本發(fā)明屬于物理學(xué)和食品工程學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法。

背景技術(shù)：

目前，人體缺鈣已成為全球性的問題，尤其是兒童、老人和孕婦的缺鈣更為嚴(yán)重。據(jù)有關(guān)部門的調(diào)查發(fā)現(xiàn)：在我國大部分人群的鈣攝人量嚴(yán)重不足。據(jù)北京市調(diào)查，幼兒鈣的攝人量僅為標(biāo)準(zhǔn)供應(yīng)量的27％～46％；兒童拘樓病的陽性檢出率為14.1％，孕婦鈣的攝人量平均為653.9mg/d·人，僅為標(biāo)準(zhǔn)供應(yīng)量的43.60％～65.4％。所以，尋找1種有效的補(bǔ)鈣產(chǎn)品或方法，對于消除因缺鈣而導(dǎo)致的各種疾病，提高人的身體素質(zhì)有重要意義。

鮮骨泥是我國近年來新開辟的食物源，它含有許多人體所需要的營養(yǎng)成分，如含有蛋白質(zhì)、脂肪、維生素，氨基酸、骨膠原，軟骨素，鈣和磷，同時(shí)還含有豐富的微量元素。因此，骨泥可促進(jìn)嬰幼兒的生長發(fā)育，預(yù)防和治療缺鐵性貧血、佝僂病和老年人因缺鈣而引起的抽搐癥及骨質(zhì)疏松癥等多種疾病。而且還由于骨泥中的膽固醇、脂肪含量比豬、羊肉低，適宜于肝病、高血壓、心臟病患者食用。骨泥作為補(bǔ)鈣的理想食物原料，人們已研制出骨泥系列食品，如骨泥餅干、骨泥掛面等。但目前人們主要是通過物理加工方法來利用骨泥。動(dòng)物骨頭經(jīng)過這種物理加工后，人體對它的吸收率尤其鈣的吸收率較低，究其原因主要是骨泥中的鈣以磷酸鈣的形式存在，不利于人體吸收。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為解決上述營養(yǎng)物質(zhì)難以吸收的技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種吸收效果好、保健效果好的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法。

本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法，包括如下步驟：

步驟一、種子罐種子培養(yǎng)液準(zhǔn)備：按牛羊鮮骨泥5-20％、白砂糖2-10％及脫脂牛奶2-10％的比例配制成種子培養(yǎng)液；

步驟二、發(fā)酵罐發(fā)酵液準(zhǔn)備：按牛羊鮮骨泥25％、白砂糖10％的比例配制成發(fā)酵液；

步驟三、MRS培養(yǎng)基準(zhǔn)備：將包括有蛋白胨、牛骨膏、酵母膏、葡萄糖溶液配制成PH值在5-7的培養(yǎng)基；

步驟四、菌種馴化制種：將乳酸菌菌種在不同比例的MRS培養(yǎng)基中傳代馴化培養(yǎng)，使其能夠適應(yīng)骨泥培養(yǎng)液，并在其中良好地生長繁殖；

步驟五、菌種培養(yǎng)：將馴化后的菌種接種于種子罐中進(jìn)行培養(yǎng)制種；

步驟六、菌種發(fā)酵：將步驟二中的發(fā)酵液配制到發(fā)酵罐中，攪拌混勻后，封蓋，滅菌完畢冷卻，將種子罐中已培養(yǎng)好的種子按3％～5％接種于其中，保溫發(fā)酵；

步驟七、沉淀過濾：發(fā)酵結(jié)束后，停止攪拌，使骨泥等顆粒物質(zhì)充分沉淀，使發(fā)酵成熟的原液，通過過濾器，過濾到貯液罐中待分裝；

步驟八、灌裝：將貯液罐中的原液進(jìn)行無菌分裝。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟一及步驟二中制備牛羊鮮骨泥的過程具體為，取牛羊鮮骨，將其打碎后進(jìn)行油磨，取顆粒大小為100目的牛羊鮮骨泥。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟四中，菌株的馴化及滅活過程中所用培養(yǎng)基及器具嚴(yán)格滅菌，菌種的培養(yǎng)溫度為37±1℃。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟四中，菌株選擇為嗜酸性乳桿菌、鼠李糖乳桿菌和嗜熱鏈球菌三株乳酸菌。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟五中具體為，馴化的菌種在無菌條件下，按3％～5％的接種量接種于種子培養(yǎng)液中，37℃，100r/min恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，測定活菌數(shù)，24h內(nèi)達(dá)到對數(shù)生長>106～109CFU/mL為止。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟六中，保溫發(fā)酵溫度為38～42℃、發(fā)酵24～72h。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟六中，發(fā)酵液的滅菌條件為125℃，0.2mpa，排氣滅菌45min，使用的蒸汽壓力不低于0.35mpa。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟六中，發(fā)酵開始后，每隔12h，取樣檢測活性鈣離子濃度的增長情況及PH值的變化和乳酸菌的生長情況。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟七中具體為，過濾之前所有的管道及貯液罐中通入不低于0.35mpa的高壓蒸汽滅菌60min，向發(fā)酵罐中打入經(jīng)空氣過濾系統(tǒng)處理的無菌凈化空氣，在一定的壓力下，使發(fā)酵成熟的原液，通過過濾器。

在本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法一種較佳實(shí)施例中，所述步驟八中具體為，將貯液罐中的原液經(jīng)滅菌封閉式管道輸入無菌灌裝間進(jìn)行分裝，無菌灌裝間的凈化程度為萬級(jí)。

本發(fā)明的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法具有如下有益效果：

建立一種由鼠李糖乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌三株益生菌株發(fā)酵新鮮牛、羊骨泥的工藝方法。該工藝的發(fā)酵液具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，并能改善腸道正常微生物菌群的穩(wěn)定性，調(diào)節(jié)胃腸功能，系具有極高營養(yǎng)價(jià)值的保健食品。是一種生物發(fā)酵的工藝技術(shù)，工藝簡單、方便、易操作，適用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，可極大的開發(fā)動(dòng)物骨骼的應(yīng)用價(jià)值。益生菌可維持腸道正常菌群的穩(wěn)定性，提高胃腸功能，進(jìn)而提高機(jī)體免疫力；將骨泥中的蛋白質(zhì)分解成易于消化吸收的的多肽、氨基酸等有效成分，進(jìn)而提高骨泥中蛋白的利用率；將骨泥中的蛋白質(zhì)分解成易于消化吸收的的多肽、氨基酸等有效成分，進(jìn)而提高骨泥中蛋白的利用率。

采用乳酸菌發(fā)酵骨泥的方法制備一種營養(yǎng)液，其中鈣以離子鈣形式存在，同時(shí)還有平衡的磷酸根離子，這樣有利于人體對鈣的吸收和體內(nèi)的沉積。

乳酸菌的種類很多，它是一類群可發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生乳酸的細(xì)菌，有調(diào)節(jié)人體胃腸平衡，增強(qiáng)人體免疫力，延緩衰老等功能。同時(shí)，乳酸菌產(chǎn)生的酸性環(huán)境可以抑制大腸桿菌和沙門氏菌等有害菌的生長?，F(xiàn)在，人們已利用乳酸菌發(fā)酵制成多種乳制品，如酸奶，馬奶酒，干酪等。

本工藝技術(shù)選用了3種乳酸菌即鼠李糖乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌發(fā)酵骨泥，該技術(shù)工藝的發(fā)酵液綜合了乳酸菌和骨泥兩者的優(yōu)點(diǎn)，以達(dá)到更好的保健效果。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其它的附圖，其中：

圖1是本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法的一種實(shí)施例的工藝流程圖。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅是本發(fā)明的一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其它實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

請參閱圖1，是本發(fā)明提供的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法的制備方法一種實(shí)施例的工藝流程圖。

所述制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法S1包括如下步驟：

步驟S11、種子罐種子培養(yǎng)液準(zhǔn)備：按牛羊鮮骨泥5-20％、白砂糖2-10％及脫脂牛奶2-10％的比例配制成種子培養(yǎng)液；

具體地，制備牛羊鮮骨泥的過程具體為，取牛羊鮮骨，將其打碎后進(jìn)行油磨，取顆粒大小為100目的牛羊鮮骨泥；

步驟S12、發(fā)酵罐發(fā)酵液準(zhǔn)備：按牛羊鮮骨泥25％、白砂糖10％的比例配制成發(fā)酵液；

具體地，制備牛羊鮮骨泥的過程具體為，取牛羊鮮骨，將其打碎后進(jìn)行油磨，取顆粒大小為100目的牛羊鮮骨泥；

步驟S13、MRS培養(yǎng)基準(zhǔn)備：將包括有蛋白胨、牛骨膏、酵母膏、葡萄糖溶液配制成PH值在5-7的培養(yǎng)基；

步驟S14、菌種馴化制種：將乳酸菌菌種在不同比例的MRS培養(yǎng)基中傳代馴化培養(yǎng)，使其能夠適應(yīng)骨泥培養(yǎng)液，并在其中良好地生長繁殖；

具體地，菌株的馴化及滅活過程中所用培養(yǎng)基及器具嚴(yán)格滅菌，菌種的培養(yǎng)溫度為37±1℃，，菌株選擇為嗜酸性乳桿菌、鼠李糖乳桿菌和嗜熱鏈球菌三株乳酸菌；

步驟S15、菌種培養(yǎng)：將馴化后的菌種接種于種子罐中進(jìn)行培養(yǎng)制種；

具體為，馴化的菌種在無菌條件下，按3％～5％的接種量接種于種子培養(yǎng)液中，37℃，100r/min恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，測定活菌數(shù)，24h內(nèi)達(dá)到對數(shù)生長>106～109CFU/mL為止；

步驟S16、菌種發(fā)酵：將步驟二中的發(fā)酵液配制到發(fā)酵罐中，攪拌混勻后，封蓋，滅菌完畢冷卻，將種子罐中已培養(yǎng)好的種子按3％～5％接種于其中，保溫發(fā)酵；

具體為，發(fā)酵液的滅菌條件為125℃，0.2mpa，排氣滅菌45min，使用的蒸汽壓力不低于0.35mpa，發(fā)酵開始后，每隔12h，取樣檢測活性鈣離子濃度的增長情況及PH值的變化和乳酸菌的生長情況；

步驟S17、沉淀過濾：發(fā)酵結(jié)束后，停止攪拌，使骨泥等顆粒物質(zhì)充分沉淀，使發(fā)酵成熟的原液，通過過濾器，過濾到貯液罐中待分裝；

具體為，過濾之前所有的管道及貯液罐中通入不低于0.35mpa的高壓蒸汽滅菌60min，向發(fā)酵罐中打入經(jīng)空氣過濾系統(tǒng)處理的無菌凈化空氣，在一定的壓力下，使發(fā)酵成熟的原液，通過過濾器；

步驟S18、灌裝：將貯液罐中的原液進(jìn)行無菌分裝；

具體為，將貯液罐中的原液經(jīng)滅菌封閉式管道輸入無菌灌裝間進(jìn)行分裝，無菌灌裝間的凈化程度為萬級(jí)。

本發(fā)明的制取骨泥發(fā)酵液的工藝方法1及其制備方法具有如下有益效果：

建立一種由鼠李糖乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌三株益生菌株發(fā)酵新鮮牛、羊骨泥的工藝方法。該工藝的發(fā)酵液具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，并能改善腸道正常微生物菌群的穩(wěn)定性，調(diào)節(jié)胃腸功能，系具有極高營養(yǎng)價(jià)值的保健食品。是一種生物發(fā)酵的工藝技術(shù)，工藝簡單、方便、易操作，適用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，可極大的開發(fā)動(dòng)物骨骼的應(yīng)用價(jià)值。益生菌可維持腸道正常菌群的穩(wěn)定性，提高胃腸功能，進(jìn)而提高機(jī)體免疫力；將骨泥中的蛋白質(zhì)分解成易于消化吸收的的多肽、氨基酸等有效成分，進(jìn)而提高骨泥中蛋白的利用率；將骨泥中的蛋白質(zhì)分解成易于消化吸收的的多肽、氨基酸等有效成分，進(jìn)而提高骨泥中蛋白的利用率。

采用乳酸菌發(fā)酵骨泥的方法制備一種營養(yǎng)液，其中鈣以離子鈣形式存在，同時(shí)還有平衡的磷酸根離子，這樣有利于人體對鈣的吸收和體內(nèi)的沉積。

乳酸菌的種類很多，它是一類群可發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生乳酸的細(xì)菌，有調(diào)節(jié)人體胃腸平衡，增強(qiáng)人體免疫力，延緩衰老等功能。同時(shí)，乳酸菌產(chǎn)生的酸性環(huán)境可以抑制大腸桿菌和沙門氏菌等有害菌的生長?，F(xiàn)在，人們已利用乳酸菌發(fā)酵制成多種乳制品，如酸奶，馬奶酒，干酪等。

本工藝技術(shù)選用了3種乳酸菌即鼠李糖乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌發(fā)酵骨泥，該技術(shù)工藝的發(fā)酵液綜合了乳酸菌和骨泥兩者的優(yōu)點(diǎn)，以達(dá)到更好的保健效果。

以上所述僅為本發(fā)明的實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書及附圖內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運(yùn)用在其它相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。