一種建立人二倍體細胞代次的分界線和代次的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種建立人二倍體細胞代次的分界線和代次的檢測方法，包括：將具有標(biāo)示作用的標(biāo)示基因植入人二倍體細胞中，獲得帶有標(biāo)記基因的標(biāo)記細胞；按照一定比例，將標(biāo)記細胞與正常細胞混合進行培養(yǎng)；培養(yǎng)結(jié)束后，統(tǒng)計標(biāo)記細胞占總細胞的比例。本發(fā)明可以檢測二倍體細胞的代次。
【專利說明】一種建立人二倍體細胞代次的分界線和代次的檢測方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物細胞【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及到一種建立人二倍體細胞代次的分界線和代次的檢測方法。

【背景技術(shù)】
[0002]世界衛(wèi)生組織在1999年就強調(diào)，用于人類疫苗生產(chǎn)的細胞基質(zhì)，人二倍體細胞是理想的病毒繁殖載體，試生產(chǎn)人類疫苗的最佳細胞株，然而在哺乳類動物5400種里面能用于人類制備疫苗的細胞載體總共不超過5個系8株細胞，其中人二倍體細胞株含有6株，由此可以看出人二倍體細胞株制備疫苗的優(yōu)勢。這些生產(chǎn)用細胞株，是病毒性疫苗生產(chǎn)所需的關(guān)鍵生物材料。
[0003]細胞在培養(yǎng)的過程中不斷的進行有絲分裂或者無絲分裂，對于人二倍體細胞培養(yǎng)來說，鑒別細胞的傳代代次是非常重要的。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種建立人二倍體細胞代次的分界線和代次的檢測方法。
[0005]為達上述目的，本發(fā)明的一個實施例中提供了一種建立人二倍體細胞代次的分界線和代次的檢測方法，包括:
[0006]A、將具有標(biāo)示作用的標(biāo)示基因植入人二倍體細胞中，獲得帶有標(biāo)記基因的標(biāo)記細胞；
[0007]B、按照一定比例，將標(biāo)記細胞與正常細胞混合進行培養(yǎng)；
[0008]C、培養(yǎng)結(jié)束后，統(tǒng)計標(biāo)記細胞占總細胞的比例。
[0009]綜上所述，本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
[0010]本發(fā)明可以檢測二倍體細胞的代次。

【具體實施方式】
[0011]實施例
[0012]1、取將要進行傳代培養(yǎng)的人二倍體細胞，在其內(nèi)部植入標(biāo)記基因；然后進行培養(yǎng)，獲得具有標(biāo)示基因的標(biāo)示細胞。
[0013]2、將具有標(biāo)記基因的細胞與正常細胞進行混合培養(yǎng)，同時記錄兩者的比例，優(yōu)先選擇兩者的比例A在1:10?1:20之間。
[0014]3、培養(yǎng)結(jié)束后，通過基因檢測的方法，統(tǒng)計標(biāo)記細胞與總細胞數(shù)量的比例B，并計算A與B的比值即為代次的粗略估算。
【權(quán)利要求】
1.一種建立人二倍體細胞代次的分界線和代次的檢測方法，包括:A、將具有標(biāo)示作用的標(biāo)示基因植入人二倍體細胞中，獲得帶有標(biāo)記基因的標(biāo)記細胞；B、按照一定比例，將標(biāo)記細胞與正常細胞混合進行培養(yǎng)；C、培養(yǎng)結(jié)束后，統(tǒng)計標(biāo)記細胞占總細胞的比例。
【文檔編號】C12Q1/06GK104328163SQ201410663876
【公開日】2015年2月4日 申請日期:2014年11月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月18日
【發(fā)明者】侯文禮, 周蓉 申請人:成都康華生物制品有限公司