一種靈菌紅素產(chǎn)生菌及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及活性產(chǎn)物的發(fā)酵生產(chǎn)及制備，屬于生物工程領(lǐng)域，具體為一種靈菌紅素產(chǎn)生菌及其制備方法與應(yīng)用。該菌為普通變形桿菌Proteus?vulgaris，于2013年6月24日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心CGMCC保藏，保藏編號(hào)：CGMCC?No.7815，保藏單位地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。該菌能夠發(fā)酵產(chǎn)生靈菌紅素PG，采用改良的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度20～28℃、培養(yǎng)時(shí)間18～24h、轉(zhuǎn)速150～300rpm，PG產(chǎn)量可達(dá)80～120mg/L。所產(chǎn)的靈菌紅素對(duì)金黃色葡萄球菌、甲型副傷寒沙門(mén)菌、白色念球菌和銅綠假單胞菌具有抑制活性，該菌在活性靈菌紅素的生物制備方面有很好的應(yīng)用前景。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種靈菌紅素產(chǎn)生菌及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及活性產(chǎn)物的發(fā)酵生產(chǎn)及制備，屬于生物工程領(lǐng)域，具體為一種靈菌紅素產(chǎn)生菌及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]靈菌紅素(Prodigiosins，PG)是一類(lèi)具有三吡咯環(huán)的天然紅色素的總稱，又名靈桿菌素、靈菌素，分子式為C2tlH25N3O (M=323.1968)，是一類(lèi)脂溶性紅色素。PG固體是一種呈暗紅色的色素，具有綠色反光，熔點(diǎn)151?152°C，幾乎不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、氯仿和苯等有機(jī)溶劑。在堿性或中性溶液中呈橙黃色，酸性溶液中呈紅色。在不同的酸堿條件下呈特有的最大紫外吸收波長(zhǎng):酸性條件在530?540nm之間有特征吸收峰，堿性條件在466?480nm之間有特征吸收峰。該色素具有抗細(xì)菌、抗真菌、抗瘧疾、免疫抑制、抗腫瘤等活性，在染色、抑制赤潮方面也受到關(guān)注，在抗腫瘤方面，因?yàn)槠渚哂邪┙M織的高針對(duì)性和對(duì)正常細(xì)胞則表現(xiàn)的低毒害作用，而成為一種非常有潛力的抗癌物質(zhì)。
[0003]PG可由一些 鏈霉菌屬(streptomyces)、沙雷氏菌屬(serratia)及假單胞菌屬(pseudomonas)等部分菌株產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，1929年由Amok等在研究Serratia生長(zhǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，并由Harashima等首次從粘質(zhì)沙雷菌(Serratia marcescens)中分離并純化出來(lái)。關(guān)于PG的研究始于美國(guó)，而后在歐美一些發(fā)達(dá)國(guó)家有了長(zhǎng)足的發(fā)展，其中關(guān)于沙雷氏菌屬(Serratia)產(chǎn)PG的研究最多。Williams以粘質(zhì)沙雷氏菌(S.marcescens)Nima株為出發(fā)菌株，搖瓶培養(yǎng)96h后得到PG的最高產(chǎn)量為0.0235g/L ;Α1οηζο等以S.marcescens為出發(fā)菌株，通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的碳氮比，利用搖瓶培養(yǎng)48h得到PG的最高產(chǎn)量為0.lg/L ；Katsumt與Nakamura以S.marcescens R-2為出發(fā)菌株,搖瓶培養(yǎng)48h得到靈菌紅素的最高產(chǎn)量為
0.17g/L ;Sole等以S.marcescens為出發(fā)菌株,通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,搖瓶培養(yǎng)48h得到PG的最高產(chǎn)量為0.2g/L ;由于PG更多的活性為人們所發(fā)現(xiàn)，其生產(chǎn)亦逐漸受到人們的重視。CangS等以一株可以利用乙醇的S.marcescens S389為出發(fā)菌株,搖瓶培養(yǎng)48h,使得PG的產(chǎn)量提高了數(shù)十倍，達(dá)到了 2.95g/L Jungdon B 等以 Serratia sp.KH-95 (KFCC10970)為出發(fā)菌株，嘗試?yán)梅磻?yīng)器擴(kuò)大發(fā)酵合成PG，通過(guò)一系列的工藝條件優(yōu)化，在有內(nèi)置吸附劑的生物反應(yīng)器中，得到了 PG產(chǎn)量最大為13.lg/L。
[0004]產(chǎn)PG的菌多自海水或土壤中分離，在PG的產(chǎn)量上還不是很理想，從自然資源中篩選得到具有高產(chǎn)PG的微生物的途徑很有應(yīng)用前景；PG的生產(chǎn)和另外一些表型(如:酪蛋白酶活性、血細(xì)胞凝集素活性)的產(chǎn)生也有一定聯(lián)系，從遺傳學(xué)角度解釋這些現(xiàn)象需要做進(jìn)一步研究。目前，PG的搖瓶生產(chǎn)產(chǎn)量可觀，但是與工業(yè)化大生產(chǎn)有一定距離。PG屬天然色素，可大量用于食品工業(yè)，醫(yī)療事業(yè)等，現(xiàn)研究主要集中在PG誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用上，PG的藥理功效，藥理機(jī)制以毒副作用等方面都尚未解決，這些方面都有待進(jìn)一步深入研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種靈菌紅素產(chǎn)生菌及其制備方法與應(yīng)用，解決發(fā)酵制備活性靈菌紅素中存在的優(yōu)質(zhì)菌株缺少、發(fā)酵周期長(zhǎng)等問(wèn)題。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案是:
[0007]一種靈菌紅素產(chǎn)生菌,該菌為普通變形桿菌Proteus vulgaris,于2013年6月24日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心CGMCC保藏，保藏編號(hào)=CGMCCN0.7815，保藏單位地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。
[0008]所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌，該菌代號(hào)為P3，在LB培養(yǎng)基上菌落呈紅色，呈波紋狀分布，革蘭氏染色陰性。
[0009]所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌，該菌的菌株16SrDNA的GenBank登陸號(hào)為:KF657723。
[0010]所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的制備方法，采集海邊泥土，取樣品lg，加入IOOml無(wú)菌去離子水，梯度稀釋后涂布LB固體培養(yǎng)基平板，28°C倒置培養(yǎng)24h?48h，篩選紅色菌落；經(jīng)反復(fù)馴化分離純化，得到靈菌紅素產(chǎn)生菌；其中，LB固體培養(yǎng)基的成分為:胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，瓊脂粉15g/L，氯化鈉10g/L，pH7.0?7.5。
[0011 ] 所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的應(yīng)用，靈菌紅素產(chǎn)生菌應(yīng)用在靈菌紅素發(fā)酵制備中。
[0012]所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的應(yīng)用，種子培養(yǎng)基采用LB液體培養(yǎng)基，其成分為IL培養(yǎng)基中含有=IOg胰蛋白胨，5g酵母粉，IOg NaCl，余量為水；取10?100 μ L_80°C保存的靈菌紅素產(chǎn)生菌濃度為50?70wt%的甘油菌液，加入5?IOmL所述的LB液體培養(yǎng)基中，28?30°C培養(yǎng)12?24h至OD6c?達(dá)0.6?1.0，以此作為種子液，進(jìn)行發(fā)酵；發(fā)酵培養(yǎng)基采用改良的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，IL培養(yǎng)基中含有:氯化鈉0.5?lg，磷酸二氫鉀lg，磷酸氫二鉀3g，氯化銨I?1.2g，硫酸鎂lg，硝酸銨2g，果糖或蔗糖20?50g，酵母粉0.1?0.5g，余量為水，ρΗ7.0 ?8.0 ;.[0013]將上述種子液按照0.5?2wt%接種至上述發(fā)酵培養(yǎng)基中，避光，培養(yǎng)溫度20?280C，轉(zhuǎn)速150?300rpm，培養(yǎng)18?24h得到發(fā)酵液。
[0014]所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的應(yīng)用，將發(fā)酵液經(jīng)6000?10000rpm，4?10°C離心8?lOmin，所得菌液的上清液用體積比為1:1?1:2的乙酸乙酯萃取，混勻后靜置10?20min，利用分液漏斗分離保存有機(jī)相；菌液沉淀用3?5倍體積的丙酮萃取，充分混勻，靜置5?IOmin,在4?10°C下,6000?8000rpm離心3?5min,取有機(jī)相；將獲得的乙酸乙酯萃取液和丙酮萃取液經(jīng)50?60°C減壓蒸餾至總體積的I?2%，混合后冷凍干燥得靈菌紅素粗品，靈菌紅素產(chǎn)量80?120mg/L。
[0015]所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的應(yīng)用，將獲得的靈菌紅素溶于二甲基亞砜或酸性甲醇，配制濃度為0.5?lg/L，對(duì)金黃色葡萄球菌、甲型副傷寒沙門(mén)菌、白色念球菌或銅綠假單胞菌具有抑制活性。
[0016]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及有益效果是:
[0017]1、本發(fā)明所提供的靈菌紅素產(chǎn)生菌P3來(lái)自山東省煙臺(tái)市萊山區(qū)海岸帶的泥土中，經(jīng)人工富集、篩選、分離及純化獲得，能夠高效發(fā)酵產(chǎn)生靈菌紅素的細(xì)菌。經(jīng)生理生化指標(biāo)鑒定及16SrDNA分析，該菌為普通變性桿菌(Proteus vulgaris)，代號(hào)P3。在常規(guī)LB固體培養(yǎng)基上菌落呈紅色，革蘭氏染色為陰性。
[0018]2、本發(fā)明能夠發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的細(xì)菌及其在靈菌紅素發(fā)酵生產(chǎn)與制備中的應(yīng)用。該菌的純培養(yǎng)物在改良的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基和優(yōu)化的培養(yǎng)條件下，24h靈菌紅素的產(chǎn)量可達(dá)120mg/L。與現(xiàn)有的菌株相比，大幅縮短了發(fā)酵周期，有效提高了單位時(shí)間內(nèi)靈菌紅素的產(chǎn)量。
[0019]3、本發(fā)明針對(duì)靈菌紅素的制備，提供一種低溫萃取的制備工藝，利用低溫高速離心、乙酸乙酯和丙酮萃取、低溫濃縮、冷凍干燥，有效的保護(hù)了所制備的靈菌紅素的活性。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0020]圖1:靈菌紅素P3PG在甲醇溶液中紫外可見(jiàn)光吸收光譜掃描圖。
[0021]圖2:靈菌紅素P3PG質(zhì)譜圖(LC-MS)。其中，A譜為總離子流圖；B、C譜為3.94min的質(zhì)譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022]針對(duì)本發(fā)明所用菌種及其靈菌紅素的發(fā)酵制備及活性分析，采用下述方式具體實(shí)施。但本發(fā)明所述的實(shí)施方式不限于此。
[0023]實(shí)施例1:靈菌紅素產(chǎn)生菌的篩選分離
[0024]采集山東省煙臺(tái)市萊山區(qū)海邊泥土，取樣品lg，加入IOOml無(wú)菌去離子水，梯度稀釋后涂布LB固體培養(yǎng)基平板，28°C倒置培養(yǎng)24h?48h，篩選紅色菌落。經(jīng)反復(fù)馴化分離純化，得到一株靈菌紅素產(chǎn)生菌P3。其中，LB固體培養(yǎng)基的成分為:胰蛋白胨(Tryptone)IOg/L，酵母粉(Yeast extract) 5g/L，氯化鈉(NaCl) 10g/L，余量為水；ρΗ7.0 ?7.5，121 °C，20min高壓滅菌，待冷卻至50?60°C時(shí)，倒制平板。
[0025]平板觀察該菌落呈明亮的紅色，呈波紋狀分布，革蘭氏染色為陰性。該菌于2013年6月24日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心CGMCC保藏，經(jīng)鑒定該菌的分類(lèi)命名為普通變性桿菌(Proteus vulgaris)。
[0026]對(duì)獲得的菌株進(jìn)行16SrDNA序列測(cè)定，采用細(xì)菌通用引物27F和1492R進(jìn)行PCR擴(kuò)增，反應(yīng)總體系為，取PCR產(chǎn)物2?5 μ I進(jìn)行l(wèi)wt%瓊脂糖凝膠電泳，EB染色后紫外檢測(cè).用瓊脂糖凝膠純化試劑盒(購(gòu)自大連寶生物公司)切膠回收1.5kb大小的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序分析。菌株的16SrDNA序列測(cè)序結(jié)果登錄GenBank,并用BLAST與GenBank中的16SrDNA序列進(jìn)行同源性比較，將得到的相似菌株的16SrDNA，利用MEGA4.0軟件，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，分析各分離菌株的進(jìn)化地位。經(jīng)鑒定:該菌株16SrDNA的GenBank登陸號(hào)為:KF657723。
[0027]實(shí)施例2:靈菌紅素產(chǎn)生菌P3的發(fā)酵培養(yǎng)
[0028]種子培養(yǎng)基采用LB液體培養(yǎng)基，其成分為IL培養(yǎng)基中含有:10g胰蛋白胨，5g酵母粉，IOg NaCl，余量為水。
[0029]取10?100 μ L_80°C保存的靈菌紅素產(chǎn)生菌P3濃度為50?70wt%的甘油菌液，加入5?IOmL LB液體培養(yǎng)基中，28?30°C培養(yǎng)12?24h至OD6tltl達(dá)0.6?1.0，以此作為種子液，進(jìn)行發(fā)酵。
[0030]發(fā)酵培養(yǎng)基采用改良的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，IL培養(yǎng)基中含有:氯化鈉(NaCl)0.5?lg，磷酸二氫鉀(KH2PO4) lg，磷酸氫二鉀(K2HPO4) 3g，氯化銨(NH4Cl) I?1.2g，硫酸鎂(MgSO4)lg，硝酸銨(NH4H03)2g，果糖或蔗糖20?50g，酵母粉0.1?0.5g，余量為水，pH7.0?8.0。
[0031]將種子液按照0.5?2wt%接種至上述發(fā)酵培養(yǎng)基中，避光，培養(yǎng)溫度20?28°C，轉(zhuǎn)速150?300rpm (轉(zhuǎn)/分鐘)，培養(yǎng)18?24h得到發(fā)酵液。
[0032]實(shí)施例3:靈菌紅素P3PG的制備[0033]將實(shí)施例2所述的發(fā)酵液分別置于離心管，溫度為4?10°C，轉(zhuǎn)速6000?lOOOOrpm，離心8?lOmin。所得上清液加入1:1?1:2 (v/v)的乙酸乙酯，混勻后靜置10?20min，利用分液漏斗分離保存有機(jī)相；菌液沉淀加入3?5倍體積的丙酮，充分混勻，靜置5?lOmin，在4?10°C下，6000?8000rpm離心3?5min，取有機(jī)相。將獲得的乙酸乙酯和丙酮萃取液在50?60°C下減壓蒸餾至總體積的I?2%，冷凍干燥得靈菌紅素粗品P3PG。
[0034]實(shí)施例4:P3PG結(jié)構(gòu)鑒定
[0035]將實(shí)施例3獲得的P3PG溶解于酸性甲醇中，利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)掃描其在190?800nm波長(zhǎng)段的吸光度。發(fā)現(xiàn)具有537nm的特征吸收峰。與已報(bào)道的靈菌紅素的吸收光譜圖一致。
[0036]將P3PG做液質(zhì)分析=Agilent1200型液相色譜儀；色譜柱為Agilent ZorbaxSB-C18(50.0mmX 2.1mm，1.8 μ mid)，流動(dòng)相為甲醇:濃度為0.lwt%的甲酸水溶液=70:30(體積比)，分析時(shí)間IOmin ;柱溫25°C;流速0.35mL/min。質(zhì)譜條件如下:AgilentG6220A飛行時(shí)間質(zhì)譜儀；離子化方式為ESI(+);質(zhì)量掃描范圍m/zllO?1000 ;毛細(xì)管電壓4000V ;霧化氣壓力206844Pa ;干燥氣流速度10L/min ;干燥溫度350°C ;碎片電壓180V ;選擇參比液作實(shí)時(shí)質(zhì)量數(shù)矯正。結(jié)果得到相對(duì)分子量為324.27，由此可計(jì)算其分子式為C2tlH25N3O,與報(bào)道的PG的分子式一致。
[0037]如圖1所示，從P3PG在甲醇溶液中紫外可見(jiàn)光波長(zhǎng)掃描圖可以看出，該色素在537nm處有最大吸收峰，與文獻(xiàn)中報(bào)道的靈菌紅素的紫外吸收峰535nm略有不同，可以通過(guò)測(cè)定537nm的吸收值來(lái)研究色素的表達(dá)量。
[0038]如圖2所示，從P3PG質(zhì)譜圖可以看出，對(duì)3.94分鐘相對(duì)豐度最高(圖2A)的峰進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)存在m/z324.27 [M+H]，判斷該色素的相對(duì)分子質(zhì)量為323.27 (圖2B)。逐級(jí)質(zhì)譜獲得的離子碎片中存在 m/z309 (圖 2C)、m/z252、m/z224、m/z236、m/zl61 和 m/zl49 等，與目前已知的靈菌紅素碎片數(shù)據(jù)基本一致。綜合紫外可見(jiàn)吸收光譜和質(zhì)譜分析的結(jié)果，判定該紅色素主要成分為靈菌紅素。
[0039]實(shí)施例5:P3PG的抑菌性能
[0040]將實(shí)施例3獲得的P3PG溶于二甲基亞砜(DMS0)，配制濃度為0.7g/L。將濾紙片浸入其中，50°C干燥后，分別置于涂布金黃色葡萄球菌、甲型副傷寒沙門(mén)菌、銅綠假單胞菌的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)平板上。37°C培養(yǎng)24h后，觀察抑菌圈的產(chǎn)生。
[0041]其中，胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)的成分為:胰蛋白胨1.5% (g/100ml)，大豆蛋白胨0.5% (g/100ml)，氯化鈉0.5% (g/100ml)，余量為水。用蒸餾水配制而成，調(diào)節(jié)pH為7.2±0.2，經(jīng)121°C壓力蒸汽滅菌后使用。
[0042]實(shí)施例結(jié)果表明，采用本發(fā)明能夠發(fā)酵產(chǎn)生靈菌紅素(Prodigiosins),通過(guò)改良的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度20?28°C、培養(yǎng)時(shí)間18?24h、轉(zhuǎn)速150?300rpm，PG產(chǎn)量可達(dá)80?120mg/L。所產(chǎn)的靈菌紅素對(duì)金黃色葡萄球菌、甲型副傷寒沙門(mén)菌、白色念球菌和銅綠假單胞菌具有抑制活性，該菌在活性靈菌紅素的生物制備方面有很好的應(yīng)用前景。
【權(quán)利要求】
1.一種靈菌紅素產(chǎn)生菌，其特征在于:該菌為普通變形桿菌Proteus vulgaris,于2013年6月24日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心CGMCC保藏，保藏編號(hào):CGMCC N0.7815，保藏單位地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。
2.按照權(quán)利要求1所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌，其特征在于:該菌代號(hào)為P3，在LB培養(yǎng)基上菌落呈紅色，呈波紋狀分布，革蘭氏染色陰性。
3.按照權(quán)利要求1所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌，其特征在于:該菌的菌株16SrDNA的GenBank 登陸號(hào)為:KF657723。
4.一種權(quán)利要求1所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的制備方法，其特征在于:采集海邊泥土，取樣品lg，加入IOOml無(wú)菌去離子水，梯度稀釋后涂布LB固體培養(yǎng)基平板，28°C倒置培養(yǎng)24h?48h，篩選紅色菌落；經(jīng)反復(fù)馴化分離純化，得到靈菌紅素產(chǎn)生菌；其中，LB固體培養(yǎng)基的成分為:胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，瓊脂粉15g/L，氯化鈉10g/L，pH7.0?7.5。
5.一種權(quán)利要求1所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的應(yīng)用，其特征在于:靈菌紅素產(chǎn)生菌應(yīng)用在靈菌紅素發(fā)酵制備中。
6.按照權(quán)利要求5所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的應(yīng)用，其特征在于:種子培養(yǎng)基采用LB液體培養(yǎng)基，其成分為IL培養(yǎng)基中含有:10g胰蛋白胨，5g酵母粉，IOgNaCl,余量為水；取10?ΙΟΟμ L-80°C保存的靈菌紅素產(chǎn)生菌濃度為50?70wt%的甘油菌液，加入5?IOmL所述的LB液體培養(yǎng)基中，28?30°C培養(yǎng)12?24h至OD6tltl達(dá)0.6?1.0，以此作為種子液，進(jìn)行發(fā)酵；發(fā)酵培養(yǎng)基采用改良的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，IL培養(yǎng)基中含有:氯化鈉0.5?lg，磷酸二氫鉀lg，磷酸氫二鉀3g，氯化銨I?1.2g，硫酸鎂lg，硝酸銨2g，果糖或蔗糖20?50g，酵母粉0.1?0.5g，余量為水，pH7.0?8.0 ; 將上述種子液 按照0.5?2wt%接種至上述發(fā)酵培養(yǎng)基中，避光，培養(yǎng)溫度20?28°C，轉(zhuǎn)速150?300rpm，培養(yǎng)18?24h得到發(fā)酵液。
7.按照權(quán)利要求6所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的應(yīng)用，其特征在于:將發(fā)酵液經(jīng)6000?10000rpm，4?10°C離心8?lOmin，所得菌液的上清液用體積比為1:1?1:2的乙酸乙酯萃取，混勻后靜置10?20min，利用分液漏斗分離保存有機(jī)相；菌液沉淀用3?5倍體積的丙酮萃取，充分混勻，靜置5?IOmin,在4?10°C下,6000?8000rpm離心3?5min,取有機(jī)相；將獲得的乙酸乙酯萃取液和丙酮萃取液經(jīng)50?60°C減壓蒸餾至總體積的I?2%，混合后冷凍干燥得靈菌紅素粗品，靈菌紅素產(chǎn)量80?120mg/L。
8.按照權(quán)利要求7所述的靈菌紅素產(chǎn)生菌的應(yīng)用，其特征在于:將獲得的靈菌紅素溶于二甲基亞砜或酸性甲醇，配制濃度為0.5?lg/L，對(duì)金黃色葡萄球菌、甲型副傷寒沙門(mén)菌、白色念球菌或銅綠假單胞菌具有抑制活性。
【文檔編號(hào)】C12P17/16GK103436476SQ201310425907
【公開(kāi)日】2013年12月11日 申請(qǐng)日期:2013年9月17日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月17日
【發(fā)明者】焦緒棟, 秦松, 崔玉琳, 李莉莉 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所