一種細(xì)胞總rna的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種細(xì)胞總RNA的提取方法。步驟如下：首先收集所需要的細(xì)胞，并加入保質(zhì)液；然后加入200ul的氯仿，震蕩搖勻后放置6-8分鐘；用高速離心機，11000rpm，室溫離心10分鐘；分離提純；再用臺式離心機，室溫離心5分鐘；分離提純；用濃度不少于80%的酒精洗滌至少一次，再在室溫下離心處理4分鐘；在40攝氏度下將酒精揮發(fā)，準(zhǔn)備的細(xì)胞密度為30-50%。本發(fā)明的有益效果是，與預(yù)期的結(jié)果一致，可以證明重組蛋白表達成果。
【專利說明】—種細(xì)胞總RNA的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種實驗方法，具體來說，一種細(xì)胞總RNA的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]核糖核酸(英語:Ribonucleic acid,縮寫:RNA)是一種重要的生物大分子，因為分子由核糖核苷酸組成而得名。每個RNA分子都由核苷酸單元長鏈組成，每個核苷酸單元含有一個含氮堿基、一個核糖和一個磷酸基。RNA是具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物的遺傳訊息中間載體，并參與蛋白質(zhì)合成；還參與基因表達調(diào)控。對一部分病毒而言，RNA是其唯一的遺傳物質(zhì)。RNA存在于一切細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中，也存在于大多數(shù)已知的植物病毒和部分動物病毒以及一些噬菌體中。嘧啶堿有一個不同:RNA是尿嘧啶，DNA則為胸腺嘧啶。五碳糖不同=RNA是核糖，DNA是脫氧核糖，這樣一來組成RNA的基本單位就是核糖核苷酸；DNA則為脫氧核苷酸DNA為雙鏈結(jié)構(gòu)，RNA為單鏈結(jié)構(gòu)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]為克服上述技術(shù)問題，我們提出了以下技術(shù)方案: 一種細(xì)胞總RNA的提取方法，步驟如下:首先收集所需要的細(xì)胞，并加入保質(zhì)液；然后加入200ul的氯仿，震蕩搖勻后放置6-8分鐘；用高速離心機，IlOOOrpm,室溫離心10分鐘；分離提純；再用臺式離心機，室溫離心5分鐘；分離提純；用濃度不少于80%的酒精洗滌至少一次，再在室溫下離心處理4分鐘；在40攝氏度下將酒精揮發(fā)。
[0004]本發(fā)明中，準(zhǔn)備的細(xì)胞密度為30-50%。
[0005]本發(fā)明中，所需要的酒精濃度為85%。
本發(fā)明的有益效果是，與預(yù)期的結(jié)果一致，可以證明重組蛋白表達成果。
【具體實施方式】
[0006]一種細(xì)胞總RNA的提取方法，步驟如下:首先收集所需要的細(xì)胞，并加入保質(zhì)液；然后加入200ul的氯仿，震蕩搖勻后放置7分鐘；用高速離心機，llOOOrpm，室溫離心10分鐘；分離提純；再用臺式離心機，室溫離心5分鐘；分離提純；用濃度85%的酒精洗滌至少一次，再在室溫下離心處理4分鐘；在40攝氏度下將酒精揮發(fā)。準(zhǔn)備的細(xì)胞密度為50%。
[0007]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實施方式】，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種細(xì)胞總RNA的提取方法，其特征在于，步驟如下:首先收集所需要的細(xì)胞，并加入保質(zhì)液；然后加入200ul的氯仿，震蕩搖勻后放置6-8分鐘；用高速離心機，llOOOrpm，室溫離心10分鐘；分離提純；再用臺式離心機，室溫離心5分鐘；分離提純；用濃度不少于80%的酒精洗滌至少一次，再在室溫下離心處理4分鐘；在40攝氏度下將酒精揮發(fā)。
2.如權(quán)利要求1所述的一種細(xì)胞總RNA的提取方法，其特征在于，準(zhǔn)備的細(xì)胞密度為30-50%ο
3.如權(quán)利要求1所述的一 種進行蛋白印跡的方法，其特征在于，所需要的酒精濃度為85%。
【文檔編號】C12N15/10GK103602663SQ201310525054
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月31日
【發(fā)明者】徐麗 申請人:徐麗