一種用橄欖苦甙制備羥基酪醇的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種用橄欖苦甙制備羥基酪醇的方法。該方法是將橄欖苦甙用水溶解后，加入脂肪分解酶酶解，酶解液離心或過濾除雜后過大孔樹脂柱，先用10～25℃水洗柱，再用50～60℃水洗脫，洗脫液濃縮后干燥，制得羥基酪醇。本發(fā)明水解時采用脂肪分解酶，避免了使用酸或堿時，容易對產(chǎn)品引入污染和產(chǎn)生的廢液污染環(huán)境的問題；而且酶解過程耗時短，效率更高，更適合工業(yè)生產(chǎn)；洗柱和洗脫時用水進行，比采用有機溶劑更節(jié)約成本，更環(huán)保，產(chǎn)品的收率和含量更高。
【專利說明】一種用橄欖苦甙制備羥基酪醇的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種用橄欖苦甙制備羥基酪醇的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]羥基酪醇(Hydroxytyrosol),又名3，4_ 二羥基苯乙醇,是一種天然小分子酹類化合物。羥基酪醇在油橄欖葉中的含量甚微，約為0.2%~0.7%。但由于其表現(xiàn)出諸多的生物活性，如抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌、保護心血管系統(tǒng)和降血糖等，尤其是抗氧化活性，使其被認為是最具清除自由基的天然抗氧化劑之一，其對自由基清除率是槲皮素的2倍，表兒茶酸的3倍之多。因此羥基酪醇可廣泛應(yīng)用于美容、保健品、醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)等諸多領(lǐng)域。
[0003]目前羥基酪醇的生產(chǎn)方法主要是從洗滌橄欖果的廢水中或橄欖果榨油后的殘渣中提取。然而，天然存在的羥基酪醇的量普遍較低，大多數(shù)文獻報道羥基酪醇主要是通過水解橄欖苦苷來制備。例如黨建章、侯金星、黃志斌等發(fā)表于2011年6月第34卷第6期的《中藥材》中的文章《鹽酸水解橄欖苦苷粗提物制備羥基酪醇》指出，用鹽酸水解橄欖苦苷制備羥基酪醇的方法工藝簡單，轉(zhuǎn)化率高，經(jīng)濟實用。又如謝普軍、黃立新、張彩虹等發(fā)表于2013年8月第44卷第15期的《中藥材》中的文章《堿水解橄欖苦苷制備羥基酪醇及其抗氧化活性研究》指出，羥基酪醇的制備在堿性條件下產(chǎn)率較高，且具有較好的抗氧化活性。但這些利用酸或堿水解來制備羥基酪醇的方法，會很容易將污染引入產(chǎn)品中，產(chǎn)生的廢液還會對環(huán)境造成污染；如果用萃取的方法提取或提純，不僅會消耗大量的有機溶劑，也會對產(chǎn)品引入污染。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種用橄欖苦甙制備羥基酪醇的方法，該方法耗時短，效率聞，經(jīng)濟環(huán)保，可獲得聞收率和聞品質(zhì)的羥基釀醇。
`[0005]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
[0006]一種用橄欖苦甙制備羥基酪醇的方法，是將橄欖苦甙用水溶解后，加入脂肪分解酶酶解，酶解液離心或過濾除雜后過大孔樹脂柱，先用10~25°c水洗柱，再用50~60°C水洗脫，洗脫液濃縮后干燥，制得羥基酪醇。
[0007]酶解時，脂肪分解酶加入量和酶解時間，會因酶活性、橄欖苦甙的純度和水加入量的不同而有一定的差異。以市場上常規(guī)活性的脂肪分解酶和常見的高純度橄欖苦甙為酶解反應(yīng)的基礎(chǔ)，更為優(yōu)選的用橄欖苦甙制備羥基酪醇的方法，包括以下步驟:
[0008]I)將橄欖苦甙用4~5倍重量的水溶解后，加入橄欖苦甙重量1%。~3%。的脂肪分解酶，酶解30~40分鐘；
[0009]2)將酶解液離心或過濾除雜，然后過大孔樹脂柱，先用10~25°C水洗柱，再用50~60°C水洗脫，洗脫液濃縮后干燥，制得羥基酪醇。
[0010]上述方法中:
[0011]步驟I)中，所述橄欖苦甙是由橄欖葉提取制得的提取物；由橄欖葉提取橄欖苦甙的方法，可參考本 申請人:在先申請的申請?zhí)枮?01310312833.7的中國專利申請，該申請公開的方法制得的橄欖苦甙純度可達95%以上，用于進一步制備羥基酪醇的效果更好。
[0012]步驟I)中，所述脂肪分解酶的最佳加入量為橄欖苦甙重量的2%0。
[0013]步驟I)中，所述酶解是在室溫條件下進行，加入脂肪分解酶后攪拌均勻即可進行。
[0014]步驟2)中，所述大孔樹脂柱可選用市場上常見大孔樹脂柱，例如型號為D-101或D-102的大孔樹脂柱。[0015]步驟2)中，除雜后的酶解液的上柱流速為0.5~1.0BV/h。
[0016]步驟2)中，所述10~25°C水的水洗量為0.8~1.2BV，優(yōu)選為1BV，水洗流速則為
0.5 ~1.0BV/ho
[0017]步驟2)中，所述50~60°C水洗脫時的流速為0.5~1.0BV/h。
[0018]步驟2)中，所述濃縮的過程為:于55~65°C的條件下將洗脫液濃縮至12~15波美。
[0019]步驟2)中，所述干燥的方式優(yōu)選為冷凍干燥。
[0020]和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
[0021]1、本發(fā)明水解時采用脂肪分解酶，避免了使用酸或堿時，容易對產(chǎn)品引入污染和產(chǎn)生的廢液污染環(huán)境的問題；而且酶解過程僅為30~40分鐘，時間大大縮短，效率更高，更適合工業(yè)生產(chǎn)；
[0022]2、洗柱和洗脫時用水進行，比采用有機溶劑更節(jié)約成本，更環(huán)保，產(chǎn)品收率可達到23%~25%和含量可達到95%~99%，產(chǎn)品的收率和含量高。
【具體實施方式】
[0023]下面以實施例作進一步描述，但本發(fā)明不局限于這些實施例。
[0024]實施例1
[0025]I)將橄欖苦甙(含量98%)用4.5倍重量的水溶解后，加入橄欖苦甙重量2%。的脂肪分解酶，攪拌均勻，室溫下酶解35分鐘；
[0026]2)將酶解液離心除雜，然后過D-101大孔樹脂柱，先用20°C水洗柱，水洗量為1BV，流速為0.8BV/h,再用55°C水洗脫，流速為0.8BV/h,洗脫液于60°C的條件下濃縮至13波美后，冷凍干燥，制得羥基酪醇；經(jīng)檢測羥基酪醇含量為99%，收率為24.5%。
[0027]實施例2
[0028]I)將橄欖苦甙(含量95%)用4.5倍重量的水溶解后，加入橄欖苦甙重量3%。的脂肪分解酶，攪拌均勻，室溫下酶解30分鐘；
[0029]2)將酶解液離心除雜，然后過D-102大孔樹脂柱，先用20°C水洗柱，水洗量為
1.2BV，流速為0.5BV/h，再用55°C水洗脫，流速為1.0BV/h，洗脫液于55°C的條件下濃縮至14波美后，冷凍干燥，制得羥基酪醇；經(jīng)檢測羥基酪醇含量為98.1%，收率為23.2%。
[0030]實施例3
[0031]I)將橄欖苦甙(含量96%)用5倍重量的水溶解后，加入橄欖苦甙重量I %。的脂肪分解酶，攪拌均勻，室溫下酶解35分鐘；
[0032]2)將酶解液過濾除雜，然后過D-101大孔樹脂柱，先用25°C水洗柱，水洗量為
0.8BV，流速為0.7BV/h，再用60°C水洗脫，流速為0.5BV/h，洗脫液于60°C的條件下濃縮至15波美后，冷凍干燥，制得羥基酪醇；經(jīng)檢測羥基酪醇含量為95%，收率為24.2%。
[0033]實施例4
[0034]I)將橄欖苦甙(含量99%)用4倍重量的水溶解后，加入橄欖苦甙重量2%。的脂肪分解酶，攪拌均勻，室溫下酶解40分鐘；
[0035]2)將酶解液離心除雜，然后過D-101大孔樹脂柱，先用10°C水洗柱，水洗量為1BV，流速為1.0BV/h,再用50°C水洗脫，流速為0.7BV/h,洗脫液于65°C的條件下濃縮至12波美后，冷凍干燥，制得羥基酪醇；經(jīng)檢測羥基酪醇含量為97.4%，收率為25%。
[0036]實施例5
[0037]I)將橄欖苦甙(含量95% )用4倍重量的水溶解后，加入橄欖苦甙重量I %。的脂肪分解酶，攪拌均勻，室溫下酶解30分鐘；
[0038]2)將酶解液過濾除雜，然后過D-102大孔樹脂柱，先用25°C水洗柱，水洗量為
1.2BV，流速為1.0BV/h，再用60°C水洗脫，流速為0.5BV/h，洗脫液于55°C的條件下濃縮至12波美后，冷凍干燥，制得羥基酪醇；經(jīng)檢測羥基酪醇含量為98%，收率為25%。
【權(quán)利要求】
1.一種用橄欖苦甙制備羥基酪醇的方法，其特征在于:將橄欖苦甙用水溶解后，加入脂肪分解酶酶解，酶解液離心或過濾除雜后過大孔樹脂柱，先用10~25°c水洗柱，再用50~60°C水洗脫，洗脫液濃縮后干燥，制得羥基酪醇。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)將橄欖苦甙用4~5倍重量的水溶解后，加入橄欖苦甙重量1%。~3%。的脂肪分解酶，酶解30~40分鐘； 2)將酶解液離心或過濾除雜，然后過大孔樹脂柱，先用10~25°C水洗柱，再用50~60°C水洗脫，洗脫液濃縮后干燥，制得羥基酪醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:除雜后的酶解液的上柱流速為0.5~1.0BV/ho
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:所述10~25°C水的水洗量為0.8~1.2BV，水洗流速為0.5~1.0BV/ho
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:所述50~60°C水洗脫時的流速為0.5~1.0BV/ho
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述濃縮的過程為:于55~65°C的條件下將洗脫液濃縮至12~15波美。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:所述酶解是在室溫條件下進行。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:所述干燥的方式為冷凍干燥。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:所述橄欖苦甙是由橄欖葉提取制得的提取物。
10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:所述大孔樹脂柱的型號為D-101或D-102。
【文檔編號】C12P7/22GK103571890SQ201310518499
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2013年10月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月28日
【發(fā)明者】蔣元勇, 文繼承, 朱昂輝, 易華, 李麗金, 雍小軍 申請人:桂林茗興生物科技有限公司