專利名稱:一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域：
及畜禽血處理加工領(lǐng)域，具體地說(shuō)涉及一種富含多肽和游離氨基酸和酶解血球粉及其制備方法。
背景技術(shù)：
動(dòng)物血液潛在的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高，開(kāi)發(fā)和利用豬血粉是緩解蛋白質(zhì)飼料資源不足的一條有效途徑。然而目前對(duì)動(dòng)物血液的利用還十分不充分，并且現(xiàn)今的血粉產(chǎn)品問(wèn)題較多(主要是血液中的血球蛋白部分)，如消化吸收率不高，營(yíng)養(yǎng)平衡性不佳，以及血腥味比較大、適口性差等。為解決上述問(wèn)題，許多科研工作者對(duì)噴霧干燥法、化學(xué)處理法、生物處理法(酶解法、發(fā)酵法)等工藝進(jìn)行了研究。噴霧干燥法目前使用較為普遍，適應(yīng)工業(yè)化生產(chǎn)的要求?；瘜W(xué)處理法是利用酸堿水解血球蛋白，這種處理方法能耗大，嚴(yán)重腐蝕設(shè)備和污染環(huán)境。但是，上述兩種方法還是無(wú)法解決血球蛋白使用過(guò)程中面臨的問(wèn)題。生物處理法為目前可以選擇的對(duì)環(huán)境和諧的方法，而酶解處理為較為高效的方法。隨著酶制劑工業(yè)的發(fā)展，酶制劑產(chǎn)品的成本逐漸降低，這也促進(jìn)了酶在酶解血球蛋白中的利用。
酶解血球蛋白可以起到很好的脫色的效果(公開(kāi)號(hào)為CN1283397A，CN101375702A, CN101366943A, CN101623043A)，可以去除腥味，改善血球粉的適口性，同時(shí)可以將大分子的血紅蛋白降解成小分子的多肽(公開(kāi)號(hào)為CN1283397A，CN101375702A,CN101366943A, CN101623043A)和游離的氨基酸(公開(kāi)號(hào)為CN101623043A)，提高血球粉的營(yíng)養(yǎng)利用價(jià)值。由于酶的種類不同，其在酶解血球粉的條件不同，且對(duì)血球粉的酶解效果也不同。本發(fā)明選擇了從現(xiàn)有的工業(yè)蛋白酶制劑中選出一種可以高效酶解血球粉的蛋白酶-堿性蛋白酶(來(lái)源于地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis) 2709,購(gòu)自Amresco公司)。前期根據(jù)該堿性蛋白酶的相關(guān)性質(zhì)進(jìn)行探討得到其最佳的反應(yīng)條件。再以該反應(yīng)條件來(lái)制備酶解血球粉產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉及其制備方法。該血球粉的多肽和氨基酸有利于動(dòng)物機(jī)體的吸收和利用，可廣泛地利用于飼料領(lǐng)域。
本發(fā)明涉及一種富含多肽及游離氨基酸的酶解血球粉及其制備方法，包括以下步驟:
(I)、向新鮮動(dòng)物血液中加入質(zhì)量百分含量為0.5%的檸檬酸鈉充分混合后，進(jìn)行離心分離得到血球液；
(2)、向血球液中加入pH = 10.0,0.02mol/L的甘氨酸-氫氧化鈉緩沖溶液，將最終pH值調(diào)整為10.0，且血球蛋白的重量濃度調(diào)整為1%，并在50°C水浴中保溫，使溫度至恒定;
(3)、按照堿性蛋白酶與血球蛋白的質(zhì)量比為0.0266: I比例向步驟⑵的血紅蛋白溶液中加入堿性蛋白酶，然后在50°C的水浴中反應(yīng)12小時(shí)，為了促進(jìn)反應(yīng)的進(jìn)行，將容器置于恒溫振蕩器中或者用攪拌裝置進(jìn)行攪勻；
(4)、反應(yīng)完畢后，將整個(gè)容器置于95 100°C保溫lOmin，然后將反應(yīng)溶液進(jìn)行噴霧干燥即可制得產(chǎn)品。
本發(fā)明還具有如下特征:
1、如上所述步驟(I)中所用的新鮮動(dòng)物血液為豬血。
2、如上所述所述步驟(2)中所用的堿性蛋白酶購(gòu)自Amresco,來(lái)源于地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis) 2709,酶活為 383830U/g。
3、如上所述所述的步驟(2)中恒溫振蕩器的轉(zhuǎn)速為150r/min。
4、按如上所述的制備方法制得的一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉。
本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，具有如下的優(yōu)點(diǎn)及有益效果:(I)本發(fā)明脫色效果好，所得酶解血球粉顏色淺，無(wú)腥味，可廣泛地利用于食品領(lǐng)域；(2)本發(fā)明是經(jīng)過(guò)食品級(jí)蛋白酶在溫和條件下獲得的，其安全性高，無(wú)副作用。無(wú)不良風(fēng)味。(3)本發(fā)明產(chǎn)生大量的不同分子量的肽及游離氨基酸，有利于動(dòng)物機(jī)體的吸收利用，同時(shí)酶解產(chǎn)生的多肽類物質(zhì)可提高仔豬腸道粘膜免疫，保護(hù)了腸道健康，提高了動(dòng)物的生產(chǎn)性能。(4)本發(fā)明的酶解效果好，適用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1酶解血球粉的制備
(I)向新鮮的豬血中加入質(zhì)量百分含量為0.5%的檸檬酸鈉充分混合后，進(jìn)行離心分離得到血球液；取Ig血球液，溶于99ml的pH = 10.0,0.02mol/L的甘氨酸-氫氧化鈉緩沖溶液中，得重量濃度I %的血紅蛋白溶液，利用lmol/L的甘氨酸或lmol/L HCl調(diào)節(jié)體系PH值為10.0，在50°C水浴中保溫，使溫度至恒定。
(2)向血紅蛋白溶液中加入0.0266g堿性蛋白酶(購(gòu)于Amresco公司，酶活為383830U/g)，在50°C水浴，轉(zhuǎn)速150r/min，pH為10.0的條件下水解12小時(shí)，然后在95 100°C下恒溫lOmin，最后將整個(gè)溶液體系進(jìn)行噴霧干燥即可制得酶解血球粉。同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照，以不加堿性蛋白酶的樣品為空白樣，其余操作步驟如前所述。與血球粉相比，經(jīng)過(guò)酶解制得的酶解血球粉的顏色得到很好的改善，其腥味也得到很高的改善。利用MinoltaChroma Meter II全自動(dòng)色度儀來(lái)測(cè)定兩種產(chǎn)品，結(jié)果見(jiàn)表I。結(jié)果顯示，經(jīng)堿性蛋白酶酶解后，血球粉的亮度(L*值)、紅度(a*值)、黃度(b*值)得到了很大的提高，總色差也提高。由于使用的堿性蛋白酶為食品級(jí)的，而血球粉本身也是食品級(jí)的，因此制備得到的酶解血球粉安全性高，無(wú)副作用，無(wú)不良風(fēng)味。
表I血球粉和酶解血球粉的色度測(cè)定
權(quán)利要求
1.一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉的制備方法，其特征在于，方法如下 (1)、向新鮮動(dòng)物血液中加入質(zhì)量百分含量為O.5%的檸檬酸鈉充分混合后，進(jìn)行離心分離得到血球液； (2)、向血球液中加入pH= 10. 0,0. 02mol/L的甘氨酸-氫氧化鈉緩沖溶液，將最終pH值調(diào)整為10. 0，且血球蛋白的重量濃度調(diào)整為1%，并在50°C水浴中保溫，使溫度至恒定； (3)、按照堿性蛋白酶與血球蛋白的質(zhì)量比為O.0266 I比例向步驟(2)的血紅蛋白溶液中加入堿性蛋白酶，然后在50°C的水浴中反應(yīng)12小時(shí)，為了促進(jìn)反應(yīng)的進(jìn)行，將容器置于恒溫振蕩器中或者用攪拌裝置進(jìn)行攪勻； (4)、反應(yīng)完畢后,將整個(gè)容器置于95 100°C保溫IOmin,然后將反應(yīng)溶液進(jìn)行噴霧干燥即制得產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求
I所述一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉的制備方法，其特征在于，所述步驟(I)中所述的新鮮動(dòng)物血液為豬血。
3.根據(jù)權(quán)利要求
I所述的一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中所用的堿性蛋白酶購(gòu)自Amresco,來(lái)源于地衣芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis) 2709，酶活為 383830U/g。
4.根據(jù)權(quán)利要求
I所述的一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉的制備方法，其特征在于，所述的步驟(2)中恒溫振蕩器的轉(zhuǎn)速為150r/min。
5.如權(quán)利要求
1-4任一項(xiàng)所述的富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉的制備方法制得的一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉。
專利摘要
一種富含多肽和游離氨基酸的酶解血球粉的制備方法，如下1、向新鮮動(dòng)物血液中加入檸檬酸鈉充分混合后，進(jìn)行離心分離得到血球液；2、向血球液中加入甘氨酸-氫氧化鈉緩沖溶液，將最終pH值調(diào)整為10.0，血球蛋白的重量濃度調(diào)整為1％，并在水浴中保溫，使溫度至恒定；3、向步驟2的血紅蛋白溶液中加入堿性蛋白酶，然后在50℃的水浴中反應(yīng)12小時(shí)，將容器置于恒溫振蕩器中或者用攪拌裝置進(jìn)行攪勻；4、反應(yīng)完畢后，然后將反應(yīng)溶液進(jìn)行噴霧干燥即可制得產(chǎn)品。本發(fā)明脫色效果好，無(wú)腥味；安全性高，無(wú)副作用，無(wú)不良風(fēng)味，保護(hù)了腸道健康，提高了動(dòng)物的生產(chǎn)性能；可廣泛應(yīng)用于食品領(lǐng)域。另外，酶解效果好，適用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A23K1/04GKCN103250869SQ201310196036
公開(kāi)日2013年8月21日 申請(qǐng)日期2013年5月24日
發(fā)明者單安山, 鄭燕斌, 陳秋石, 張 浩 申請(qǐng)人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan