用發(fā)酵細胞物質(zhì)喂養(yǎng)動物的方法
【專利摘要】披露了喂養(yǎng)動物的方法。該方法包括以至少0.5％的動物膳食的量，向該動物喂食經(jīng)分解的細胞物質(zhì)?？梢允褂妹傅摹⒒瘜W的、或物理的分解來分解該細胞物質(zhì)?？梢詫⒃摻?jīng)分解的細胞物質(zhì)用作用于動物的蛋白來源。
【專利說明】用發(fā)酵細胞物質(zhì)喂養(yǎng)動物的方法 相關申請的交叉引用
[00011 本申請要求2013年11月15日提交的美國臨時專利申請?zhí)?1/904,536的優(yōu)先權，它 們的全部內(nèi)容通過引用結合在此。
技術領域
[0002] 本發(fā)明總體上涉及動物飼料，更具體地說，本發(fā)明涉及喂食細胞物質(zhì)至動物的方 法。 發(fā)明背景
[0003] 氨基酸，例如谷氨酸、L-精氨酸、蘇氨酸、或賴氨酸的生產(chǎn)產(chǎn)生用作食物、飼料、藥 物制劑、和工業(yè)應用中的氨基酸來源的富含氨基酸部分。一些氨基酸是在分批的、補料分批 的、或連續(xù)發(fā)酵的工藝中使用谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)的。在一個工藝中，一旦發(fā)酵液中的氨基 酸濃度達到希望的水平，則使用酸，例如硫酸，將發(fā)酵液的pH降低至3.5至4.5之間的pH。接 下來將發(fā)酵液加熱至55°C和65°C之間的溫度，以滅活發(fā)酵中使用的生產(chǎn)培養(yǎng)物。然后可以 除去主要氨基酸產(chǎn)物，并且剩余生物質(zhì)是處于稀釋的、水性狀態(tài)，例如小于15%固體的高蛋 白材料。
[0004] 作為低固體發(fā)酵物質(zhì)，從常規(guī)加工方案中回收的谷氨酸棒狀桿菌細胞物質(zhì)和其他 細胞物質(zhì)具有受限的飼料價值。此類谷氨酸棒狀桿菌細胞物質(zhì)和其他細胞物質(zhì)的飼料價值 還受限于難消化的細胞成分、細胞壁中可能存在的抗營養(yǎng)部分、蛋白構成的不平衡、或此類 因素的任意組合。這些限制因素限制了使用此類細胞物質(zhì)降低攝食率(即小于5%的每日飼 料)的用途，并且潛在地阻止了此類細胞物質(zhì)在被配制用于需要高可消化性飼料的快速生 長動物的定量供應方面的用途。需要的是用于生產(chǎn)用于動物飼料的改進的發(fā)酵細胞物質(zhì)的 工藝。 發(fā)明概述
[0005] 在不同實施例的每一個中，本發(fā)明滿足了這些需要并且披露了能夠改進細胞物質(zhì) 的可接受性和可消化性，由此改進此類細胞物質(zhì)作為飼料成分的用途的工藝。
[0006] 在一個實施例中，喂養(yǎng)動物的方法包括以至少0.5%的動物膳食的量，向動物喂養(yǎng) 分解的細胞物質(zhì)。 附圖簡要說明
[0007] 圖1示出了可以是本發(fā)明的細胞物質(zhì)來源的發(fā)酵工藝的加工示意圖的一個實施 例。 發(fā)明詳述
[0008] 本發(fā)明披露了對用作動物飼料的生物質(zhì)進行改性的新穎方法。在一個實施例中， 喂養(yǎng)動物的方法包括對獲得自發(fā)酵的細胞物質(zhì)進行分解，由此生產(chǎn)分解的細胞物質(zhì)并且以 至少0.5%的動物膳食的量，向動物喂養(yǎng)該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)。在一個實施例中，可以對獲 得自發(fā)酵工藝的細胞物質(zhì)進行分解，并且在另一個實施例中，可以從發(fā)酵工藝分離來自發(fā) 酵工藝的完整細胞，以生產(chǎn)細胞物質(zhì)。
[0009] 在一個實施例中，本發(fā)明的細胞物質(zhì)可以是用于生產(chǎn)以下項的發(fā)酵生物質(zhì)：氨基 酸(例如賴氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸），有機酸(例如乳酸、檸檬酸、谷氨酸、延胡索酸、蘋果酸、琥 珀酸），維生素，生物燃料(例如乙醇），脂質(zhì)，營養(yǎng)補充劑，化學前體，核黃素，生物素，黃原 膠，蝦青素，二十碳五烯酸，二十二碳六烯酸，或其他可商購的發(fā)酵產(chǎn)品。在另一個實施例 中，細胞物質(zhì)可以包括有機體，例如真菌、細菌、酵母、或藻類。在另外一個實施例中，細胞物 質(zhì)可以是棒狀桿菌屬來源、短桿菌屬來源、乳球菌屬來源、芽胞桿菌屬來源、假絲酵母屬來 源、酵母菌屬來源、曲霉屬來源、裂殖酵母屬來源、埃希氏菌屬來源、根霉屬來源、有孢圓酵 母屬來源、亞羅酵母屬來源、酒香酵母屬來源、接合酵母屬來源、放線菌屬來源、迪茨菌屬來 源、雙岐桿菌屬來源、或其任意組合。
[0010] 可以用多種方法來分解細胞物質(zhì)，這些方法包括但不限于酶的、化學的、和/或物 理的分解方法。在一個實施例中，可以使用pH調(diào)節(jié)、加熱、或其組合來分解細胞物質(zhì)。在另一 個實施例中，可以使用對細胞物質(zhì)中的完整細胞進行的酶處理、沖擊、或其組合來分解細胞 物質(zhì)，其中在中性pH下，此類處理將是有用的。對活細胞進行的工藝會是有用的，因為在發(fā) 酵后就不需要先前的殺死步驟。然而，在另一個實施例中，還可以對經(jīng)受殺死步驟的細胞物 質(zhì)進行本發(fā)明的分解細胞的工藝，殺死步驟包括但不限于pH調(diào)節(jié)(例如酸化)和/或熱處理。 一旦分解了細胞物質(zhì)，則它可以作為高蛋白液體飼料被喂食至動物，或隨后被干燥并且作 為干飼料成分而喂食。可以使用不同酶來分解細胞物質(zhì)。可以使用的酶包括但不限于溶菌 酶、變?nèi)芫亍⒌鞍酌?、木聚糖酶、半纖維素、胞壁質(zhì)酶、酰胺酶、肽聚糖水解酶、溶菌糖基轉(zhuǎn) 移酶、肽酶、羧肽酶、和/或在動物飼料中使用的、用于蛋白或碳水化合物消化的其他酶。
[0011] 在另外一個實施例中，可以使用不同的機械的或物理的分解方法來分解細胞物 質(zhì)。此類方法包括但不限于超聲處理、勻漿化、沖擊、珠磨法、高壓梯度、滲透梯度、高壓處 理、加熱、冰凍、凍/融、弗氏壓碎、堿化、酸化、用表面活性劑進行處理、用螯合劑進行處理、 或其任意組合。此類物理分解方法改進了細胞物質(zhì)的價值，而無需進一步加工以提取細胞 成分。本質(zhì)上，不除去任何成分的完整細胞物質(zhì)的分解改進了可以喂食到動物的可消化營 養(yǎng)素的總回收，由此減少了任何廢物流的存在。
[0012] 沖擊是指在封閉攪拌系統(tǒng)中細胞與固體球的碰撞，并且還可以被稱為珠磨法。珠 磨法通常用于加工方案，以釋放細胞間部分進入用于隨后提取的溶液。珠磨法還可以用于 生產(chǎn)保留在不溶性部分中的細胞壁部分，其中可以通過離心或沉淀來濃縮不溶性部分。
[0013] 分解的細胞物質(zhì)可以經(jīng)受進一步加工。在一個實施例中，可以干燥分解的細胞物 質(zhì)。干燥工藝可以包括而不限于噴霧干燥、滾筒式干燥、或其他已知干燥工藝。在一個替代 性實施例中，分解的細胞物質(zhì)可以按以下形式使用:液體形式、濕糊、經(jīng)濃縮蒸發(fā)形式、經(jīng)離 心形式，或不經(jīng)干燥即使用。
[0014] 在一個實施例中，可以將分解的細胞物質(zhì)致密化。致密化的類型包括但不限于使 分解的細胞物質(zhì)穿過制丸磨或其他類型的壓縮，以將分解的細胞物質(zhì)致密化。
[0015] 可以向多種動物喂養(yǎng)分解的細胞物質(zhì)，這些動物包括但不限于魚、家禽、豬、反芻 動物、牛、或其他商業(yè)上喂養(yǎng)的動物。分解的細胞物質(zhì)可以用作喂養(yǎng)動物的蛋白來源，并且 以范圍從按動物膳食的重量計0.5%-20%、按動物膳食的重量計1 %-15%、或按動物膳食 的重量計2 %-10 %的量進行喂養(yǎng)。
[0016] 提供了以下示例性的非限制性實例以進一步描述在此呈現(xiàn)的實施例。本領域的普 通技術人員將理解的是這些實例的變化可能在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0017] 實例1.用來增加細胞物質(zhì)的可溶性蛋白含量的方法。
[0018] 啟動一系列實驗室試驗來研究加工方法，這些加工方法目的在于分解谷氨酸棒狀 桿菌發(fā)酵物質(zhì)的細胞結構。細胞破裂釋放可溶性細胞材料進入溶液并且可以通過測量蛋白 與染色劑結合的分光光度計技術來間接測量溶解的蛋白。布拉德福德(Bradford)測定測量 蛋白與考馬斯藍染料反應，并且這一測定被用于確定不同加工方法對細胞分解的作用。
[0019] 在賴氨酸生產(chǎn)和隨后的賴氨酸除去后，收集谷氨酸棒狀桿菌細胞。在30°C，在 10%-15%固體的水溶液中，用0.1 %溶菌酶處理細胞，持續(xù)10-14小時，并且干燥。在臺式消 化測試中，并且在動物喂養(yǎng)試驗中按比例放大后，評估酶處理的細胞。
[0020] 制備方法。在UF過濾后，從賴氨酸生產(chǎn)發(fā)酵獲得約1加侖的細胞。細胞具有約3.1的 天然pH，并且在洗滌后具有3.05的pH(如在此描述）。洗滌包括用蒸餾水沖洗細胞2次。對于 第一次沖洗，在8,000rpm下離心細胞，在10,800xG下離心細胞10分鐘，并且倒出液體。重新 懸浮細胞。對于第二次沖洗，在5，OOOrpm下離心細胞，在4，225xG下離心細胞10分鐘，并且倒 出液體。重新懸浮細胞，并且將細胞儲存在冰箱中，直至進一步加工。
[0021] 將細胞經(jīng)受多種處理，并且通過測量從細胞釋放進溶液的蛋白來確定處理的功 效。在表1中列出并且描述了這些處理。
[0022]表1.實例1的加工條件。
[0023]如表2中描述進行分解細胞的不同工藝，連同使用布拉德福德測定的不同工藝的 結果。
[0024]表2.用于實例1的不同加工條件的結果。

[0025] 這一實例證明，不同形式的分解工藝導致蛋白從細胞釋放并且進入溶液。洗滌劑、 酶、或機械分解增加蛋白釋放大于超聲處理、凍/融、或高壓(弗氏壓碎器)的使用?；趯嵗?2的結果，使用酶和/或機械分解的工藝看來是用于分解細胞的最有效工藝。
[0026] 實例2.增加蛋白質(zhì)消化率的加工方法。
[0027] 在賴氨酸生產(chǎn)和賴氨酸除去后，進行一系列研究來分解谷氨酸棒狀桿菌細胞的細 胞完整性?？梢杂萌芫柑幚戆l(fā)酵細胞物質(zhì)，并且可以使發(fā)酵細胞物質(zhì)經(jīng)受不同組合的機 械沖擊。圖1示出了測試的加工方法的示意圖。使用通常用于評價飼料成分的蛋白質(zhì)消化率 的體外胃蛋白酶活性測定來間接測量細胞結構的分解。更大胃蛋白酶消化率值（％)表明增 加的可消化性和潛在改進的營養(yǎng)效用。
[0028] 如在表3中所示，經(jīng)干燥但未首先經(jīng)酶暴露或沖擊進行的加工的棒狀桿菌屬細胞 物質(zhì)具有低消化率。機械分解的實踐增加了細胞的胃蛋白酶消化率至少19個百分比單位， 無論起始細胞物質(zhì)是否經(jīng)受殺死步驟(加熱+酸），并且無論用于生產(chǎn)干燥細胞物質(zhì)的設備 如何。酶的添加和酶的組合增加了細胞物質(zhì)的消化率，但是如與沖擊相比，處于較小的程 度。酶和沖擊的組合增加了細胞的消化率。使用普雷邁爾磨(Premier Mill)，型號#SM15進 行在此描述的沖擊(即珠磨法），該磨具有鋯珠粒，這些鋯珠粒具有0.87mm和1.0mm之間的尺 寸。以278RPM的最大速率完成沖擊，并且以1升每分鐘的平均速率加工這些材料。此外，將已 經(jīng)使用加熱和酸殺死的細胞暴露于使用氧化鈣進行的堿處理，至pH為10,并且然后使用乳 酸將pH返回至中性。這些堿處理的細胞還具有增加的消化率。在通過加熱和酸處理去活后， 使用高壓勻漿分解細胞。使用高壓勻漿器來勻漿細胞，在高壓勻漿器中，壓力為1000巴并且 下降至大氣壓。以3.75升每分鐘的速率，通過勻漿器加工細胞兩次。如使用胃蛋白酶消化率 測定進行評價的，使用勻漿化進行的細胞的分解還增加了細胞消化率。
[0029] 表3.經(jīng)受不同加工方法以生產(chǎn)干飼料成分的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的消化率。
[0030] 實例3.水產(chǎn)業(yè)喂養(yǎng)試驗。
[0031] 這一研究的目的在于測量用商業(yè)上可行的膳食喂養(yǎng)的斑點叉尾鮰的生長反應，該 商業(yè)上可行的膳食中的植物蛋白（例如大豆餅粉)被已經(jīng)通過本發(fā)明的不同實施例分解并 且生產(chǎn)的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)所取代。
[0032]用幼小斑點叉尾鮰（平均初始重量11.93±0.076g)來進行十周生長試驗，以確定 魚對于喂食本發(fā)明的細胞物質(zhì)產(chǎn)物的反應。將基本膳食配制為包含32%蛋白、5%脂質(zhì)，并 且效仿商業(yè)飼料配方。用本發(fā)明的經(jīng)加工并且干燥的細胞物質(zhì)取代5%或10%的膳食，并且 在蛋白基礎上替換大豆餅粉。在實驗室條件下制造飼料，并且在冷凍下進行儲存，直至有需 求，并且跨處理使用固定百分率體重，進料至滿足。膳食配方呈現(xiàn)于表4中。在生長試驗結束 時，確定最終重量、飼料轉(zhuǎn)化率(FCR)和存活。在第十周進行喂養(yǎng)實驗，并且喂養(yǎng)實驗的數(shù)據(jù) 呈現(xiàn)在表5中。
[0033]使用標準慣例，在飼料實驗室中制備研究膳食。在食物混合器(霍巴特(Hobart)公 司，特洛伊(Troy)，俄亥俄州，美國）混合預研磨的干成分和油15min。將熱水共混進該混合 物，以達到適合造粒的稠度。使用磨肉機和3mm壓模將每一膳食加壓造粒。在造粒后，將膳食 干燥至8 % -10 %的含濕量并且在4°C下儲存。
[0034]使用主要基于植物的蛋白來源，將基本膳食設計為包含約32%蛋白和約5%脂質(zhì)。 膳食包含4%鯡魚魚粉，以確保膳食跨取代水平的適口性。配制所有膳食，以滿足斑點叉尾 鮰（I.punctatus)的營養(yǎng)需求。修改基本膳食，以用相同水平的蛋白，但是用本發(fā)明的經(jīng)加 工的生物質(zhì)的增量水平(〇、5%、和10%)來生產(chǎn)11份膳食。隨著添加本發(fā)明的經(jīng)加工的細胞 物質(zhì)，在異-含氮基礎上除去大豆餅粉，并且將玉米淀粉用作填料。調(diào)節(jié)魚油，以維持跨膳食 的類似脂質(zhì)水平。
[0035]按15條魚每個水族缸，將幼小斑點叉尾鮰(平均初始重量11.93 ± 0.076g)隨機地 儲存進75-L水族缸中。單個水族缸為用2，500-L室內(nèi)水再循環(huán)系統(tǒng)服務的模塊式單元。對于 膳食1至7(基本的，10%添加水平)存在四個重復，并且對于以5%添加包含具體細胞物質(zhì)的 每一膳食(膳食8至11)存在三個重復。使用水下3,600-W加熱器，將水溫維持在約28°C。在每 一水族缸中，使用氣泡石將溶解氧維持在近飽和，并且將使用普通空氣管路的集水槽連接 至再生式鼓風機。使用YSI-55數(shù)字氧/溫度計(可得自YSI公司，黃溫泉市，俄亥俄州，美國） 一天兩次測量溶解氧和水溫，同時每周一次測量pH、總氨氮量(TAN)、和亞硝酸鹽-N。用電子 pH計(pH筆，可得自飛世爾科技公司(Fisher Scientific)，辛辛那提，俄亥俄州，美國）間歇 地測量水pH。分別使用索洛薩諾(S〇l 〇rzan〇)( 1969)和帕森斯(Parsons)等人（1985)描述的 方法測量總氨氮量(TAN)和亞硝酸鹽-N。光周期設置為14h光照和10h黑暗。根據(jù)魚的尺寸， 按4.5%至6.0%BW每天供應膳食至魚，并且分為兩等份的飼料。每隔一周稱量魚的重量?；?于％體重計算飼料定量，并且對于所有處理時間間隔，該飼料定量是恒定的?；谏L和攝 食反應的觀察，每周調(diào)節(jié)每個槽供應的飼料的量。在生長研究結束時，將魚計數(shù)并且分組稱 重，以確定增重、存活、和飼料轉(zhuǎn)化率。
[0036]使這一實例的數(shù)據(jù)經(jīng)受單向方差分析，以確定在處理手段間的顯著(PS0.05)差 異。使用鄧奈特氏t檢驗(Dunnett's t-test)來比較單個處理手段，以控制膳食平均值。還 使用學生紐曼科伊爾斯多范圍檢驗法（Student-Neuman Keuls'multiple range test)來 區(qū)別處理手段間的顯著差異，并且針對10%細胞物質(zhì)的添加水平，檢驗配對對比。使用針對 窗口的SAS系統(tǒng)(可得自賽仕軟件研究所(SAS Institute)，卡瑞，北卡羅來納州)來進行統(tǒng) 計分析。
[0037]在表4A和4B中示出研究膳食，在這兩個表格中，在本文描述的不同加工條件下生 產(chǎn)的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)以表明的水平(5 %和10 % )包括在膳食中。在表5中示出這一實例 的魚的行為表現(xiàn)。數(shù)據(jù)示出，根據(jù)本發(fā)明而不進一步加工(#1，噴霧干燥的殺死的細胞；10% 添加)生產(chǎn)的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)導致魚的行為表現(xiàn)的統(tǒng)計顯著的減少。針對棒狀桿菌屬 細胞物質(zhì)進行的本發(fā)明的所有加工條件導致高于未加工的細胞喂養(yǎng)的魚的最終魚重量。細 胞物質(zhì)方面的改進導致類似于對照魚的行為表現(xiàn)的魚的行為表現(xiàn)。這些數(shù)據(jù)示出，細胞的 加工導致改進的效用。
[0038]表4A.供應至斑點叉尾鮰的膳食的構成。
[0039]表4B.供應至斑點叉尾鮰的膳食的構成。
[0040]表5.在這一實例的喂養(yǎng)試驗期間，斑點叉尾鮰的生長反應。

[0041 ] 實例4.水產(chǎn)業(yè)喂養(yǎng)研究。
[0042]這一實例研究了用包含已經(jīng)用本發(fā)明不同方法加工的棒狀桿菌細胞物質(zhì)的膳食 喂養(yǎng)的斑點叉尾鮰的生長。用幼小斑點叉尾鮰(平均初始重量6.08±0.16g)進行10周生長 研究，以確定魚對于本發(fā)明的經(jīng)加工的細胞物質(zhì)產(chǎn)物的反應。將基本膳食配制為包含約 36%蛋白、約6%脂質(zhì)，并且效仿商業(yè)飼料配方。用本發(fā)明的經(jīng)加工的細胞物質(zhì)取代5%或 10%的膳食，并且在蛋白基礎上替換大豆餅粉。在實驗室條件下制造飼料，并且在冷凍下進 行儲存，直至有需求。貫穿生長試驗，跨處理使用固定百分率體重，將飼料輸入靶向為接近 滿足。在生長研究結束時，確定最終重量、飼料轉(zhuǎn)化率(FCR;供應的飼料/增重）、和存活。在 10周結束時，稱量魚的重量并且評價行為表現(xiàn)。
[0043]使用主要基于植物的蛋白來源，將基本膳食設計為包含約36%蛋白和約6%脂質(zhì)。 膳食包含4%鯡魚魚粉，以確保膳食跨取代水平的適口性。配制所有膳食，以滿足斑點叉尾 鮰（I.punctatus)的營養(yǎng)需求。修改基本膳食，以用相同水平的蛋白，但是用本發(fā)明的經(jīng)加 工的細胞物質(zhì)的增量水平(〇、5 %、和10 % )來生產(chǎn)10份膳食。隨著添加本發(fā)明的經(jīng)加工的細 胞物質(zhì)，在異-含氮基礎上除去大豆餅粉，并且將玉米淀粉用作填料。調(diào)節(jié)魚油，以維持跨膳 食的類似脂質(zhì)水平。使用標準慣例來制備這一實例的膳食。在食物混合器(可得自霍巴特 (Hobart)公司，特洛伊(Troy)，俄亥俄州，美國）混合預研磨的干成分和油15min。將熱水共 混進該混合物，以達到適合造粒的稠度。使用磨肉機和3mm壓模將每一膳食加壓造粒。在造 粒后，將膳食干燥至8 % -10 %的含濕量并且在4 °C下儲存。
[0044]按15條儲存的魚每個水族缸，將幼小斑點叉尾鮰(平均初始重量6.08 ±0.16g)隨 機地儲存進75-L水族缸中，該水族缸為2，500-L室內(nèi)再循環(huán)系統(tǒng)的模塊式部件。將每一膳食 供應至四個重復組的魚。在此系統(tǒng)中，使用水下3,600-W加熱器(可得自水生動物生態(tài)系統(tǒng) 公司(Aquatic Eco-Systems Inc.)，阿波普卡，佛羅里達州，美國），將水溫維持在約28°C。 在每一水族缸中，使用氣泡石將溶解氧維持在近飽和，并且將使用普通空氣管路的集水槽 連接至再生式鼓風機。使用YSI-55數(shù)字氧/溫度計(可得自YSI公司，黃溫泉市，俄亥俄州，美 國）一天兩次測量溶解氧和水溫，同時每周一次測量pH、總氨氮量(TAN)、和亞硝酸鹽-N。用 電子pH計(pH筆，可得自飛世爾科技公司(Fisher Scientific)，辛辛那提，俄亥俄州，美國） 間歇地測量水pH。分別使用索洛薩諾(Solorzano) (1969)和帕森斯(Parsons)等人（1985)描 述的方法測量總氨氮量(TAN)和亞硝酸鹽-N。光周期設置為14h光照和10h黑暗。根據(jù)魚的尺 寸，按3.5%至5.0%BW每天供應膳食至魚，并且分為兩等份的飼料。每隔一周稱量魚的重 量?；隗w重的百分比計算供應的飼料定量，并且在每個一周的間隔期間，將該飼料定量保 持恒定，并且然后基于生長和攝食反應的觀察，每周對該飼料定量進行調(diào)節(jié)。在生長試驗結 束時，將魚計數(shù)并且分組稱重，以確定增重、存活、和飼料轉(zhuǎn)化率。
[0045] 在此實例中，失靈的主加熱器不能被立即替換。為了維持水溫，將單個加熱器安裝 進每個處理的兩個槽中，以緩解低溫。由于單個加熱器問題，若干水族缸具有高死亡率，并 且已經(jīng)從該研究中排除。因此，對于少數(shù)處理，僅存在3個重復。
[0046] 使用針對窗口的SAS系統(tǒng)(可得自賽仕軟件研究所(SAS Institute)，卡瑞，北卡羅 來納州）來進行統(tǒng)計分析。使數(shù)據(jù)經(jīng)受單向方差分析，以確定在處理手段間的顯著（P< 0.05)差異。使用鄧奈特氏t檢驗(Dunnett's t-test)，將每個處理與參考膳食進行比較。使 用學生紐曼科伊爾斯多范圍檢驗法（Student-Neuman Keuls'multiple range test)的SAS 輸出來區(qū)別處理手段之間的顯著差異，并且針對每一產(chǎn)物10%的添加水平，進行配對對比。 [0047]在這一實例中向魚喂食的膳食構成呈現(xiàn)在表6A和6B中。這一實例的生長結果呈現(xiàn) 在表7中。
[0048] 表6A.向斑點叉尾鮰喂食的研究膳食的構成。
[0049] 表6B.向斑點叉尾鮰喂食的研究膳食的構成。
[0050]表7.經(jīng)10周生長試驗，斑點叉尾鮰的生長反應。
[0051]在這一實例中，當包括10 %的膳食時，經(jīng)噴霧干燥的、殺死的細胞導致斑點叉尾鮰 的較少的生長行為表現(xiàn)。與0和10%經(jīng)噴霧干燥的、殺死的細胞之間的線性回歸相比，當包 括5 %的膳食時，在生長行為表現(xiàn)方面，按照本發(fā)明的原始細胞物質(zhì)的所有修改都導致數(shù)值 改進。喂食經(jīng)沖擊處理的、未殺死的細胞導致較少的生長行為表現(xiàn)?？赡艿氖?，這些結果歸 因于延遲加工期間，原始材料的降解。將未殺死的細胞保持在中性pH，并且隨后干燥的材料 導致與經(jīng)歷相同加工的、被殺死的材料相比，較低的生長行為表現(xiàn)。這可以表明，如果在干 燥前，將其保持延長的時段，未殺死的細胞物質(zhì)的飼料價值存在潛在損失。因此，在一個實 施例中，活細胞應在12小時內(nèi)被加工以用于加工方案中的另外步驟。當査看在加工前用pH 調(diào)節(jié)和熱處理殺死的細胞時，對于當細胞被殺死時的所有加工的細胞材料而言，存在最終 重量方面的觀察到的增加。
[0052]實例5.家禽喂養(yǎng)研究。
[0053]這一實例評估了用包含已經(jīng)受根據(jù)本發(fā)明的不同處理工藝的棒狀桿菌屬細胞物 質(zhì)的定量喂養(yǎng)的雞的生長行為表現(xiàn)。該研究使用500只新罕布什爾X哥倫比亞雞(在孵化后 第8天，平均初始重量:78. lg)。從孵化后第8天至29天進行該研究（21天測定），其中進行25 個處理，每個處理五個重復，并且每個重復4只雞。每周收集欄重量，并且在同一圖表上記錄 采食量和飼料轉(zhuǎn)化。在該研究結束時，隨機選擇每個欄一只雞，用于血液收集，以評價臨床 病理學參數(shù)。使樣品經(jīng)受臨床病理學分析。還對于每個欄一只雞(即隨機選擇用于血液收集 的同一只雞），確定肝臟重量(絕對值)和作為體重的百分比的肝臟重量。
[0054]用邦弗朗尼校正，使用為單因子AN0VA的SAS分析數(shù)據(jù)，其中在該模型中，膳食是唯 一因變量。因此，存在若干例子，其中膳食的主效應顯著，但是在處理間，邦弗朗尼校正的平 均值分離并不顯示差異(例如，兩個時段的增重:飼料結果）。這被認為是合邏輯的，考慮了 使用在實驗設計中表示的大量處理，實驗誤差率和比較誤差率之間的差異。
[0055]在這一實例中，用表8中呈現(xiàn)的基本膳食喂養(yǎng)家禽。在減少基本膳食中的玉米和大 豆餅粉的情況下，將根據(jù)本發(fā)明的不同實施例加工的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)添加至基本膳 食。隨著根據(jù)本發(fā)明的不同實施例加工的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的添加，調(diào)節(jié)這些膳食，以維 持膳食包含240g的CP/kg的膳食、12.3-27.8g賴氨酸/kg的膳食、和2857-3131千卡的可代謝 能量/kg的膳食。CP是指粗蛋白。
[0056]表8.這一實例的基本膳食。

[0057]用于這一實例的根據(jù)本發(fā)明的不同實施例加工的不同棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)呈現(xiàn) 在表9中。

[0058]將用于研究處理的膳食用于這一實例，并且如下使用本發(fā)明的經(jīng)不同處理的棒狀 桿菌屬細胞物質(zhì)進行制備。在不同膳食處理的每一個中，在減少如在此討論的玉米和大豆 餅粉的情況下，將棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)添加至基本膳食。研究處理2被計算為包含19.7g的 賴氨酸/kg的膳食，這分開了具有膳食賴氨酸的最低(研究膳食1)和最高(研究膳食25)濃度 的研究膳食之間的賴氨酸濃度方面的差異。添加至研究處理2的L-賴氨酸HC1被計算為包含 238.6g的CP/kg，但是對于這一計算，并不考慮由L-賴氨酸HC1貢獻的N。研究處理3被計算為 包含25.0g的賴氨酸/kg的膳食，這等價于具有膳食賴氨酸的最高濃度的研究處理25中的賴 氨酸的量。添加至研究處理3的L-賴氨酸HC1被計算為包含238.6g的CP/kg，但是對于這一計 算，并不考慮由L-賴氨酸HC1貢獻的N。
[0059]研究膳食如下： 研究膳食1表8的玉米-大豆餅粉基本膳食(對照）； 研究膳食2基本膳食+6.9g/kg的L-賴氨酸HC1 (中賴氨酸對照）； 研究膳食3基本膳食+13.9g/kg的L-賴氨酸HC1 (高賴氨酸對照）； 研究膳食4基本膳食+12.5g/kg經(jīng)噴霧干燥的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食5基本膳食+25. Og/kg經(jīng)噴霧干燥的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食6基本膳食+50.0 g/kg經(jīng)噴霧干燥的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食7基本膳食+100.0 g/kg經(jīng)噴霧干燥的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食8基本膳食+12.5g/kg經(jīng)噴霧干燥的、沖擊的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食9基本膳食+25. Og/kg經(jīng)噴霧干燥的、沖擊的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食10基本膳食+50.0 g/kg經(jīng)噴霧干燥的、沖擊的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食11基本膳食+100. 〇g/kg經(jīng)噴霧干燥的、沖擊的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食12基本膳食+12.5g/kg經(jīng)滾筒式干燥的、沖擊的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食13基本膳食+25. Og/kg經(jīng)滾筒式干燥的、沖擊的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食14基本膳食+50.0 g/kg經(jīng)滾筒式干燥的、沖擊的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食15基本膳食+100.0 g/kg經(jīng)滾筒式干燥的、沖擊的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食16基本膳食+25. Og/kg經(jīng)噴霧干燥的、溶菌酶處理的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食17基本膳食+50.0 g/kg經(jīng)噴霧干燥的、溶菌酶處理的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食18基本膳食+12.5g/kg經(jīng)噴霧干燥的、乳酸鈣處理的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食19基本膳食+25. Og/kg經(jīng)噴霧干燥的、乳酸鈣處理的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食20基本膳食+25.Og/kg經(jīng)噴霧干燥的、蛋白酶和溶菌酶處理的、殺死的細胞 物質(zhì)； 研究膳食21基本膳食+50.0 g/kg經(jīng)噴霧干燥的、蛋白酶和溶菌酶處理的、殺死的細胞 物質(zhì)； 研究膳食22基本膳食+100.Og/kg經(jīng)噴霧干燥的、蛋白酶和溶菌酶處理的、殺死的細胞 物質(zhì)； 研究膳食23基本膳食+25. Og/kg經(jīng)噴霧干燥的、勻漿的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食24基本膳食+50.0 g/kg經(jīng)噴霧干燥的、勻漿的、殺死的細胞物質(zhì)； 研究膳食25基本膳食+100.0 g/kg經(jīng)噴霧干燥的、勻漿的、殺死的細胞物質(zhì)。
[0060] 研究膳食1-3表示對家禽研究中觀察到的處理變化的典型處理。研究1-3在標準膳 食配方內(nèi)并且其唯一差異為添加賴氨酸，以匹配在具有最高量的賴氨酸的研究膳食（即研 究膳食25)中的賴氨酸的水平。增加水平的未加工細胞物質(zhì)在研究膳食4-7中，其中家禽的 生長行為表現(xiàn)并未不同于對照膳食，但是在研究結束時，存在飼料效率(增重:飼料比)方面 的顯著降低。改變細胞物質(zhì)的工藝，例如沖擊(膳食8-15 )、溶菌酶處理(膳食16和17 )、和在 加工期間使用氫氧化鈣來提高pH并且然后使用乳酸來降低pH(膳食18和19)，都導致等價于 對照膳食的雞的行為表現(xiàn)。蛋白酶和溶菌酶應用的工藝并未恢復雞行為表現(xiàn)(膳食20-22)， 因為這些膳食中的雞行為表現(xiàn)類似于未加工的細胞物質(zhì)。然而，可能是蛋白酶和溶菌酶應 用已經(jīng)遭受可能影響結果的微生物污染。使用兩階段勻漿器來分解細胞(膳食23-25)也不 影響行為表現(xiàn)，因為如與未加工的細胞物質(zhì)膳食相比，這些膳食中的雞行為表現(xiàn)類似。
[0061] 表11A.用包含變化量的棒狀桿菌細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的雞的行為表現(xiàn)。

[0062]表11B.用包含變化量的棒狀桿菌細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的雞的行為表現(xiàn)。

[0063] 實例6.家禽喂養(yǎng)試驗。
[0064] 這一研究評估了用本發(fā)明的不同方法加工的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的雞的生 長行為表現(xiàn)?；旧攀撑浞匠尸F(xiàn)在表12中，并且應用至細胞物質(zhì)的工藝呈現(xiàn)在表13中。以 278RPM的最大速率，使用普雷邁爾磨，型號#SM15完成沖擊，該磨具有在0.87mm和1.0_之間 的鋯珠粒。以1升/分鐘的平均速率，通過該磨加工材料。
[0065]在這一試驗中，使用在孵化后第7天，具有81.9g的平均初始重量的260只新罕布什 爾X哥倫比亞雞。在孵化后第7至27天期間進行該研究（21d測定）；存在13個處理，并且每個 處理5個重復，并且每個重復4只雞。每周收集欄重量，并且在同一圖表上記錄采食量和飼料 轉(zhuǎn)化。 在該研究結束時，用C02室息使所有雞安樂死。行為表現(xiàn)結果呈現(xiàn)在表14中。
[0066]表12.向雞喂食的基本膳食。

[0067]用單因子AN0VA分析數(shù)據(jù)，使用通過圖基檢驗(Tukey ' s)調(diào)節(jié)的LSMEANS分離平均 值，其中在該模型中，膳食是唯一因變量。
[0069]在減少玉米和大豆餅粉的情況下，將細胞物質(zhì)添加至基本膳食，調(diào)節(jié)這些膳食，以 維持膳食包含240g的CP/kg的膳食、19.8g賴氨酸/kg的膳食、和2946-3106千卡的可代謝能 量/kg的膳食。
[0070]表12A.用棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的雞的行為表現(xiàn)。

[0071 ]表12B.用棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的雞的行為表現(xiàn)。

[0072] 當未加工的細胞物質(zhì)以10%包括在膳食中時，生長行為表現(xiàn)下降(膳食3、5、和7)。 無論干燥技術如何，作為給料10%細胞物質(zhì)的結果，還觀察到增重:飼料方面的顯著降低。 使用沖擊(膳食8-13)證明了在行為表現(xiàn)和增重:飼料兩方面的降低的緩解。
[0073] 實例7.喂食棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)至豬的效果。
[0074] 將總計96頭豬(6.8±0.3kg體重(BW);大約28日齡）用于具有4個膳食處理的隨機 化完全區(qū)組設計。區(qū)組為6個初始BW類別。研究單元為具有2頭閹公豬的一個欄，并且每個欄 具有2頭小母豬。每個處理具有6個區(qū)組重復。
[0075]使用的膳食處理是根據(jù)行業(yè)標準的典型保育舍膳食的陽性對照，和具有以5%、 7.5%、和10%存在的變化量的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的陽性對照。
[0076] 反應的變量包括豬的行為表現(xiàn)和一些血液參數(shù)。豬的行為表現(xiàn)被測量為BW、體重 增益(ADG)、采食量(ADFI)和增重與飼料比(G:F)。在第0、7、15、21、28和35天記錄體重和飼 料消失。每日針對豬，每個欄計算ADG和ADFI，并且表示為每頭豬的日平均值。按公制單位分 析并且報告行為表現(xiàn)數(shù)據(jù)。
[0077]在第35天，按每個欄2頭豬測量以下血清參數(shù)：白蛋白、血液尿素氮(BUN)、鈣、膽固 醇、肌酐磷酸激酶(CPK)、肌酐、球蛋白、葡萄糖、乳酸脫氫酶、磷、鉀、血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(SG0T; 也稱為天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶或AST)、鈉、和總血清蛋白。
[0078]將膳食配制為滿足或超過豬的營養(yǎng)需求(豬NRC(Swine NRC)，2012)，并且配制為 提供跨所有膳食處理的可代謝能量(ME)和營養(yǎng)素的類似濃度。膳食配方包括最小濃度的 Lys、Ca和P;Lys與ME比；以及Ile、Met、S氨基酸、Thr、Trp和Val與Lys的最小比（國家豬營養(yǎng) 指南（National Swine Nutrition Guide)，2010)。在標準化回腸可消化（SID)基礎上提供 氨基酸。膳食并不包括抗生素，益生元或益生菌。所有膳食都是粒料形式。喂養(yǎng)程序包括對 于階段1、2和3,分別為7、14和14天的3個階段。
[0079] 使用的豬為PIC母豬C29X公豬337。在約21日齡，將豬斷奶并且移入研究設施，并 且然后是在開始實驗之前給定7天適應期。在該時間期間，用商業(yè)膳食喂食所有豬。在斷奶 七天后(約28日齡），將豬稱重并且隨機分配至膳食處理;這被認為是研究的第0天。
[0080] 在第35天(研究的最后一天），每個欄隨機選擇1頭閹公豬和1頭小母豬，以收集血 樣。按照從1至6的區(qū)組順序，經(jīng)由頸靜脈穿刺收集樣品。在收集期間將樣品保持在冰上，并 且加工以獲得血清。在約_l〇°C冷凍血清樣品，并且運送至實驗室用于分析。由于在第13、20 和22天死亡，從該研究除去三頭豬。那些豬中的一頭屬于處理1，并且其他2頭豬屬于處理4。 預先針對不涉及膳食處理的呼吸問題對那些豬進行治療。
[0081] 作為隨機化完全區(qū)組設計，使用SAS的混合(MIXED)程序，分析這一研究的數(shù)據(jù)。將 區(qū)組用作模型中的隨機效應。行為表現(xiàn)數(shù)據(jù)的殘差的分析示出正態(tài)分布，并且未檢測到異 常值。殘差的血液數(shù)據(jù)分析示出16個記錄(2%的總數(shù))為異常值(超越第一和第三四分位數(shù) 的3倍四分位數(shù)間距），并且將其從分析中排除。通過作為參考的四分位數(shù)間距進行的異常 值分析使用了不易受極端觀測值影響的標度和位置點的測量。已經(jīng)轉(zhuǎn)換了以下4個變量，以 實現(xiàn)數(shù)據(jù)的正態(tài)分布JUNUlCPKk 1)、球蛋白和SG0T(f2)。按照相同實驗設計，使用SAS 的GLIMMIX程序分析轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)；出于報告目的，將那些處理平均值及其標準誤差逆轉(zhuǎn)換為 它們的原始單位。包括線性的、二次的、和三次的多項式分析，以評價膳食棒狀桿菌屬細胞 物質(zhì)的漸增添加的效果。包括成對比較，用于單個處理比較。
[0082] 在如表13中所示的研究中，經(jīng)35天，在這一研究中豬的行為表現(xiàn)(BW、ADG、ADFIJP G: F)示出對膳食棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的漸增添加的負劑量依賴反應(線性效應，P〈0.001)。 [0083]表13.從第0天至第35天的累積的豬的行為表現(xiàn)。
*線性效應，Ρ〈〇·〇〇1。 abe行內(nèi)的、具有不同上標差異的處理平均值(Ρ〈〇. 05)。
[0085] 如表14中所示，與對照膳食(0%棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)）喂養(yǎng)的豬相比，從第0天至 第7天，按5%的膳食進行本發(fā)明的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的添加使ADG降低(P〈0.01)24%，但 是在用對照膳食對比5%棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的豬之間，對于ADG，未檢測到進一步差 異。相比之下，與對照膳食喂養(yǎng)的豬相比，在該研究的每一階段中，按7.5%或10%的膳食進 行棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的添加使ADG降低(P〈0.05)。0對比5%的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng) 的豬之間的ADFI沒有差異。然而，在那兩個處理之間，在5%的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的 豬中，在每一時間點，累積的G:F更低(P>0.01)。與對照膳食喂養(yǎng)的豬相比，更大劑量(7.5% 或10%)的膳食棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)進一步降低ADFI和G:F。
[0086] 表14.在這一實例中豬的行為表現(xiàn)的LS平均值。
ADM動物營養(yǎng)研究-S13101
[0087] 如在表15中所示，對于以下血液參數(shù)，未檢測到處理間差異：鈣、磷、肌酸磷酸激 酶、葡萄糖、乳酸脫氫酶、和總蛋白。當與對照膳食喂養(yǎng)的豬相比時，按5%的膳食進行棒狀 桿菌屬細胞物質(zhì)的添加降低了（P〈〇.〇〇1)血液尿素氮，并且該差異的幅值隨著喂養(yǎng)的棒狀 桿菌屬細胞物質(zhì)的不斷增加的水平而增加。相比之下，5%棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的豬具 有更多(P〈0.01)膽固醇，但是更大劑量的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)沒有進一步增加該值。與不 用它喂養(yǎng)的豬相比，在7.5%或10%棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的豬中，血清肌酐濃度下降(P 〈0.01)，而僅在10%棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的豬中，白蛋白、鉀和鈉下降(P〈〇.05)。然而， 所有血液成分都在正常觀察的范圍內(nèi)。
[0088] 表15.血液參數(shù)的LS平均值。
ADM動物營養(yǎng)研究-S13101
[0089] 棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)對豬的行為表現(xiàn)的負效應隨時間下降。例如，按最低劑量 (5%)進行的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的膳食添加具有對ADG和G:F的初始負效應(第0至7天）， 但是對于以下單個時段，第7至15天、第15至21天、第21至28天、和第28至35天，在0對比5% 棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的豬之間未檢測到進一步差異。類似地，在0對比10%棒狀桿菌屬 細胞物質(zhì)喂養(yǎng)的豬之間的行為表現(xiàn)方面的相對差異隨時間下降。事實上，從第28直至第35 天，在G:F方面，未檢測到處理間的差異。棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的營養(yǎng)規(guī)范源自肉仔雞，可能 的是，ME和SID氨基酸之一或兩者的濃度被過高估計。保育舍的豬對于膳食中的能量和氨基 酸濃度非常敏感，這主要是由于對采食量的物理限制。隨著包括更多棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)， 膳食中的ME和SID氨基酸二者被稀釋，這將有助于解釋對行為表現(xiàn)和血液參數(shù)的影響。
[0090] 這一實例表明，膳食棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的漸增濃度以劑量依賴性方式減少了豬 的行為表現(xiàn)。生長速率方面的減少受飼料效率方面的損失驅(qū)動，并且在較少程度上受降低 的采食量驅(qū)動，這些效應隨著豬的成熟而降低。膳食處理還影響一些血液參數(shù)。這些結果提 示，對于豬，棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)的營養(yǎng)規(guī)范可能被過高估計，因為該營養(yǎng)規(guī)范源自對肉仔 雞的研究。
[0091] 實例8.喂食棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)至魚的效果。
[0092] 進行8周喂養(yǎng)研究，以評估用賴氨酸生物質(zhì)產(chǎn)物（即棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)）喂養(yǎng)的 羅非魚的反應。研究膳食包括處于10%干重的本發(fā)明的經(jīng)加工的細胞物質(zhì)（如表16中所述 的進行加工），處于87%干重的具有32%粗蛋白的商業(yè)斑點叉尾鮰配制品（可得自安格勒頓 (Angel ton)，德克薩斯州的朗讓公司（Rangen，Inc.))，和3 %干重的羧甲基纖維素。以干形 式徹底混合細胞物質(zhì)、商業(yè)斑點叉尾鮰配制品和羧甲基纖維素，添加水，通過磨肉機加工所 得餅粉，以生產(chǎn)3-_粒料，并且用加壓氣流干燥粒料至按重量計小于10%濕度。
[0093]使用具有4.2g/魚的初始平均重量的幼小的、迅速生長的羅非魚，在以再循環(huán)模式 運行的38-L水族缸中進行該研究。通過空調(diào)環(huán)境空氣，將溫度維持在28°C，+/-1°C。通過培 養(yǎng)系統(tǒng)的水流速率足以維持最佳水質(zhì)。還使用砂過濾系統(tǒng)來除去微粒材料，并且用生物過 濾器除去含氮廢物。使用補充曝氣來維持溶解氧水平接近飽和，并且常規(guī)監(jiān)測其他水質(zhì)參 數(shù)，以保持它們在可接受水平。用計時器控制的熒光，維持12hr/12hr光/暗循環(huán)。
[0094]將每種膳食研究進料至每個水族缸15條魚的三聯(lián)組(處于接近表觀飽和的速率）， 每天兩次，持續(xù)8周。貫穿該研究，每周分組稱重魚，以監(jiān)測體重增益（％的初始重量）、飼料 效率、和存活。
[0095] 在該研究結束時，稱量魚的重量。使用每個水族缸三條魚，以獲得每個槽一個合并 的血漿樣品，并且對于小動物小組的化學測量值，分析血漿樣品。如本領域已知，使用每個 水族缸的另三條魚以解剖它們的肝臟樣品，從而測量肝體指數(shù)(肝臟重量/體重比）。
[0096] 對于這一實例的研究，使用統(tǒng)計分析系統(tǒng)的廣義線性模型，施加適當?shù)慕y(tǒng)計程序。 單個水族缸/槽為針對所有統(tǒng)計分析進行觀察的基本單位。表16中示出了這一研究的結果 和向魚喂食的棒狀桿菌屬細胞物質(zhì)是如何進行加工的。
[0097] 表16.

[0098]已經(jīng)參考某些示例性和說明性的實施例、組合物及其用途對本發(fā)明進行了描述。 然而，具有本領域普通技能的人員應該認識到，在不背離本發(fā)明的范圍的情況下，可以對任 何這些示例性實施例做出各種替換、改變或組合。因此，本發(fā)明并不受這些示例性和說明性 的實施例的描述限制，而是受所附權利要求書的限制。
【主權項】
1. 一種喂養(yǎng)動物的方法，該方法包括： 以至少0.5 %的動物膳食的量，向該動物喂食經(jīng)分解的細胞物質(zhì)。2. 根據(jù)權利要求1所述的方法，進一步包括對獲得自發(fā)酵工藝的細胞物質(zhì)進行分解，由 此生產(chǎn)該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)。3. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中該細胞物質(zhì)包括棒狀桿菌屬來源的細 胞。4. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中該動物是魚。5. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中該動物選自下組，該組由以下各項組 成:家禽、豬、和反芻動物。6. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，進一步包括從發(fā)酵工藝分離完整細胞，由 此生產(chǎn)該細胞物質(zhì)。7. 根據(jù)權利要求2所述的方法，其中分解該細胞物質(zhì)包括選自下組的行為，該組由以下 各項組成:酶處理、化學處理、物理分解、或其任意組合。8. 根據(jù)權利要求7所述的方法，其中該行為包括物理分解并且選自下組，該組由以下各 項組成：超聲處理、勻漿化、沖擊、珠磨法、高壓梯度、高壓處理、加熱、冰凍、凍/融、弗氏壓 碎、堿化、酸化、用表面活性劑進行處理、用螯合劑進行處理、或其任意組合。9. 根據(jù)權利要求7所述的方法，其中該行為包括酶處理。10. 根據(jù)權利要求7所述的方法，其中該行為包括酶處理和物理處理。11. 根據(jù)權利要求10所述的方法，其中該物理處理包括加熱、PH調(diào)節(jié)、或其組合。12. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，進一步包括干燥該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)。13. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)處于液體形式 或是濕糊。14. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，進一步包括將該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)致密 化。15. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中以按動物膳食的重量計0.5 %-20 % 的量，向該動物喂食該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)。16. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中以按動物膳食的重量計1%-15%的 量，向該動物喂食該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)。17. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中以按動物膳食的重量計2%-10%的 量，向該動物喂食該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)。18. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)是真菌、細菌、 酵母、或藻類來源。19. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中該細胞物質(zhì)是棒狀桿菌屬來源、短桿 菌屬來源、乳球菌屬來源、芽胞桿菌屬來源、假絲酵母屬來源、酵母菌屬來源、曲霉屬來源、 裂殖酵母屬來源、埃希氏菌屬來源、根霉屬來源、有孢圓酵母屬來源、亞羅酵母屬來源、酒香 酵母屬來源、接合酵母屬來源、放線菌屬來源、迪茨菌屬來源、雙岐桿菌屬來源、或其任意組 合。20. 根據(jù)權利要求1或權利要求2所述的方法，其中將該經(jīng)分解的細胞物質(zhì)用作用于動 物的蛋白來源。
【文檔編號】A23J1/00GK105916384SQ201480072425
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2014年11月14日
【發(fā)明人】斯蒂芬妮·布洛克, P·漢克, M·塞卡瓦, 詹姆斯·林奎斯特, 特拉維斯·納爾遜, L·索爾海姆
【申請人】阿徹丹尼爾斯米德蘭德公司