fā)明提供了治療人類患者中選自前列腺癌和良性前列腺增生的前列腺疾病的方法。所述方法包含給患者施用包含能抑制細菌源青霉素結合蛋白活性的化合物的組合物的步驟。組合物以能延遲所述疾病的進程或減輕所述病癥的癥狀的有效量施用。一組依據(jù)本發(fā)明使用的化合物是β-內(nèi)酰胺化合物，即具有β-內(nèi)酰胺環(huán)系的化合物，包括特別是β-內(nèi)酰胺抗生素例如青霉素類、頭孢菌素類和它們的類似物。此外，已發(fā)現(xiàn)肽Ala-D-γ-Glu-Lys-D-Ala-D-Ala(據(jù)信起NAALAD酶的底物的作用)能有效地作為肽酶抑制劑來依據(jù)本發(fā)明用于行為改進和提高認知。非β-內(nèi)酰胺NAALAD酶抑制劑已在專利和非專利文獻中有報道。參見例如U.S.專利5,795,877；5,804,602；5,968,915；5,902,817；5,962,521；5,863,536，和6,017,903，將所述專利的說明書引入本發(fā)明以作參考，這些專利公開了這樣的NAALAD酶抑制劑，以及通常這樣的NAALAD酶抑制劑在治療對NAALAD酶抑制治療有反應的一些疾病狀態(tài)中的應用。其它能依據(jù)本發(fā)明使用的化合物可用分子模型研究來確定。適用于本發(fā)明的抗生素化合物可以與一種或多種其它酶抑制劑，例如有效量的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑(其中所述活性化合物是β-內(nèi)酰胺化合物)或另一種NAALAD酶抑制劑或P-糖蛋白流出抑制劑聯(lián)合施用來提高活性化合物的腦水平。本發(fā)明實施方案的方法和制劑既能在人類健康中使用，也能在獸醫(yī)中使用，例如用于犬、貓和馬類動物。在一個本發(fā)明實施方案中，在口服(包括頰或舌下給藥)或非胃腸道給藥制劑中用任選作為活性酯衍生物的1-氧雜-1-去硫雜頭孢菌素，更優(yōu)選7-甲氧基-1-氧雜-1-去硫雜頭孢菌素治療患有其特征是認知或行為異常的神經(jīng)病的溫血脊椎動物、最優(yōu)選人類患者。在一個實施方案中，肽酶抑制劑是拉氧頭孢，[7-β-[2-羧基-2-(4-羥基苯基)乙酰氨基]-7α-甲氧基-3-[[(1-甲基-1H-四唑-5-基)硫基]甲基]-1-氧雜-1-去硫雜-3-頭孢(cephem)-4-甲酸]，U.S.專利4,323,567中描述了并要求保護該化合物以及相關化合物，包括其口服吸收的活性酯衍生物，將該專利的說明書引入本發(fā)明以作參考。已發(fā)現(xiàn)，當以至少約50μg/kg體重的劑量非胃腸施用時，拉氧頭孢表現(xiàn)出顯著的劑量反應性神經(jīng)活性。在另一個本發(fā)明實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療以隨后減輕需要這種治療的患者中行為或認知障礙的癥狀的藥物制劑。所述制劑包含其特征是對細菌衍生的青霉素結合蛋白有親和力的化合物。在一個實施方案中，所述化合物能結合下述細菌蛋白酶并抑制其功能，即已知對包含C-末端肽序列?；?D-丙氨酰基-D-丙氨酸的肽聚糖底物表現(xiàn)出其蛋白酶解活性的細菌蛋白酶。在另一個實施方案中，化合物能結合β-內(nèi)酰胺酶—能結合青霉素的另一種細菌蛋白，并抑制該酶的功能。所用抑制劑在制劑中的含量為經(jīng)確定能有效地抑制內(nèi)源性NAALAD酶活性的量。在一個實施方案中，該量在足以調(diào)節(jié)認知和行為特性的水平下能有效地抑制腦中的NAALAD酶。在后一實施方案中，NAALAD酶抑制劑在本發(fā)明方法中表現(xiàn)出的活性水平不僅取決于其對青霉素結合蛋白和NAALAD酶的親和力，還特別取決于抑制劑化合物穿越血腦屏障以在腦中達到能有效地調(diào)節(jié)患者行為和/或認知能力的水平的能力。在一個本發(fā)明實施方案中，藥物制劑包含選自下列的含β-內(nèi)酰胺的化合物青霉素、頭孢菌素類、其含β-內(nèi)酰胺的類似物，包括β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，和用于所述含β-內(nèi)酰胺的化合物的藥物載體。當β-內(nèi)酰胺化合物是例如市售抗生素時，β-內(nèi)酰胺化合物在所述制劑中的含量低于通過商業(yè)上詳細說明的給藥方式施用以產(chǎn)生臨床有效的化合物抗菌血液水平所需的量。然而，假定具有適當?shù)难X屏障穿越特性、劑量水平降低的所述抗生素可有效地產(chǎn)生足以抑制腦中神經(jīng)原性蛋白酶活性并調(diào)節(jié)認知和行為特性的化合物的腦和CSF水平。此外，這樣的制劑還可任選包括有效量的一種或多種β-內(nèi)酰胺酶抑制劑和P-糖蛋白流出泵抑制劑或者能抑制NAALAD酶和相關神經(jīng)原性酶活性的另一化合物。雖然可具體制備本發(fā)明制劑以適于通過能夠在腦中達到閾值最小蛋白酶抑制濃度的本領域已知給藥方式來施用，但是一般將其配制成適于非胃腸道或口服給藥的形式，并任選將其配制成本領域眾所周知的延長釋放或“貯藥庫”類型制劑。附圖的簡要說明附圖1-42是表示下述數(shù)據(jù)的圖在測定抗侵略性攻擊行為活性(附圖1-4、9-14、24、29、31和32)、一般運動原活性、嗅覺辨別(附圖5)、性活性(附圖6)、抗焦慮活性(附圖7、25、26、28、37和40)、和空間記憶力(附圖8和29-36)的本領域所接受的不同動物模型中測試拉氧頭孢、其它β-內(nèi)酰胺抗生素、棒酸(clavulanicacid)、和其它神經(jīng)活性化合物所收集的數(shù)據(jù)。附圖15和16表示的是，在倉鼠中腦內(nèi)施用肽聚糖前體蛋白對攻擊性侵略行為和嗅覺辨別的影響。發(fā)明詳述本發(fā)明以及在本文中描述和要求保護的各實施方案部分基于下述發(fā)現(xiàn)能結合和抑制細菌源青霉素結合蛋白的酶活性的化合物也是N-乙?；?α-連接酸二肽酶(NAALAD酶)活性以及腦中可能的其它相關酶的強效抑制劑，并且當將其給藥以在腦中提供有效的閾值NAALAD酶抑制濃度時，NAALAD酶抑制劑在臨床上表現(xiàn)出顯著的神經(jīng)活性，部分表現(xiàn)為行為改進以及提高認知和功能。在一個實施方案中，依據(jù)本發(fā)明有效使用的NAALAD酶抑制劑的特征是，它們能抑制對包含酰基-D-丙氨?；?D-丙氨酸的蛋白或肽底物表現(xiàn)出選擇性蛋白酶解活性的細菌蛋白酶?；蛘?，可依據(jù)本發(fā)明一個實施方案治療行為和認知障礙的有效NAALAD酶抑制劑的特征是，它們對青霉素結合蛋白有選擇性的親和力(通過締合/或共價結合)；這樣的化合物特別包括β-內(nèi)酰胺抗生素例如青霉素類、頭孢菌素類及其類似物。根據(jù)迄今為止的動物測試，在腦中這樣的細菌蛋白酶抑制劑似乎在亞臨床抗菌水平上起作用來抑制可在行為和認知的神經(jīng)化學介導中起作用的神經(jīng)肽酶活性。通過施用β-內(nèi)酰胺酶抑制劑、棒酸、一種在臨床上沒有顯著抗菌活性的含有β-內(nèi)酰胺的化合物，能有效地抑制神經(jīng)肽酶活性，同時調(diào)節(jié)行為和認知能力。據(jù)推測，抑制這樣的神經(jīng)肽酶(例如NAALAD酶)活性可調(diào)節(jié)一種或多種神經(jīng)遞質或神經(jīng)調(diào)質的濃度和/或功能，同時改善表現(xiàn)為認知能力增強和行為表現(xiàn)型異常減輕的神經(jīng)功能。在一個本發(fā)明實例中，腹膜內(nèi)施用50微克/kg拉氧頭孢抑制了倉鼠中的攻擊行為，提高了大鼠的空間學習能力，并且在大鼠中起抗焦慮劑作用。當以1微克/kg以下的劑量腹膜內(nèi)施用時，棒酸表現(xiàn)出類似活性。在歷史上，β-內(nèi)酰胺抗生素領域技術人員知道，抗菌劑的作用方式是通過起青霉素結合蛋白(PBP)的底物的作用來抑制細胞壁合成；術語PBP已被擴展，其包括結合所有β內(nèi)酰胺包括頭孢菌素類的蛋白。最近，研究人員已經(jīng)能夠克隆這些PBP并測定其序列，還結晶了這些酶并測定了其活性位點基元(參見P.Palomeque等人，J.Biochem.，279，223-230，1991)。根據(jù)這些數(shù)據(jù)，已設計了四種PBP的公認結合位點，即活性位點I、II、III和IV。這些活性位點、序列位置以及氨基酸(AA)序列如下所述活性位點I從N-末端開始計的上游的35AA′sSTTK活性位點II從STTK基元開始計的上游的57AA′sSGC、SGN、或SAN活性位點III從SGC基元開始計的上游的111AA′sKTG活性位點IV從SGC基元開始計的上游的41AA′sENKD通過努力鑒定被拉氧頭孢以類似于抑制PBP的方式抑制的腦中的酶系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)了稱為N-乙?；?α-連接酸二肽酶(NAALADase)的谷氨?；入拿?參見M.N.Pangalos等人，J.Bio.Chem.，264，8470-8483，1999)具有與公認的PBP活性位點幾乎完全重疊的位點。該酶系統(tǒng)調(diào)節(jié)谷氨酸能神經(jīng)傳遞路徑，其作用表現(xiàn)為諸如攻擊行為、記憶/認知、和焦慮的行為后果。作為公認的PBP活性位點與人和大鼠NAALAD酶中的保守序列幾乎完全重疊的后果，據(jù)信拉氧頭孢以及其它β-內(nèi)酰胺化合物在低濃度下通過抑制NAALAD酶來介導行為作用。這是基于下述在PBP與NAALAD酶I—幾種已知的NAALAD酶當中的一種—之間的重疊序列類似性，如下所示活性位點IPBP從N-末端開始計的上游的35AA′sSTTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQK活性位點IIPBP從STTK基元開始計的上游的57AA′sSGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFG活性位點IIIPBP從SGC基元開始計的上游的111AA′sKTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLG活性位點IVPBP從SGC基元開始計的上游的41AA′sENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGV因為β-內(nèi)酰胺通過結合這四個活性位點來抑制細菌細胞壁的PBP轉肽基作用，所以可推斷，這種在活性位點序列和位置中的保存類似性將使得拉氧頭孢和其它β-內(nèi)酰胺化合物對NAALAD酶以及具有與這4個活性結合位點基元重疊的序列的其它神經(jīng)原性酶有類似結合特性。該發(fā)現(xiàn)與施用非常低劑量的一些青霉素蛋白結合化合物會帶來顯著的行為改進作用這一觀察結合起來，給我們提供了預防和治療特征是神經(jīng)機能障礙的疾病的新方法。迄今為止已進行過充分研究的兩種β-內(nèi)酰胺化合物拉氧頭孢和棒酸的獨特神經(jīng)活性表明，這些化合物對多種神經(jīng)原性酶靶表現(xiàn)出活性，這些酶包括NAALAD酶和在結構上相關的酶，特別是可能與PBP和NAALAD酶共享4個活性結合位點基元的酶。為了鑒定出與拉氧頭孢和棒酸的行為與認知活性有關的其它公認的神經(jīng)原性目標，使用NAALAD酶II的序列來檢索人類基因組數(shù)據(jù)庫(NCBI-BLAST)。確定了與NAALAD酶II有顯著的同源性并且編碼這4個活性位點基元的7個人基因序列1)＞dbj/AP001769.2/AP001769Homosapiens染色體11克隆RP11-240F8map11q14活性位點IPBP從N-末端開始計的上游的35AA′s.....STTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQK＞dbj/AP001769NSRK活性位點IIPBP從STTK基元開始計的上游的57AA′s.....SGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFG＞dbj/AP001769SFG活性位點IIIPBP從SGC基元開始計的上游的111AA′s.....KTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLG＞dbj/AP001769KLG活性位點IVPBP從SGC基元開始計的上游的41AA′s......ENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGV＞dbj/AP001769ERSI2)＞dbj|AP000827.2|AP000827Homosapiens染色體11克隆RP.活性位點IPBP從N-末端開始計的上游的35AA′s......STTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQK＞dbj|AP000827.2NSRK活性位點IIPBP從STTK基元開始計的上游的57AA′s.......SGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFG＞dbj|AP000827.2SFG活性位點IIIPBP從SGC基元開始計的上游的111AA′s......KTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLG＞dbj|AP000827.2KLG活性位點IVPBP從SGC基元開始計的上游的41AA′s.......ENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGV＞dbj|AP000827.2ERSI3)＞dbj|AP000648.2|AP000648Homosapiens染色體11克隆CM.活性位點IPBP從N-末端開始計的上游的35AA′s......STTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQK＞＞dbj|AP000648.2NSRK活性位點IIPBP從STTK基元開始計的上游的57AA′s.......SGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFG＞dbj|AP000648.2SFG活性位點IIIPBP從SGC基元開始計的上游的111AA′s......KTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLG＞dbj|AP000648.2KLG活性位點IVPBP從SGC基元開始計的上游的41AA′s......ENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGV＞dbj|AP000648.2ERSI4)＞gb|AC074003.2|AC074003Homosapiens染色體2克隆RP11.活性位點IPBP從N-末端開始計的上游的35AA′s......STTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQKgb|AC074003.2|AC074003STQ-活性位點IIPBP從STTK基元開始計的上游的57AA′s.......SGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFGgb|AC074003.2|AC074003SFG活性位點IIIPBP從SGC基元開始計的上游的111AA′s......KTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLGgb|AC074003.2|AC074003KLG活性位點IVPBP從SGC基元開始計的上游的41AA′s......ENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGVgb|AC074003.2|AC074003ERGV5)＞emb|AL162372.6|AL162372Homosapiens染色體13克隆RP.活性位點IPBP從N-末端開始計的上游的35AA′s......STTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQKemb|AL162372.6STQ-活性位點IIPBP從STTK基元開始計的上游的57AA′s......SGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFGemb|AL162372.6SFG活性位點IIIPBP從SGC基元開始計的上游的111AA′s......KTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLGemb|AL162372.6KLG活性位點IVPBP從SGC基元開始計的上游的41AA′s......ENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGVemb|AL162372.6ERGV6)gb|AC024234.5|AC024234Homosapiens染色體11克隆RP1.活性位點IPBP從N-末端開始計的上游的35AA′s......STTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQKgb|AC024234.5|AC024234STQ-活性位點IIPBP從STTK基元開始計的上游的57AA′s......SGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFGgb|AC024234.5|AC024234SFG活性位點IIIPBP從SGC基元開始計的上游的111AA′s......KTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLGgb|AC024234.5|AC024234KLG活性位點IVPBP從SGC基元開始計的上游的41AA′s......ENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGVgb|AC024234.5|AC024234ERGV7)dbj|AP002369.1|AP002369Homosapiens染色體11克隆RP....活性位點IPBP從N-末端開始計的上游的35AA′s......STTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQKdbj|AP002369.1STQ-活性位點IIPBP從STTK基元開始計的上游的57AA′s.......SGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFGdbj|AP002369.1SFG活性位點IIIPBP從SGC基元開始計的上游的111AA′s......KTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLGdbj|AP002369.1KLG活性位點IVPBP從SGC基元開始計的上游的41AA′s......ENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGVdbj|AP002369.1ERGV在腦中表達的各基因序列的編碼蛋白是β-內(nèi)酰胺和其它NAALAD酶抑制劑的行為和認知活性的可能的靶目標。因此，依據(jù)本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了改善行為和/或認知的方法，該方法包含通過施用有效量的β-內(nèi)酰胺化合物或能抑制NAALAD酶的其它化合物來抑制由一個或多個上述確定的基因序列表達的非NAALAD酶蛋白的生物活性的步驟。在一個實施方案中，一般而言，能有效地用于本發(fā)明不同藥物制劑和方法實施方案的NAALAD酶抑制劑是對本領域眾所周知的青霉素結合蛋白表現(xiàn)出可檢測到的選擇性親和力的化合物，包括特別是含有β-內(nèi)酰胺的化合物(下文稱為“β-內(nèi)酰胺化合物”)例如青霉素類和頭孢菌素類及其類似物，一些β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，和包含氨基酸序列Ala-D-γ-Glu-Lys-D-Ala-D-Ala的肽。在這樣的NAALAD酶抑制化合物當中，優(yōu)選依據(jù)本發(fā)明使用的是還表現(xiàn)出良好血腦屏障運輸特性(由良好的腦脊液(CSF)/腦血清濃度比例表示)的化合物。此外，應當理解，其它本領域眾所周知的NAALAD酶抑制劑可單獨使用或者與青霉素蛋白結合化合物聯(lián)合使用來治療和預防行為和/或認知障礙。在涉及用于抑制神經(jīng)原性NAALAD酶以改善行為和/或改善認知功能的藥物制劑的本發(fā)明實施方案中，β-內(nèi)酰胺化合物或其它NAALAD酶抑制化合物，包括這類化合物的肽或類似物一般是配制成單位劑型，這樣的單位劑型任選與已知能促進藥物穿越血腦屏障運輸?shù)钠渌衔锘蚍肿訉嶓w聯(lián)合使用或作為共價軛合物使用。下列美國專利(這些專利的說明書引入本發(fā)明以作參考)描述并要求保護這樣的藥物制劑/軛合技術U.S.專利5,624,894；5,672,683；5,525,727；5,413,996；5,296,483；5,187,158；5,177,064；5,082,853；5,008,257；4,933,438；4,900,837；4,880,921；4,824,850；4,771,059；和4,540,564。提高包括NAALAD酶抑制劑在內(nèi)的藥物在腦中的濃度可通過與P-糖蛋白流出抑制劑例如在下列專利中描述的那些聯(lián)合施用來實現(xiàn)U.S.專利5,889,007；5,874,434；5,654,304；5,620,855；5,643,909；和5,591,715，這些專利的說明書引入本發(fā)明以作參考。或者，可依據(jù)本發(fā)明使用的β-內(nèi)酰胺抗生素化合物，包括青霉素類、頭孢菌素類、苯氧乙基青霉素鉀類、1-氧雜-1-去硫雜cephems、clavams、clavems、azetidinones、carbapenams、carbapenems、和carbacephems可單獨使用或者與本領域眾所周知的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑聯(lián)合使用，這些β-內(nèi)酰胺酶抑制劑自身可以是或者可以不是能夠對青霉素結合蛋白表現(xiàn)出選擇性親和力的β-內(nèi)酰胺化合物。可依據(jù)本發(fā)明單獨使用或者與其它神經(jīng)肽酶抑制劑聯(lián)合使用來治療和/或預防認知或行為障礙的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的實例是在臨床上可以或可以不表現(xiàn)出獨立的顯著抗菌活性的其它β-內(nèi)酰胺化合物，例如棒酸和沙納霉素及其類似物、舒巴坦、他佐巴坦、舒他西林、和氨曲南以及其它一內(nèi)酰胺。有很多專利和非專利文獻描述了β-內(nèi)酰胺抗生素、其制備、其特征確定、其制劑及其作用方式。已知β-內(nèi)酰胺抗生素通過干擾涉及細菌細胞壁合成的一個或多個生物途徑來表現(xiàn)出其抗菌活性；尤其是，它們抑制涉及用作構建細胞壁合成單位的肽基聚糖鏈的交聯(lián)的羧肽酶和/或轉肽基酶(或蛋白酶)活性。因此，據(jù)信β-內(nèi)酰胺抗生素通過下述機制起羧肽酶或轉肽基酶抑制劑的作用它們共價、非共價締合(根據(jù)某些報道)鍵合一組或多組通常稱為青霉素結合蛋白(PBP′s)的細菌酶。這樣的酶通過交聯(lián)肽基聚糖鏈來完成細菌細胞壁的合成。現(xiàn)在本發(fā)明提出了類似的肽酶-底物相互作用/抑制，以作為涉及對認知能力和行為表現(xiàn)型至關重要的腦功能的重要神經(jīng)化學途徑。之所以提出這樣的神經(jīng)化學機制還是因為下述發(fā)現(xiàn)將有效量的肽Ala-D-γ-Glu-Lys-D-丙氨?；?D-丙氨酸直接給到腦中可產(chǎn)生改善的行為特性，并且所產(chǎn)生的行為特性與腦中可以擬的濃度的β-內(nèi)酰胺化合物所產(chǎn)生的效果相同。該肽似乎在介導認知能力和行為表現(xiàn)型的一些普通神經(jīng)化學過程中起著一種或多種神經(jīng)原性肽酶(通常表現(xiàn)出其對肽神經(jīng)遞質或神經(jīng)調(diào)質、即NAAD的活性，例如NAALAD酶)的替代底物的作用(并由此抑制其活性)。根據(jù)迄今為止的動物實驗，據(jù)信一般類型的行為障礙都可以依據(jù)本發(fā)明通過施用有效量的NAALAD酶抑制劑來預防或治療，包括侵略性精神障礙、強迫觀念與行為精神障礙、焦慮癥、抑郁癥、和注意力缺乏活動過強疾病(ADHD)。因此在一個本發(fā)明實施方案中，NAALAD酶抑制劑選自能結合青霉素結合蛋白的化合物，例如β-內(nèi)酰胺抗生素或β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，和/或對包含C-末端氨基酸序列酰基-D-丙氨?；?D-丙氨酸的細菌蛋白或肽底物表現(xiàn)出選擇性蛋白酶解活性抑制的化合物，或其它NAALAD酶抑制劑，并給患有下列疾病的患者施用作為抗侵略行為劑的上述NAALAD酶抑制劑來控制患者的沖動和暴力行為孤獨癥、圖雷特氏綜合征、精神發(fā)育遲緩、精神病、躁狂癥、老年性癡呆，或給予有人格障礙以及不適當侵略行為史的患者。在另一實施方案中，施用有效量的去氨基谷氨酸類似物或N-取代的谷氨酸衍生物來控制患有這樣的病癥的患者中的沖動和暴力行為。可依據(jù)本發(fā)明治療的其它神經(jīng)病包括抑郁癥，包括重性抑郁癥(個別發(fā)作、復發(fā)、憂郁癥)、非典型抑郁癥、胸腺機能障礙性抑郁癥、亞綜合征性抑郁癥、激越性抑郁癥、運動阻抑性抑郁癥、與癌癥、糖尿病或心肌梗塞后一起致病的抑郁癥、更年期抑郁癥、雙相型精神障礙、精神病性抑郁癥，內(nèi)源性和反應性抑郁癥、強迫觀念與行為精神障礙，或食欲過盛。此外，NAALAD酶抑制劑可用于治療患有下列疾病的患者疼痛(單獨施用或者與嗎啡、可待因或右旋丙氧吩聯(lián)合施用)、強迫觀念與行為人格精神障礙、創(chuàng)傷后緊張性障礙、高血壓、動脈粥樣硬化、焦慮癥、神經(jīng)性食欲缺乏、疼痛、社會恐怖癥、口吃、睡眠障礙、慢性疲勞、與阿爾茨海默氏病有關的認知不足、酒精濫用、食欲障礙、體重減輕、廣場恐怖癥、改善記憶、健忘癥、戒煙、尼古丁戒斷綜合征癥狀、與月經(jīng)前綜合征有關的情緒和/或食欲失調(diào)、與月經(jīng)前綜合征有關的情緒抑郁和/或糖類嗜欲、與尼古丁戒斷有關的情緒失調(diào)、食欲失調(diào)或導致復發(fā)趨向的失調(diào)、24小時生理節(jié)奏的節(jié)律混亂、邊緣型人格障礙、疑病癥、月經(jīng)前綜合征(PMS)、后黃體期焦慮癥、月經(jīng)前焦慮癥、拔毛發(fā)癖、其它抗抑制藥停止后的癥狀、侵略性/間歇性爆發(fā)性障礙、強迫性賭博、強迫性消費、強迫性欲、使用對精神起作用的物質所帶來的病癥、性障礙、精神分裂癥、早泄、或選自緊張、憂慮、憤怒、拒絕敏感的精神病癥狀、和缺乏精神或身體活力?？梢罁?jù)本發(fā)明治療的精神病的其它實例包括但不限于中度精神發(fā)育遲緩(318.00)、嚴重精神發(fā)育遲緩(318.10)、深度精神發(fā)育遲緩(318.20)、非未特指的精神發(fā)育遲緩(319.00)、孤獨障礙(299.00)、蔓延型發(fā)育障礙NOS(299.80)、注意力缺乏活動過強障礙(314.01)、團體型行為障礙(312.20)、孤立侵略型行為障礙(312.00)、混合型行為障礙(312.90)、圖雷特氏病(307.23)、慢性運動原或聲音抽搐病癥(307.22)、短暫抽搐病癥(307.21)、抽搐病癥NOS(307.20)、老年發(fā)作、無并發(fā)癥的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆(290.00)、老年發(fā)作、伴有譫妄的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆(290.30)、老年發(fā)作、伴有妄想的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆(390.20)、老年發(fā)作、伴有抑郁癥的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆(290.21)、老年前期發(fā)作、無并發(fā)癥的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆(290.10)、老年前期發(fā)作、伴有譫妄的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆(290.11)、老年前期發(fā)作、伴有妄想的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆(290.12)、老年前期發(fā)作、伴有抑郁癥的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆(290.13)、無并發(fā)癥的多梗塞癡呆(290.40)、伴有譫妄的多梗塞癡呆(290.41)、伴有妄想的多梗塞癡呆(290.42)、伴有抑郁癥的多梗塞癡呆(290.43)、老年性癡呆NOS(290.10)、早老性癡呆NOS(290.10)、酒精戒斷性譫妄(291.00)、酒精性幻覺癥(291.30)、與酒精中毒有關的酒精性癡呆(291.20)、苯丙胺或類似作用的擬交感神經(jīng)藥中毒(305.70)、苯丙胺或類似作用的擬交感神經(jīng)藥中毒妄想性障礙(292.11)、大麻性妄想性障礙(292.11)、可卡因中毒(305.60)、可卡因性譫妄(292.81)、可卡因性妄想性障礙(292.11)、迷幻劑性幻覺癥(305.30)、迷幻劑性妄想性障礙(292.11)、迷幻劑性心境障礙(292.84)、迷幻劑迷幻劑后知覺障礙(292.89)、苯環(huán)利定(PCP)或類似作用的芳基環(huán)己基胺中毒(305.90)、苯環(huán)利定(PCP)或類似作用的芳基環(huán)己基胺性譫妄(292.81)、苯環(huán)利定(PCP)或類似作用的芳基環(huán)己基胺性妄想性障礙(292.11)、苯環(huán)利定(PCP)或類似作用的芳基環(huán)己基胺性心境障礙(292.84)、苯環(huán)利定(PCP)或類似作用的芳基環(huán)己基胺性器質性精神障礙NOS(292.90)、其它或未特指的對精神起作用的物質中毒(305.90)、其它或未特指的應用精神作用物質所致譫妄(292.81)、其它或未特指的應用精神作用物質所致癡呆(292.82)、其它或未特指的應用精神作用物質所致妄想性障礙(292.11)、其它或未特指的應用精神作用物質所致幻覺癥(292.12)、其它或未特指的應用精神作用物質所致心境障礙(292.84)、其它或未特指的應用精神作用物質所致焦慮癥(292.89)、其它或未特指的應用精神作用物質所致人格障礙(292.89)、其它或未特指的應用精神作用物質所致器質性精神障礙NOS(292.90)、譫妄(293.00)、癡呆(294.10)、器質性妄想性障礙(293.81)、器質性幻覺癥(293.81)、器質性心境障礙(293.83)、器質性焦慮癥(294.80)、器質性人格障礙(310.10)、器質性精神障礙(29.80)、強迫觀念與行為精神障礙(300.30)、創(chuàng)傷后緊張性障礙(309.89)、泛化性焦慮癥(300.02)、焦慮癥NOS(300.00)、身體變形性精神障礙(300.70)、疑病癥(或疑病性神經(jīng)機能病)(300.70)、軀體癥狀化障礙(300.81)、混合型軀體病樣精神障礙(300.70)、軀體病樣精神障礙NOS(300.70)、間歇性爆發(fā)性障礙(312.34)、盜竊癖(312.32)、病理性賭博(312.31)、放火狂(312.33)、拔毛發(fā)癖(312.39)、和沖動控制障礙NOS(312.39)?？捎帽景l(fā)明所描述的包含β-內(nèi)酰胺的蛋白酶抑制劑治療的精神病的其它實例包括亞慢性緊張癥型精神分裂癥(295.21)、慢性緊張癥型精神分裂癥(295.22)、伴有急性惡化的亞慢性緊張癥型精神分裂癥(295.23)、伴有急性惡化的慢性緊張癥型精神分裂癥(295.24)、處于緩解期的緊張癥型精神分裂癥(295.55)、未特指的緊張癥型精神分裂癥(295.20)、慢性錯亂型精神分裂癥(295.12)、伴有急性惡化的亞慢性錯亂型精神分裂癥(295.13)、伴有急性惡化的慢性錯亂型精神分裂癥(295.14)、處于緩解期的錯亂型精神分裂癥(295.15)、未特指的錯亂型精神分裂癥(295.10)、亞慢性妄想型精神分裂癥(295.31)、慢性妄想型精神分裂癥(295.32)、伴有急性惡化的亞慢性妄想型精神分裂癥(295.33)、伴有急性惡化的慢性妄想型精神分裂癥(295.34)、處于緩解期的妄想型精神分裂癥(295.35)、未特指的妄想型精神分裂癥(295.30)、亞慢性混合型精神分裂癥(295.91)、慢性混合型精神分裂癥(295.92)、伴有急性惡化的亞慢性混合型精神分裂癥(295.93)、伴有急性惡化的慢性混合型精神分裂癥(295.94)、處于緩解期的混合型精神分裂癥(295.95)、未特指的混合型精神分裂癥(295.90)、亞慢性殘余型精神分裂癥(295.61)、慢性殘余型精神分裂癥(295.62)、伴有急性惡化的亞慢性殘余型精神分裂癥(295.63)、伴有急性惡化的慢性殘余型精神分裂癥(295.94)、處于緩解期的殘余型精神分裂癥(295.65)、未特指的殘余型精神分裂癥(295.60)、妄想性(偏執(zhí)狂樣)障礙(297.10)、短暫反應性精神病(298.80)、精神分裂癥樣精神障礙(295.40)、分裂情感性精神障礙(295.70)、感應性精神障礙(297.30)、精神障礙NOS(非典型精神病)(298.90)、無精神病特征的嚴重、混合型、雙相性精神障礙(296.63)、無精神病特征的嚴重、躁狂型、雙相性精神障礙(296.43)、無精神病特征的嚴重、抑郁型、雙相性精神障礙(296.53)、有精神病特征的混合型、雙相性精神障礙(296.64)、有精神病特征的躁狂型、雙相性精神障礙(296.44)、有精神病特征的抑郁型、雙相性精神障礙(296.54)、雙相性精神障礙NOS(296.70)、具有神經(jīng)病特征的單一發(fā)作、重性抑郁癥(296.24)、具有神經(jīng)病特征的復發(fā)的重性抑郁癥(296.34)、妄想型人格障礙(301.00)、精神分裂樣人格障礙(301.20)、精神分裂癥型人格障礙(301.22)、反社會性人格障礙(301.70)、邊緣型人格障礙(301.83)?？梢罁?jù)本發(fā)明治療的焦慮癥包括但不限于焦慮癥(235)、驚恐性障礙(235)、伴有廣場恐怖癥的驚恐性障礙(300.21)、不伴有廣場恐怖癥的驚恐性障礙(300.01)、無驚恐性障礙史的廣場恐怖癥(300.22)、社會恐怖癥(300.23)、單純型恐怖癥(300.29)、器質性焦慮癥(294.80)、應用精神作用物質所致焦慮癥(292.89)、分離焦慮癥(309.21)、青少年怯生癥(313.21)、和過度焦慮癥(313.00)。有效量的本文所描述的NAALAD酶抑制劑，特別是β-內(nèi)酰胺化合物可用于治療下列精神病中度精神發(fā)育遲緩；嚴重精神發(fā)育遲緩；深度精神發(fā)育遲緩；孤獨癥；注意力缺乏活動過強病癥；蔓延型發(fā)育障礙NOS；團體型行為障礙；孤立侵略型行為障礙；圖雷特氏?。焕夏臧l(fā)作、伴有譫妄的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆；老年發(fā)作、伴有妄想的阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆；老年前期發(fā)作、阿爾茨海默氏病型原發(fā)性退變性癡呆；亞慢性緊張癥型精神分裂癥；慢性緊張癥型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性緊張癥型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性緊張癥型精神分裂癥；處于緩解期的緊張癥型精神分裂癥；未特指的緊張癥型精神分裂癥；亞慢性錯亂型精神分裂癥；慢性錯亂型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性錯亂型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性錯亂型精神分裂癥；處于緩解期的錯亂型精神分裂癥；未特指的錯亂型精神分裂癥；亞慢性妄想型精神分裂癥；慢性妄想型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性妄想型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性妄想型精神分裂癥；處于緩解期的妄想型精神分裂癥；未特指的妄想型精神分裂癥；亞慢性混合型精神分裂癥；慢性混合型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性混合型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性混合型精神分裂癥；處于緩解期的混合型精神分裂癥；未特指的混合型精神分裂癥；亞慢性殘余型精神分裂癥；慢性殘余型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性殘余型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性殘余型精神分裂癥；處于緩解期的殘余型精神分裂癥；未特指的殘余型精神分裂癥；妄想性(偏執(zhí)狂樣)障礙；短暫反應性精神病；精神分裂癥樣精神障礙；分裂情感性精神障礙；感應性精神障礙；精神障礙NOS(非典型精神病)；有精神病特征的混合型、雙相性精神障礙；有精神病特征的躁狂型、雙相性精神障礙；有精神病特征的抑郁型、雙相性精神障礙；雙相性精神障礙NOS；具有神經(jīng)病特征的單一發(fā)作或復發(fā)的重性抑郁癥；妄想型人格障礙；精神分裂樣人格障礙；精神分裂癥型人格障礙；反社會性人格障礙；邊緣型人格障礙；焦慮癥；驚恐性障礙；伴有廣場恐怖癥的驚恐性障礙；不伴有廣場恐怖癥的驚恐性障礙；無驚恐性障礙史的廣場恐怖癥；社會恐怖癥；單純型恐怖癥；強迫觀念與行為精神障礙；創(chuàng)傷后緊張性障礙；泛化性焦慮癥；焦慮癥NOS；器質性焦慮癥；應用精神作用物質所致焦慮癥；分離焦慮癥；青少年怯生癥；和過度焦慮癥。一種或多種神經(jīng)原性NAALAD酶抑制劑，包括特別是親神經(jīng)的β-內(nèi)酰胺抗生素或β-內(nèi)酰胺酶抑制劑可單獨使用或者與P-糖蛋白抑制劑聯(lián)合使用來治療下列精神病亞慢性緊張癥型精神分裂癥；慢性緊張癥型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性緊張癥型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性緊張癥型精神分裂癥；處于緩解期的緊張癥型精神分裂癥；未特指的緊張癥型精神分裂癥；亞慢性錯亂型精神分裂癥；慢性錯亂型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性錯亂型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性錯亂型精神分裂癥；處于緩解期的錯亂型精神分裂癥；未特指的錯亂型精神分裂癥；亞慢性妄想型精神分裂癥；慢性妄想型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性妄想型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性妄想型精神分裂癥；處于緩解期的妄想型精神分裂癥；未特指的妄想型精神分裂癥；亞慢性混合型精神分裂癥；慢性混合型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性混合型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性混合型精神分裂癥；處于緩解期的混合型精神分裂癥；未特指的混合型精神分裂癥；亞慢性殘余型精神分裂癥；慢性殘余型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性殘余型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性殘余型精神分裂癥；處于緩解期的殘余型精神分裂癥；未特指的殘余型精神分裂癥；妄想性(偏執(zhí)狂樣)障礙；短暫反應性精神?。痪穹至寻Y樣精神障礙；分裂情感性精神障礙；感應性精神障礙；精神障礙NOS(非典型精神病)；有精神病特征的混合型、雙相性精神障礙；有精神病特征的躁狂型、雙相性精神障礙；有精神病特征的抑郁型、雙相性精神障礙；雙相性精神障礙NOS；妄想型人格障礙；精神分裂樣人格障礙；精神分裂癥型人格障礙；反社會性人格障礙；邊緣型人格障礙。最優(yōu)選用本發(fā)明方法治療的精神病的實例包括亞慢性緊張癥型精神分裂癥；慢性緊張癥型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性緊張癥型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性緊張癥型精神分裂癥；處于緩解期的緊張癥型精神分裂癥；未特指的緊張癥型精神分裂癥；亞慢性錯亂型精神分裂癥；慢性錯亂型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性錯亂型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性錯亂型精神分裂癥；處于緩解期的錯亂型精神分裂癥；未特指的錯亂型精神分裂癥；亞慢性妄想型精神分裂癥；慢性妄想型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性妄想型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性妄想型精神分裂癥；處于緩解期的妄想型精神分裂癥；未特指的妄想型精神分裂癥；亞慢性混合型精神分裂癥；慢性混合型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性混合型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性混合型精神分裂癥；處于緩解期的混合型精神分裂癥；未特指的混合型精神分裂癥；亞慢性殘余型精神分裂癥；慢性殘余型精神分裂癥；伴有急性惡化的亞慢性殘余型精神分裂癥；伴有急性惡化的慢性殘余型精神分裂癥；處于緩解期的殘余型精神分裂癥；未特指的殘余型精神分裂癥；妄想性(偏執(zhí)狂樣)障礙；短暫反應性精神??；精神分裂癥樣精神障礙；分裂情感性精神障礙；精神分裂樣人格障礙；精神分裂癥型人格障礙。在一個優(yōu)選的本發(fā)明方面，本發(fā)明提供了治療焦慮癥的方法?？捎帽景l(fā)明方法和藥物制劑治療的焦慮癥的實例包括焦慮癥；驚恐性障礙；伴有廣場恐怖癥的驚恐性障礙；不伴有廣場恐怖癥的驚恐性障礙；無驚恐性障礙史的廣場恐怖癥；社會恐怖癥；單純型恐怖癥；強迫觀念與行為精神障礙；創(chuàng)傷后緊張性障礙；泛化性焦慮癥；焦慮癥NOS；器質性焦慮癥；應用精神作用物質所致焦慮癥；分離焦慮癥；青少年怯生癥；和過度焦慮癥。可最優(yōu)選治療的焦慮癥的實例包括驚恐性障礙；社會恐怖癥；單純型恐怖癥；器質性焦慮癥；強迫觀念與行為精神障礙；創(chuàng)傷后緊張性障礙；泛化性焦慮癥；和焦慮癥NOS。在一個本發(fā)明實施方案中，用作本發(fā)明方法和制劑中的神經(jīng)化學官能劑的NAALAD酶抑制劑的特征尤其是它們能結合青霉素結合蛋白[使用例如在下列文獻中描述的方法確定的B.G..Spratt，大腸桿菌K12的青霉素結合蛋白的性質，Eur.J.Biochem.，72341-352(1977)和N.H.Georgopapadakou，S.A.Smith，C.M.Cimarusti，和R.B.Sykes，單內(nèi)酰胺與大腸桿菌和金黃色釀膿葡萄球菌的青霉素結合蛋白的結合與抗菌活性有關，Antimocrob.AgentsChemother.，2398-104(1983)]，并且對于抗生素，它們的特征還是抑制選擇性羧肽酶和/或轉肽基酶對包含氨基酸序列Ala-D-γ-Glu-Lys-D-丙氨?；?D-丙氨酸的肽底物的活性。這樣的化合物特別包括β-內(nèi)酰胺化合物?？梢罁?jù)本發(fā)明使用的優(yōu)選的β-內(nèi)酰胺化合物是青霉素類、頭孢菌素類、以及它們的單環(huán)和二環(huán)類似物和/或衍生物?？捎糜诒景l(fā)明方法以及制備本發(fā)明制劑的市售抗生素包括苯氧乙基青霉素鉀類、cephems、1-氧雜-1-去硫雜cephems、clavams、clavems、azetidinones、carbapenams、carbapenems、和carbacephems。下述化合物是可依據(jù)本發(fā)明使用的代表性β-內(nèi)酰胺化合物。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，Cl手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝O；R1＝低級烷氧基，優(yōu)選甲氧基；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且Z＝其中R2＝低級烷基、優(yōu)選甲基，或支鏈低級烷基。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，C1手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝O；R1＝H；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且Z＝其中R2＝低級烷基、優(yōu)選甲基，或支鏈低級烷基。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，C1手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝S、S＝O、SO2；R1＝低級烷氧基，優(yōu)選甲氧基；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且Z＝其中R2＝低級烷基、優(yōu)選甲基，或支鏈低級烷基。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，C1手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝S、S＝O、SO2；R1＝H；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且Z＝其中R2＝低級烷基、優(yōu)選甲基，或支鏈低級烷基。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，C1手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝C；R1＝低級烷氧基，優(yōu)選甲氧基；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且Z＝其中R2＝低級烷基、優(yōu)選甲基，或支鏈低級烷基。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，C1手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝C；R1＝H；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且Z＝其中R2＝低級烷基、優(yōu)選甲基，或支鏈低級烷基。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，C1手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝C；R1＝H；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且T＝Cl，F(xiàn)，Br，I，CH3，C2-C4烷基，芳基、包括雜芳基，S-烷基，S-芳基、包括S-雜芳基，SO3R(R＝H、烷基、芳基)，SO2R(R＝H、烷基、芳基)，N-烷基2，N-芳基2，CO2R(R＝H、烷基)，P-烷基2，P-芳基2，PO3R2(R＝H、烷基、芳基)。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，C1手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝C；R1＝低級烷氧基，優(yōu)選甲氧基；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且T＝Cl，F(xiàn)，Br，I，CH3，C2-C4烷基，芳基、包括雜芳基，S-烷基，S-芳基、包括S-雜芳基，SO3R(R＝H、烷基、芳基)，SO2R(R＝H、烷基、芳基)，N-烷基2，N-芳基2，CO2R(R＝H、烷基)，P-烷基2，P-芳基2，PO3R2(R＝H、烷基、芳基)。其中V＝-CO2M、SO3M、SO2M、PO3M2、PO2M，其中M＝H或可藥用鹽或酯形成基團，C1手性可以是R或S，每個差向異構體具有獨特的生物活性；X＝O；R1＝低級烷氧基，優(yōu)選甲氧基；Y＝OM，M＝H，可藥用鹽或活性酯形成基團例如1-二氫茚基、新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基；且Z＝其中R2＝低級烷基、優(yōu)選甲基，或支鏈一般烷基。其中式III、IV、III’、和IV’化合物可用于本發(fā)明，其中基團W、V、X、R1、Y、M和Z分別如化合物Ia-If中所定義?？梢罁?jù)本發(fā)明使用的其它優(yōu)選的化合物IXa-IXf、Xa-Xf、XIa-XIf、XIIa-XIIf、XI’a-XI’f、和XII’a-XII’f是式IX、X、XI、XII、XI’、和XII’化合物，其中基團W、V、X、R1、Y、和M分別如化合物Ia-If中所定義，且基團T如化合物Ig和Ih中所定義。可依據(jù)本發(fā)明使用的另一組優(yōu)選的化合物XIIIa-XIIIf、XIVa-XIVf、XVa-XVf、XVIa-XVIf、XV’a-XV’f、和XVI’a-XVI’f是式XIII、XIV、XV、XVI、XV’、和XVI’化合物，其中基團W、V、X、R1、Y、和M分別如化合物Ia-If中所定義，且基團T如化合物Ig和Ih中所定義。可依據(jù)本發(fā)明使用的另一組優(yōu)選的化合物分別是化合物XVIIa-XVIIf、XVIIIa-XVIIIf、XIXa-XIXf、和XXa-XXf，其中基團W、V、X、R1、M、和Y分別如化合物Ia-If中所定義。在一個優(yōu)選的本發(fā)明實施方案中，蛋白酶抑制劑是下式所示化合物其中R是氫、鹽形成或活性酯形成基團；R1是氫或C1-C4烷氧基；T是C1-C4烷基、鹵素(包括氯、氟、溴和碘)、羥基、O(C1-C4)烷基、或-CH2B，其中B是親核試劑BH的殘基，且?；怯袡C酸?；鵒H的殘基。市售的這類化合物(1-烷氧基-1-去硫雜cephems)的實例是拉氧頭孢和氟氧頭孢。US專利4323567描述了并要求保護拉氧頭孢，該專利的說明書引入本發(fā)明以作參考。拉氧頭孢是特別優(yōu)選的，這是因為其具有良好的血腦屏障運輸能力，并因此能在腦中提供較高濃度的該化合物(相對于血液/血清水平)。在另一個本發(fā)明實施方案中，將拉氧頭孢或據(jù)述可用于非胃腸道給藥以獲得臨床有效抗生素組織濃度的另一市售β-內(nèi)酰胺抗生素(或其衍生物或類似物)轉化成相應的一或二活性酯，以將所述化合物的口服吸收改善至足以在腦中抑制神經(jīng)原性蛋白酶活性、同時有效地影響行為和認知能力的水平，盡管血清濃度在臨床上不足以實現(xiàn)抗菌效力?；蛘?，可將N-取代的谷氨酸衍生物或2-去氨基2-取代的谷氨酸類似物轉化成相應的活性酯衍生物。合適的可在體內(nèi)水解的(活性)酯基的實例包括例如酰氧基烷基例如乙酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基、β-乙酰氧基乙基、β-新戊酰氧基乙基、1-(環(huán)己基羰基氧基)丙-1-基、和(1-氨基乙基)羰基氧基甲基；烷氧基羰基氧基烷基例如乙氧基羰基氧基甲基和α-乙氧基羰基氧基乙基；二烷基氨基烷基例如乙氧基羰基氧基甲基和β-乙氧基羰基氧基乙基；二烷基氨基烷基，尤其是二低級烷基氨基烷基例如二甲基氨基甲基、二甲基氨基乙基、二乙基氨基甲基或二乙基氨基乙基；2-(烷氧基羰基)-2-鏈烯基例如2-(異丁氧基羰基)戊-2-烯基和2-(乙氧基羰基)丁-2-烯基；內(nèi)酯基例如2-苯并[c]呋喃酮基和二甲氧基2-苯并[c]呋喃酮基；與另一β-內(nèi)酰胺抗生素或β-內(nèi)酰胺酶抑制劑連接的酯。這樣化學修飾的市售非胃腸道用β-內(nèi)酰胺抗生素的一個實例是拉氧頭孢(Ia，Y＝OH，R1＝OCH3，且V＝COM，其中M＝OH)，是制備其一種活性酯類似物Ia，其中Y＝OM，M＝H或活性酯例如1-二氫茚基，且V＝CO2M，其中M是H或活性酯，其中至少一個V和Y包含活性酯部分。上述β-內(nèi)酰胺抗生素或谷氨酸衍生物或類似物的羧基的合適的可藥用鹽包含金屬鹽例如鋁鹽，堿金屬鹽例如鈉鹽或鉀鹽，堿土金屬鹽例如鈣鹽或鎂鹽，以及銨鹽或取代的銨鹽，例如與低級烷基胺如三乙胺、羥基低級烷基胺例如2-羥基乙胺、二(2-羥基乙基)胺或三(2-羥基乙基)胺、環(huán)烷基胺例如二環(huán)己基胺形成的鹽，或者與下述胺形成的鹽普魯卡因、二芐基胺、N，N-二芐基乙二胺、1-二苯羥甲胺、N-甲基嗎啉、N-乙基哌啶、N-芐基-β-苯乙基胺、去氫樅胺、N，N′-二去氫樅胺、乙二胺，或吡啶型堿例如吡啶、可力丁或喹啉，或可用于與已知的青霉素類或頭孢菌素類形成鹽的其它胺。其它適用的鹽包括鋰鹽和銀鹽。式(I)化合物的鹽可通過以常規(guī)方法進行鹽交換來制得。在另一個本發(fā)明實施方案中，使用下式所示青霉素或青霉素類似物來作為NAALAD酶抑制劑其中在所述式中，X＝O、S、SO、SO2或C；R是H或可藥用成鹽或成酯基團；R1是H或低級烷氧基，G是氫或羥基，且Z是氨基、?；被O2M、SO3M、PO3M2、或PO2M，其中M是氫或可藥用成鹽或成酯基團，優(yōu)選為活性酯形成基團。沒有抗菌作用或有弱抗菌作用的苯氧乙基青霉素鉀和cephem或cephem亞砜和砜以及在結構上相關的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑例如他佐巴坦、棒酸和舒巴坦可特別用于其中擔心會形成抗生素抗藥性的應用。有多種市售β-內(nèi)酰胺抗生素可依據(jù)本發(fā)明使用、或修飾或配制以優(yōu)化其效力。這樣的化合物的實例是頭孢羥唑鈉甲酸酯(Mandol)頭孢唑啉鈉(Zolicef，Ancef，Kefzol)頭孢美唑鈉(Zeegazone)頭孢尼西鈉(Monocid)頭孢哌酮鈉(Cefobid)頭孢雷特(Precef)頭孢噻肟鈉(Claforan)頭孢替坦鈉(Cefotan，Apatef)頭孢西丁鈉(Mefoxin)頭孢他定(Ceptaz，F(xiàn)ortaz，Tazicef，Tazidime)頭孢唑肟鈉(Kefurox，Zinacef)頭孢曲松(Rocephin)頭孢曲松鈉(Rocephin)注射頭孢氨呋肟(Kefurox，Zinacef)注射頭孢拉定(Velosef-injectable)頭孢噻吩鈉(Keflin，Seffin)頭孢吡硫鈉(Cefadyl)拉氧頭孢(Moxam)阿莫西林(Amoxil，Polymox)阿莫西林和棒酸鉀(Augmentin)氨芐青霉素(Omnipen，Principen)氨芐青霉素和舒巴坦(Unasyn)阿洛西林(Azlin)氨芐青霉素碳酯(Spectrobid)羧芐青霉素(Geocillin，Geopen)頭孢克洛(Ceclor)頭孢羥氨芐(Duricef，Ultracef)頭孢唑啉鈉(Mandol)cefazolinsodium(Ancef，Kefzol)頭孢克肟(Suprax)頭孢美唑鈉(Zefazone)頭孢尼西(Monocid)頭孢哌酮(Cefobid)頭孢雷特(Precef)頭孢噻肟(Claaforan)頭孢替坦(Cefotan)頭孢西丁(Mefoxin)注射頭孢羅齊口服頭孢羅齊(Cefzil)頭孢他定(Ceptaz，F(xiàn)ortax)頭孢唑肟(Cefizox)頭孢曲松(Rocephin)頭孢氨呋肟(Ceftin，Zinacef)頭孢氨芐(Keflex，Keftab)頭孢噻吩(Keflin)頭孢吡硫(Cefadyl)頭孢拉定(Anspor，Velosef)氯唑西林(Cloxapen，Tegopen)環(huán)青霉素雙氯青霉素(Dycill，Pathocil)注射氯拉卡比口服氯拉卡比甲氧西林(Staphcillin)美洛西林(Mezlin)拉氧頭孢(Moxam)萘夫西林(Nafcil，Unipen)苯唑西林(Bactocill，Prostaphlin)青霉胺(Cuprimine，Depen)青霉素G(Wycillin，Pentids，BicillinLA)青霉素V(Veetids，V-CillinK)哌拉西林(Pipracil)羧噻吩青霉素(Ticar)羧噻吩青霉素和棒酸鉀(Timentin)其它市售β-內(nèi)酰胺抗生素包括亞胺培南(泰寧)，其通常與cilastatin(其防止被腎酶水解)聯(lián)合施用。其它β-內(nèi)酰胺抗生素包括美羅匹寧(Meronem/Zeneca)和氨曲南(Azacetam)。其它penems包括biapenem、panipenem、卡蘆莫南、和ritipenam。還表現(xiàn)出交叉抑制NAALAD酶、并且可以或可以不表現(xiàn)出獨立抗菌活性的本領域已知的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑可特別依據(jù)本發(fā)明使用。如上所述，可將適于非胃腸道給藥的β-內(nèi)酰胺抗生素化合物修飾成其活性酯衍生物，以改善口服吸收，并達到足以抑制神經(jīng)原性蛋白酶的化合物的腦水平，但是不必須提供在臨床上足夠有效的抗生素血液水平。可依賴其抑制蛋白酶介導的細胞壁合成的抗菌效力的其它抗生素，例如γ-內(nèi)酯和/或喹啉類抗生素也可依據(jù)本發(fā)明使用。可使用本領域已知的分子發(fā)現(xiàn)技術，例如在U.S.專利5,552,543(該專利的說明書引入本發(fā)明以作參考)中描述的技術來鑒定能夠通過所提出的關于β-內(nèi)酰胺化合物活性的機制來抑制神經(jīng)原性蛋白酶的其它化合物。該專利描述了用于檢測在青霉素結合蛋白與β-內(nèi)酰胺抗生素之間發(fā)生的“鎖和鑰匙”相互作用與抗菌活性之間的關系的算法?？蓪⑦@樣的分子模型技術與用于鑒定具有良好血腦屏障運輸效力的化合物的其它藥物模型技術(例如在出版的PCT國際申請WO99/10522中描述的技術，該出版物引入本發(fā)明以作參考)聯(lián)系起來，以最佳地鑒定出可依據(jù)本發(fā)明實施方案使用的有效化合物。因此，為了依據(jù)本發(fā)明治療目標神經(jīng)原性NAALAD酶，不僅重要的是可用于本發(fā)明的化合物不僅應當具有作為目標神經(jīng)蛋白酶(NAALAD酶)抑制劑的活性，而且重要的是這樣的化合物應當具有一定閾程度的穿越血腦屏障的效力，以提供藥物在腦中的有效的蛋白酶抑制濃度。這樣的血腦屏障運輸特性可能是化合物結構所固有的，或者可將這樣的化合物與能有效地促進血腦屏障運輸?shù)钠渌瘜W實體配制在一起和/或軛合。為了制備和配制能提高其血腦屏障運輸能力的化合物，人們已作了大量研究和開發(fā)工作，并且可使用這樣的技術來提高可依據(jù)本發(fā)明使用的蛋白酶抑制劑及其助劑的腦濃度。動物實驗表明，拉氧頭孢的閾有效劑量(非胃腸道給藥)為約50μg/kg體重。根據(jù)動物實驗數(shù)據(jù)和非胃腸道施用的拉氧頭孢在腦與身體其它組織之間的已知分布，拉氧頭孢在腦中的有效最小神經(jīng)原性蛋白酶抑制濃度為約30nM。據(jù)表明，當以1微克/千克體重的劑量腹膜內(nèi)施用時，棒酸是有效的神經(jīng)原性NAALAD酶抑制劑。當依據(jù)本發(fā)明用于治療行為和/或認知障礙時，NAALAD酶抑制劑的有效劑量水平將顯著地取決于患者體重、抑制劑與目標神經(jīng)原性蛋白酶的親和力、活性化合物的血腦屏障運輸特征、給藥方式、以及為了提高血腦屏障運輸而任選使用的藥物配制/軛合技術。對于非胃腸道施用的拉氧頭孢，在倉鼠以及其它實驗動物中的最小有效劑量為約50微克/千克體重，或多或少。當拉氧頭孢以口服形式，優(yōu)選以活性酯修飾或衍化形式使用時，據(jù)估計劑量為約2.5-約50mg/劑量，遠低于提供治療有效抗菌濃度所需的拉氧頭孢劑量。預計棒酸類藥物的有效口服劑量為約0.1-約10mg/劑量。棒酸可口服吸收，并表現(xiàn)出良好的血腦屏障運輸。其它蛋白酶抑制劑的有效劑量同樣將取決于其對目標蛋白酶的固有親和力、所選的給藥途徑、患者體重、和血腦屏障運輸效力。依據(jù)本發(fā)明使用的NAALAD酶抑制劑的有效劑量可易于使用動物模型以及本領域已知的分析技術憑經(jīng)驗確定。一般來說，對于β-內(nèi)酰胺抗菌化合物，在本發(fā)明方法和制劑中使用的劑量水平低于為達到臨床有效的抗菌水平所需的劑量。β-內(nèi)酰胺抗菌化合物的非胃腸道給藥劑量可以為約1-約80mg/劑量?？诜┝靠梢詾榧s2.5-約150mg/劑量。當臨床醫(yī)師根據(jù)患者詳細情況作出這種決定時，更高或更低的劑量可能是適當?shù)模⑶铱梢罁?jù)本發(fā)明使用。因此，例如，當患者/臨床病癥處于不用擔心β-內(nèi)酰胺化合物的固有抗菌活性是并發(fā)禁忌癥的情況下時，可使用最高達或超過能夠提供臨床有效抗生素血液閾水平的高劑量抗生素，來治療需要依據(jù)本發(fā)明通過NAALAD酶抑制來實行治療的患者。此外，依據(jù)本發(fā)明，可使用能以有效量穿越血腦屏障的其它本領域已知的NAALAD酶抑制劑來治療行為和認知障礙。例如，它們可用于改善癡呆患者的認知能力或減侵略性行為。已知的NAALAD酶抑制劑的實例包括一般的金屬肽酶抑制劑例如O-菲咯啉，金屬螯合劑例如乙二胺四乙酸(EDTA)和乙二醇雙(β-氨基乙醚)-N，N-四乙酸(EGTA)，和肽類似物例如quesqualicacid、天冬氨酸谷氨酸(Asp-Glu)、Glu-Glu、Gly-Glu、γ-Glu-Glu和β-N-乙?；?L-天冬氨酸-L-谷氨酸。其它NAALAD酶抑制劑是最近描述的下式所示化合物其中X是RP(O)(OH)CH2-[參見U.S.專利5,968,915，該專利引入本發(fā)明以作參考]；RP(O)(OH)NH-[參見U.S.專利5,863,536，該專利引入本發(fā)明以作參考]；RP(O)(OH)O-[參見U.S.專利5,795,877，該專利引入本發(fā)明以作參考]；RN(OH)C(O)Y-或RC(O)NH(OH)Y，其中Y是CR1R2、NR3或O[參見U.S.專利5,962,521，該專利引入本發(fā)明以作參考]；或者X是RS(O)Y、RSO2Y、或RS(O)(NH)Y，其中Y是CR1R2、NR3或O[參見U.S.專利5,902,817，該專利引入本發(fā)明以作參考]。每篇上述U.S.專利都提出了所述NAALAD酶抑制劑在治療與谷氨酸異常有關的疾病中的應用，所述疾病包括癲癇癥、中風、阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、肌萎縮性側索硬化(ALS)、亨廷頓氏舞蹈病、精神分裂癥、慢性疼痛、局部缺血和神經(jīng)原損傷。本發(fā)明的發(fā)現(xiàn)使得能使用青霉素結合蛋白(細菌羧肽酶或轉肽基酶)抑制劑，特別是β-內(nèi)酰胺抗生素和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑來開發(fā)基于這些化合物作為NAALAD酶抑制劑的以前未被發(fā)現(xiàn)的活性的治療這類疾病的方法。最近已發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)組織中高濃度的谷氨酸與多發(fā)性硬化有關，并且據(jù)信，抑制神經(jīng)組織中的NAALAD酶以及因此抑制谷氨酸生成可通過減輕癥狀的嚴重程度或通過減少其發(fā)作來給患有這類疾病的患者提供治療有益效果。本發(fā)明還提供了治療下述疾病的一些藥物制劑行為或認知障礙，以及與神經(jīng)組織或包含NAALAD酶活性的其它組織中異常谷氨酸濃度生成有關的疾病。所述制劑一般包含神經(jīng)活性組分和用于它的可藥用載體，神經(jīng)活性組分包括能抑制細菌酶和能抑制已知(憑經(jīng)驗證據(jù))選擇性地作用于包含氨基酸序列Ala-D-γ-Glu-Lys-D-丙氨酰基-D-丙氨酸的肽的神經(jīng)原性肽酶(例如NAALAD酶)的化合物。在一個實施方案中，藥物制劑在單位劑型中包含一定量能抑制患有或趨于患有下述病癥的患者中的NAALAD酶活性的β-內(nèi)酰胺化合物可通過抑制NAALAD酶來預防或治療以減輕其癥狀的病癥。肽酶(NAALAD酶)抑制劑的量和載體的性質當然取決于欲采取的給藥途徑。抑制劑的量是通過預定的給藥途徑施用后能有效地提供下述濃度的量抑制劑在其中需要抑制NAALAD酶的組織例如腦中的濃度，并且該濃度能有效地治療和減輕目標行為或認知障礙或可通過抑制NAALAD酶活性來治療的其它疾病的癥狀。在使用β-內(nèi)酰胺抗生素化合物的實施方案中，本發(fā)明制劑中肽酶抑制劑的量一般低于能提供臨床有效細菌蛋白酶抑制的量，即在劑型中施用給患者時，低于能提供抗菌有效水平的量?？蓪⑦m用于本發(fā)明的肽酶抑制劑與一種或多種可藥用載體混合，并且可以口服施用，例如作為片劑、膠囊、小膠囊、可分散粉末、粒劑、錠劑、粘膜貼劑、小藥囊等劑型施用?？蓪AALAD酶抑制劑與可藥用載體例如淀粉、乳糖或海藻糖混合，加入或不加入一種或多種制片賦形劑，并壓制成片劑或錠劑?？扇芜x用腸溶衣將這樣的片劑、小膠囊或膠囊包衣，以將在胃中的水解/降解減至最小?？诜苿┖屑s1-約99％的活性組分和約1-約99％重量的可藥用載體和/或配制賦形劑。任選地，當β-內(nèi)酰胺抗生素用作NAALAD酶抑制劑時，劑型可這樣制得將其與P-糖蛋白抑制劑組合以提供提高的藥物半衰期和活性組分的腦濃度?；蛘撸珊唵蔚貙⒌鞍酌敢种苿┡cP-糖蛋白或β-內(nèi)酰胺酶抑制劑聯(lián)合給藥，或者劑型可包含單獨或與P-糖蛋白組合的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑(其自身也是NAALAD酶抑制劑)與載體。在另一個本發(fā)明實施方案中，藥物制劑可含有例如約2.5％-約90％活性組分和載體，更優(yōu)選含有約5％-約60％重量的活性組分。依據(jù)本發(fā)明一個實施方案，將藥物制劑配制成口服(os)給藥，即經(jīng)口吞咽給藥或頰或舌下給藥的形式(小藥囊、錠劑、和/或口服粘膜貼劑的形式)。在另一實施方案中，將口服施用的劑型配制成延長釋放劑型，以在預定時間內(nèi)釋放活性組分。含有活性蛋白酶抑制劑和適于這類給藥途徑的常規(guī)無毒可藥用載體、輔料和載體的局部劑型，包括透皮貼劑、鼻內(nèi)給藥劑型、和栓劑單位制劑也在本發(fā)明范圍內(nèi)?；蛘撸景l(fā)明藥物制劑可經(jīng)由非胃腸道給藥途徑，包括皮下給藥、腹膜內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥和靜脈內(nèi)給藥來施用。這樣的非胃腸道給藥劑型一般呈水溶液或分散體的形式，其中使用了可藥用載體例如等滲鹽水、5％葡萄糖、或其它眾所周知的可藥用液體載體組合物。適于注射使用的藥物劑型包括無菌水溶液或分散液和用于臨時制備無菌注射溶液或分散液的無菌粉末或冷凍干燥物。在所有情況下，劑型必須是無菌的，其在制備和貯存條件下是穩(wěn)定的，并且必須抗微生物體的污染作用而防腐。注射劑的載體可以是含有例如水、乙醇、或多元醇(或例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、它們的混合物、和植物油的溶劑或分散介質?？捎糜谥委熜袨楹驼J知障礙以及對神經(jīng)原性肽酶抑制有反應的其他疾病的肽酶抑制劑的非胃腸道給藥劑型還可以配制成可注射的緩釋制劑，其中是將蛋白酶抑制劑與一種或多種天然或合成生物可降解或生物可分散聚合物混合，所述聚合物有例如碳水化合物，包括淀粉、樹膠和醚化或酯化纖維素衍生物、聚醚、聚酯(特別是聚交酯、聚乙醇酸交酯或聚-交酯-乙醇酸交酯)、聚乙烯醇、明膠、或藻酸鹽。這樣的制劑可制成例如微球懸浮液、凝膠(親水或疏水組成的凝膠)、或制成一定形狀的聚合物基質植入物，這樣的植入物是本領域眾所周知的，起著“貯庫型”藥物遞送系統(tǒng)的功能，能提供生物活性組分的延長釋放。這樣的組合物可使用本領域已知的制劑技術來制備，并且可設計任意多種藥物釋放類型。在本發(fā)明中使用的藥物組合物可間歇，或者以逐漸、連續(xù)、恒定或可控速度施用給需要治療的患者。此外，每天施用本發(fā)明藥物制劑的時間和次數(shù)可根據(jù)患者的病癥和外界因素而變。對于在本發(fā)明范圍內(nèi)使用的任何給定的蛋白酶抑制劑，效力水平和最佳劑量以及劑型與患者有關，并且可在臨床醫(yī)師的合理判斷范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。制劑一般施用足以治療或預防患者病癥，例如足以改善受治療患者的行為或認知能力的時間?？墒褂孟嗤驕p少的預防目標疾病的給藥方案連續(xù)施用蛋白酶抑制劑的制劑。由于認識了神經(jīng)原性蛋白酶的存在和功能，可易于將這樣的化合物與腦勻漿、腦脊液(CSF)或腦組織提取物中分離出來，并進行純化以用于結構確定和藥物開發(fā)應用。因此，通過使用包括特異性親和色譜和/或高壓液相色譜在內(nèi)的本領域已知技術，可分離出一種或多種具有決定著行為表型和認知能力的確定神經(jīng)化學功能的神經(jīng)原性蛋白酶并確定其特征。因此，例如，可將β-內(nèi)酰胺抗生素與固體基質例如磁性珠子或官能化二氧化硅共價結合、任選經(jīng)由可裂解接頭結合，以形成能夠與目標蛋白酶選擇性地親和/相互作用的固相。然后將攜帶固體底物的β-內(nèi)酰胺化合物與CSF、腦勻漿或腦提取物在一個或多個pH水平下接觸足以使得神經(jīng)原性蛋白酶與固定的β-內(nèi)酰胺化合物發(fā)生反應(或締合結合)的時間。或者，可將包含氨基酸序列?；?D-丙氨酰基-D-丙氨酸的蛋白或肽底物固定在固體底物上，并用作目標神經(jīng)原性蛋白酶的親和探針。然后將共價或締合結合的蛋白酶從提取物中分離出來，然后通過取決于蛋白酶-固定探針相互作用的性質的技術從固體底物上釋放下來。如果蛋白酶與固定的β-內(nèi)酰胺化合物形成共價鍵，則可通過例如將可裂解的接頭裂解來將所得復合物從固相底物上釋放下來，以獲得基本上不含非蛋白酶組分的神經(jīng)原性蛋白酶、尤其是其衍生物?；蛘撸瑑?yōu)選地，用于蛋白酶親和柱的探針表現(xiàn)出對蛋白酶的所選締合(非共價)親和，這樣可通過改變嚴格性(液相的離子強度或pH)來將蛋白酶從固相上釋放下來，以將蛋白酶以基本上不含非蛋白酶組分的形式從固體底物上釋放下來。能夠鑒定本發(fā)明方法和藥物制劑的神經(jīng)蛋白酶目標的另一方案是使用用放射核酸金屬化物(radionucleide)(H3)標記的青霉素或頭孢菌素。將這種青霉素或頭孢菌素的溶液注射到測試動物的腦中，經(jīng)過預定時間后，給動物實施安樂死，立即提取/均化腦。然后將腦提取物/勻漿進行一次或多次分離處理例如離心、透析、和色譜處理(例如凝膠纖維色譜)。分析分離的化學物質中存在的標記物，分離出標記的物質，任選進行另外的純化操作，并進行物理化學分析以確定結構。使用本領域已知的蛋白氨基酸分析技術/測序，易于確定出神經(jīng)原性蛋白酶的結構，由此能夠制備出編碼至少一部分蛋白酶的核酸探針。然后可使用探針來從可用基因庫中檢索編碼蛋白酶的DNA。使用本領域已知的克隆技術分析并克隆目標基因構建物，以獲得可用于表達無限量純蛋白酶的基因工程微生物、真核細胞或原核生物，然后可使用純蛋白酶來進行診斷或藥物篩選應用。在一個相關的本發(fā)明實施方案中，將蛋白酶以半抗原形式軛合，以接種鼠或其它物種來制備識別一種或多種神經(jīng)原性蛋白酶表位的單克隆抗體?？贵w生成可用本領域技術人員眾所周知的雜交瘤形成技術來進行。U.S.專利4628077中總結了這樣的方法，特別是形成對膠原蛋白表現(xiàn)出的特異性的單克隆抗體的方法，將該專利中關于單克隆抗體形成的部分引入本發(fā)明以作參考?？贵w自身可通過共價連接或親和連接(例如經(jīng)由生物素抗生物素蛋白復合物)與可檢測的標記物例如放射性核酸金屬化物、酶、或熒光或電發(fā)光物質配合。這樣標記的抗體可在診斷試劑盒和方法中使用來分析例如腦脊液樣本，以確定患者行為或認知狀況與神經(jīng)蛋白酶濃度的關系。這種診斷試驗也可以用來評估患者對藥物治療的反映，并監(jiān)視患者狀態(tài)，而且也是作為神經(jīng)原性蛋白酶濃度的函數(shù)。該方法可用本領域技術人員已知的本領域承認的競爭性或三明治型特異性結合測定。因此，依據(jù)本發(fā)明另一實施方案，本發(fā)明提供了評價患者神經(jīng)化學狀況的方法，包括將腦脊液樣本與具有下述作用的標記抗體接觸的步驟所述標記抗體能特異性結合調(diào)節(jié)決定著患者認知能力水平和/或行為表型的神經(jīng)化學路徑的神經(jīng)原性蛋白酶的表位，最后與由具有預定認知或行為表型的患者測定得水平進行比較。在另一個本發(fā)明實施方案中，本發(fā)明提供了基本上純形式的肽神經(jīng)調(diào)質或神經(jīng)遞質。所述神經(jīng)肽的特征在于，其介導患者的行為和認知能力，起著神經(jīng)原性蛋白酶底物的作用，其自身能夠被拉氧頭孢的D-異構體或包含序列?；?D-丙氨酰基-D-丙氨酸的肽抑制。對肽神經(jīng)調(diào)質或神經(jīng)譯質表現(xiàn)出選擇性活性的神經(jīng)原性蛋白酶可表現(xiàn)出蛋白酶解活性，包括轉蛋白酶或羧蛋白酶活性(或所述的轉肽基酶或羧肽酶活性)?？捎妙愃朴谏鲜龇蛛x和純化神經(jīng)原性蛋白酶的方法從腦脊液或腦勻漿分離出神經(jīng)肽。然而，是將青霉素結合蛋白(或分離的神經(jīng)原性蛋白酶自身的任選化學修飾的形式)固定在固體底物的表面上，來代替使用具有共價結合的β-內(nèi)酰胺抗生素的固體底物作為目標分子的親和探針。青霉素結合蛋白(PBP)對肽神經(jīng)調(diào)質/神經(jīng)遞質表現(xiàn)出選擇性親和性，并且當把攜帶PBP的固相與腦勻漿或腦脊液在一個或多個離子強度和/或pH條件下接觸時，目標肽分子優(yōu)先與固體底物結合。攜帶PBP的固相可以以色譜柱的形式使用，即用在親和色譜中，或者，可將固體底物簡單地分散在腦勻漿或提取物或腦脊液中，以選擇性結合肽神經(jīng)調(diào)質/神經(jīng)遞質，然后將其從青霉素結合蛋白上釋放下列，按照需要通過高壓液相色譜分離和進一步純化，以獲得基本上不含其它蛋白質組分的純形式的所述肽神經(jīng)調(diào)質/神經(jīng)遞質。肽神經(jīng)遞質自身可用作神經(jīng)活性藥物，或者其可用作開發(fā)相關神經(jīng)活性藥物的先導藥物。此外，所純化的神經(jīng)遞質的結構可通過本領域已知的氨基酸序列分析法方便地確定，這使得本領域技術人員可制備核酸探針(如果可能的話合成基因)來分離出編碼肽神經(jīng)遞質/神經(jīng)調(diào)質的DNA序列。最后，與上述神經(jīng)原性蛋白酶的基因的應用類似，可以克隆出分離的基因類似物，并制備臨床量的用于藥物介入、抗體生成或藥物開發(fā)的肽神經(jīng)遞質/神經(jīng)調(diào)質。在本發(fā)明另一個方面，可給患有認知或行為障礙的患者接種疫苗，所述疫苗是制成例如能激發(fā)對患者接種的抗體反應的神經(jīng)原性蛋白酶軛合物，其中所述的抗體反應足以減弱神經(jīng)原性蛋白酶的功能，同時改進患者的行為和/或認知表型，以改善與異常谷氨酸濃度/活性有關的其它患者病癥，包括但不限于上述病癥。在一個實施方案中，軛合物包含一個或多個肽的半抗原軛合物，所述肽包含4-20個NAALAD酶的氨基酸序列，所述氨基酸序列包含一個或多個如上所述的NAALAD酶或PBP的活性位點基元。上述本發(fā)明實施方案部分得自根據(jù)在下述動物行為認知和技能模型中收集的數(shù)據(jù)推出的作用機制。通過分析在下述非限制性實驗實施例中獲得的數(shù)據(jù)，本發(fā)明其它實施方案將變得顯而易見，下述實施例僅是舉例說明了可通過使用本發(fā)明方法和制劑而達到的行為改善和認知能力改善。實驗實施例于1981-1982年上市的拉氧頭孢(Mox)作為第三代頭孢菌素樣抗生素在世界范圍內(nèi)廣泛使用。用2200名細菌感染患者評價了臨床效力和安全性(Jackson等人，1986)。其中260名患者用Mox治療格蘭氏陰性軟膜蛛網(wǎng)膜炎，241名患者(93％)表現(xiàn)出令人滿意的對抗生素治療的反應。每8小時用4gMox治療患者，治療2-3周。IM注射后1小時內(nèi)達到了峰值血漿濃度，消除半衰期為2.3小時。以8-12小時的間隔多次注射，沒有任何累積。拉氧頭孢可穿越血腦屏障。IV施用2.0g該藥物后，Mox的腦脊液(CSF)水平為25-39μg/ml。作為血清濃度百分比的CSF濃度估計為20％。D異構體具有抗菌活性，并且未與血漿蛋白結合的比例比L異構體大。用拉氧頭孢進行的行為實驗方法動物飼養(yǎng)將得自HarlanSprague-DawleyLaboratories(Indianapolis，IN)的雄性敘利亞金色倉鼠(Mesocricetusauratus)(140-150g)在有機玻璃籠子(24cm×24cm×20cm)中單獨飼養(yǎng)，保持相反的光照黑暗循環(huán)(14L10D；在1900點開始光照)，并提供食物和水讓它們自由攝取。在測試前，讓動物適應相反的光照黑暗循環(huán)至少2周。所有行為測試都是在24小時生理節(jié)奏循環(huán)的黑暗期進行的。所有動物都是依據(jù)在GuidefortheCareandUseofLaboratoryAnimals(NationalInstitutesofHealthPublicationNo.85-23，Revised1985)中出版的準則獲得和飼養(yǎng)的。攻擊性侵略行為激動行為可分為攻擊性或防衛(wèi)性侵略行為(Blanchard和Blanchard，1977；Adams，19798；Albert和Walsh，1984)。攻擊性侵略行為的特征是，侵略者向對手發(fā)起攻擊，而防衛(wèi)性侵略行為缺少主動接近。這兩種侵略行為都有它們各自獨特的神經(jīng)行為系統(tǒng)。引起攻擊性和防衛(wèi)性攻擊的刺激是不同的，因為它們是伴隨每一激動反應的行為后果。雖然已經(jīng)由動物模型收集了支持獨特攻擊性和防衛(wèi)性神經(jīng)網(wǎng)絡概念的大量經(jīng)驗數(shù)據(jù)，但是在人侵略行為中有值得關注和令人感興趣的類似性，這表明有類似神經(jīng)組織(Blanchard，1984)。攻擊性侵略行為易于使用以居住/侵入式樣測試的雄性金色倉鼠—一種建立的攻擊性侵略行為模型來進行(Ferris和Potegal1988)。將不熟悉的雄性倉鼠置于另一雄性倉鼠的飼養(yǎng)籠子中，引起居住倉鼠的明確的激動行為，包括攻擊性侵略行為。行為測定和分析倉鼠是夜間活動動物，因此所有行為測試都是在暗淡的紅色光照射下的黑暗期的前4個小時進行。記錄居住動物的攻擊性侵略行為，例如咬侵入者的潛伏時間，咬的總次數(shù)，與侵入者接觸的總時間，和在10分鐘測試期間的脅腹標志(Ferris和Potegal，1988)。脅腹標志是嗅覺交流的形式，其中倉鼠拱起其背部，并靠著環(huán)境中的物體摩擦產(chǎn)生性外激素的脅腹腺(Johnson，1986)。在攻擊性遭遇期間，脅腹標志頻率大大增加，并且在發(fā)起并贏得戰(zhàn)斗的優(yōu)性動物中特別顯著(Ferris等人，1987)。依次使用單向ANOVA和Newman-Keuls后hoc檢驗分析參數(shù)數(shù)據(jù)，即潛伏時間和接觸時間。依次使用Kruskal-Wallis檢驗和Mann-WhitneyU檢驗來分析非參數(shù)數(shù)據(jù)，即咬的次數(shù)和脅腹標志，以確定各組間的差異。分別采用用于參數(shù)數(shù)據(jù)的成對和不成對t-檢驗與用于成對和不成對非參數(shù)數(shù)據(jù)的Wilcoxon和Mann-Whitney檢驗來分析兩個樣本比較。結果I.高劑量拉氧頭孢在小規(guī)模試驗中，給經(jīng)過預篩選對較小侵入者有攻擊性侵略行為的6只雄性倉鼠腹膜內(nèi)(IP)給予Mox(50mg/kg，體積為約150μl)。用Mox和鹽水進行的治療是等衡的，這樣每只動物接受間隔至少48小時的兩種治療。治療90分鐘—估計能反映出Mox峰值血漿水平的一定時間后，測試動物(Jackson等人，1986)。將拉氧頭孢溶解在0.9％NaCl中，并在冰上貯存。對于每一測試，都制備新鮮的溶液。用鹽水載體治療的居住動物在不到1分鐘內(nèi)咬侵入者(附圖1)。用Mox治療后，咬的平均潛伏時間增加至6分鐘以上(p＜0.05)。此外，10分鐘內(nèi)觀察到的咬的次數(shù)顯著減少(p＜0.05)。然而，接觸時間，即居住動物嗅和探究侵入者所消耗的時間也顯著減少(p＜0.01)。脅腹標志的下降雖不顯著，但是有這種趨勢(p＜0.07)?？偨Y與攻擊性侵略行為有關的所有行為指標的一般下降提出了這樣的可能性，即50mg/kg劑量的Mox對運動原活動和激勵有非特異性的抑制作用。為了驗證該可能性，需要進行劑量反應實驗以找到能有效地抑制攻擊性侵略行為、同時不改變其它行為的Mox的最小劑量。II.拉氧頭孢劑量反應為了找到能顯著地減輕攻擊性侵略行為的Mox的最小劑量，在6只動物中測試一系列濃度(載體、0.5、5.0、50、500、和5000μg/kg)。治療是等衡的，每只動物接受間隔至少48小時的每種治療。在治療之間咬的潛伏時間有顯著差異(F(5，30)＝5.66；p＜0.001)。用5.0μg劑量的拉氧頭孢治療對攻擊性侵略行為的任何行為指標都沒有影響。然而，與載體對照相比，50μg/kg的劑量顯著地延遲了咬的潛伏時間，其潛伏時間在7分鐘以上(p＜0.001)。500μg和5.0mg的劑量還顯著地延長了咬的潛伏時間。正如所預計的那樣，延長咬的潛伏時間的相同劑量還減少了咬的次數(shù)(H＝24.12；p＜0.001)。用50μgMox治療的動物表現(xiàn)出咬次數(shù)的顯著減少(p＜0.05)。實際上，在10分鐘的觀察期間內(nèi)，6只動物當中，有3只動物根本沒有咬過。在治療之間接觸時間有顯著差異(F(5，30)＝2.5；p＜0.05)。與載體對照相比，500μg和5mg的劑量顯著地減少了接觸時間(分別是p＜0.05和p＜0.01)。各組間脅腹標志沒有顯著差異(H＝9.256；p＜0.09)?？偨Y這些數(shù)據(jù)表明，50μg/kg劑量的Mox非常有效地抑制了攻擊性侵略行為，同時沒有顯著地減少接觸時間和脅腹標志。高劑量的Mox雖然有效地減小了侵略行為的指標，但是也減少了接觸時間。因此，對于以后的行為實驗，50μg劑量似乎是最佳的。已經(jīng)鑒定了Mox的最有效劑量，現(xiàn)在需要使用更大數(shù)目的動物和更多的行為測試來進行更全面的實驗。III.用50μg拉氧頭孢進行行為測試攻擊性侵略行為用鹽水載體或50μg/kgMox治療后(附圖4)，測試13只倉鼠的攻擊性侵略行為。對于2種治療，都IP給予約150μl的體積。注射90分鐘后測試動物。每只動物接受兩種治療。注射順序是等衡的，治療之間的間隔不低于48小時。拉氧頭孢顯著地延長了咬的潛伏時間(p＜0.001)，并減少了咬的次數(shù)(p＜0.01)。接觸時間或脅腹標志沒有顯著改變?？偨Y該較大規(guī)模的低劑量Mox實驗確證了劑量反應實驗的結果，即Mox可有效地減輕攻擊性侵略行為，同時沒有改變通過在侵入者身上所消耗的時間表示的社會行為。在開放區(qū)域中的運動原活動用鹽水載體或50μg/kgMox治療后(附圖5)，測試6只動物在“開放區(qū)域”中的運動原活動。該實驗是等衡的，每只動物接受各種治療。注射90分鐘后，將動物單獨置于大的、清潔的、沒有任何褥草的有機玻璃籠子(48×32×40cm)中。通過在籠子下面的帶子將該開放區(qū)域劃分成象限。通過計數(shù)1分鐘內(nèi)越過象限的次數(shù)來評價動物的運動原活動。在治療組之間，開放區(qū)域活動方面沒有任何顯著差異。嗅覺辨別力用載體或50μg/kgMox治療16只動物，并通過測定其找到隱藏的向日葵籽所花費的時間來測試其嗅覺辨別力(附圖5)。注射是等衡的，每只動物接受各種治療。在測試前，將動物禁食24小時。注射90分鐘后，將動物暫時從它們的飼養(yǎng)籠子里取出來，把6粒向日葵籽埋藏在位于一個角落中的褥草下面。將動物放回它們的飼養(yǎng)籠子中，在10分鐘的觀察期間內(nèi)，通過它們找到向日葵籽所花費的時間來進行評價。與載體對照相比，在用Mox治療的動物中，找到向日葵籽所花費的時間顯著減少(p＜0.001)。令人驚奇的是，用Mox而不是鹽水治療后不到5分鐘，所有向日葵籽都被迅速地消耗掉了。實際上，用鹽水治療后，在這16只動物當中，沒有一只消耗了所有向日葵籽，而用Mox治療的動物都消耗了所有向日葵籽。性活動用鹽水載體或50μg/kgMox治療后，在5分鐘的觀察期間內(nèi)測試6只動物的性活動(附圖6)。該實驗是是等衡的，每只動物接受各種治療。注射90分鐘后，根據(jù)爬上的潛伏時間和插入次數(shù)，即與放在其飼養(yǎng)籠子中的感受雌性動物交配的回合數(shù)。在一般麻醉條件下切除雌性金色倉鼠的卵巢。通過連續(xù)3天單次SC注射50mg雌二醇苯甲酸酯來治療痊愈的動物，以誘導性感受性。在測試當天，將施以雌激素的雌性動物置于實驗雄性動物的飼養(yǎng)籠子中。首先通過雄性動物在雌性動物中引起的劇烈脊柱前凸來進行評價。脊柱前凸是陳規(guī)的姿勢，其特征在于是強烈的、持續(xù)的椎骨背屈。用載體治療后，動物在約30秒爬上并插入感受雌性動物。用Mox治療后，爬上的時間顯著增加了(p＜0.05)。雖然兩種治療都表現(xiàn)出高交配回合，但是用Mox治療的動物表現(xiàn)出插入速度下降的趨勢(P＜0.07)?？偨Y拉氧頭孢似乎具有非常良好的serenic特性。Serenic是用于治療沖動和暴行的藥物(Olivier和Mos，1991)。Serenic應該抑制攻擊性侵略行為，同時不干擾社會、食欲和認知行為。Mox沒有改變對侵入者的社會興趣，即接觸時間。用藥物治療也沒有改變脅腹標志和在開放區(qū)域中的活動，這表明一般的激勵和運動原活動是正常的。用Mox治療的禁食動物更能發(fā)現(xiàn)隱藏的向日葵籽，這表明藥物治療不干擾發(fā)現(xiàn)食物的嗅覺或促動；實際上，其可能提高這種能力。有趣的是，Mox治療減少了爬上感受雌性動物的潛伏時間，并且在5分鐘觀察期間內(nèi)，減少了(雖然不顯著)交配回合數(shù)。應當指出，用Mox治療的動物仍然具有非常強的性活動能力，只是行為的強烈程度似乎弱一些。Mox的抗侵略行為作用與減輕性活動的作用結合在一起，這使得其可用于治療性暴力侵犯。eltoprazine—一種第一代serenics的開發(fā)之所以被放棄了，部分是因為據(jù)發(fā)現(xiàn)其能增加動物的恐懼和焦慮(Olivier等人，1994)。為了控制這種可能性，需要在用于篩選藥物對焦慮癥的作用的模型中測試Mox。IV.測試拉氧頭孢的抗焦慮活性高架正迷宮高架正迷宮是為了在大鼠中測試抗焦慮以及焦慮誘導藥物而開發(fā)的(Pellow等人，1985)。已經(jīng)在行為上、生理上、和藥理上驗證了該方法。正迷宮由兩個開放的臂和兩個封閉的臂構成。大鼠天生地進入開放臂的傾向小于進入封閉臂的傾向，并且在開放臂中停留的時間要少得多。與限制在封閉臂中相比，限制在開放臂中會帶來更明顯的焦慮相關性行為以及更高的緊張激素水平。臨床有效的抗焦慮藥物例如利眠寧或安定顯著地增加了在開放臂中停留的時間百分比以及進入開放臂中的次數(shù)。與之相反，焦慮誘導藥物例如可立寧或安非他明會減少進入開放臂中的次數(shù)以及在臂臂中停留的時間。方法將重250-300g的雄性Wistar大鼠成群地在標準12∶12光照-黑暗循環(huán)(在早晨8點開始光照)中飼養(yǎng)，并提供食物和水讓其隨意獲得。正迷宮由2個開放臂(50×10cm)和兩個封閉臂(50×10×40cm)和開放頂構成，并且兩個開放臂彼此相對。將迷宮提高至50cm高度。給動物IP注射50μg/kgMox和鹽水載體90分鐘后，在正迷宮中測試8只動物。治療順序是等衡的，注射間隔至少48小時。在實驗開始時，將動物放置在正迷宮的中央朝著封閉臂方向。在5分鐘的觀察期間，根據(jù)動物進入封閉臂的潛伏時間、在封閉臂中停留的時間、以及第一次進入封閉臂后進入開放臂中的次數(shù)來評價動物(附圖7)。與載體相比，用Mox治療顯著地增加了進入封閉臂的潛伏時間(p＜0.05)。在封閉臂中停留的時間顯著地減少了(p＜0.01)，同時進入開放臂的數(shù)目顯著地增加了(p＜0.05)。總結這些數(shù)據(jù)表明，以50μg/kg的劑量施用的Mox具有抗焦慮活性。該發(fā)現(xiàn)表明，Mox具有serenic活性，同時其與部分通過增加恐懼和焦慮來抑制攻擊性侵略行為的以前的serenics例如eltoprazine不同。這些數(shù)據(jù)還表明，Mox可具有用作抗焦慮劑的治療價值。然而，Mox的抗焦慮活性引起了關于行為特異性的其它擔心。許多抗焦慮劑，特別是苯并二氮雜類是鎮(zhèn)靜劑，并且可抑制一般的運動原獲得，而且還可以起健忘劑的作用，并影響學習和記憶。因為Mox對脅腹標志或在開放區(qū)域中的活動沒有任何影響，所以其可能不會起一般鎮(zhèn)靜劑的作用。然而，需要測試Mox來確定其是否對學習和記憶有任何不利影響。V.測試拉氧頭孢的抗焦慮活性拉氧頭孢v.利眠寧方法因為Mox和CDP具有不同的生物利用度特性，例如腦穿越性，所以其CNS活性不能通過系統(tǒng)注射等摩爾濃度的每種藥物來進行比較。反而，需要將兩種藥物直接注射到腦室系統(tǒng)中以繞過血腦屏障。用戊巴比妥鈉(50mg/kg)將動物麻醉，植入目標是側室的微注射導管，在測試前讓動物恢復2天。用Mox或CDP測試各組動物(每組6只)。在隔開的2天，給每只動物注射藥物和0.9％NaCl載體。注射順序是等衡的，并且間隔2天。Mox和CDP都是在0.9％NaCl中制成1mM濃度。所有注射都是用10秒鐘給完全清醒的束縛的動物注射2μl的體積。60分鐘后，在正迷宮中測試動物，觀察3分鐘，并如上所述評價行為。結果與載體治療相比，Mox治療顯著(p＜0.05)延遲了動物進入封閉臂中的時間(附圖17)。用Mox治療使得動物在正迷宮的光亮臂中度過大部分時間。與載體相比，用Mox治療后，在黑暗中停留的時間顯著(p＜0.01)減少。與載體治療相比，用1mM濃度的CDP治療后，對進入封閉臂的潛伏時間或在封閉臂中停留的時間沒有任何影響?？刂品翘禺愋砸种七\動原活動當CDP以5-15mg/kg的劑量系統(tǒng)施用給嚙齒動物時，其是鎮(zhèn)靜劑，并抑制運動原活動。然而，在幾天內(nèi)重復施用CDP后，對運動原活動的抑制作用會消失。只有當動物對CDP的運動原作用變得感覺遲鈍時，才在正迷宮中測試CDP的抗焦慮活性。為了控制直接注射到腦中后Mox和CDP對運動原活動的任何非特異性作用，在正迷宮中測試前30分鐘，在開放區(qū)域中測試動物(附圖18)。這兩種抗焦慮劑對一般運動原活動都沒有顯著影響?？偨Y關于Mox是抗焦慮劑的發(fā)現(xiàn)表明，Mox具有serenic活性，同時其與部分通過增加恐懼和焦慮來抑制攻擊性侵略行為的以前的serenics例如eltoprazine不同。在等摩爾基礎上，直接施用到腦中后，Mox表現(xiàn)出抗焦慮活性，而CDP則沒有。這些數(shù)據(jù)表明，除了serenic以外，Mox可具有用作抗焦慮劑的治療價值。然而，Mox的抗焦慮活性引起了關于行為特異性的其它擔心。許多抗焦慮劑，特別是苯并二氮雜類是鎮(zhèn)靜劑，并且可抑制一般的運動原獲得，而且還可以起健忘劑的作用，并影響學習和記憶。因為Mox對脅腹標志或在開放區(qū)域中的活動沒有任何影響，所以其可能不會起一般鎮(zhèn)靜劑的作用。然而，需要測試Mox來確定其是否對學習和記憶有任何不利影響。VI.測試拉氧頭孢的空間記憶作用徑向臂迷宮徑向臂迷宮是其中一個最常用的在嚙齒動物中測試空間學習和記憶的方法。其是由Olton與合作者開發(fā)的(1976)，其提供了對測試個體的幾個不同路徑的同時選擇。動物必須學習使用視覺空間線索來確定食物的位置(位置學習)。方法試驗試驗由三期構成(如下所述)。迷宮的臂沿著順時針方向從一到七，數(shù)字一是距離迷宮右側最遠的臂。所有試驗都持續(xù)約12分鐘。當不測試時，所有倉鼠都無限地攝取水。除了迷宮中的向日葵籽以外，每天給倉鼠一個AgwayProlab3000食丸。在所有時期內(nèi)的試驗都是在連續(xù)的天內(nèi)進行。一期一期由五個15分鐘的試驗構成。在開始一期中的五個試驗之前，將4粒向日葵籽置于臂1、2、和3的末端。臂4、5、6、和7是空的。二期該試驗的二期與一期相同，除了在臂2、4和7中放置向日葵籽。臂1、3、5和6是空的。二期由四個15分鐘的試驗構成。三期該試驗的三期由三個15分鐘的試驗構成，在臂2、4、和7中放置向日葵籽。三期與二期的不同之處在于將迷宮在房間中順時針旋轉110°。解讀行為如果倉鼠的所有4個爪子都越過臂入口，則記錄臂進入。如果倉鼠的鼻子接觸在臂末端的閉塞處頂部，或者如果它們的鼻子穿過閉塞處，則記錄完全臂進入。這些評分是關于放置和未放置向日葵籽的臂。此外，記錄被倉鼠裝入袋中的向日葵籽的數(shù)目。結果用0.9％NaCl或50μg/kgMox治療后，在徑向臂迷宮中測試6只雄性倉鼠(附圖8)。每只動物接受每種治療，治療順序是等衡的。在徑向臂迷宮中，最重要的測定是，在測試的最后一天，將迷宮的方向反轉后，所發(fā)現(xiàn)的向目葵籽的數(shù)目。與載體治療相比，拉氧頭孢治療顯著地增加了所發(fā)現(xiàn)的向日葵籽(p＜0.01)?？偨Y這些數(shù)據(jù)支持了下述觀念拉氧頭孢的抗焦慮作用不伴有干擾學習和記憶(苯并二氮雜抗焦慮劑伴有這種不利作用)。相反，拉氧頭孢增強了空間記憶，其可用作精神病治療劑來改善認知能力。該發(fā)現(xiàn)表明，拉氧頭孢可以是治療兒童和老年患者中的ADHD和行為障礙的有效治療劑。在水迷宮中的空間航行類似于徑向臂迷宮的Morris水迷宮是為了測試空間記憶而開發(fā)的(Morris，1984)。將水池分成通常稱為北、南、東和西的象限。用奶粉使水池中的水變得不透明。在一個象限中將平臺隱藏在表面之下，平臺的作用是置于水池內(nèi)的嚙齒動物的逃脫途徑。從多個不同起點將動物置于水池的某個地方，記錄動物找到平臺所用的時間，在每個象限中停留的時間百分比，行進的距離和游泳速度。在水池中動物沒有任何視覺或空間線索，并且必須依賴于迷宮外的線索，即放在水池外可被游動的動物看見的物體。經(jīng)過一系列試驗，大鼠發(fā)展了根據(jù)迷宮外線索找到平臺位置的“位置學習”或知識。每天可將平臺移到不同象限中，以使空間記憶與工作記憶結合起來。該方案涉及以前記憶的消退和解答新的空間問題。方法水迷宮由黑色的塑料環(huán)狀水池構成，直徑約為150cm，高約54cm，填充了約35cm水平的用奶粉變得不透明的水。將水池分成4個象限，在西北象限的表面2cm下浸沒著一個直徑為10cm的平臺。將水維持約25℃的溫度。在水池周圍有幾個視覺線索。在水池上面是一個捕捉實驗動物運動的錄像機。使用HVSImage(Hampton，UK)開發(fā)的軟件全自動地收集數(shù)據(jù)。在測試前，使大鼠熟悉水池和置于西北象限中的平臺。在連續(xù)4天中，每天都將動物置于水池中的隨機位點上，并給它們2分鐘來發(fā)現(xiàn)平臺。在測試前1小時，用50μg/kgMox(n＝11)或載體(n＝10)治療動物。熟悉了試驗后，測試動物的空間航行。測試開始的第一天，平臺在預期的西北象限中。在2分鐘的觀察期間內(nèi)，用錄像機記錄所有行為。將測試動物干燥后，把它們放回到各自的飼養(yǎng)籠子中。在接下去的每一天，將平臺移動到新的象限中，大鼠在不同位置開始?？偸菍⒋笫笾糜谒刂?，并朝著側壁。對于4個象限中的每一個，相對于平臺的開始位點是不同的；然而，在每個象限，平臺總是在相同的相對位置。距離水池側面20cm，并且在朝著中央的左邊角。結果雙向ANOVA表明，治療(F(1，20)＝6.48，p＜0.05)和測試天數(shù)(F(3，63)＝5.76，p＜0.01)有顯著的主要影響(附圖19)。在治療與測試天數(shù)之間有顯著的相互影響(F(3，63)＝4.35，p＜.01)。Newman-Keuls后hoc檢驗表明，在第2天(p＜.05)、第3天(p＜.01)和第4天(p＜.05)，治療之間有顯著差異(附圖19)。在每一天，與載體治療組相比，用Mox治療的動物發(fā)現(xiàn)隱藏平臺所用的時間顯著地縮短了。實際上，與第1天相比，用載體治療的動物在第2天(p＜.05)和第3天(p＜.01)發(fā)現(xiàn)隱藏平臺所用的時間顯著地增加了。對于兩種治療(附圖19，底部的2個圖)，發(fā)現(xiàn)平臺的方案與通過動物在每個象限中停留的時間百分比所判斷的結果類似。對于任一象限，在任一天，治療之間沒有任何顯著差異。對于在任何特定象限中停留的時間百分比，在天數(shù)之間有顯著差異(例如北面的象限，F(xiàn)(3，63)＝28.80，p＜.0001)。在某幾天，動物在一些象限中度過了大部分時間。例如，在第1天，相對于其它象限，用Mox和載體治療的動物都在北面的象限中度過了其大部分時間(p＜.01)。這是可以預計到的，因為它們已經(jīng)通過熟悉過程了解了平臺位于該象限中。有趣的是，與南面和東面的象限相比，在第1天，用載體治療的動物還在西面的象限中度過了較長時間(p＜.05)。這可能是因為平臺隱藏在北面象限的西北部位所致。在第2天，與東面和西面的象限相比，用Mox和載體治療的動物在北面和南面的象限度過了較長時間。在第3天，用Mox治療的動物沒有表現(xiàn)出對任何象限的特別偏好，而與南面和西面的象限相比，用載體治療的動物仍然表現(xiàn)出對北面象限的顯著偏好。在第4天，用Mox和載體治療的動物都在正確的象限(西面)中度過了大部分時間，在前一天隱藏平臺的東面象限中度過了較少時間。在第4天，對于這兩種治療，該方案都表現(xiàn)出良好的空間、工作和程序記憶。在各天中，對于到達平臺所經(jīng)過的距離，在用Mox和載體治療的動物之間沒有顯著差異(附圖20)。然而，用Mox治療的動物的游泳速度比用載體治療的動物要快得多(F(1，20)＝22.94，p＜0.0001)(附圖20)。例如，在第2天，這兩組游動了類似距離到達平臺，只是用Mox治療的動物以幾乎2倍的速度游動了該距離(p＜.01)。對于Mox治療，雖然各天沒有任何顯著影響(F(3，63)＝2.27，p＜.09)，但是在游動速度與天數(shù)之間有相互影響(F(3，63)＝2.75，p＜.05)，因為該組的游泳速度隨著時間的延長下降了。在水迷宮中的線索航行方法在空間航行最后一天(第4天)的下一天，測試動物的線索航行。在這些測試中，將平臺升至水面以上。測試前一小時，用Mox或鹽水載體治療動物。對于線索航行，在空間航行期間用Mox治療的動物也用Mox治療。給動物進行一系列2分鐘的試驗，試驗間隔45分鐘。對于每個試驗，將平臺移至不同象限。線索航行實驗與空間航行相同，除了平臺是可以看見的，并且在一天內(nèi)，測試是進行5個連續(xù)試驗。在所有測試期間，記錄動物找到平臺所用的時間、在每個象限停留的時間百分比、游動的距離以及游泳速度。結果在用Mox和載體治療的動物之間，動物找到平臺所用的時間有差異(F(1，20)＝24.68，p＜0.0001)(附圖21)。對于天數(shù)有顯著影響(F(4，84)＝6.53，p＜0.0001)，但是在治療與天數(shù)之間沒有任何相互影響(F(4，84)＝0.99，p＜0.4)。在第1、3和4個試驗，與用載體治療的動物相比，用Mox治療的動物找到平臺所用的時間顯著縮短。就象空間航行中一樣，對于兩種治療(附圖21，底部的2個圖)，發(fā)現(xiàn)平臺的方案與通過動物在每個象限中停留的時間百分比所判斷的結果類似。對于任一象限，在任一天，治療之間沒有任何顯著差異(例如南面的象限，F(xiàn)(1，20)＝1.61，p＜0.21)。對于在任何特定象限中停留的時間百分比，在試驗之間有顯著差異(例如南面的象限，F(xiàn)(4，84)＝16.70，p＜.0001)。在某幾個試驗，動物在一些象限中度過了大部分時間。例如，在第5個試驗，相對于其它象限，用Mox和載體治療的動物都在隱藏平臺的北面象限和在前一個試驗放置平臺的西面象限中度過了其大部分時間。與空間航行不同，對于在線索航行期間游動的距離，在用Mox和載體治療的動物之間有顯著差異(F(1，20)＝44.11，p＜0.0001)(附圖22)。對于試驗有顯著影響(F(4，84)＝7.90，p＜0.0001)，并且在治療與試驗之間有相互影響(F(4，84)＝2.67，p＜0.05)。在第1個試驗，對于游動距離，在治療之間沒有任何差異。然而，在第3和4個試驗，與用Mox治療的動物相比，用載體治療的動物明顯用了更多的時間來找到平臺。對于用Mox治療的動物，在各試驗之間，游動距離沒有顯著改變。然而，對于用載體治療的動物，在第3個試驗游動的平均距離顯著大于該治療的任何其它試驗。與空間航行不同，在兩種治療之間游泳速度沒有任何顯著差異(F(1，20)＝0.67，p＜0.42)(附圖22)。然而，在試驗之間有顯著影響(F(4，84)＝17.18，p＜0.0001)，并且在治療與試驗之間有相互影響(F(4，84)＝4.10，p＜0.01)。在兩個治療中，在每個隨后的試驗，游泳速度有顯著增加。例如，從第1個試驗到第4個試驗，用Mox和載體治療的動物都表現(xiàn)出游泳速度的顯著增加(p＜0.01)。總結與用載體治療的對照動物相比，用拉氧頭孢治療的動物能更有效地找到隱藏和可見的平臺。然而，對于在每個航行范例中的成功，方案是嚴格不同的。在空間航行期間，動物必須依賴迷宮外的線索和程序記憶來找到移動的平臺。用Mox和載體治療的動物似乎表現(xiàn)出相同的學習和記憶，因為對于測試的每一天，在每個象限中度過的時間百分比沒有任何不同。在游泳模式上沒有任何表面差異(附圖23和24)。治療之間的游動距離沒有顯著差異。用Mox治療的動物能更快地找到平臺，這部分是因為其游動得更快。然而，線索航行呈現(xiàn)了不同情況。用Mox治療的動物找到平臺所用的時間比用載體治療的動物少。由在各象限中停留的時間百分比限定的搜尋情況非常相似。然而，與空間航行不同，用Mox治療的動物游動了更短的距離。此外，兩個治療組都以相同速度游動。這些數(shù)據(jù)支持了下述觀念拉氧頭孢的抗焦慮作用不伴有干擾學習和記憶(苯并二氮雜抗焦慮劑伴有這種不利作用)。相反，拉氧頭孢增強了空間記憶，其可用作精神病治療劑來改善認知能力。該發(fā)現(xiàn)表明，拉氧頭孢可以是治療兒童和老年患者中的ADHD和行為障礙的有效治療劑。VII.非人靈長目動物中的社會行為實驗方案用Mox測試8只兩歲大小的青春期恒河獼猴。在場地位置設定的組中由它們的母親飼養(yǎng)動物。在1歲大小時，將它們放到單獨的籠子中。之后的每一天，將它們成對飼養(yǎng)2-3小時。青春期伴侶總是相同的。該年的長過程導致青春期伴侶或“游戲同伴”具有限定良好的與可認識的支配和次要狀態(tài)的社會相互關系史。以該方式展現(xiàn)的社會行為非常強烈，這是因為猴子一起度過的時間很有限。在實驗期間，將猴子成對地放置在“游戲籠子”中，用錄像機記錄1小時。該實驗是這樣設計的，對于用Mox和載體治療的每只猴子，都獲得行為數(shù)據(jù)。治療是ABA型給藥方案第一天-每對中的一個成員接受0.9％NaCl載體，第二天-藥物，第三天-載體。在測試天，一對當中只有1個成員接受注射。1周后，依據(jù)相同的ABA給藥方案給一對當中的另一個成員注射。拉氧頭孢是以1mg/kg的劑量IM注射。注射后60分鐘，在一個小時的觀察期間用錄像機記錄動物。記錄動物40種以上的不同行為(Winslow等人，1988)。在表1中僅列出了28種行為。未列出的行為，例如咬自己、發(fā)音、緊貼、爬上、逃跑、自我打扮非常少見，因此將它們從分析中刪除。對于每個行為指標，進行成對的t-檢驗。結果與載體相比，通過Mox治療使得打斗持續(xù)時間顯著縮短(p＜0.05)。該發(fā)現(xiàn)不受動物社會地位的影響，即用Mox治療后，處于支配地位和次要地位的動物都表現(xiàn)出減少的打斗。有趣的是，幾個不同的激動行為指標，例如綜合侵略行為打分在接近顯著水平上交錯在一起。應當注意到，這些動物是青春期恒河獼猴，并且它們表現(xiàn)出的社會侵略行為主要限制在打斗上。侵略行為與成年的情緒暴虐不同。然而，據(jù)信打斗是成年侵略行為的不成熟先期行為。青春期和成年猴子的異性打扮是交往行為的主要標志。雖然Mox顯著地減輕了打斗的持續(xù)時間，但是其對異性打扮沒有任何影響?？偨Y將拉氧頭孢以1mg/kg的劑量施用給青春期恒河獼猴后，其顯著地減輕了打斗—激動行為的標志。然而，作為交往行為標志的異性打扮未受影響。因此，關于Mox可減輕嚙齒動物中激動行為的發(fā)現(xiàn)延伸到了非人靈長目動物。VIII.測試拉氧頭孢的D和L異構體原理藥物的3D結構可天然地存在鏡像或異構體。根據(jù)它們的旋光，可將這些異構體分為D或L型。通常只有其中一個異構體具有生物活性。因為用于這些實驗的Mox是作為兩種異構體的混合物制得的，所以需要分離并測試活性異構體。方法拉氧頭孢鈉鹽(FW564.4)是作為異構體混合物從SigmaChemical(StLouisMO)獲得的。D，L-Mox是通過Ziemniak等人，1982描述的方法用HPLC分離到的。將D，L-Mox置于水中，在C18柱上分離，用1％MeCN，pH6.5緩沖液洗脫。用UV檢測器在275nm檢測洗脫液。兩種異構體都呈現(xiàn)單峰。D-Mox的保留時間為6.7分鐘，而L-Mox的保留時間為8.2分鐘。Mox的單獨異構體比較不穩(wěn)定，并且在冷凍干燥期間會迅速異構化，這使得難以獲得具有適當程度(＞98％)的樣本。因此需要直接從HPLC施用給動物。將D異構體(約200μg/mlHPLC緩沖液)稀釋至50μg/ml鹽水，并在冰上保持直至IP注射(50μg/kg)。也將L異構體(約150μg/mlHPLC緩沖液)稀釋至50μg/ml鹽水，并進行類似處理。結果用50μg/kgD或LMox治療后，測試兩組動物(每組8只)的攻擊性侵略行為(附圖9)。注射后90分鐘測試動物。DMox顯著地延長了咬的潛伏時間(p＜0.01)，并減少了咬的數(shù)目(p＜0.05)。對于接觸時間或脅腹標志，這兩種異構體之間沒有顯著差異?？偨Y這些數(shù)據(jù)表明，D拉氧頭孢是影響攻擊性侵略行為的活性異構體。IX.測試β-內(nèi)酰胺類抗生素抗侵略性行為原理拉氧頭孢在化學和藥理上與頭孢菌素和青霉素類抗生素相似。實際上，拉氧頭孢被歸為頭孢菌素。所有頭孢菌素類和青霉素的基本結構如下。它們都具有β-內(nèi)酰胺環(huán)(A)，頭孢菌素具有6元二氫噻嗪環(huán)(B)，青霉素具有5元噻唑烷環(huán)(B)。形成這些抗生素的化學母核的這些基本結構天然存在于真菌中。拉氧頭孢不是天然發(fā)現(xiàn)的，并且其特征是，氧替代了頭孢菌素中的硫(S)。頭孢菌素母核青霉素母核Aβ-內(nèi)酰胺環(huán)Aβ-內(nèi)酰胺環(huán)B二氫噻嗪環(huán)B二氫噻嗪環(huán)頭孢菌素和青霉素是抗菌素。它們的抗菌活性是因為抑制了細菌細胞壁中的肽基聚糖的合成。雖然其精確的作用基質尚未完全了解，但是這些抗生素能結合幾種蛋白酶解酶，例如羧肽酶和內(nèi)肽酶，這幾種蛋白酶解酶涉及合成能增強細菌細胞壁的肽基聚糖網(wǎng)格。這些抗生素與蛋白酶解酶之間的相互作用是可逆的。據(jù)信這些β-內(nèi)酰胺類抗生素起著酰基-D-丙氨?；?D-丙氨酸—這些酶的內(nèi)源性底物的底物類似物的作用。當這些細菌酶與抗生素結合時，它們就不能行使其功能，并且在它們復制時細菌裂解。類似的羧肽酶和內(nèi)肽酶與哺乳動物腦中神經(jīng)元和神經(jīng)膠質的細胞膜有關。在它們的多種功能中，其中一種是迅速地降解起神經(jīng)遞質作用的神經(jīng)肽。與依賴再攝取機制來終止信號激活的標準神經(jīng)遞質例如多巴胺和血清素不同，神經(jīng)肽由于其在細胞外空間中迅速降解而失活。據(jù)信這些β-內(nèi)酰胺類抗生素通過干擾在多個神經(jīng)肽上的代謝(NAALAD酶活性)以改變腦神經(jīng)肽環(huán)境來發(fā)揮精神病治療活性。方法用等摩爾濃度(90μM)的拉氧頭孢(Mox)、氨芐青霉素(Amp)、羧芐青霉素(Carb)、頭孢西丁(Cef)、阿莫西林(Amox)或鹽水載體測試6只動物。將濃度調(diào)節(jié)至與前面實驗中MOX所用的劑量相同的50μg/kg。所有溶液都是在0.9％NaCl中制備的，并且是IP給藥。注射順序是等衡的。注射后90分鐘，測試動物的攻擊性侵略行為(附圖10)。對于咬的潛伏時間，在治療之間有顯著差異(F(5，30)＝2.83，p＜0.05)。與載體對照相比，Mox和Amp都顯著地延長了咬的潛伏時間(分別p＜0.001和p＜0.05)。對于咬的數(shù)目，在治療之間也有顯著差異(H＝10.6；p＜0.05)。Mox和Amp藥物都顯著地減少了咬的數(shù)目(p＜0.05)。對接觸時間和脅腹標志沒有任何顯著治療影響(附圖11)?？偨Y這些數(shù)據(jù)表明，β-內(nèi)酰胺抗菌Mox的抗侵略行為作用可延伸到包括β-內(nèi)酰胺氨芐青霉素。在所有測試的抗生素當中，Mox穿透CNS的能力最強。施用2.0gMoxIV的專利提出，藥物的腦脊液水平約為30μg/ml。Mox的CSF與血清水平的比例為約15-20％。據(jù)估計，在IP注射14μgMox的140g倉鼠中，Mox的血清濃度為0.1ng/ml。這可由15ng/ml的CSF濃度或約30nM的Mox腦水平反映出來。這些水平當然是在能有效地與神經(jīng)肽受體相互作用的范圍內(nèi)，其中大多數(shù)神經(jīng)肽受體在納摩爾范圍內(nèi)有結合親和力。與標準神經(jīng)遞質相互作用的可能性很小，因為這些受體具有在微摩爾和毫摩爾范圍內(nèi)的Kd’s。在患有腦膜炎的新生兒(有利于β-內(nèi)酰胺抗生素CNS穿透的病癥)中，Amp的CSF與血清水平的比例為約10％。另一方面，頭孢西丁的CNS穿透力較弱，甚至當腦膜發(fā)炎時也是如此。也許很多β-內(nèi)酰胺抗生素能有效地抑制侵略行為，并且它們受其藥動學和CNS穿透能力的限制。為了驗證這種想法，需要使用高劑量的每種藥物來重復β-內(nèi)酰胺抗生素實驗。X.高劑量的β-內(nèi)酰胺類用等摩爾濃度(約5mg/kg；9mM)的氨芐青霉素(Amp)、羧芐青霉素(Carb)和頭孢西丁(Cef)或鹽水載體測試6只動物。將濃度調(diào)節(jié)至與Mox劑量反應實驗的劑量相同的5mg/kg。所有溶液都是在0.9％NaCl中制備的，并且是IP給藥。注射順序是等衡的。注射后90分鐘，測試動物的攻擊性侵略行為(附圖12)。對于咬的潛伏時間，在治療之間有顯著差異(F(4，25)＝5.49，p＜0.01)。與載體對照相比，Amp和Carb都顯著地延長了咬的潛伏時間(p＜0.001)。對于咬的數(shù)目，在治療之間也有顯著差異(H＝11.7；p＜0.05)。Amp和Carb都顯著地減少了咬的數(shù)目(分別p＜0.05和p＜0.01)。對接觸時間和脅腹標志沒有任何顯著治療影響(附圖13)。在該高劑量β-內(nèi)酰胺抗生素實驗中不包括阿莫西林。相反，使用1mg/kg(約2mM)的劑量單獨對其進行實驗。IP注射Amox或鹽水載體后90分鐘，測試8只動物(附圖14)。給每只動物進行每種治療，注射之間的間隔不低于48小時。治療是等衡的。在用1mg/kgAmox治療的動物中，攻擊性侵略行為沒有顯著改變。總結這些數(shù)據(jù)表明，以足夠高的劑量施用的氨芐青霉素和羧芐青霉素可抑制攻擊性侵略行為，同時不改變接觸時間或脅腹標志。這些數(shù)據(jù)支持了這樣的可能性拉氧頭孢的精神病治療作用被其它β-內(nèi)酰胺共享，并且作用生物機制可能是類似的。生物利用度和CNS穿透性可能是導致生物效力不同的部分主要因素。實際上，最近的測試表明，棒酸—一種β-內(nèi)酰胺化合物的抗菌活性在臨床上不顯著，但是具有臨床重要的β-內(nèi)酰胺酶抑制活性，以低于1μg/kg的劑量i.p.施用時，其表現(xiàn)出廣泛的精神病治療作用，包括抗焦慮、抗侵略行為和提高認知。其高口服吸收和良好的血腦屏障運輸能力使得它與相關的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑成為優(yōu)選用于本發(fā)明方法和藥物制劑的候選藥物?，F(xiàn)在據(jù)信，這些β-內(nèi)酰胺化合物的精神病治療作用的機制是它們與神經(jīng)原性NAALAD酶相互作用。這是可行的，因為據(jù)報道頭孢菌素在低至10nM的濃度具有抗菌活性。以50μg/kg治療后，估計Mox在腦中的濃度為約30nM。對于β-內(nèi)酰胺抗生素的精神病治療活性，另一可能的解釋是，其阻斷了已知的神經(jīng)遞質受體或再攝取蛋白。為了測試第二種可能性，需要在廣泛的放射配體結合測定中測定Mox的受體相互作用。XI.受體與運輸結合測定中篩選拉氧頭孢測試Mox對后葉加壓素V1A與血清素5HT1A受體的相互作用后葉加壓素與血清素都是控制雄性倉鼠攻擊性侵略行為的關鍵神經(jīng)遞質(Ferris等人，1998)。這兩種神經(jīng)遞質還都參與控制人的侵略行為(Coccaro等人，1998)。后葉加壓素促進侵略行為，而血清素部分通過抑制后葉加壓素系統(tǒng)的活性來抑制侵略行為。阻斷前下丘腦中的后葉加壓素V1A受體和刺激血清素5HT1A受體能阻斷攻擊性侵略行為(Ferris等人，1999)。由于Mox顯著地抑制攻擊性侵略行為，因此猜測其是通過與一種或兩種這些受體相互作用而行使活性的。為了驗證這種猜測，在測試競爭性結合V1A受體的膜結合測定(Ferris等人，1994)和測試競爭性5HT1A受體的受體放射自顯影測定(Ferris等人，1999)中測試Mox。1μM濃度的拉氧頭孢沒有顯著地代替?zhèn)}鼠肝臟膜制備物中的I125HO-LVA(后葉加壓素配體)結合。類似地，Mox不能有效地減少I125DPAT(血清素配體)與倉鼠腦組織切片的特異性結合?？偨Y這些數(shù)據(jù)表明，拉氧頭孢不與倉鼠中的后葉加壓素V1A和血清素5HT1A受體直接相互作用。這表明，拉氧頭孢是通過改變其它神經(jīng)化學途徑來影響行為。測試氨基酸、腎上腺素能、血清素能、和多巴胺能受體及其轉運蛋白通過NOVASCREEN—按照Hanover，Maryland的一種收縮研究組織在36個不同結合測定中測試拉氧頭孢。對于在下頁列出的測定，以100nM和一式兩份樣本測試拉氧頭孢。之所以選擇這些測定是因為它們各自的受體或轉運蛋白在精神病的病生理學中起作用。在任一這些結合測定中，拉氧頭孢沒有任何顯著作用。測試促腎上腺皮質素釋放激素受體促腎上腺皮質素釋放激素(例如在下頁顯示的CRH或CRF)是調(diào)節(jié)緊張的關鍵神經(jīng)激素。因為Mox抑制沖動、侵略行為、和焦慮，同時促進學習和記憶，并且可減輕緊張。出于該原因，在CRF結合測定中通過NOVASCREEN測試Mox。在該測定中，100nM濃度的拉氧頭孢沒有任何作用?？偨Y這些數(shù)據(jù)表明，拉氧頭孢不直接與涉及侵略行為和精神病的病生理的許多受體和轉運蛋白相互作用。這有三種可能的作用機制1)與未篩選的已知受體例如組氨酸、乙酰膽堿、和其它神經(jīng)肽相互作用，2)與未知或“孤立受體”相互作用，或3)與改變腦化學環(huán)境的CNS中的蛋白酶解酶(例如NAALAD酶)相互作用。XII.驗定作用機制測試肽基聚糖前體肽對于攻擊性侵略行為的作用原理β-內(nèi)酰胺抗生素的立體化學與?；?D-丙氨酰基-D-丙氨酸—細菌蛋白酶解酶的天然底物類似。據(jù)假定，該結構的特征使得β-內(nèi)酰胺抗生素能夠作為競爭性底物來阻斷酶活性。為了驗證該假設，在倉鼠居住者/侵入者模型中測試?；?D-丙氨酰基-D-丙氨酸的類似物肽基聚糖前體肽(Nieto和Perkins1971；Zeiger和Maurer，1973)的抗侵略行為作用。方法從SigmaChemical獲得肽基聚糖前體肽Ala-D-γ-Glu-Lys-D-Ala-D-Ala(PPP)，在DMSO中重新配制，并在0.9％NaCl中稀釋至約2mM的終濃度。用戊巴比妥鈉(50mg/kg)將動物麻醉，植入目標是側室的微注射導管，在測試前讓動物恢復2天。在測試的當天，給動物(n＝6)注射約1mg/kg劑量(體積為1μl)的載體(2％DMSO的0.9％NaCl溶液)或PPP。注射后60分鐘，再測試動物對于放置在其飼養(yǎng)籠子中的較小侵入者的攻擊性侵略行為。2天后，再測試動物，并顛倒治療順序。結果肽基聚糖前體肽顯著地延長了咬的潛伏時間(p＜0.05)，并且減少了在10分鐘觀察期間內(nèi)的咬的次數(shù)(p＜0.05)(附圖15)。對于接觸時間和脅腹標志，在治療之間沒有顯著差異(附圖15)。測試肽基聚糖前體肽對嗅覺辨別的影響給6只動物腦室內(nèi)注射載體或1mg/kgPPP，并通過測定其找到隱藏的向日葵籽所花費的時間來測試其嗅覺辨別力(附圖16)。注射是等衡的，每只動物接受各種治療。在測試前，將動物禁食24小時。注射60分鐘后，將動物暫時從它們的飼養(yǎng)籠子里取出來，把6粒向日葵籽埋藏在位于一個角落中的褥草下面。將動物放回它們的飼養(yǎng)籠子中，在5分鐘的觀察期間內(nèi)，通過它們找到向日葵籽所花費的時間來進行評價。與載體相比，用PPP治療的動物找到向日葵籽所用的時間顯著減少(p＜0.05)?？偨Y將肽基聚糖前體肽直接注射到倉鼠腦中，產(chǎn)生了與外周注射Mox相同的行為結果。這兩種藥物和兩種給藥途徑都顯著地減輕了侵略行為，同時沒有改變運動原活動的社會興趣，即接觸時間和脅腹標志。此外，該前體肽類似地達到了可能是篩選β-內(nèi)酰胺抗生素的最簡單和最有效的行為測定的嗅覺辨別力的提高效果。這些發(fā)現(xiàn)表明，β-內(nèi)酰胺是通過下述途徑來影響行為的1)直接作用于腦，和2)模擬?；?D-丙氨?；?D-丙氨酸肽部分。雖然棒酸含有β-內(nèi)酰胺環(huán)，并且在結構上與青霉素和頭孢菌素類似，但是其具有弱的抗菌活性，沒有作為抗生素的任何治療價值。然而，當與一些β-內(nèi)酰胺抗生素例如替卡西林(Timentin)聯(lián)合施用時，棒酸可延伸抗生素的作用譜并提高抗生素的活性(AHFS，1991)。該協(xié)同作用可能是由于棒酸具有細菌β-內(nèi)酰胺酶(其天然降解β-內(nèi)酰胺抗生素并使其失活)競爭性抑制劑的作用(Brown等人，1976；Reading和Cole1977)。棒酸在美國棒酸可商購獲得，但是僅以與其它藥物固定組合的形式市售。常規(guī)處方藥物Timentin一般是以200-300mg/kg/天(按替卡西林的含量計)的劑量靜脈內(nèi)施用，這相當于約7-10mg/kg/天的棒酸劑量(AHFS，1991)。沒有任何報道表明以該劑量施用的棒酸有副作用或禁忌癥(Koyu等人，1986；Yamabe等人，1987)。下文給出的數(shù)據(jù)表明，10ng-10μg/kg或比抗菌適應征用量低1000-1,00,000倍的劑量的棒酸可改變CNS活性和行為。棒酸自身在口服時是有活性和穩(wěn)定的。生物利用度約為64-75％(Davies等人，1985；Bolton等人，1986)，消除半衰期略低于2小時。峰值血漿濃度在攝取后45分鐘-3小時出現(xiàn)(Bolton等人，1986)，血漿半衰期在2小時以上(Nakagawa等人，1994)。分布體積約為15升，這表明棒酸主要限制在細胞外液體中(Davies等人，1985)。CSF/血漿比例為約0.25，這表明棒酸易于穿越血腦屏障(Nakagawa等人，1994)。用棒酸進行的行為實驗I.棒酸在焦慮的種籽尋找模型中的劑量反應原理棒酸(CLAV)在結構上與β-內(nèi)酰胺抗生素相似。篩選具有CNS活性的β-內(nèi)酰胺的最有效和簡單的生物測定是金色倉鼠種籽尋找焦慮模型。簡言之，將倉鼠禁食過夜。在接下來的一天，如下所述將它們暴露于另外的緊張下把它們從其飼養(yǎng)籠子中取出了，并在新的環(huán)境中放幾分鐘。該操作刺激了緊張激素皮質醇的釋放(附圖37)。在它們不在飼養(yǎng)籠子期間，將向日葵籽隱藏在一個角落的褥草下面。當被放回飼養(yǎng)籠子中時，倉鼠通常沿著墻壁爬行1-2分鐘后才平靜下來、定居和吃種籽。然而，用苯并二氮雜類抗焦慮劑利眠寧治療的動物在不到10秒鐘內(nèi)找到了種籽。用拉氧頭孢和其它β-內(nèi)酰胺抗生素治療后，找到種籽所用的時間也從數(shù)分鐘降至數(shù)秒鐘。實驗方案將得自HarlanSprague-DawleyLaboratories(Indianapolis，IN)的雄性敘利亞金色倉鼠(Mesocricetusauratus)(120-130g)在有機玻璃籠子(24cm×24cm×20cm)中單獨飼養(yǎng)，保持相反的光照黑暗循環(huán)(14L10D；在1900點開始光照)，并提供食物和水讓它們自由攝取。在6組倉鼠(4-8/組)中測試一系列濃度的CLAV(鹽水載體、0.1、1.0、10、100、1,000ng/kg)(附圖25)。所有行為測試都是在暗淡的紅色光照射下的24小時生理節(jié)奏循環(huán)的黑暗期進行的。在測試前，將所有動物禁食20-24小時。腹膜內(nèi)(IP)注射藥物90分鐘后，將動物從其飼養(yǎng)籠子中取出了，在臨時籠子中放2分鐘。在此期間，把6粒向日葵籽埋藏在位于飼養(yǎng)籠子一個角落中的褥草下面。將動物隨機地朝著任何一個空角落放回它們的飼養(yǎng)籠子中，并在5分鐘的觀察期間內(nèi)，記錄它們找到向日葵籽所花費的時間。依次用單向ANOVA和Scheffe’s后hoc檢驗分析所記錄的時間。檢驗假定的等方差(Hartley’sF-max＝2.1p＞.05)。結果對于找到向日葵籽所花費的時間，在劑量之間有顯著差異(F(5，30)＝10.0；p＜0.0001)。10ng及10ng以上劑量的CLAV將找到向日葵籽所花費的時間顯著地(p＜0.01)減少至少于8.0秒，而對于鹽水載體，找到向日葵籽所花費的時間平均為104秒。1ng/kg的劑量與載體對照沒有顯著差異。總結數(shù)據(jù)表明，在該種籽尋找測試中，以10ng/kg體重劑量施用的CLAV具有最大效力。在這些實驗中使用的成年雄性倉鼠的體重約為125g。因此，給這些動物施用約1.25ngCLAV。CLAV具有約為細胞外體液體積的分布體積。瘦肉的細胞外水分含量約為22％。1.25ngCLAV在27.5ml水中的濃度為0.045ng/ml或約200pM(CLAV鉀鹽的分子量約為240)。因為CSF/血漿比例為0.25，所以估計在腦中的濃度為約50pM。該種籽尋找焦慮模型似乎具有經(jīng)驗有效性(McKinney1989)，即用于治療臨床焦慮癥的藥物例如苯并二氮雜在動物模型中是有效的。然而，對于多種抗焦慮和無效的藥物，在使用種籽尋找焦慮模型之前，必須進行篩選以評價假陰性和假陽性的發(fā)生率。因此，需要在傳統(tǒng)高架正迷宮中驗證CLAV的抗焦慮活性。II.在高架正迷宮中中測試棒酸高架正迷宮是為了在大鼠中篩選抗焦慮以及焦慮誘導藥物作用而開發(fā)的(Pellow等人，1985)。已經(jīng)在行為上、生理上、和藥理上驗證了該方法。正迷宮由兩個開放的臂和兩個封閉的臂構成。大鼠天生地進入開放臂的傾向小于進入封閉臂的傾向，并且在開放臂中停留的時間要少得多。與限制在封閉臂中相比，限制在開放臂中會帶來更明顯的焦慮相關性行為以及更高的緊張激素水平。臨床有效的抗焦慮藥物例如利眠寧或安定顯著地增加了在開放臂中停留的時間百分比以及進入開放臂中的次數(shù)。與之相反，焦慮誘導藥物例如可立寧或安非他明會減少進入開放臂中的次數(shù)以及在臂臂中停留的時間。實驗方法將重250-300g的雄性Wistar大鼠成群地在標準12∶12光照-黑暗循環(huán)(在早晨8點開始光照)中飼養(yǎng)，并提供食物和水讓其隨意獲得。正迷宮由2個開放臂構成，開放臂長50cm，寬10cm，并具有高40cm、由干凈的有機玻璃制成的壁。兩個封閉臂具有相同尺寸，但是具有頂蓋。將封閉臂的有機玻璃漆成黑色。每對臂彼此相對排列以形成正迷宮。將迷宮提高至50cm高度。給動物IP注射1.0μg/kgCLAV、50或載體對照(注射體積為0.3ml)90分鐘后，在正迷宮中測試18只動物。治療順序是等衡的，注射間隔至少48小時。在實驗開始時，將動物放置在一個開放臂的末端。在5分鐘的觀察期間，根據(jù)動物進入封閉臂的潛伏時間、在封閉臂中停留的時間、以及第一次進入封閉臂后進入開放臂中的次數(shù)來評價動物。該實驗產(chǎn)生重復測定表。依次用雙向重復測定ANOVA和Bonferroni后hoc檢驗來比較治療之間的數(shù)據(jù)。結果對于進入黑暗的潛伏時間，在治療之間有顯著差異(F(1，18)＝8.53p＜0.01)。當用CLAV治療時(p＜0.05)，動物在初始開發(fā)光位置停留的時間比用載體治療的動物長(附圖26)。對于在開放臂中停留的時間，治療之間有非常顯著的差異(F(1，18)＝144；p＜0.0001)(附圖26)。與載體相比，用CLAV治療使得在開放臂中停留的時間顯著延長(p＜0.01)。對于進入開放臂中的次數(shù)，治療之間有顯著差異(F(1，18)＝44.0p＜0.0001)，與載體相比，用CLAV治療(p＜0.01)使得進入光照的開放臂中的運動增加了(附圖26)。總結這些數(shù)據(jù)表明，以1μg/kg劑量施用的CLAV在正迷宮中有抗焦慮活性。這些數(shù)據(jù)是激動人心的；然而，許多抗焦慮劑例如苯并二氮雜會抑制運動原活動。因為用CLAV治療的動物用了較長時間從有光照的開放臂中移動到黑暗、保護的封閉臂中，因此可能有人提出該β-內(nèi)酰胺化合物沒有減輕焦慮，相反，其對動物有鎮(zhèn)靜作用并妨礙其運動。為了驗證這種可能性，需要在開放區(qū)域中測試CLAV對一般運動原活動的影響。III.在開放區(qū)域中的運動原活動實驗方案進行完在第II節(jié)中描述的正迷宮測試后，立即在“開放區(qū)域”中測試動物的一般運動原活動。將動物置于大的、清潔的、沒有任何褥草的有機玻璃籠子(48×32×40cm)中。通過在籠子下面的帶子將該開放區(qū)域劃分成相等的象限。通過計數(shù)1分鐘內(nèi)越過象限的次數(shù)來評價動物的運動原活動。在CLAV與載體治療之間，開放區(qū)域活動方面沒有任何顯著差異(附圖27)。總結在該開放區(qū)域測試中，沒有任何證據(jù)表明CLAV抑制了運動原活動。在另一行為實驗—第VII節(jié)中報道的脅腹標志證實這個發(fā)現(xiàn)。脅腹標志是倉鼠用來散播信息激素以進行嗅覺交流的復雜的刻板的運動原行為(附圖39)。脅腹標志不受CLAV治療的影響。與更常規(guī)的苯并二氮雜抗焦慮藥物相比，該β-內(nèi)酰胺化合物具有不抑制運動原活動的優(yōu)點。然而，CLAV的抗焦慮活性能比得上臨床處方藥物苯并二氮雜嗎？IV.在正迷宮中的棒酸vs利眠寧實驗方案利眠寧(Librium)是常用的抗焦慮處方藥物，其已經(jīng)在臨床前實驗中進行過充分研究。在正迷宮中的有效抗焦慮劑量是10-25mg/kg(Lister1987；File和Aranko1988；Shumsky和Lucki1994)。在該劑量范圍內(nèi)，利眠寧(CDP)是鎮(zhèn)靜劑并抑制運動原活動，從而使得需要運動的任何行為測定的解讀很復雜(McElroy等人，1985)。然而，已發(fā)現(xiàn)，隨著在幾天內(nèi)每天反復地施用CDP，動物會對運動原抑制產(chǎn)生耐受(Shumsky和Lucki1994)。因此在這些實驗中，在開始實驗前，每天給大鼠(n＝6)IP注射一次CDP(10mg/kg)，注射7天。雖然CLAV對運動原活動沒有任何影響，但是需要通過每天注射CLAV(100ng/kg)來治療等數(shù)量的大鼠以確保均衡的實驗設計。此外，每天給第3組大鼠(n＝6)注射鹽水載體。使用第II節(jié)報道的實驗，在正迷宮中測試1μg/kg劑量的CLAV。得自第I節(jié)中報道的種籽尋找焦慮測定的數(shù)據(jù)表明，CLAV應當在10ng-1μg/kg的劑量范圍內(nèi)有效。出于該原因，在這些實驗中，以100ng/kg的劑量測試CLAV。結果對于進入黑暗的潛伏時間，在治療之間有顯著差異(F(2，15)＝21.45，p＜0.001)。與載體對照相比，用CLAV和CDP治療的動物進入黑暗的封閉臂中的潛伏時間顯著延長(p＜0.01)(附圖28A)。對于在光照中停留的時間，治療之間也有顯著差異(F(2，15)＝17.14，p＜0.001)。與載體對照相比，用CLAV和CDP治療的動物暴露于開放臂中光照的時間也顯著延長(p＜0.01)(附圖28A)。對于進入開放臂中的次數(shù)，在治療之間沒有任何顯著差異(附圖28B)?？偨Y這些數(shù)據(jù)表明，在高架正迷宮中，CLAV和CDP具有類似的抗焦慮活性。然而，CLAV具有更強的活性，其在比CDP低100,000倍的劑量下有效。此外，CLAV沒有常規(guī)苯并二氮雜類抗焦慮劑所具有的鎮(zhèn)靜、運動原抑制活性。CLAV的抗焦慮作用是即時性的，不需要發(fā)展出耐受性來實現(xiàn)行為效力。然而，需要注意，苯并二氮雜藥物具有另一種不需要的副作用，對于這種副作用，即記憶缺失沒有產(chǎn)生任何耐受(Shumsky和Lucki1994)。例如，安定(Valium)選擇性地削弱短期記憶，并引起長期記憶缺乏(Liebowitz等人，1987；Kumar等人，1987)。因此，需要測試CLAV是否對學習和記憶有任何不良影響。V.在水迷宮中的棒酸和空間記憶Morris水迷宮是為了測試空間記憶而開發(fā)的(Morris，1984)。將水池分成通常稱為北、南、東和西的象限。用奶粉使水池中的水變得不透明。在一個象限中將平臺隱藏在表面之下，平臺的作用是置于水池內(nèi)的嚙齒動物的逃脫途徑。從多個不同起點將動物置于水池的某個地方，記錄動物找到平臺所用的時間，在每個象限中停留的時間百分比，行進的距離和游泳速度。在水池中動物沒有任何視覺或空間線索，并且必須依賴于迷宮外的線索，即放在水池外可被游動的動物看見的物體。經(jīng)過一系列試驗，大鼠發(fā)展了根據(jù)迷宮外線索找到平臺位置的“位置學習”或知識。每天可將平臺移到不同象限中，以使空間記憶與工作記憶結合起來。該方案涉及以前記憶的消退和解答新的空間問題。1.空間航行方法水迷宮由黑色的塑料環(huán)狀水池構成，直徑約為150cm，高約54cm，填充了約35cm水平的用奶粉變得不透明的水。將水池分成4個象限，在西北象限的表面2cm下浸沒著一個直徑為10cm的平臺。將水維持約25℃的溫度。在水池周圍有幾個視覺線索。在水池上面是一個捕捉實驗動物運動的錄像機。使用HVSImage(Hampton，UK)開發(fā)的軟件全自動地收集數(shù)據(jù)。在測試前，使大鼠熟悉水池和置于西北象限中的平臺。在連續(xù)4天中，每天都將動物置于水池中的隨機位點上，并給它們2分鐘來發(fā)現(xiàn)平臺。在測試前1小時，用1.0μg/kgCLAV(n＝9)或載體(n＝9)治療動物。熟悉了試驗后，測試動物的空間航行。測試開始的第一天，平臺在預期的西北象限中。在2分鐘的觀察期間內(nèi)，用錄像機記錄所有行為。將測試動物干燥后，把它們放回到各自的飼養(yǎng)籠子中。在接下去的每一天，將平臺移動到新的象限中，大鼠在不同位置開始?？偸菍⒋笫笾糜谒刂?，并朝著側壁。對于4個象限中的每一個，相對于平臺的開始位點是不同的；然而，在每個象限，平臺總是在相同的相對位置。其位于距離水池側面20cm處，并且在朝著中央的左邊角。依次使用雙向、重復測定ANOVA和Bonferroni后hoc檢驗來比較CLAV與載體治療動物的找到隱藏平臺所用的時間、路徑長度、游泳速度、和象限時間。結果對于發(fā)現(xiàn)平臺所用的時間，藥物治療(F(1，16)＝4.17，p＜0.057)、治療天數(shù)(F(3，48)＝0.51，p＞0.5)或因素間相互影響(F(3，48)＝1.92p＞0.1)沒有任何顯著影響(附圖29)。然而，在第1和4天，用CLAV治療的動物找到平臺所用的時間較少，并且有趨于顯著的趨勢。對于兩種治療(附圖30A和B)，發(fā)現(xiàn)平臺的方案與通過動物在每個象限中停留的時間百分比所判斷的結果類似。對于任一象限，在任一天，治療之間沒有任何顯著差異。對于在任何特定象限中停留的時間百分比，在天數(shù)之間有顯著差異(例如CLAV，北面的象限，F(xiàn)(3，32)＝38.81，p＜.0001)。在某幾天，動物在一些象限中度過了大部分時間。例如，在第1天，相對于其它象限，用CLAV和載體治療的動物都在北面的象限中度過了其大部分時間(p＜.01)。這是可以預計到的，因為它們已經(jīng)通過熟悉過程了解了平臺位于該象限中。對于通過動物在每個象限中停留的時間百分比表示的發(fā)現(xiàn)平臺的狀況，雖然在CLAV和載體之間是類似的，但是有小而明顯的差異。與用載體治療的動物相比，用CLAV治療的動物在正確的象限中度過了更長時間。在第2天，這種差異特別明顯，用CLAV治療的動物在正確(南面)的象限中度過了50％以上的時間(p＜0.01)。用載體治療的動物在正確的象限中度過了不到40％的時間，此時間與在其它象限中度過的時間無顯著差異。在第4天，用CLAV和載體治療的動物都在正確的象限(西面)中度過了大部分時間。在第4天，對于這兩種治療，該方案都表現(xiàn)出良好的空間、工作和程序記憶。對于發(fā)現(xiàn)平臺所經(jīng)過的距離，治療沒有顯著影響(F(1，16)＝8.40，p＞0.01)。在第1天，在尋找平臺期間用CLAV治療的動物游動的距離比用載體治療的動物短(p＜0.05)(附圖31)。對于游泳速度，在CLAV與載體之間沒有任何顯著差異(附圖32)。2.線索航行方法在空間航行最后一天(第4天)的下一天，測試動物的線索航行。在這些測試中，將平臺升至水面以上。測試前一小時，用CLAV或鹽水載體治療動物。對于線索航行，在空間航行期間用CLAV治療的動物也用CLAV治療。給動物進行一系列2分鐘的試驗，試驗間隔45分鐘。對于每個試驗，將平臺移至不同象限。線索航行實驗與空間航行相同，除了平臺是可以看見的，并且在一天內(nèi)，測試是進行5個連續(xù)試驗。在所有測試期間，記錄動物找到平臺所用的時間、在每個象限停留的時間百分比、游動的距離以及游泳速度。結果在線索航行期間，對于找到平臺所用的時間，治療(F(1，16)＝0.553p＞0.1)、試驗(F(4，64)＝0.9745，p＞0.1)或因素間相互影響(F(4，64)＝0.7433，p＞0.5)沒有任何顯著影響(附圖33)。就象空間航行中一樣，對于兩種治療(附圖34A和B)，發(fā)現(xiàn)平臺的方案與通過動物在每個象限中停留的時間百分比所判斷的結果非常類似。對于任一象限，在任一個試驗，治療之間沒有任何顯著差異(例如試驗1，北面的象限，F(xiàn)(1，16)＝0.099，p＞0.5)。在大多數(shù)試驗中，對于任一治療，在任何特定象限中停留的時間百分比有顯著差異，尤其是CLAV最明顯。對于發(fā)現(xiàn)平臺所游動的距離，在用CLAV與載體治療的動物之間沒有顯著差異(F(1，16)＝0.23p＞0.5)(附圖35)。雖然治療對游泳速度沒有任何顯著重要影響(F(1，16)＝0.926，p＞0.1)，但是有顯著的試驗影響(F(4，64)＝7.87，p＜0.001)和因素間相互影響(F(4，64)＝2.56，p＜0.05)。在試驗4(p＜0.01)和試驗5(p＜0.05)，兩種治療，特別是CLAV治療都表現(xiàn)出降低的游泳速度。這可能反映了這樣的事實，它們知道了在哪兒尋找如附圖34A和B所示的平臺。總結當在Morris水迷宮中進行空間和線索航行測試時，用棒酸治療的動物沒有表現(xiàn)出減弱學習和記憶。實際上，在空間和線索航行中，對于找到隱藏平臺所用的時間、和在正確平臺中度過的時間百分比，與載體相比，用CLAV治療的動物表現(xiàn)出更好的表現(xiàn)。這些數(shù)據(jù)表明，CLAV的抗焦慮作用不伴有干擾學習和記憶(苯并二氮雜抗焦慮劑伴有這種不利作用)。作用機制實驗VI.棒酸和緊張反應原理在緊張狀態(tài)下，即在種籽發(fā)現(xiàn)測定中不給予食物并置于新的環(huán)境中，和在高架正迷宮中暴露于光照且新的環(huán)境中，而不改變運動元活性或認識功能，CLAV能夠減輕焦慮是重要發(fā)現(xiàn)。如果我們對其作用機制有更清楚的了解，可拓寬CLAV作為抗焦慮劑以及治療多種情感障礙的治療應用。例如，CLAV能通過抑制天然緊張反應來改變焦慮嗎？常規(guī)處方藥物苯并二氮雜類抗焦慮劑既阻斷激素皮質醇的正常24小時生理節(jié)奏釋放，也阻斷緊張介導的皮質醇釋放(Gram和Christensen，1986；Petraglia等人，1986；Hommer等人，1986)。實驗方案將成年雄性倉鼠在新環(huán)境中放置5分鐘會引起顯著的、可預測到的皮質醇血液水平增加(Weinberg和Wong1986)。使用該新測試來評價CLAV對緊張引起的皮質醇釋放的影響。IP施用CLAV(10μg/kg，n＝6)或鹽水載體(n＝4)來治療2組雄性倉鼠。使用不接受任何治療或隔離緊張的第3組(n＝4)作為基礎水平皮質醇的對照。治療60分鐘后，將動物從其飼養(yǎng)籠子中取出了，并在新的籠子中放置5分鐘。通過斷頭術處死動物，收集軀干的血液來放射免疫測定皮質醇。在相反的光照∶黑暗條件下測試所有動物4小時，然后進入黑暗循環(huán)。依次用單向ANOVA和FisherPLSD后hoc檢驗來比較數(shù)據(jù)。結果對于皮質醇的緊張釋放，在治療之間有顯著差異(F(2，11)＝10.03p＜0.01)。與未治療的未誘導緊張的對照相比，載體(p＜0.05)與CLAV(p＜0.01)表現(xiàn)出2倍的皮質醇血液水平(附圖37)?？偨Y數(shù)據(jù)表明，β-內(nèi)酰胺抗焦慮劑CLAV對由于暴露于新環(huán)境中產(chǎn)生輕度緊張而釋放的皮質醇不具有任何表面影響。該詳情與沒有運動原抑制和認知損害結合在一起，使得CLAV成為獨特的抗焦慮劑，并提出了一種高度特異性的新的作用機制。初看起來，有人可能認為抑制緊張反應是有利的。實際上，有人提出腎上腺皮質機能亢進與抑郁癥的病生理有關(Sacher等人，1973)。導致腎上腺機能障礙、活動過強的長期精神緊張可危及生命。然而，反應性下丘腦-垂體-腎上腺軸對于正常生理和行為是至關重要的。如果不適當?shù)蒯尫牌べ|醇，通常輔助動物適應環(huán)境的緊張性刺激可能是致命的。VII.領土或攻擊性侵略行為原理在更復雜的行為模型中繼續(xù)研究CLAV的CNS活性可有助于弄清楚其作用機制。例如，動物之間的敵對社會相互作用需要冒險的評定、交流和激動行為來解決領土、配偶、食物等的糾紛。神經(jīng)遞質血清素和后葉加壓素是動物和人體中CNS組織以及表現(xiàn)這些行為的基本物質(Ferris等人，1997；Coccaro等人，1998；Ferris2000)。為此，測試CLAV對領土或攻擊性侵略行為，即防衛(wèi)居所不被侵入者侵犯的影響。激動行為可分為攻擊性或防衛(wèi)性侵略行為(Blanchard和Blanchard，1977；Adams，1978；Albert和Walsh，1984)。攻擊性侵略行為的特征是，侵略者向對手發(fā)起攻擊，而防衛(wèi)性侵略行為缺少主動接近。這兩種侵略行為都有它們各自獨特的神經(jīng)行為系統(tǒng)。引起攻擊性和防衛(wèi)性攻擊的刺激是不同的，因為它們是伴隨每一激動反應的行為后果。雖然已經(jīng)由動物模型收集了支持獨特攻擊性和防衛(wèi)性神經(jīng)網(wǎng)絡概念的大量經(jīng)驗數(shù)據(jù)，但是在人侵略行為中有值得關注和令人感興趣的類似性，這表明有類似神經(jīng)組織(Blanchard，1984)。攻擊性侵略行為易于使用以居住/侵入式樣測試的雄性金色倉鼠—一種在防衛(wèi)居所概念上建立的攻擊性侵略行為模型來進行(Ferris和Potegal1988)。將不熟悉的雄性倉鼠置于另一雄性倉鼠的飼養(yǎng)籠子中，引起居住倉鼠的明確的激動行為，包括攻擊性侵略行為。實驗方案倉鼠是夜間活動動物，因此所有行為測試都是在暗淡的紅色光照射下的黑暗期的前4個小時進行。記錄居住動物的攻擊性侵略行為，例如咬侵入者的潛伏時間，咬的總次數(shù)，與侵入者接觸的總時間，和在10分鐘測試期間的脅腹標志(Ferris和Potegal，198)。脅腹標志是嗅覺交流的形式，其中倉鼠拱起其背部，并靠著環(huán)境中的物體摩擦產(chǎn)生性外激素的脅腹腺(Johnson，1986)。在攻擊性遭遇期間，脅腹標志頻率大大增加，并且在發(fā)起并贏得戰(zhàn)斗的優(yōu)性動物中特別顯著(Ferris等人，1987)。給5只雄性金色倉鼠(130-140g)IP注射CLAV(200μg/kg)和鹽水載體(體積約為0.2ml)。在小規(guī)模實驗中，發(fā)現(xiàn)以1.0μg/kgIP施用的CLAV對侵略行為沒有任何影響。因此需要在較高濃度測試CLAV，但是該濃度在仍然是侵略行為藥理實驗所能接受的劑量范圍內(nèi)。載體和CLAV治療是等衡和隨機的，所有這5只動物接受間隔至少48小時的每種治療。治療90分鐘后，在10分鐘的觀察期間內(nèi)測試動物。用雙向ANOVA分析潛伏時間和接觸時間。通過Wilcoxon匹配對有正負號排序的檢驗來來分析非參數(shù)數(shù)據(jù)，即咬的次數(shù)和脅腹標志。結果對于咬侵入者的潛伏時間，雖然藥物治療沒有任何顯著的主要影響(F(1，3)＝7.40，P＜0.07)，但是有趨于顯著的趨勢(附圖38)。對于與侵入者接觸的時間，藥物治療沒有任何顯著的主要影響(F(1，3)＝2.85，p＞0.1)(附圖38)。對于咬侵入者的次數(shù)，在藥物治療之間有顯著差異(T＝3.0，p＜0.05，N＝8)。對于用載體治療的動物，咬的平均次數(shù)為13次，而用CLAV治療使得咬的平均次數(shù)降至6次(附圖39)。對于居住動物的脅腹標志行為，藥物治療沒有任何顯著影響(T＝4.0，p＞0.1，N＝5)(附圖39)?？偨Y棒酸具有較小程度的抗侵略行為或serenic-樣特性。Serenic是用于治療沖動和暴行的藥物(Olivier和Mos，1991)。Serenic應該抑制攻擊性侵略行為，同時不干擾社會、食欲和認知行為。CLAV沒有改變對侵入者的社會興趣，即接觸時間。eltoprazine—一種第一代serenics的開發(fā)之所以被放棄了，部分是因為據(jù)發(fā)現(xiàn)其能增加動物的恐懼和焦慮(Olivier等人，1994)。CLAV的強效抗焦慮活性不包括這種可能性。VIII.與谷氨?；入拿傅南嗷プ饔肅LAV對β-內(nèi)酰胺酶有非常高的結合親和力。有人假定存在著這些細菌酶的哺乳動物同源物，并且這些同源蛋白參與CNS中神經(jīng)遞質水平的調(diào)控。已經(jīng)克隆了大腸桿菌TEMβ-內(nèi)酰胺酶并測定了其序列，還結晶了這些酶并測定了其活性位點基元。根據(jù)這些數(shù)據(jù)，已設計了可適應CLAV的四種在β-內(nèi)酰胺酶上的公認結合位點，即活性位點I、II、III和IV。這些活性位點、序列位置以及氨基酸(AA)序列如下所述活性位點I從N-末端開始計的上游的35AA′sSTTK活性位點II從STTK基元開始計的上游的57AA′sSGC、SGN、或SAN活性位點III從SGC基元開始計的上游的111AA′sKTG活性位點IV從SGC基元開始計的上游的41AA′sENKD通過篩選在這些β-內(nèi)酰胺酶結合位點與哺乳動物酶之間的氨基酸序列同源物，Revaax科學家在腦中鑒定了CLAV能以類似于結合β-內(nèi)酰胺酶的方式結合的酶系統(tǒng)。該酶谷氨?；入拿?N-乙?；吝B接，酸性二肽酶)或NAALAD酶(Pangalos等人，1999)有調(diào)節(jié)谷氨酸能神經(jīng)傳遞路徑的作用，預計其作用表現(xiàn)為諸如侵略行為、記憶/認知、以及焦慮的行為后果。因為β-內(nèi)酰胺酶的公認的活性位點與人和大鼠NAALAD酶中的保守序列幾乎完全重疊，所以猜測CLAV是通過抑制NAALAD酶活性而影響行為的。β-內(nèi)酰胺酶與NAALAD酶之間的重疊序列類似性如下所示活性位點Iβ-內(nèi)酰胺酶從N-末端開始計的上游的35AA′sSTTKNAALAD酶從N-末端開始計的上游的38AA′sSTQK活性位點IIβ-內(nèi)酰胺酶從STTK基元開始計的上游的57AA′sSGC、SGN、或SANNAALAD酶從STQK基元開始計的上游的59AA′sSFG活性位點IIIβ-內(nèi)酰胺酶從SGC基元開始計的上游的111AA′sKTGNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的110AA′sKLG活性位點IVβ-內(nèi)酰胺酶從SGC基元開始計的上游的41AA′sENKDNAALAD酶從SFG基元開始計的上游的41AA′sERGV棒酸以15-34nM的濃度抑制革蘭氏陰性β-內(nèi)酰胺酶，而在種籽尋找焦慮模型中CLAV在10ng/kg的劑量有效(pg3)。如果NAALAD酶是與β-內(nèi)酰胺酶同源的人體酶，則預計CLAV是高親和性底物。IX.阻斷NAALAD酶活性后的種籽尋找原理和實驗方案假定在種籽尋找測定中CLAV是通過阻斷腦中NAALAD酶活性而起抗焦慮作用的。如果該觀念是正確的，則預計已知能阻斷NAALAD酶的藥物應當也能提高種籽尋找能力。為此，用N-乙酰基-β-天冬氨?；?谷氨酸(β-NAAG)—一種競爭性NAALAD酶抑制劑(Serval等人，1992)治療動物，并在種籽尋找焦慮模型中測試。除了一個顯著的不同外，該實驗與在第I節(jié)中描述的實驗類似。因為β-NAAG不易于穿越血腦屏障，必須將其直接注射到側腦室中，在側腦室中其經(jīng)由腦室系統(tǒng)被腦脊液攜帶著分布在腦中。在體積為1μl的鹽水ICV中給予3ng劑量的β-NAAG(FW304)。成年倉鼠腦重量平均為約1.2g，其中22％是細胞外液體。估計β-NAAG濃度為11ng/ml或36nM。如上所述分別將兩組、每組6只動物禁食過夜，在接下來的一天測試。一組用β-NAAG治療，另一組用鹽水載體治療，1小時后，記錄找到隱藏的向日葵籽所用的時間。使用用于未配對數(shù)據(jù)的Studentt-檢驗來進行統(tǒng)計學比較。結果對于找到向日葵籽所用的時間，在治療之間有顯著(p＜0.001)差異(附圖40)。實際上，在微注射鹽水載體的6只動物當中，沒有一只在5分鐘的觀察期間內(nèi)找到了向日葵籽。然而，3天后，當給這些相同動物微注射β-NAAG(3ng/μl)并測試種籽尋找時，它們找到向日葵籽所用的時間平均為21.8±9.7秒?？偨Y這些數(shù)據(jù)表明，β-NAAG—一種特異性NAALAD酶抑制劑可顯著地減少找到隱藏的向日葵籽所用的時間—CLAV也具有這樣的生物活性。因為β-NAAG在種籽尋找焦慮模型中有活性，所以關于β-NAAG與CLAV具有相同作用機制的假定不能被否認。根據(jù)這些數(shù)據(jù)，可將該假定延伸，以預測β-NAAG和CLAV對一系列生物和行為指標表現(xiàn)出類似影響。為此，在如第VII節(jié)所述的居住動物侵入者模型中測試動物的攻擊性侵略行為。如上所述，當以高濃度施用時，CLAV僅對攻擊行為起較小程度影響。雖然10ng/kg劑量的CLAV可提高種籽尋找能力，但是其在高達200μg/kg的劑量下對攻擊性侵略行為僅有較小程度影響。如果β-NAAG和CLAV具有相同作用機制，則β-NAAG應當對侵略行為有小的影響或者沒有影響。X.NAALAD酶阻斷攻擊性侵略行為的作用實驗方案在該實驗中測試的動物是在第IX節(jié)中使用的動物。種籽尋找測定結束后，將β-NAAG(n＝6)和鹽水載體(n＝6)治療的動物保持在其飼養(yǎng)籠子中，并放入較小的雄性侵入者。在10分鐘觀察期間內(nèi)，記錄居住動物的咬的潛伏時間、咬的次數(shù)、接觸時間和脅腹標志。用Studentt-檢驗比較治療之間的咬的潛伏時間和接觸時間。用Mann-Whitney比較β-NAAG與載體的非參數(shù)指標咬的次數(shù)和脅腹標志。結果對于攻擊性侵略行為的任何指標，在β-NAAG與載體治療的動物之間都沒有任何顯著差異(附圖41和42)?？偨Y從在居住動物侵入者模型中測定的結果可看出，用β-NAAG阻斷NAALAD酶活性沒有改變攻擊性侵略行為。該發(fā)現(xiàn)與小時觀念是一致的即CLAV和β-NAAG具有相同機制—阻斷NAALAD酶活性。權利要求1.治療需要這種治療的患者中選自下列的行為障礙的方法侵略性精神障礙、強迫觀念與行為精神障礙、焦慮癥、抑郁癥、或ADHD，所述方法包含給所述患者施用有效量的能抑制所述患者腦中一種或多種神經(jīng)原性肽酶的肽酶活性的化合物的步驟。2.權利要求1的方法，其中所述行為障礙是抑郁癥或強迫觀念與行為精神障礙。3.權利要求2的方法，其中施用作為抗侵略行為劑的肽酶抑制劑來控制患有孤獨癥、圖雷特氏綜合征、精神發(fā)育遲緩、精神病、躁狂癥、老年性癡呆的人類患者或有人格障礙以及不適當侵略行為史的患者中的沖動和暴力行為。4.權利要求2的方法，其中給患有包括焦慮癥在內(nèi)的行為障礙的人類患者施用所述化合物。5.權利要求2的方法，其中給患有包括ADHD在內(nèi)的行為障礙的人類患者施用所述化合物。6.權利要求1的方法，其中所述肽酶抑制劑是β-內(nèi)酰胺化合物。7.權利要求6的方法，其中所述β-內(nèi)酰胺化合物是β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。8.權利要求7的方法，其中所述肽酶抑制劑選自青霉素類、頭孢菌素類、苯氧乙基青霉素鉀類、1-氧雜-1-去硫雜cephems、clavams、clavems、azetidinones、carbapenams、carbapenems、和carbacephems。9.權利要求9的方法，其中所述肽酶抑制劑是頭孢菌素的1-氧雜-1-去硫雜類似物。10.權利要求1的方法，其中所述化合物是β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。11.權利要求1的方法，其中還包含施用有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑的步驟。12.權利要求6或7的方法，其中將肽酶抑制劑與有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑聯(lián)合施用。13.權利要求1的方法，其中所述肽酶抑制劑是β-內(nèi)酰胺抗生素，并且其施用給患者的量低于能提供抗菌有效血液水平的抑制劑的有效量。14.權利要求1或3的方法，其中所述肽酶抑制劑是下式所示化合物其中R是氫、鹽形成基團或活性酯形成基團；R1是氫或C1-C4烷氧基；T是C1-C4烷基、鹵素、羥基、O(C1-C4)烷基、或-CH2B，其中B是親核試劑BH的殘基，且酰基是有機酸?；鵒H的殘基。15.權利要求14的方法，其中所述化合物是拉氧頭孢或氟氧頭孢。16.權利要求1的方法，其中所述肽酶抑制劑是谷氨酸的2-任選取代的氧雜-2-去氨基類似物、谷氨酸的2-任選取代的碳(carba)-2-去氨基類似物、或谷氨酸的N-取代衍生物。17.權利要求16的方法，其中還包含施用有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑的步驟。18.提高需要這種治療的患者的認知功能的方法，所述方法包含給所述患者施用有效量的能抑制所述患者腦中一種或多種神經(jīng)原性肽酶的肽酶活性的化合物的步驟。19.權利要求18的方法，其中溫血脊椎動物是患有癡呆或遺忘癥的人類患者。20.權利要求18的方法，其中溫血脊椎動物是患有阿爾茨海默氏病的人類患者。21.權利要求18的方法，其中所述肽酶抑制劑是β-內(nèi)酰胺化合物。22.權利要求21的方法，其中所述β-內(nèi)酰胺化合物是β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。23.權利要求21的方法，其中所述肽酶抑制劑選自青霉素類、頭孢菌素類、苯氧乙基青霉素鉀類、1-氧雜-1-去硫雜cephems、clavams、clavems、azetidinones、carbapenams、carbapenems、和carbacephems。24.權利要求23的方法，其中所述肽酶抑制劑是頭孢菌素的1-氧雜-1-去硫雜類似物。25.權利要求18的方法，其中所述抑制劑還包含施用有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑的步驟。26.權利要求23的方法，其中將肽酶抑制劑與有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑聯(lián)合施用。27.權利要求18的方法，其中所述肽酶抑制劑是β-內(nèi)酰胺抗生素，并且其施用給患者的量為至少50μg/kg，但是低于能提供抗菌有效血液水平的抑制劑的有效量。28.權利要求18的方法，其中所述肽酶抑制劑是下式所示化合物其中R是氫、鹽形成基團或活性酯形成基團；R1是氫或C1-C4烷氧基；T是C1-C4烷基、鹵素、羥基、O(C1-C4)烷基、或-CH2B，其中B是親核試劑BH的殘基，且?；怯袡C酸?；鵒H的殘基。29.權利要求28的方法，其中所述化合物是拉氧頭孢或氟氧頭孢。30.權利要求29的方法，其中抑制劑還包含施用有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑的步驟。31.權利要求18的方法，其中所述肽酶抑制劑是谷氨酸的2-任選取代的氧雜-2-去氨基類似物、谷氨酸的2-任選取代的碳(carba)-2-去氨基類似物、或谷氨酸的N-取代衍生物。32.權利要求34的方法，其中抑制劑還包含施用有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑的步驟。33.治療患有或趨于患有至少部分特征是腦或其它神經(jīng)組織中細胞外谷氨酸濃度異常的病癥的人類患者的方法，所述方法包含給所述患者施用組合物的步驟，其中所述組合物含有能夠抑制青霉素結合蛋白或細菌源的β-內(nèi)酰胺酶活性的化合物，其中所述組合物以能夠有效地預防或減輕所述病癥的破壞或癥狀的量施用。34.權利要求33的方法，其中所述化合物是β-內(nèi)酰胺化合物。35.權利要求33的方法，其中所述化合物是β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。36.權利要求34的方法，其中所述化合物選自青霉素類、頭孢菌素類、苯氧乙基青霉素鉀類、1-氧雜-1-去硫雜cephems、clavams、clavems、azetidinones、carbapenams、carbapenems、和carbacephems。37.權利要求36的方法，其中所述化合物是頭孢菌素的1-氧雜-1-去硫雜類似物。38.權利要求37的方法，其中所述化合物是拉氧頭孢或其可口服吸收的活性酯。39.權利要求33、34、35、36、37或38任一項的方法，其中所述患者病癥選自局部缺血、癲癇癥、低血糖癥、亨廷頓氏舞蹈病、阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、肌萎縮性側索硬化(ALS)、慢性疼痛、和神經(jīng)組織創(chuàng)傷。40.權利要求37的方法，其中所述患者病癥是由于所述組織的血流暫時中斷而導致的神經(jīng)組織局部缺血。41.治療人類患者中選自前列腺癌或良性前列腺增生的前列腺疾病的方法，所述方法包含給所述患者施用組合物的步驟，其中所述組合物含有能夠抑制青霉素結合蛋白或細菌源的β-內(nèi)酰胺酶活性的化合物，并且以能夠有效地延遲所述疾病發(fā)展或減輕所述疾病癥狀的量施用所述化合物。42.權利要求41的方法，其中所述化合物是β-內(nèi)酰胺化合物。43.權利要求41的方法，其中所述化合物是β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。44.權利要求42的方法，其中所述化合物選自青霉素類、頭孢菌素類、苯氧乙基青霉素鉀類、1-氧雜-1-去硫雜cephems、clavams、clavems、azetidinones、carbapenams、carbapenems、和carbacephems。45.權利要求43的方法，其中所述化合物是頭孢菌素的1-氧雜-1-去硫雜類似物。46.權利要求44的方法，其中所述化合物是拉氧頭孢、其可口服吸收的活性酯、或β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。47.治療需要所述治療的人類患者中焦慮癥的方法，所述方法包含給所述患者施用有效量的能調(diào)節(jié)所述患者腦中神經(jīng)原性羧肽酶或轉肽基酶活性的神經(jīng)原性肽酶抑制劑的步驟。48.權利要求47的方法，其中所述神經(jīng)原性肽酶活性的特征是，其被包含序列Ala-D-γ-Glu-Lys-D-丙氨?；?D-丙氨酸的肽抑制。49.用于治療需要這種治療的人類患者中行為或認知障礙的呈單位劑型的藥物制劑，所述制劑含有β-內(nèi)酰胺化合物及用于它的可藥用載體，在所述單位劑量中β-內(nèi)酰胺化合物的量能有效地調(diào)節(jié)認知和行為能力。50.權利要求49的藥物制劑，其中所述β-內(nèi)酰胺化合物是β-內(nèi)酰胺抗生素，并且所述β-內(nèi)酰胺抗生素的量低于施用所述制劑后能產(chǎn)生抗菌有效血液水平的抗生素量，但是為能在腦中產(chǎn)生足以調(diào)節(jié)認知和行為能力的β-內(nèi)酰胺抗生素水平的有效量。51.權利要求49的藥物制劑，其中所述β-內(nèi)酰胺化合物是基本上不含臨床有效β-內(nèi)酰胺抗生素的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。52.權利要求50的藥物組合物，其中所述β-內(nèi)酰胺抗生素是1-氧雜-1-去硫雜頭孢菌素。53.權利要求50的藥物組合物，其中所述β-內(nèi)酰胺抗生素是7-甲氧基-1-氧雜-1-去硫雜頭孢菌素。54.權利要求50的藥物制劑，其中所述β-內(nèi)酰胺抗生素是拉氧頭孢或其活性酯衍生物。55.配制成非胃腸道給藥形式的權利要求54的藥物制劑，其中所述抗生素是拉氧頭孢，并且其量相當于約50μg/kg-約400μg/kg患者體重。56.呈口服劑型的權利要求53的藥物制劑，其中所述β-內(nèi)酰胺抗生素是拉氧頭孢的活性酯，并且其含量為約2.5-約250mg/單位劑量。57.權利要求50的藥物組合物，其中還包含有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑。58.權利要求49的藥物組合物，其中還包含有效量的P-糖蛋白流出泵抑制劑。59.權利要求50的藥物組合物，其中所述制劑是口服劑型。60.權利要求50的藥物組合物，其中所述制劑是非胃腸道劑型。61.權利要求50的藥物組合物，其中所述制劑是延遲釋放劑型。62.治療需要所述治療的人類患者中認知障礙的方法，所述方法包含抑制所述脊椎動物腦中的神經(jīng)原性肽酶活性的步驟，所述神經(jīng)原性肽酶的特征是其被有效量的肽Ala-D-γ-Glu-Lys-D-Ala-D-Ala抑制。63.權利要求62的方法，其中抑制神經(jīng)原性肽酶的步驟是通過施用其量能有效地提高患者認知能力的β-內(nèi)酰胺抗生素來進行的。64.權利要求63的方法，其中所述β-內(nèi)酰胺抗生素是以低于獲得抗菌有效血液水平的所述抗生素所需量的量施用的。65.治療人、犬科、貓科和馬科動物中行為障礙的方法，所述方法包含抑制神經(jīng)原性肽酶活性的步驟，所述神經(jīng)原性肽酶的特征是其被有效量的肽Ala-D-γ-Glu-Lys-D-丙氨?；?D-丙氨酸抑制。66.權利要求65的方法，其中所述神經(jīng)原性肽酶包含N-乙?；?α-連接的酸性二肽酶。67.權利要求65的方法，其中抑制神經(jīng)原性肽酶的步驟是通過施用能有效地抑制腦中肽酶活性的β-內(nèi)酰胺化合物的量來進行的。68.權利要求66的方法，其中所述β-內(nèi)酰胺化合物是頭孢菌素的1-氧雜-1-去硫雜類似物。69.權利要求67的方法，其中所述β-內(nèi)酰胺化合物選自拉氧頭孢、氨芐西林和羧芐西林及它們的活性酯。70.治療患有所述疾病的人、犬科、貓科和馬科動物中行為障礙的方法，所述方法包含抑制神經(jīng)原性肽酶活性的步驟，所述神經(jīng)原性肽酶的特征是其被包含序列Ala-D-γ-Glu-Lys-D-丙氨酰基-D-丙氨酸的肽抑制，并且所述步驟是通過給所述脊椎動物施用其量能有效地抑制所述肽酶活性的選自β-內(nèi)酰胺抗生素和β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的β-內(nèi)酰胺化合物來進行的。71.用于治療行為或認知障礙的口服劑型的藥物制劑，所述制劑包含β-內(nèi)酰胺抗生素作為神經(jīng)活性組分和用于其的可藥用載體，其中所述抗生素的量低于能提供抗菌有效血液水平的所述抗生素的量，并且在將所述劑型口服(os)施用給表現(xiàn)出行為或認知障礙癥狀的患者時，所述β-內(nèi)酰胺抗生素在所述劑型中的量能有效地在腦中提供其濃度可有效地減輕患者行為障礙癥狀或提高癡呆或遺忘癥患者中認知能力的所述β-內(nèi)酰胺抗生素。72.權利要求71的藥物制劑，其中所述β-內(nèi)酰胺抗生素是下式所示化合物其中X是O、C、或S；R是H或可藥用成鹽或成酯基團；?；鞘锦；?OH的有機酸的殘基；R1是H或低級烷氧基；且T是OH，T＝Cl，F(xiàn)，Br，I，CH3，C2-C4烷基，芳基、包括雜芳基，S-烷基，S-芳基、包括S-雜芳基，SO3R(R＝H、烷基、芳基)，SO2R(R＝H、烷基、芳基)，N-烷基2，N-芳基2，CO2R(R＝H、烷基)，P-烷基2，P-芳基2，PO3R2(R＝H、烷基、芳基)。73.權利要求72的藥物制劑，其中X＝O，且酰基是下式所示基團其中旋光中心C1是D形式，且R選自H或可藥用成鹽或成酯基團。74.權利要求73的藥物制劑，其中R1是甲氧基，且T是1-甲基四唑-5-基硫基甲基。75.權利要求74的藥物制劑，其中R是能夠在體內(nèi)水解以生成其中R＝H的相應化合物的酯形成基團。76.權利要求71的藥物制劑，其中還包含P-糖蛋白流出抑制劑。77.權利要求69的藥物制劑，其中所述β-內(nèi)酰胺抗生素是下式所示化合物其中X＝O、S、或C；R是H或可藥用成鹽或成酯基團；R1是H或低級烷氧基，G是氫或羥基，且Z是氨基、?；被O2M、SO3M、PO3M2、或PO2M，其中M是氫或可藥用成鹽或成酯基團。78.作為認知提高組合物中的與可藥用載體混合的活性組分的N-乙?；?α-連接的酸性二肽酶的肽酶活性抑制劑在制備藥物中的應用。79.作為抗焦慮組合物中的與可藥用載體混合的活性組分的N-乙?；?α-連接的酸性二肽酶的肽酶活性抑制劑在制備藥物中的應用。80.權利要求78或79中任何一項的應用，其中所述抑制劑是β-內(nèi)酰胺抗生素或β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。81.權利要求80的應用，其中所述藥物還包括P-糖蛋白流出泵抑制劑。82.權利要求78、79或80中任何一項的應用，其中所述抑制劑是谷氨酸的2-任選取代的氧雜-2-去氨基類似物、谷氨酸的2-任選取代的碳(carba)-2-去氨基類似物、或谷氨酸的N-取代衍生物。83.權利要求82的應用，其中所述藥物還包括P-糖蛋白流出泵抑制劑。84.治療患有或趨于患有特征是神經(jīng)組織中谷氨酸濃度異常增高或前列腺組織中NAALAD酶水平增高的病癥的患者的方法，所述方法包含給所述患者施用能夠表現(xiàn)出與青霉素結合蛋白的特異性結合相互作用的化合物的步驟，所述化合物以能夠有效地抑制NAALAD酶活性并由此減輕或預防疾病癥狀的量施用。85.治療患有多發(fā)性硬化的患者的方法，所述方法包含給所述患者施用β-內(nèi)酰胺化合物的步驟，所述化合物以能夠有效地抑制患者神經(jīng)組織中NAALAD酶活性的量施用給患者。86.權利要求1、18、33、34、41、84和85任一項的方法，其中所述NAALAD酶抑制劑是基本上不具有抗生素活性的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑。87.權利要求1、18、33、35、41、84和85任一項的方法，其中所述NAALAD酶抑制劑是基本上不具有抗生素活性的青霉素或頭孢菌素亞砜或砜衍生物。88.權利要求85的方法，其中所述β-內(nèi)酰胺化合物是拉氧頭孢或其酯。89.β-內(nèi)酰胺化合物在制備用于治療焦慮癥、且不伴有抗生素作用的藥物中的應用。全文摘要已經(jīng)發(fā)現(xiàn),在溫血脊椎動物中,施用β－內(nèi)酰胺化合物,包括某些細菌肽酶抑制劑,能夠提供顯著的向神經(jīng)作用,特別是抗焦慮和抗侵略行為以及提高認知的作用,據(jù)信這是通過抑制神經(jīng)原性NAALAD酶以及相關酶活性來介導的。已經(jīng)發(fā)現(xiàn),β－內(nèi)酰胺抗生素和β－內(nèi)酰胺酶抑制劑表現(xiàn)出有效的NAALAD酶抑制作用,并且具有血腦屏障運輸能力的那些化合物是有效的神經(jīng)原性NAALAD酶抑制劑,且具有顯著的神經(jīng)治療作用。β－內(nèi)酰胺化合物可用于治療多種與谷氨酸異常有關的疾病狀態(tài)。還描述了使用所述化合物的治療方法以及它們的藥物制劑。文檔編號A61K31/5383GK1382047SQ00814380公開日2002年11月27日申請日期2000年8月16日優(yōu)先權日1999年8月16日發(fā)明者G·A·科佩申請人:雷瓦爾克斯藥品有限公司