發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及具有增強(qiáng)的抗氧化性的海洋卵磷脂制劑。
背景技術(shù)：
：：流行病學(xué)研究和臨床研究已經(jīng)將各種健康益處與魚和海產(chǎn)品的消耗相關(guān)聯(lián)。歸因于長(zhǎng)鏈n-3多不飽和脂肪酸(lc-pufa)的存在的這些正面健康結(jié)果包括降低心血管疾病(cvd)(hu和willett2002)、抗炎性質(zhì)(calder2004)、關(guān)節(jié)炎(deutsch2007)、經(jīng)前期綜合征等的風(fēng)險(xiǎn)。lc-pufa對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)非常敏感，并且可以在整個(gè)加工過(guò)程中以及隨后的包封或制劑中迅速氧化(hamilton1998；undeland等人1998；baik等人2004)。脂質(zhì)過(guò)氧化是指脂質(zhì)的氧化降解。它是一種自由基介導(dǎo)的反應(yīng)鏈，一旦啟動(dòng)，導(dǎo)致多不飽和脂質(zhì)的氧化變質(zhì)。這些反應(yīng)可以由許多有毒產(chǎn)物包括氫過(guò)氧化物(looh)和醛引發(fā)或增強(qiáng)?？梢酝ㄟ^(guò)測(cè)量脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物如looh和丙二醛(mda)來(lái)監(jiān)測(cè)脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程的進(jìn)展。初級(jí)過(guò)氧化產(chǎn)物是氫過(guò)氧化物，其中雙鍵可能已經(jīng)移動(dòng)和/或改變構(gòu)型。這些產(chǎn)物可以在結(jié)構(gòu)上重新排列并轉(zhuǎn)化成二級(jí)過(guò)氧化產(chǎn)物，通過(guò)裂解產(chǎn)生更小的分子或通過(guò)二聚合產(chǎn)生更大的分子。脂質(zhì)氫過(guò)氧化物是不穩(wěn)定的，它們的斷裂產(chǎn)生諸如mda的產(chǎn)物。mda是三碳低分子量醛，是脂質(zhì)氧化的二級(jí)產(chǎn)物之一，對(duì)健康有害，并且是由含有至少三個(gè)雙鍵的脂肪酸的氧化過(guò)程形成的。雖然mda不是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的化學(xué)計(jì)量標(biāo)記，但與looh積累相比，其積累反映了脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)過(guò)程的強(qiáng)度。這些物種以及一些其他物質(zhì)的測(cè)量可以評(píng)估不同階段的氧化途徑，提供該動(dòng)態(tài)過(guò)程的詳細(xì)信息。脂質(zhì)過(guò)氧化是一個(gè)關(guān)鍵的降解過(guò)程，負(fù)責(zé)降低海洋ω-3油的質(zhì)量，包括氣味、顏料和質(zhì)地的變化。脂質(zhì)過(guò)氧化還負(fù)責(zé)產(chǎn)生大量的細(xì)胞毒性化合物(addis1986；kubow1992)。此外，已經(jīng)表明，氧化的海洋ω-3油可能具有受損的功效，導(dǎo)致補(bǔ)充有效性的變化(turner2006)。重要的是，幾項(xiàng)研究表明，消耗含有脂質(zhì)氧化終產(chǎn)物的膳食或油后血漿過(guò)氧化脂質(zhì)標(biāo)志物增加，表明氧化脂質(zhì)具有被腸吸收的能力。strapans和同事(1994,1999)表明，膳食氧化脂質(zhì)是人血清乳糜微粒中氧化脂質(zhì)的來(lái)源。naruszewicz發(fā)現(xiàn)，熱處理油的消耗導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化物的餐后血漿水平顯著增加(naruszewicz等人1987)。除了磷脂(主要是磷脂酰膽堿)結(jié)合的lc-pufa之外，海洋卵磷脂如磷蝦油含有天然抗氧化劑(蝦青素)。已知這些卵磷脂在保質(zhì)期內(nèi)是穩(wěn)定的，這可能是由于天然抗氧化劑的存在。本申請(qǐng)的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在其保質(zhì)期內(nèi)顯示出穩(wěn)定性的海洋卵磷脂具有最小的過(guò)氧化作用，在胃腸道條件下易受脂質(zhì)過(guò)氧化的影響。發(fā)明人能夠通過(guò)向具有優(yōu)選低三甲胺n-氧化物(tmao)水平的海洋卵磷脂添加某些抗氧化劑來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了包含海洋卵磷脂和一種或多種外源性抗氧化劑的海洋卵磷脂制劑，其中所述制劑具有的所述一種或多種外源性抗氧化劑的濃度為10mg/kg或更多。有時(shí)，所述一種或多種外源性抗氧化劑的濃度為100mg/kg或更多，有時(shí)為500mg/kg或更多，有時(shí)為1000mg/kg或更多，有時(shí)為1200mg/kg或更多，有時(shí)為1400mg/kg或更多，有時(shí)為1600mg/kg或更多，有時(shí)為2000mg/kg或更多，有時(shí)為2500mg/kg或更多，有時(shí)為3000mg/kg或更多，有時(shí)為4000mg/kg或更多。優(yōu)選地，所述一種或多種外源性抗氧化劑以有效減少胃腸道條件中的脂質(zhì)過(guò)氧化的量提供。優(yōu)選地，海洋卵磷脂來(lái)自磷蝦或魚源。優(yōu)選地，所述一種或多種外源性抗氧化劑包含至少一種生育酚。有時(shí)，所述一種或多種外源性抗氧化劑包含兩種或更多種不同生育酚(例如α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚)的混合物。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑具有大于700mg/kg的內(nèi)源性鈣濃度。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑具有大于500mg/kg的內(nèi)源性鎂濃度。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑具有至少2％(w/w)的磷脂。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑具有至少3％(w/w)的epa和至少2％(w/w)的dha。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑具有25mgn/100g或更少的三甲胺n-氧化物(tmao)濃度。有時(shí)，所述tmao濃度為15mgn/100g或更少，有時(shí)為10mgn/100g或更少，有時(shí)為7mgn/100g或更少，有時(shí)為5mgn/100g或更少，有時(shí)為3mgn/100g或更少，和有時(shí)為1mgn/100g或更少。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑具有5mgn/100g或更少的三甲胺(tma)濃度。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，在40℃或以下儲(chǔ)存3個(gè)月，優(yōu)選6個(gè)月后，磷蝦油具有5mgn/100g或更少的tma。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑具有少于1200mg/kg的鈉濃度。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑具有的游離膽堿濃度小于450mg/kg和/或甜菜堿濃度低于1000mg/kg和/或總氨基酸濃度小于0.3g/100g。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，在胃模型中孵育制劑180分鐘后，所述制劑中丙二醛(mda)水平不超過(guò)6μmol/g，有時(shí)為4μmol/g，有時(shí)為2μmol/g，有時(shí)為0μmol/g。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，在胃模型中孵育制劑180分鐘后，所述制劑中氫過(guò)氧化物(looh)水平不超過(guò)10μmol/g，有時(shí)為6μmol/g，有時(shí)為4μmol/g，有時(shí)為2μmol/g，和有時(shí)為0μmol/g。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，在胃模型中孵育制劑180分鐘后，磷脂、甘油三酯、脂肪酸、蝦青素或任何其它活性成分的水平為孵育前其初始值的80％或更高。優(yōu)選地，其水平為孵育前其初始值的85％或更高，更優(yōu)選90％或更高，進(jìn)一步優(yōu)選97％或更高，最優(yōu)選99％或更高。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，所述制劑還包含油。優(yōu)選地，所述油是魚油、藻油、植物油或其組合。更優(yōu)選地，所述油包含至少一種ω-3脂肪酸，其中所述油具有的所述至少一種ω-3脂肪酸的濃度為25％(w/w)或更高。本發(fā)明還提供了包含上述任一種制劑的營(yíng)養(yǎng)、藥物或保健組合物或功能食品或醫(yī)療食品。本發(fā)明還提供了制備根據(jù)本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑的方法，包括：將海洋生物質(zhì)與至少一種有機(jī)溶劑混合；將所述至少一種有機(jī)溶劑與脫脂生物質(zhì)分離，得到含有所述至少一種有機(jī)溶劑和海洋卵磷脂的液相；從液相中蒸發(fā)出所述至少一種有機(jī)溶劑；獲得海洋卵磷脂；并在該過(guò)程的任何階段加入一種或多種外源性抗氧化劑。本發(fā)明還提供了制備根據(jù)本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑的方法，包括：在生物質(zhì)的制備過(guò)程中加入一種或多種外源性抗氧化劑；將海洋生物質(zhì)與至少一種有機(jī)溶劑混合；將所述至少一種有機(jī)溶劑與脫脂生物質(zhì)分離，得到含有所述至少一種有機(jī)溶劑和海洋卵磷脂的液相；從液相中蒸發(fā)出所述至少一種有機(jī)溶劑并獲得海洋卵磷脂。有時(shí)，所描述的方法中的每一個(gè)可以進(jìn)一步包括至少一個(gè)用水洗滌的步驟。任選地，當(dāng)進(jìn)行所述至少一個(gè)用水洗滌所提取的海洋卵磷脂的步驟時(shí)，將提取的海洋卵磷脂溶解在有機(jī)溶劑混合物中。有時(shí)，這些方法的每一個(gè)還可以包括濃縮海洋卵磷脂并任選地與一種或多種油混合。有時(shí)，所述一種或多種外源性抗氧化劑的加入量導(dǎo)致海洋卵磷脂制劑中外源性抗氧化劑的最終濃度為10mg/kg或更多，有時(shí)為100mg/kg或更多，有時(shí)為500mg/kg或更多，有時(shí)為1000mg/kg或更多，有時(shí)為1200mg/kg或更多，有時(shí)為1400mg/kg或更多，有時(shí)為1600mg/kg或更多，有時(shí)為2000mg/kg或更多，有時(shí)為2500mg/kg或更多，有時(shí)為3000mg/kg或更多，有時(shí)為4000mg/kg或更多。優(yōu)選地，所述一種或多種外源性抗氧化劑包含生育酚。有時(shí)，所述一種或多種外源性抗氧化劑包含兩種或更多種不同生育酚(例如α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚)的混合物。本發(fā)明還提供了治療或預(yù)防疾病或病癥的方法，包括向受試者施用治療有效量的如上文所公開(kāi)的本發(fā)明海洋卵磷脂制劑中任一種的制劑。優(yōu)選地，疾病或病癥是心血管疾病、認(rèn)知疾病、炎癥、炎性疾病、關(guān)節(jié)炎、抑郁癥或經(jīng)前期綜合征。在某些非限制性實(shí)施方案中，受試者患有心血管疾病、認(rèn)知疾病、炎癥、炎性疾病、關(guān)節(jié)炎、抑郁癥或經(jīng)前期綜合征。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，受試者患有胃腸道疾病或病癥。胃腸道疾病和病癥包括：克羅恩病或潰瘍性結(jié)腸炎、消化性潰瘍、胃潰瘍、胃食管反流病(gerd)和腸易激綜合征(ibs)等炎癥性腸病。本發(fā)明還提供降低施用于需要海洋卵磷脂的受試者的組合物的氧化狀態(tài)的方法，包括施用所述組合物并將有效量的任何一種上述公開(kāi)的海洋卵磷脂制劑共同施用于需要海洋卵磷脂的受試者。在某些非限制性實(shí)施方案中，受試者患有心血管疾病、認(rèn)知疾病、炎癥、炎性疾病、關(guān)節(jié)炎、抑郁癥或經(jīng)前期綜合征。在本發(fā)明的某些其它非限制性實(shí)施方案中，受試者患有胃腸道疾病或病癥。胃腸道疾病和病癥包括：克羅恩病或潰瘍性結(jié)腸炎、消化性潰瘍、胃潰瘍、胃食管反流病(gerd)和腸易激綜合征(ibs)等炎癥性腸病。具體實(shí)施方案本發(fā)明首次公開(kāi)了含有一種或多種外源性抗氧化劑的海洋卵磷脂制劑。術(shù)語(yǔ)“卵磷脂”是指含有1％w/w或更多種磷脂的脂質(zhì)組合物。術(shù)語(yǔ)“外源性抗氧化劑”是指至少一種天然或合成的抗氧化劑或其組合，其加入到海洋卵磷脂中，和/或加入到海洋卵磷脂的原料中，和/或在生產(chǎn)海洋卵磷脂的任何步驟期間，并且至少部分地存在于海洋卵磷脂制劑中。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“海洋卵磷脂制劑”和“制劑”或其任意的語(yǔ)言變體是可互換的。天然抗氧化劑從天然來(lái)源分離或源自天然來(lái)源，例如但不限于：海洋來(lái)源(如魚、魚類部分、磷蝦、魷魚、小蝦(shrimp)或其他甲殼類動(dòng)物)、植物來(lái)源(如大豆、向日葵、油菜籽、油菜(canola)、玉米、橄欖、迷迭香、茉莉、水果、草本、牛至屬植物(origanum)、梅利莎(melissa)、葡萄、人參、蔓越莓和茶)、微生物(野生發(fā)現(xiàn)的、發(fā)酵生長(zhǎng)的或其他的)和動(dòng)物來(lái)源(例如蛋、牛奶、羊毛、牛肉、豬油脂肪等)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，從磷蝦(磷蝦油)、魚或魚部分、魷魚、小蝦或其他甲殼類動(dòng)物中提取海洋卵磷脂。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑還包含油。任選地，所述油選自魚油、藻油、植物油及其任何組合。任選地，油包含的ω3脂肪酸濃度為25％(w/w)或更高，有時(shí)為35％(w/w)或更高，有時(shí)為50％(w/w)或更高。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，海洋卵磷脂制劑含有的外源性抗氧化劑水平為10mg/kg或以上，有時(shí)為100mg/kg或以上，有時(shí)為500mg/kg或以上，有時(shí)為1000mg/kg或以上，有時(shí)為1200mg/kg或以上，有時(shí)為1400mg/kg或以上，有時(shí)為1600mg/kg或以上，有時(shí)為2000mg/kg或以上，有時(shí)為2500mg/kg或以上，有時(shí)為3000mg/kg或以上，有時(shí)為4000mg/kg或更多。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，所述一種或多種外源性抗氧化劑選自：生育酚、生育三烯酚、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸、迷迭香提取物、鼠尾草酸、多酚、酚類及其任意組合。多酚和/或酚類可以是天然來(lái)源的(例如，來(lái)自茶、葡萄酒或橄欖)，合成來(lái)源的，或其混合物，并且可以包括：酚酸(沒(méi)食子酸、鞣花酸、丹寧酸、咖啡酸、綠原酸、肉桂酸、阿魏酸和香豆素)、單寧、木質(zhì)素、類黃酮亞類，其中包括黃酮醇(如槲皮素、高良姜素、山奈酚、楊梅酮、非瑟酮、異鼠李素、藿香黃酮醇(pachypodol)、鼠李秦素(rhamnazin)、蘆丁、羥乙基云香甙(hydroxyethylrutoside))、黃酮(金合歡素(acacetin)、芹黃素、柯因(chrysin)、香葉木素、橘黃酮、木犀草素)、異黃酮、黃烷酮(橙皮苷、柚皮素、水飛薊賓、圣草酚)、花青素(anthocyanidin)、黃烷醇(兒茶素、沒(méi)食子兒茶素、表兒茶素、表沒(méi)食子兒茶素、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(egcg)、原花青素(proanthocyanidin)、芪、原花青素(proanthocyanidin)(或無(wú)色花青素(leucoanthocyanidin))、原矢車菊素(procyanidin)、茶黃素、茶紅素黃酮醇、3-羥基黃烷酮(如二氫槲皮素、二氫山奈酚)、異黃酮(如染料木素、黃豆苷元、黃豆黃素)、矢車菊素(cyanidin)、飛燕草色素(delphinidin)、錦葵色素(malvidin)、天竺葵色素(pelargonidin)、芍藥花色素(peonidin)、牽?；ㄉ?petunidin)、白藜蘆醇、苯丙素、花青素脫氫聚酯型兒茶素(anthocyanidinsdehydrotheasinensin)、聚酯型兒茶素醌(theasinensinquinone)、表茶黃棓靈(epitheaflagallin)、羥基茶黃素、前表茶黃棓靈(proepitheaflagallin)和羥基酪醇。優(yōu)選地，所述一種或多種外源性抗氧化劑是不含任何另外的抗氧化劑的生育酚。優(yōu)選地，所述一種或多種外源性抗氧化劑包含兩種或更多種不同生育酚(例如α-生育酚和β-生育酚)的混合物。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑中的tmao水平為25mgn/100g或更少，有時(shí)15mgn/100g或更少，有時(shí)為10mgn/100g或更少，有時(shí)為7mgn/100g或更少，有時(shí)為5mgn/100g或更少，有時(shí)為5mgn/100g或更少，有時(shí)為3mgn/100g或更少，和有時(shí)為1mgn/100g或更少。術(shù)語(yǔ)“內(nèi)源性鈣水平”或“內(nèi)源性鎂水平”是指從海洋卵磷脂生物質(zhì)中提取而不添加天然或合成鈣或鎂的鈣或鎂水平。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，海洋卵磷脂制劑含有高的內(nèi)源性鈣水平，優(yōu)選700mg/kg或更高，低水平的鈉，優(yōu)選1200mg/kg或更低，和/或低的tma含量，優(yōu)選5mgn/100g或更低。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑中的內(nèi)源性鈣水平高于700mg/kg，有時(shí)高于1000mg/kg，有時(shí)高于1200mg/kg，有時(shí)高于2000mg/kg，有時(shí)高于3000mg/kg，和有時(shí)高于4000mg/kg。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑中的鈉水平低于1200mg/kg，有時(shí)低于1100mg/kg，有時(shí)低于1000mg/kg，有時(shí)低于900mg/kg，有時(shí)低于700mg/kg，和有時(shí)低于500mg/kg。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑中的鈣水平高于鈉水平；有時(shí)ca/na的比率大于1，有時(shí)大于2，有時(shí)比率大于3，有時(shí)比率大于4。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，儲(chǔ)存至少4個(gè)月后，海洋卵磷脂制劑的tma水平不會(huì)增加高于5mgn/100g，有時(shí)為4mgn/100g，有時(shí)為3mgn/100g，有時(shí)為1mgn/100g。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，在儲(chǔ)存至少5個(gè)月，至少6個(gè)月，至少7個(gè)月，至少8個(gè)月，至少9個(gè)月，至少10個(gè)月，至少11個(gè)月，或至少一年后，tma水平不會(huì)增加高于5mgn/100g，有時(shí)為4mgn/100g，有時(shí)為3mgn/100g，有時(shí)為1mgn/100g。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，在環(huán)境溫度(20-30℃)下至少6個(gè)月的時(shí)間，或在40℃或更低至少3個(gè)月的時(shí)間內(nèi)，海洋卵磷脂制劑的tma水平不會(huì)增加高于5mgn/100g，優(yōu)選4mgn/100g，更優(yōu)選3mgn/100g，最優(yōu)選1mgn/100g。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑含有高的內(nèi)源性鎂水平，為高于500mg/kg，有時(shí)高于750mg/kg，有時(shí)高于1000mg/kg，和有時(shí)高于2000mg/kg。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑含有低的游離膽堿水平，有時(shí)少于450mg/kg，有時(shí)少于300mg/kg，有時(shí)少于200mg/kg，和有時(shí)少于100mg/kg。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑含有低的甜菜堿水平，有時(shí)少于1000mg/kg或750mg/kg，有時(shí)少于500mg/kg或250mg/kg，有時(shí)少于50mg/kg，和有時(shí)少于10mg/kg。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑含有低的總氨基酸水平，有時(shí)少于0.3g/100g，有時(shí)少于0.1g/100kg，和有時(shí)少于0.05g/100g。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，磷蝦油制劑含有低水平的以下氨基酸：丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、鳥(niǎo)氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、羥脯氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸。優(yōu)選地，所述氨基酸之一的每一種的水平小于0.15g/100g或0.1g/100g，優(yōu)選小于0.05g/100g，更優(yōu)選小于0.04g/100g，甚至更優(yōu)選小于0.02g/100g，最優(yōu)選小于0.006g/100g。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑包含至少2％(w/w)的磷脂，有時(shí)高于10％(w/w)，有時(shí)高于25％(w/w)，有時(shí)高于35％(w/w)磷脂，有時(shí)高于40％(w/w)，有時(shí)高于45％(w/w)，有時(shí)高于50％(w/w)，和有時(shí)高于60％(w/w)。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑包含至少3％(w/w)的epa，有時(shí)高于5％(w/w)epa，有時(shí)高于6％(w/w)epa，有時(shí)高于8％(w/w)epa，有時(shí)高于10％(w/w)epa，和有時(shí)高于12％(w/w)epa。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，海洋卵磷脂制劑包含至少2％(w/w)dha，有時(shí)高于3％(w/w)dha，有時(shí)高于5％(w/w)dha，有時(shí)高于7％(w/w)dha，和有時(shí)高于10％(w/w)dha。本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑可以是流體油、粉末、顆粒、蠟、糊、油或水乳液形式，以及使其能夠使用的任何其它形式。在本發(fā)明的另一方面，海洋卵磷脂制劑與營(yíng)養(yǎng)、藥物或保健組合物或功能食品或醫(yī)療食品結(jié)合使用或是其一部分。本發(fā)明還提供了包含上述任一種海洋卵磷脂制劑的營(yíng)養(yǎng)、藥物或保健組合物或功能食品或醫(yī)療食品。本文使用的醫(yī)療食品是特別配制的并且旨在用于具有不能通過(guò)單獨(dú)的正常飲食滿足的獨(dú)特營(yíng)養(yǎng)需要的疾病/病癥的膳食管理。本文使用的營(yíng)養(yǎng)組合物可以是任何營(yíng)養(yǎng)組合物，包括但不限于：人乳脂替代品、嬰兒配方、成人配方、乳制品、奶粉、飲料、奶昔、冰淇淋、餅干、大豆產(chǎn)品、焙烤制品、糕點(diǎn)、面包、蛋糕、醬汁、湯、預(yù)制食品、冷凍食品、調(diào)味品、糖食、油、脂肪、人造黃油、涂抹食品、填充料、谷物、即食產(chǎn)品、嬰兒食品、幼兒食品、棒(bar)、小吃、糖果和巧克力產(chǎn)品。本文使用的功能性食品可以是任何功能性食品，包括但不限于乳制品、冰淇淋、餅干、大豆制品、焙烤制品、糕點(diǎn)、蛋糕和面包、即食產(chǎn)品、醬汁、湯、預(yù)制食品、冷凍食品、調(diào)味品、糖食、油和脂肪、人造黃油、涂抹食品、填充料、谷物、即食產(chǎn)品、飲料和奶昔、嬰兒食品、棒、小吃、糖果和巧克力產(chǎn)品。本文使用的保健組合物可以是任何保健品，其可以是可以被認(rèn)為是食物或食物的一部分并提供醫(yī)學(xué)或健康益處(包括預(yù)防和治療疾病或病癥)的任何物質(zhì)。這種保健組合物包括但不限于：食品添加劑、食品補(bǔ)充劑、膳食補(bǔ)充劑、基因工程食品(例如蔬菜、草藥產(chǎn)品和加工食品如谷物、湯和飲料)、興奮性功能食品、臨床營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品、醫(yī)用食品和藥用食品(pharmafood)。膳食補(bǔ)充劑可以以軟凝膠膠囊、片劑、糖漿和其它已知的膳食補(bǔ)充劑遞送系統(tǒng)的形式遞送。藥物或保健組合物可以是本領(lǐng)域通常使用的許多劑量遞送形式中的任一種。適合于口服施用的藥物組合物可以作為離散的劑量單位(例如丸劑、片劑、微丸、糖衣丸、膠囊或軟凝膠)、作為粉劑或顆粒劑或作為溶液劑、混懸劑、糖漿劑或酏劑形式提供。用于本發(fā)明組合物的合適的施用途徑是口服、頰含、舌下、經(jīng)由飼管的腸內(nèi)、局部、透皮、皮下或腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)和皮內(nèi))施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物經(jīng)口服施用。本發(fā)明還提供藥物組合物，其中海洋卵磷脂制劑與(藥學(xué)上)可接受的助劑和任選的其它治療劑混合。助劑在與組合物的其它成分相容的意義上必須是“可接受的”，并且對(duì)其接收者無(wú)害。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物還包含至少一種另外的藥物活性劑。本發(fā)明提供了制備本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑的方法，其包括提取過(guò)程、任選洗滌和抗氧化劑富集。在本發(fā)明的另一個(gè)方面，本發(fā)明提供本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑，其用于降低cvd危險(xiǎn)因子，和/或治療或預(yù)防cvd，和/或改善患有cvd的受試者的病況和/或改善患有認(rèn)知疾病或病癥的受試者的病況，和/或治療或預(yù)防認(rèn)知疾病或病癥，和/或治療或預(yù)防炎癥或炎性疾病和/或改善患有炎癥或炎性疾病或病癥的受試者的病況，和/或治療或預(yù)防抑郁癥和/或改善患有抑郁癥的受試者的病況，和/或治療或預(yù)防經(jīng)前期綜合癥，和/或改善患有經(jīng)前期綜合征的受試者的病況。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于減輕體重、降低血壓或心率和/或用于改善血清脂質(zhì)譜(profile)的本發(fā)明制劑。提取卵磷脂的階段任選地通過(guò)向海洋生物質(zhì)中加入一種或多種有機(jī)溶劑來(lái)形成卵磷脂提取物而進(jìn)行。生物質(zhì)可以是磷蝦粉、魚粉的形式，新鮮或冷凍的磷蝦或魚的形式，或新鮮或冷凍的磷蝦或魚通過(guò)烹飪和傾析處理除去一些含水量的形式。在制備生物質(zhì)例如磷蝦粉或魚粉時(shí)，任選加入抗氧化劑。任選地，在磷蝦或魚粉生產(chǎn)的情況下，在干燥階段之前、期間和/或之后加入這些抗氧化劑。任選地，通過(guò)離心、過(guò)濾、重力分離或其它方法將液相(含有溶于有機(jī)溶劑中的卵磷脂)與脫脂生物質(zhì)分離。任選地，通過(guò)重復(fù)上述方法從生物質(zhì)中提取與脫脂生物質(zhì)一起留下的殘留卵磷脂：向脫脂的生物質(zhì)中加入一種或多種有機(jī)溶劑并通過(guò)相同的任選方法(即離心、過(guò)濾、重力分離等)分離液體。在進(jìn)行再提取的情況下，將從提取和再提取獲得的液相合并以形成最終的液相。在選擇過(guò)濾作為分離方法的情況下，可以通過(guò)在從其中除去第一液相之后簡(jiǎn)單地洗滌作為“濾餅”剩下的脫脂生物質(zhì)進(jìn)行重復(fù)提取。通過(guò)洗滌進(jìn)行的所述再提取將再次通過(guò)使用一種或多種有機(jī)溶劑進(jìn)行。從提取和再提取獲得的濾液(即液相)合并形成最終的液相。任選地通過(guò)加入水，任選地還加入有機(jī)溶劑，將水和有機(jī)溶劑與最終液相混合，洗滌最終液相。混合后，任選地通過(guò)重力進(jìn)行分離或通過(guò)離心進(jìn)行分離，形成兩個(gè)不同的相：含有海洋卵磷脂的有機(jī)相和含有大部分水的第二相(即水相)。有機(jī)相可任選地用水和任選的有機(jī)溶劑以相同的程序洗滌。無(wú)論是否洗滌，最終液相任選進(jìn)行蒸發(fā)階段，以除去有機(jī)溶劑并獲得卵磷脂。蒸發(fā)可以在減壓下進(jìn)行。提取或再提取階段期間溶劑與海洋生物質(zhì)(溶劑體積與生物質(zhì)重量)之比小于10:1，優(yōu)選小于5:1，更優(yōu)選小于4:1。應(yīng)該控制提取條件，并且可以任選地保持在10-60℃之間，優(yōu)選在30-40℃之間，并且保持1分鐘至10小時(shí)，優(yōu)選保持1-3小時(shí)，更優(yōu)選保持2-2.5小時(shí)。提取可以分批進(jìn)行，例如在間歇反應(yīng)器中，或任選地通過(guò)連續(xù)提取工藝進(jìn)行。在連續(xù)提取系統(tǒng)如本領(lǐng)域已知的那些中，可以以并流或逆流模式進(jìn)行連續(xù)提取。在連續(xù)提取中溶劑與海洋生物質(zhì)的比例被認(rèn)為是系統(tǒng)中兩種料流的流量之比。水洗階段也可以任選地連續(xù)地進(jìn)行。任選地，水和有機(jī)相可以通過(guò)在線混合器(in-linemixer)或通過(guò)cstr或通過(guò)混合器-沉降器系統(tǒng)混合。混合的水-有機(jī)相可以通過(guò)連續(xù)或分批重力分離罐，或任選地通過(guò)連續(xù)離心分離。在連續(xù)洗滌的情況下，水、有機(jī)溶劑和最終液相之間的比率將被認(rèn)為是三個(gè)料流中每一個(gè)的流量之間的比率。有機(jī)溶劑任選地包含這樣的有機(jī)溶劑，其任選地包含極性和非極性溶劑的混合物。極性溶劑可以包括以下的一種或多種：乙醇、甲醇、2-丙醇和丁醇。非極性溶劑可以包括以下的一種或多種：己烷、庚烷和石油醚。極性和非極性溶劑(體積與體積)之比優(yōu)選為1:99-99:1，更優(yōu)選為5:95-50:50，最優(yōu)選為10:90-20:80。優(yōu)選的溶劑混合物是己烷和乙醇混合物。在洗滌階段期間用于洗滌有機(jī)相(含有溶解在有機(jī)溶劑中的卵磷脂)的水相體積任選地小于最終液相體積的100％，有時(shí)小于最終液相的50％，有時(shí)小于最終液相體積的10％。在蒸發(fā)后獲得的卵磷脂任選進(jìn)行水洗階段，其中卵磷脂優(yōu)選再溶解在有機(jī)溶劑中以形成有機(jī)相。加入水，任選地與有機(jī)溶劑一起，或任選地在其后加入到有機(jī)相中，與之一起混合，并任選地通過(guò)重力分離或離心與其分離。水洗階段可任選地重復(fù)一次或幾次。最終的海洋卵磷脂制劑將通過(guò)從洗滌的卵磷脂中去除溶劑，任選地通過(guò)蒸發(fā)有機(jī)溶劑，優(yōu)選在減壓下蒸發(fā)而獲得。進(jìn)行水洗滌時(shí)形成有機(jī)相的卵磷脂和有機(jī)溶劑之間的比例有時(shí)是(卵磷脂重量與有機(jī)溶劑體積之比)1:1-1:40，有時(shí)為1:2-1:30，有時(shí)為1:3-1:10，有時(shí)1:5-1:8。有機(jī)溶劑任選地包含這樣的有機(jī)溶劑，其任選地包含極性和非極性溶劑的混合物。極性溶劑可包括：乙醇、甲醇、丁醇等。非極性溶劑可以來(lái)自以下的一種或多種：己烷、庚烷等。極性和非極性溶劑(體積與體積)之比優(yōu)選為1:99-99:1，更優(yōu)選為5:95-50:50，更優(yōu)選為10:90-20:80。優(yōu)選的溶劑混合物是己烷和乙醇混合物。在水洗滌階段用于洗滌有機(jī)相(含卵磷脂+有機(jī)溶劑)的水相體積小于有機(jī)相體積的100％，有時(shí)小于有機(jī)相體積的50％，有時(shí)小于有機(jī)相體積的40％，有時(shí)小于有機(jī)相體積的30％，有時(shí)小于有機(jī)相體積的20％，有時(shí)小于有機(jī)相體積的10％。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，可以處理海洋卵磷脂以便將磷脂濃度增加至40％(w/w)或更高，時(shí)間為50％(w/w)或更高，有時(shí)為60％(w/w)或更高?？梢允褂萌軇┻M(jìn)行磷脂濃縮階段。濃縮的海洋卵磷脂可以任選地與一種或多種油混合以形成海洋卵磷脂制劑，其中磷脂濃度任選為30％(w/w)或更高，有時(shí)為40％(w/w)或更高，有時(shí)為50％(w/w)或更高。用于共混的一種或多種油可以任選地選自：魚油、藻油、植物油或其任何組合。任選地，用于共混的一種或多種油可以包含25％(w/w)或更高，有時(shí)為35％(w/w)或更高，有時(shí)為50％(w/w)或更高的ω3脂肪酸濃度。任選地，ω3脂肪酸是epa和/或dha。用于共混的一種或多種油可以任選地呈甘油三酯形式、乙基酯形式、游離脂肪酸形式或其任何組合。外源性抗氧化劑可以在如下過(guò)程階段的一個(gè)或多個(gè)中加入到海洋卵磷脂中：在其經(jīng)歷磷脂濃縮階段之前，在磷脂濃縮階段期間，在海洋卵磷脂與一種或多種油混合的階段期間，加入到包含一種或多種油或其任何組合的海洋卵磷脂制劑中。海洋卵磷脂樣品中的三甲胺(tma)水平由挪威的nofimabiolab的外部實(shí)驗(yàn)室測(cè)試。根據(jù)conway和byrne的微擴(kuò)散方法的修改版本在conway盤中進(jìn)行測(cè)量(e.j.conway等人，1933；k.j.obink1955)。海洋卵磷脂樣品中的tmao水平由挪威的nofimabiolab的外部實(shí)驗(yàn)室測(cè)試。根據(jù)conway和byrne的微擴(kuò)散方法的修改版本在conway盤中進(jìn)行測(cè)量(e.j.conway等人，1933；k.j.obink1955)。通過(guò)fox分析測(cè)試氫過(guò)氧化物水平。在562nm處進(jìn)行測(cè)量，其是鐵-二甲酚橙復(fù)合物的吸光度(gay1999)。丙二醛(mda)水平通過(guò)改良的tbars試驗(yàn)進(jìn)行測(cè)試。通過(guò)hplc(fenaille2001)或分光光度計(jì)定量硫代巴比妥酸-mda加合物。海洋卵磷脂樣品中的磷脂(pl)含量由第三方實(shí)驗(yàn)室(spectralservices)通過(guò)31p-nmr分析，或由hptlc分析計(jì)算。通過(guò)用氯仿和甲醇溶液(95:5的體積比體積)溶解樣品，使用含有水、甲醇、乙酸、丙酮和氯仿的洗脫液在hptlc硅膠板上運(yùn)行樣品，然后用含有水、硫酸和無(wú)水硫酸銅的染色溶液染色該板，進(jìn)行hptlc分析。通過(guò)氣相色譜(改性aocs官方方法ce1b-89或改性aocsce1i-07)分析epa和dha含量。通過(guò)加拿大posbio-sciences的icp方法進(jìn)行海洋卵磷脂樣品中礦物質(zhì)和金屬含量的元素分析。海洋卵磷脂樣品中的膽堿和甜菜堿由德國(guó)的eurofinsanalytikgmbh使用lc-ms-ms分析。根據(jù)參考方法iso13903:2005；ec152/2009(f)和iso13904:2005；ec152/2009(f)，由eurofinsanalytikgmbh分析總氨基酸含量。加速穩(wěn)定性試驗(yàn)是藥物和產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)的加速儲(chǔ)存條件模型(“新藥物和產(chǎn)品穩(wěn)定性測(cè)試q1a(r2)”，ich協(xié)調(diào)三方指南，2003年2月)。本文所用的術(shù)語(yǔ)百分比(％)與化合物的量和濃度結(jié)合使用，表示重量百分比。實(shí)施例實(shí)施例1:根據(jù)本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑的制備實(shí)施例1a.通過(guò)向200克磷蝦粉中加入800毫升溶劑并在約40℃下振蕩約2小時(shí)來(lái)進(jìn)行從磷蝦粉中提取油。溶劑混合物分別含有體積比約為90:10的己烷和乙醇。使用buchner真空系統(tǒng)從粉末中過(guò)濾溶劑(包括提取的油)。剩下作為“濾餅”的脫脂粉末用另外400毫升相同的溶劑混合物洗滌，以進(jìn)一步提取留在脫脂粉末中的油。將所有濾液合并，并將溶劑在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓蒸發(fā)，在約50℃的浴中進(jìn)行約1小時(shí)，直至達(dá)到小于10毫巴的真空，并且油相中沒(méi)有可見(jiàn)的沸騰。獲得約50克油。將50克所獲得的油中的約30克溶解在約930毫升的溶劑混合物中，其中包括體積比如下的己烷、乙醇和水：87.1％己烷，9.7％乙醇，3.2％水。攪拌該溶液，使有機(jī)相和水相在分液漏斗中分離。向上部的有機(jī)相中加入相當(dāng)于最終磷蝦油重量0.14％的混合天然生育酚。之后，蒸發(fā)(上部)有機(jī)相的溶劑，以在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓制備磷蝦油，在約50℃的浴中進(jìn)行約1小時(shí)，直至達(dá)到小于10毫巴的真空，并且油相中沒(méi)有可見(jiàn)的沸騰。所描述的過(guò)程導(dǎo)致磷蝦油制劑包含：pl＝25.8g/100g；epa＝8.2g/100g；dha＝4.8g/100g；tmao<1mgn/100g。實(shí)施例1b.使用連續(xù)工業(yè)單元逆流地提取磷蝦油。提取在約40℃下用溶劑混合物進(jìn)行，所述溶劑混合物分別含有體積比約為90:10的己烷和乙醇。設(shè)定系統(tǒng)參數(shù)以確保300kg/h的磷蝦粉和1140l/h的溶劑的流量。含有溶解油的溶劑通過(guò)重力從脫脂粉末中連續(xù)分離。在約50℃下減壓蒸發(fā)溶劑。將400kg所接收的油溶解在約2748l包括己烷、乙醇和水的溶劑混合物中。攪拌該溶液，使有機(jī)相和水相分離。將(上部)有機(jī)相的溶劑蒸發(fā)，以減壓生成磷蝦油。將得到的油用由己烷、乙醇和水組成的相同溶劑混合物進(jìn)行第二次洗滌。所描述的過(guò)程導(dǎo)致磷蝦油制劑包含：pl＝36.4g/100g；epa＝11.2g/100g；dha＝6.5g/100g；tmao<1mgn/100g；游離膽堿＝87.1mg/kg；甜菜堿<2mg/kg；ca＝1800mg/kg；na＝400mg/kg和以下的氨基酸組合物：氨基酸g/100g丙氨酸<0.015精氨酸<0.042天冬氨酸<0.017半胱氨酸<0.006谷氨酸<0.021甘氨酸<0.019組氨酸<0.02羥脯氨酸<0.05異亮氨酸<0.035亮氨酸<0.015賴氨酸<0.014甲硫氨酸<0.024鳥(niǎo)氨酸<0.05苯丙氨酸<0.031脯氨酸<0.02絲氨酸<0.016蘇氨酸<0.006色氨酸<0.01酪氨酸<0.023纈氨酸<0.016實(shí)施例2：海洋卵磷脂穩(wěn)定性商業(yè)海洋卵磷脂的穩(wěn)定性根據(jù)ich“新藥物和產(chǎn)品q1a的穩(wěn)定性試驗(yàn)”指南的推薦條件進(jìn)行評(píng)估。為了長(zhǎng)期穩(wěn)定性，將海洋卵磷脂在25±2℃/60％±5％rh下保存12個(gè)月，在加速條件下，海洋卵磷脂在40±2℃/75％±5％rh下保存。在每個(gè)測(cè)試點(diǎn)，分析樣品的過(guò)氧化值(pv)(根據(jù)美國(guó)藥典<401>脂肪和固定油；ep藥典5.02.5.5)和對(duì)茴香胺。(根據(jù)美國(guó)藥典<401>脂肪和固定油的修改版本；ep藥典5.02.5.36)如表1和表2所示，測(cè)試的海洋卵磷脂的穩(wěn)定性沒(méi)有顯示任何降低，因?yàn)閜v和對(duì)茴香胺水平保持低于藥典接受水平。海洋卵磷脂的這種公認(rèn)的穩(wěn)定性通常歸因于卵磷脂中天然抗氧化劑的存在(例如磷蝦油中的蝦青素)，并且是經(jīng)常不向海洋卵磷脂中添加外源性抗氧化劑的原因。表1:在25±2℃/60％±5％rh下海洋卵磷脂的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)月過(guò)氧化物值(meo2q/kg)對(duì)茴香胺0<0.23.53<0.26.06<0.27.59<0.22.612<0.25.3表2:在40±2℃/75％±5％rh下海洋卵磷脂的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)月pv(meqo2/kg)對(duì)茴香胺0<0.23.51<0.20.82<0.25.43<0.24.36<0.27.3實(shí)施例3：在胃模型中本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑與常規(guī)海洋卵磷脂相比的抗氧化性評(píng)分在含有2mg/mlnacl、3.2mg/mlhcl37％和7mg/ml胃蛋白酶(pepsine)的模擬胃液(sgf)中，在200μm抗壞血酸和50μmfecl3作為氧化催化劑的情況下，將根據(jù)本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑和常規(guī)海洋卵磷脂在37℃下?lián)u動(dòng)孵育180分鐘。油的最終濃度為10mg/ml。在胃模型中孵育180分鐘后分析過(guò)氧化標(biāo)記物氫過(guò)氧化物(looh，通過(guò)ferric-xylenolorangecomplex-fox測(cè)定)和丙二醛(mda-tba2hplc分析)。結(jié)果總結(jié)在表3中，該結(jié)果表明海洋卵磷脂在體外胃模型條件下傾向于氧化，脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物形成混合物(looh和mda)。為了根據(jù)其在胃模型中的抗氧化性對(duì)油進(jìn)行分級(jí)，開(kāi)發(fā)了評(píng)分量表。通過(guò)以下方法將每個(gè)樣品按增加的抗氧化性順序分為0至4：3mm或以下的looh或mda水平被認(rèn)為是低的，每個(gè)都為油提供了2分的得分。大于3并低于10mm的looh或mda水平被認(rèn)為是中等，得分為1。10mm或以上的looh或mda水平被認(rèn)為是高的，并且得分為0?？偪寡趸栽u(píng)分計(jì)算為looh和mda評(píng)分的總和，并顯示于下表3中。有趣的是，獲得了油之間的顯著差異。具體來(lái)說(shuō)，向高tmao海洋卵磷脂(>25mgntmao/100g磷蝦油)中加入混合天然生育酚降低了氧化參數(shù)的水平，從而使抗氧化性評(píng)分從0增加到1-2。類似地，與tmao水平高且沒(méi)有加入生育酚的油(0抗性評(píng)分)相比，低tmao水平導(dǎo)致油具有更高的抗性評(píng)分(1)。最重要的是，如本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑的高抗性得分(4)所證明的，在低tmao水平和存在生育酚之間獲得協(xié)同效應(yīng)。這種協(xié)同效應(yīng)是意想不到的，特別是相對(duì)于出版物來(lái)說(shuō)，其指出tmao存在增強(qiáng)了生育酚的抗氧化活性。ishikawa(1978)證實(shí)，在tmao的存在下，生育酚活性得到提高，并導(dǎo)致對(duì)亞油酸甲酯的自氧化的抑制，而在沒(méi)有tmao的情況下觀察到過(guò)氧化值的顯著增加。類似地，ishikawa和yuki(1975)證明了生育酚和tmao之間在抑制在60℃黑暗中保持的豬油氧化方面的協(xié)同作用。表3*cognis的covi-ox；天然生育酚的混合物>700mg/g評(píng)分：mda；looh≤3microm–2點(diǎn)mda；looh>3和<10microm–1點(diǎn)mda；looh≥10microm-0點(diǎn)實(shí)施例4:在胃模型中本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑與常規(guī)海洋卵磷脂相比的ω3水平含有超過(guò)1000mg/kg外源性混合天然生育酚和小于5mgn/100gtmao的根據(jù)本發(fā)明的海洋卵磷脂制劑(磷蝦油)和不含外源性抗氧化劑和超過(guò)30mgn/100gtmao的常規(guī)海洋卵磷脂(磷蝦油)在含有2mg/mlnacl、3.2mg/mlhcl37％和7mg/ml胃蛋白酶的模擬胃液(sgf)中以及200μm抗壞血酸和50μmfecl3作為氧化催化劑的情況下，在37℃下?lián)u動(dòng)孵育180分鐘。在胃模型中孵育180分鐘后分析過(guò)氧化標(biāo)記物氫過(guò)氧化物(looh，通過(guò)ferric-xylenolorangecomplex-fox測(cè)定)和丙二醛(mda-tba2hplc分析)。結(jié)果表明，在商業(yè)海洋卵磷脂中，ω-3脂肪酸水平——epa和dha降低約15％。然而，根據(jù)本發(fā)明的海洋卵磷脂的檢測(cè)顯示胃模型孵育后epa和dha水平的降低低于5％。實(shí)施例5:選擇用于本發(fā)明制劑的抗氧化劑a.優(yōu)選的魚油用抗氧化劑如實(shí)施例2所示，海洋卵磷脂在其保質(zhì)期內(nèi)是穩(wěn)定的，因此通常在卵磷脂中不加抗氧化劑。與海洋卵磷脂相反，已知魚油易于氧化，因此需要加入抗氧化劑(r.j.hamilton1998；p.k.j.p.wandasundara等人)。相信由于不同的抗氧化劑通過(guò)不同的機(jī)制起作用，不同抗氧化劑的組合將產(chǎn)生最好的抗氧化活性。通過(guò)將四種不同的抗氧化劑(混合天然生育酚、抗壞血酸棕櫚酸酯、迷迭香提取物和d-生育酚)及其組合添加到魚油(含21％w/wepa和52％w/wdha)并評(píng)估稱為油穩(wěn)定指數(shù)(osi)的在加速模型中的油穩(wěn)定性(基于aocs官方方法cd12b-92)，測(cè)試該假設(shè)。油穩(wěn)定性指數(shù)定義為在分析條件下獲得氧化快速加速之前的時(shí)間長(zhǎng)度。抗氧化性的測(cè)度通常稱為誘導(dǎo)期。因此，較高的值預(yù)測(cè)有更長(zhǎng)的穩(wěn)定期。實(shí)際上，如表4所示，三種抗氧化劑的混合物表現(xiàn)出最好的抗氧化活性，兩種抗氧化劑的混合物提供中度抗氧化活性，生育酚單獨(dú)僅提供最小的活性。表4：添加到魚油中的不同抗氧化劑組合的osi結(jié)果混合天然生育酚＝來(lái)自cognis的covi-ox；12.5％抗壞血酸棕櫚酸酯＝來(lái)自vitablend的vitablendtm160ip迷迭迭香提取物＝來(lái)自naturex的stabilenhanceosrb.在胃模型中富含蝦青素的商業(yè)磷蝦油制劑的抗氧化性評(píng)分含有高濃度tmao的常規(guī)磷蝦油富含三種濃度的蝦青素，并如實(shí)施例3所述在模擬胃液(sgf)中孵育。在180分鐘后分析作為過(guò)氧化標(biāo)記物的氫過(guò)氧化物(looh，由ferric-xylenolorangecomplex-fox測(cè)定-參見(jiàn)上述方法)。結(jié)果總結(jié)在表5中，該結(jié)果確認(rèn)商業(yè)磷蝦油在體外胃模型條件下傾向被氧化，脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物形成混合物；例如氫過(guò)氧化物(looh)。令人感興趣的是，雖然實(shí)施例3的結(jié)果表明，抗氧化劑(生育酚)的添加提高了抗性評(píng)分，但是即使蝦青素濃度增加10倍以上，通過(guò)蝦青素富集僅獲得looh水平的最小變化。這個(gè)結(jié)果是意想不到的，特別是考慮到使用其它模型證明蝦青素與生育酚相比具有更好的抗氧化活性的出版物(hama等人2012；mikiw1991)。表5c.本發(fā)明不同海洋卵磷脂制劑的抗氧化性評(píng)分具有低tmao水平的海洋卵磷脂與不同的抗氧化劑混合并在模擬胃液(sgf)中孵育。孵育180分鐘后分析過(guò)氧化標(biāo)記物氫過(guò)氧化物(looh，通過(guò)ferric-xylenolorangecomplex-fox測(cè)定)和丙二醛(mda-tba2hplc分析)。表6中總結(jié)的結(jié)果表明，雖然所有的抗氧化劑都改善了胃模型中的抗氧化性評(píng)分(一個(gè)或兩個(gè)點(diǎn)的升高)，但只有含有生育酚的抗氧化劑導(dǎo)致氧化分?jǐn)?shù)提高了3到4個(gè)點(diǎn)。令人感興趣的是，如果生育酚是唯一添加的抗氧化劑，或者如果將生育酚作為抗氧化劑混合物的一部分加入，則抗氧化性評(píng)分是相當(dāng)?shù)?。鑒于使用抗氧化劑混合物觀察到的增加魚油穩(wěn)定性的優(yōu)點(diǎn)，這一結(jié)果是出人意料的。表6當(dāng)前第1頁(yè)12當(dāng)前第1頁(yè)12