一種沙丁魚小肽蛋白的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物制品和生物加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種沙丁魚小肽蛋白的制備 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 沙丁魚，又稱薩丁魚、鰛和鰯，富有驚人的營養(yǎng)價值，富含磷脂、蛋白質(zhì)和鈣，主要 用作食用，其魚肉、主要是蛋白質(zhì)亦可制為動物飼料。
[0003] 沙丁魚肽是沙丁魚自身固有的或沙丁魚蛋白在特定條件下將其具有一定功能特 性的氨基酸序列片段從蛋白質(zhì)肽鏈中切斷并釋放出來，且可能顯示出一種或多種生物活性 的肽類物質(zhì)。沙丁魚肽因其優(yōu)良的理化性質(zhì)、感官性能及特定的生理功能而受到廣泛關(guān)注。 研宄已經(jīng)證實，小肽的吸收利用速率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氨基酸，且小肽具有較高的生物活性，對畜禽 生長和健康具有重要作用。小肽具有超越其所含蛋白和氨基酸的額外的效果。
[0004] 目前，制備魚肽的方法主要是魚蛋白可控酶解法，但是通過酶解工藝獲得的蛋白 質(zhì)分子的大小、組成、結(jié)構(gòu)等方面呈現(xiàn)不可避免的多樣性和復(fù)雜性，限制了其進一步應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對以上現(xiàn)有技術(shù)問題，提供一種沙丁魚小肽蛋白 的制備方法，該方法簡單可控、得到的小肽蛋白成分和含量相對穩(wěn)定，可作為優(yōu)良的動物飼 料。
[0006] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：
[0007] -種沙丁魚小肽蛋白的制備方法，包括以下步驟：
[0008] (1)取非洲沙丁魚為原材料，去除表面魚鱗、內(nèi)臟，并用水清洗干凈后，切片、蒸熟 (去除油脂，使酶解更充分）、壓榨、粉碎（有利于充分酶解），得到魚粉；
[0009] (2)在魚粉加入水，魚粉與水的質(zhì)量比為1 : (3-8)，攪拌均勻，得到魚粉溶液； [0010] (3)在魚粉溶液中加入0· 05-0. 5% (重量百分比）的復(fù)合酶進行酶解，所述復(fù)合 酶由堿性蛋白酶和胰蛋白酶按1 : (1-5)的質(zhì)量比混合而成，酶解溫度保持在30-70°C，先 調(diào)PH值至7-8,酶解Ih后再調(diào)PH值至7-8,繼續(xù)酶解3-10h，得到含小肽蛋白的酶解混合 物；
[0011] (4)酶解完成后升高溫度至70-KKTC，保持10_30min，進行滅酶處理；
[0012] (5)將滅酶后的酶解混合物過50-150目的振動篩，將魚骨粉（被截留）從酶解混 合物中分離出來，收集濾過液；
[0013] (6)將濾過液離心在6500-7500rpm下離心10-30min，收集上清液，進行超濾，收集 濾過液，真空濃縮至濾過液體積的1/3-2/3,噴霧干燥，得到小肽蛋白。
[0014] 將得到的魚小肽蛋白進行純度和分子量大小測定，結(jié)果顯示：83%分子量〈1 萬 Dalton、6 % 分子量 5000 ~1000Dalton、7 % 分子量 1000 ~500Dalton、21 % 分子量 <500Dalton。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下顯著優(yōu)點和有益效果：
[0015] (1)本發(fā)明魚小肽蛋白的制備方法簡單可控，可操作性強，重復(fù)性好，得到的小肽 蛋白純度高，成分和含量相對穩(wěn)定，且生物活性物質(zhì)種類和含量豐富；
[0016] (2)本發(fā)明得到的魚小肽蛋白具有較高的可消化率，適用于用作動物添加飼料，可 快速補充營養(yǎng)，促進增重、改善飼料報酬，促進幼齡動物腸道發(fā)育，增強動物抗病和抗應(yīng)激 能力，減少發(fā)病，提高成活率，改善群體均勻度，具有良好的誘食性，提高采食量，經(jīng)試驗驗 證可部分替代小豬飼料中抗生素的使用。
【附圖說明】
[0017] 圖1所示的是本發(fā)明實施例4中不同飼料對斷奶后豬仔生長影響的結(jié)果圖。
【具體實施方式】
[0018] 以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步具體描述。應(yīng)該指出，以下具體說明都是例示 性的，旨在對本發(fā)明提供進一步的說明。除非另有說明，本發(fā)明使用的所有科學(xué)和技術(shù)術(shù)語 具有與本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域人員通常理解的相同含義。
[0019] 實施例1 :
[0020] (1)取非洲沙丁魚為原材料，去除表面魚鱗、內(nèi)臟，并用水清洗干凈后，切片、蒸熟 (去除油脂）、壓榨、粉碎，得到魚粉；
[0021] (2)在魚粉加入水，魚粉與水的質(zhì)量比為1 : 6,攪拌均勻，得到魚粉溶液；
[0022] (3)在魚粉溶液中加入0.25% (重量百分比）的復(fù)合酶進行酶解，所述復(fù)合酶由 堿性蛋白酶和胰蛋白酶按1 : 1.5的質(zhì)量比混合而成，酶解溫度保持在50-60°C，先調(diào)PH值 至7. 5,酶解Ih后再調(diào)PH值至7. 5,繼續(xù)酶解4-6h，得到含小肽蛋白的酶解混合物；
[0023] (4)酶解完成后升高溫度至90°C，保持20min進行滅酶處理；
[0024] (5)將滅酶后的酶解混合物過80目的振動篩，將魚骨粉（被截留）從酶解混合物 中分離出來，收集濾過液；
[0025] (6)將濾過液離心在7000rpm下離心20min，收集上清液，進行超濾，超濾孔徑為5 萬Dalton，收集濾過液，真空濃縮至濾過液體積的1/3-2/3,噴霧干燥，得到小肽蛋白。
[0026] 實施例2 :
[0027] 1、對實施例1得到的小肽蛋白采用高效液相色譜的方法進行純度和分子量大 小測定，結(jié)果如下：83%分子量〈1萬Dalton、6%分子量5000~1000Dalton、7%分子量 1000~500Dalton、21 %分子量<500Dalton。可見，采用本發(fā)明方法從沙丁魚中制備的小肽 蛋白純度高，小肽蛋白分子量低，小肽含量豐富。
[0028] 2、對實施例1得到的小肽蛋白進行各種理化指標(biāo)檢測，結(jié)果如下表1所示。
[0029] 表1 :小狀蛋白理化指標(biāo)檢測
[0030]
【主權(quán)項】
1. 一種沙丁魚小肽蛋白的制備方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 取非洲沙丁魚為原材料，去除表面魚鱗、內(nèi)臟，并用水清洗干凈后，切片、蒸熟、壓 棒、粉碎，得到魚粉； (2) 在魚粉加入水，魚粉與水的質(zhì)量比為1 : (3-8)，攪拌均勻，得到魚粉溶液； (3) 在魚粉溶液中加入0.05-0. 5%的復(fù)合酶進行酶解，所述復(fù)合酶由堿性蛋白酶和胰 蛋白酶按1 : (1-5)的質(zhì)量比混合而成，酶解溫度保持在30-70°C，先調(diào)PH值至7-8,酶解 Ih后再調(diào)PH值至7-8,繼續(xù)酶解3-10h，得到含小肽蛋白的酶解混合物； (4) 酶解完成后升高溫度至70-KKTC，保持10_30min，進行滅酶處理； (5) 將滅酶后的酶解混合物過50-150目的振動篩，將魚骨粉從酶解混合物中分離出 來，收集濾過液； (6) 將濾過液在6500-7500rpm下離心10-20min，收集上清液，進行超濾，收集濾過液， 真空濃縮至濾過液體積的1/3-2/3,噴霧干燥，得到小肽蛋白。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種沙丁魚小肽蛋白的制備方法，包括以下步驟：取非洲沙丁魚去除表面魚鱗、內(nèi)臟，并清洗干凈后，切片、蒸熟、壓榨、粉碎，加入水，得到魚粉溶液；在魚粉溶液中加入0.05-0.5％的復(fù)合酶進行酶解，所述復(fù)合酶由堿性蛋白酶和胰蛋白酶按1︰(1-5)的質(zhì)量比混合而成，酶解溫度保持在30-70℃，先調(diào)PH值至7-8，酶解1h后再調(diào)PH值至7-8，繼續(xù)酶解3-10h，得到含小肽蛋白的酶解混合物；然后滅酶處理；過振動篩，收集濾過液；將濾過液離心收集上清液，進行超濾，收集濾過液，真空濃縮噴霧干燥，得到小肽蛋白。該方法簡單可控、得到的小肽蛋白成分和含量相對穩(wěn)定，可作為優(yōu)良的動物飼料。
【IPC分類】A23J1-04, A23J3-34
【公開號】CN104872371
【申請?zhí)枴緾N201510309254
【發(fā)明人】楊瀟, 諸輝
【申請人】寧波希諾亞海洋生物科技有限公司
【公開日】2015年9月2日
【申請日】2015年6月8日