蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其中每1000mL培養(yǎng)基含有如下重量的組分：心-腦提取物5-20g、瓊脂2-6g、特異性酶顯色底物0.1-1g、二甲基甲酰胺0.05-20g、葡萄糖1-8g、硫酸鎂0.2-0.5g、氯化鋰0.2-0.5g、除氧劑0.3-0.6g、3-嗎啉代丙烷-1-磺酸0.2-1.0g、雜菌抑制劑0.5-5.0g、余量為水；所述特異性酶顯色底物是6-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷和5-溴-4-氯-3-吲哚-肌醇-1-磷酸鉀的混合物。本發(fā)明蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基克服了現(xiàn)有技術(shù)中制作成本高、生產(chǎn)過程容易污染等弊端，無需添加蛋黃或白蛋白，底物價格低廉，降低了成本減少污染方便保存。
【專利說明】蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種適用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性顯色培養(yǎng)基，以及該選擇性顯色培 養(yǎng)基的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 賭樣芽孢桿菌（Bacillus cereus)是一種革蘭陽性桿菌，芽胞桿菌屬（Bacillus) 中的一種。菌體細胞桿狀，末端方，成短或長鏈，1. 〇?1. 2X3. 0?5. 0微米。產(chǎn)芽孢，芽孢 圓形或柱形，中生或近中生，I. 0?1. 5微米，孢囊無明顯膨大。革蘭氏陽性，無莢膜，運動。 菌落大，表面粗糙，扁平，不規(guī)則。蠟狀芽胞桿菌細菌對外界有害因子抵抗力強，分布廣，是 典型的菌體細胞。
[0003] 蠟樣芽孢桿菌在自然界中分布甚廣，其中一些菌株極易污染食品、空氣和水等引 起食物中毒。我國近兩年食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)的資料顯示，蠟樣芽孢桿菌是僅次于致病性大 腸桿菌、沙門菌和副溶血性弧菌的又一重要致病菌，米飯、肉類制品、乳制品、蔬菜、水果的 帶菌率高達20-77%，中毒事件以在學(xué)校集體食堂、家庭、飲食服務(wù)單位等發(fā)生居多。致病性 蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒主要由該菌產(chǎn)生的腸毒素所致，其次是該菌感染，菌量和毒 素量成正比。腸毒素又分為耐熱性嘔吐型和不耐熱性腹瀉型之分，前者主要在米飯類食品 中形成，食后引起嘔吐型腸胃炎，后者則在各種食物中均可產(chǎn)生，食后致腹瀉型腸胃炎。
[0004] 蠟樣芽胞桿菌的分離培養(yǎng)一般使用NGKG培養(yǎng)基或MYP培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基含有蛋 黃利用蛋黃反應(yīng)，包括分離培養(yǎng)、鏡檢觀察、生化鑒定等多個步驟，制作工藝復(fù)雜，整個過程 一般需要4-7天生產(chǎn)過程中容易污染，保存不方便，已不能滿足微生物快速準(zhǔn)確檢測的現(xiàn) 實需要。目前雖然有顯色培養(yǎng)基，但是這些顯色培養(yǎng)基使用高價的磷脂酶的底物，需添加白 蛋白，制作成本高，生產(chǎn)過程中容易污染，保存不方便。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供一種蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，以及該選擇性顯色培養(yǎng)基的制 備方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。
[0006] 本發(fā)明首先涉及一種蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其中每IOOOmL培養(yǎng)基含 有如下重量的組分：
[0007]

【權(quán)利要求】
1. 一種蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，其中每lOOOmL培養(yǎng)基含有如下 重量的組分：
所述特異性酶顯色底物是6-氯-3-吲哚基--D-吡喃葡萄糖苷和5-溴-4-氯-3-吲 哚-肌醇-1-磷酸鉀的混合物。
2. 如權(quán)利要求1所述的蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述特異性酶 顯色底物中6-氯-3-吲哚基-D-吡喃葡萄糖苷和5-溴-4-氯-3-吲哚-肌醇-1-磷 酸鉀的重量比為1 :〇. 01-0. 1。
3. 如權(quán)利要求2所述的蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述特異性酶 顯色底物中6-氯-3-吲哚基-D-吡喃葡萄糖苷和5-溴-4-氯-3-吲哚-肌醇-1-磷 酸鉀的重量比為1 :〇. 01-0. 05。
4. 如權(quán)利要求1所述的蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述除氧劑選 自丙酮酸鹽、過氧化氫、巰基乙酸鹽、半胱氨酸、硫化鈉或硫化亞鐵。
5. 如權(quán)利要求4所述的蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述丙酮酸鹽 是其鈉鹽或鉀鹽。
6. 如權(quán)利要求4所述的蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述、巰基乙酸 鹽是其鈉鹽或鉀鹽。
7. 如權(quán)利要求1所述的蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述雜菌抑制 劑為甲氧芐啶。
8. -種制備如權(quán)利要求1-7任一項所述蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基的方法，其特 征在于，包括如下步驟： 1) 將特異性酶顯色底物溶于二甲基甲酰胺中配成混合液； 2) 將心-腦提取物、瓊脂、葡萄糖、硫酸鎂、氯化鋰、除氧劑、3-嗎啉代丙烷-1-磺酸、雜 菌抑制劑按比例混合； 3) 將步驟1)的混合液加入步驟2)混合液中，加水配成一定濃度溶液； 4) 120°C滅菌15min后冷卻，即得到所述蠟樣芽孢桿菌選擇性顯色培養(yǎng)基。
【文檔編號】C12R1/085GK104480186SQ201410681386
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年11月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月24日
【發(fā)明者】金京勛 申請人:蘇州嘉禧蘿生物科技有限公司