專利名稱：用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體及其制備方法，屬于生物材料領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
石墨烯是一種新型的碳納米材料，具有獨(dú)特的二維平面結(jié)構(gòu)，已被應(yīng)用于柔性透明電極、增強(qiáng)材料等領(lǐng)域；同時在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，石墨烯近年來也備受關(guān)注，已被用于細(xì)胞成像、藥物輸運(yùn)、生物分析、干細(xì)胞工程及腫瘤治療方面研究。海綿狀三維多孔石墨烯材料首先由沈陽金屬所成會明等發(fā)現(xiàn)，其合成方法通常為，以泡沫鎳為催化劑，有機(jī)氣體如甲烷為碳源，采用化學(xué)氣相沉積法(CVD)制備含有催化劑的三維多孔石墨烯材料，然后腐蝕去除催化劑后得到海綿狀三維多孔石墨烯材料。這種方法制備的石墨烯材料具有優(yōu)良的電學(xué)、力學(xué)性能，可進(jìn)一步應(yīng)用于生物芯片、植入材料等 生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。組織器官中的細(xì)胞均在三維環(huán)境中生長，因此在目前二維平面的細(xì)胞培養(yǎng)皿或石墨烯襯底上培養(yǎng)細(xì)胞時，受平面生長環(huán)境的限制，細(xì)胞的活性、形貌和生長狀態(tài)等與體內(nèi)環(huán)境下相比有很大改變，因此探索將海綿狀三維多孔石墨烯應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)具有重要的價(jià)值；并且，由于細(xì)胞培養(yǎng)對材料的雜質(zhì)含量和加工過程有很高的要求,如何制備具有高導(dǎo)電率、超輕多孔、良好生物相容性的三維多孔石墨烯也是亟待解決的難題。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述提到的現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明提供了一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體及其制備方法，該細(xì)胞培養(yǎng)載體實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞的三維培養(yǎng)，模擬細(xì)胞的體內(nèi)生長環(huán)境，有利于維持細(xì)胞的生長狀態(tài)和活性，促進(jìn)細(xì)胞生長。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案
一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體，所述載體為三維多孔石墨烯支架。進(jìn)一步的，所述三維多孔石墨烯支架的外表修飾有生物活性分子，所述生物活性分子可以是多聚賴氨酸或?qū)诱尺B蛋白。優(yōu)選的,所述三維多孔石墨烯支架的孔徑為20-500微米,密度為2-20 mg/cm3。將所述的三維多孔石墨烯支架固定于透明聚苯乙烯或玻璃材料基底上，并在三維多孔石墨烯支架的周圍固定液池壁，形成培養(yǎng)池，用于細(xì)胞培養(yǎng)；所培養(yǎng)的細(xì)胞至少為腫瘤細(xì)胞、原代神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞中的一種或幾種。如上所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體的制備方法，它包括以下步驟
(a)應(yīng)用化學(xué)氣相沉積工藝在金屬泡沫支架上制備三維多孔石墨烯支架；
(b)將含有金屬泡沫支架的三維多孔石墨烯浸泡在酒精和水的混合溶劑中5-20min ；采用真空抽氣去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣；
(c)在封閉容器中，采用用酸性腐蝕液去除金屬泡沫支架,然后依次采用1，0.1，0.01，O. 001 mol/L的鹽酸或硝酸溶液各洗滌I次，再以去離子水洗滌數(shù)次；得到用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體三維多孔石墨烯支架。優(yōu)選的，步驟(b)中真空抽氣后壓力小于IOkPa,并保持至少30分鐘。優(yōu)選的，所述金屬催化劑為泡沫鎳、泡沫銅、泡沫金銅合金或泡沫鎳銅合金。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)至少在于
(1)本發(fā)明提供的細(xì)胞培養(yǎng)載體，在三維多孔石墨烯支架結(jié)構(gòu)上培養(yǎng)細(xì)胞，由于三維多孔石墨烯材料的多孔結(jié)構(gòu)具有超高孔隙率，為細(xì)胞生長提供充足空間，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的三維培養(yǎng)，模擬了細(xì)胞的體內(nèi)生長環(huán)境，有利于維持細(xì)胞的生長狀態(tài)和活性，促進(jìn)細(xì)胞生長；而且經(jīng)本方法處理的三維多孔石墨烯能夠保持本征石墨烯優(yōu)良的力學(xué)、電學(xué)、電化學(xué)性能，滿足調(diào)控細(xì)胞生長和分化等需求；
(2)本發(fā)明在制備用作基底的三維多孔石墨烯支架的過程中，在去除催化劑模板前，首先采用溶劑浸潤三維多孔石墨烯支架，避免材料因表面張力和密度的原因漂浮在液體表 面，并抽真空去除材料表面吸附的空氣，提高腐蝕液的浸潤性，且在封閉環(huán)境中進(jìn)行浸泡處理，有效避免了腐蝕液的揮發(fā)及凝結(jié)，更易在后續(xù)處理過程中去除金屬和離子的殘余，從而顯著提高材料的生物相容性和處理過程的可重復(fù)性；有效避免催化劑和腐蝕劑殘留在石墨烯支架中，提高了培養(yǎng)細(xì)胞的活性和存活率。


為了更清楚地說明本申請實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本申請中記載的一些實(shí)施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。圖I是本發(fā)明一較佳實(shí)施例中含有三維多孔石墨烯支架的培養(yǎng)池的結(jié)構(gòu)示意圖； 圖2是本發(fā)明實(shí)施例中的三維多孔石墨烯支架表面培養(yǎng)PC 12細(xì)胞，經(jīng)β-微管蛋白
(Tubulin)免疫熒光染色后的熒光照片；
圖3是本發(fā)明實(shí)施例中三維多孔石墨烯支架的掃描電鏡照片。
具體實(shí)施例方式針對現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷與不足，經(jīng)長期研究和實(shí)踐，本發(fā)明提出了利用三維多孔石墨烯支架作為細(xì)胞培養(yǎng)載體的構(gòu)想及這種用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體的制備方法。該用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體為三維多孔石墨烯支架2 ;所述三維多孔石墨烯支架2的外表可以修飾有生物活性分子，所述生物活性分子可以是多聚賴氨酸或?qū)诱尺B蛋白；所述三維多孔石墨烯支架2的孔徑為20-500微米，密度為2-20 mg/cm3。如圖I所示，將所述的三維多孔石墨烯支架2固定于透明聚苯乙烯或玻璃材料基底I上，并在三維多孔石墨烯支架的周圍固定液池壁4，形成培養(yǎng)池；然后采用丙酮、異丙醇、酒精清洗去除有機(jī)物殘留，再用大量去離子水浸泡三維多孔石墨烯支架2以進(jìn)一步去除可溶性有毒物質(zhì)；在培養(yǎng)池中注入培養(yǎng)基形成液池3，用于細(xì)胞培養(yǎng)；所培養(yǎng)的細(xì)胞至少為腫瘤細(xì)胞、原代神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞中的一種或幾種。本發(fā)明還提供了一種制作用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體的制備方法，其主要包括下列步驟首先，采用傳統(tǒng)CVD的方法，以孔隙率約為95%的金屬泡沫為催化劑，在1000 °C條件下，以甲烷為碳源制備單層或少層石墨烯，制備有金屬泡沫的三維多孔石墨烯支架；其次，將含有金屬泡沫的三維多孔石墨烯浸泡在酒精和水的混合溶劑中5-20 min，采用真空抽氣去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣；然后，在封閉容器中，采用用酸性腐蝕液去除金屬泡沫，最后依次采用1，0.1，0.01，O. 001 mol/L的鹽酸或硝酸溶液各洗滌一次，再以去離子水洗滌數(shù)次得到三維多孔石墨烯支架。其中，三維多孔石墨烯支架的孔徑由泡沫鎳的孔徑結(jié)構(gòu)決定，密度與材料的層數(shù)有關(guān)。優(yōu)選的，三維多孔石墨烯支架層數(shù)為五至十層，孔徑在100-300微米之間，密度在密度為2-20 mg/cm3。藉由本發(fā)明，可同時實(shí)現(xiàn)各類細(xì)胞在石墨烯表面的三維培養(yǎng)，為進(jìn)一步石墨烯基生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用提供技術(shù)支持。以下結(jié)合若干較佳實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明。實(shí)施例I 采用CVD的方法，以孔隙率95 %、孔徑在30-300微米的泡沫鎳為催化劑，在900 °〇條件下，以甲烷為碳源生長5-10層石墨烯。將含有催化劑鎳的三維多孔石墨烯支架浸泡在含75 %酒精的水溶液中10 min，抽氣使壓力小于10 kPa，保持30 min，去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣；然后通入空氣至常壓后，加入1000倍體積的酸性氯化鐵腐蝕液，在密封環(huán)境中浸泡24 h以去除催化劑鎳；然后依次采用1，0.1，0.01, O. 001 mol/L的鹽酸溶液各洗滌I次，再用去離子水洗滌3次。制得的三維多孔石墨烯支架干燥后孔徑在20-300微米之間，比泡沫鎳模板的孔徑略有減小，密度約為4-5 mg/cm3。用玻璃基底將三維多孔石墨烯支架撈起，直接采用道康寧3140硅酮粘合劑固定，將液池壁固定于三維多孔石墨烯支架的周圍，并在室溫條件下固化時間12 h，形成培養(yǎng)池；繼而用丙酮處理5 h，隨后用異丙醇清洗0.5 h，然后用大量的去離子水清洗，并浸泡120 h。將制得的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體浸泡于I mg/mL的多聚賴氨酸PBS溶液中12 h，然后用大量的滅菌PBS緩沖液沖洗。向培養(yǎng)池中注入含15%血清培養(yǎng)基，并浸泡2 h，用于PC12細(xì)胞(大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株)的培養(yǎng)，培養(yǎng)基為含15 %胎牛血清的DMEM，接種密度為IO5細(xì)胞/cm2。培養(yǎng)結(jié)果顯示生長的細(xì)胞胞體豐滿、胞漿透明、細(xì)胞邊緣折光率高，生長狀態(tài)良好，如圖2所示。實(shí)施例2
采用CVD的方法，以孔隙率95 %、孔徑在100-300微米的泡沫銅為催化劑，在950 °〇條件下，以甲烷為碳源生長10-20層石墨烯。將含有催化劑鎳的三維多孔石墨烯支架浸泡在含98 %酒精的水溶液中20 min，抽氣使壓力至100 Pa，保持30 min，去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣；然后通入空氣至常壓后，加入100倍體積的酸性腐蝕液以去除催化劑鎳；然后依次采用1，O. I, O. 01 mol/L的硝酸溶液各洗滌I次，再用去離子水洗滌6次。制得的三維多孔石墨烯支架干燥后孔徑在100-300微米之間,密度約為5-8 mg/cm3,形貌如圖3所示。用玻璃基底將三維多孔石墨支架烯撈起，干燥后直接采用道康寧3140硅酮粘合劑固定，將液池壁固定于三維多孔石墨烯支架的周圍，并在室溫條件下固化時間24h，形成培養(yǎng)池；繼而用丙酮處理2 h，隨后用酒精清洗2 h，然后用大量的去離子水清洗，并浸泡24h。將制得的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體浸泡于I mg/mL的多聚賴氨酸PBS溶液中12 h，然后用大量的滅菌PBS緩沖液沖洗；向培養(yǎng)池中注入含15%血清的DMEM培養(yǎng)基，可用于PC12細(xì)胞培養(yǎng)。實(shí)施例3
采用CVD的方法，以孔隙率95 %、孔徑在300-500微米的泡沫金銅合金為催化劑，在750°C條件下，以甲烷為碳源生長50-100層石墨烯。將含有催化劑鎳的三維多孔石墨烯支架浸泡在含2 %酒精的水溶液中60 min，抽氣使壓力小于10 kPa，保持30 min，去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣；然后通入空氣至常壓后，加入1000倍體積的酸性氯化鐵腐蝕液以去除催化劑鎳；然后依次采用1，O. I, O. 01，O. 001, O. 0001 mol/L的鹽酸溶液各洗滌I次，再用去離子水洗滌3次。制得的三維多孔石墨烯支架干燥后孔徑在300-500微米之間，密度約為15-20 mg/cm3。使用組織培養(yǎng)用途的聚苯乙烯(TCPS)基底將三維多孔石墨烯撈起，直接采用道 康寧3140硅酮粘合劑固定，將液池壁固定于三維多孔石墨烯支架的周圍，并在室溫條件下固化時間48h，形成培養(yǎng)池；繼而用酒精處理5 h，然后用大量的去離子水清洗，并浸泡I h。將制得的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體浸泡于10 mg/mL的多聚賴氨酸PBS溶液中24 h，然后用大量的滅菌PBS緩沖液沖洗。向培養(yǎng)池中注入含15%血清培養(yǎng)基，并浸泡2 h，用于原代海馬神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)，培養(yǎng)基為含15%胎牛血清的DMEM，接種密度為IO6細(xì)胞/cm2。培養(yǎng)結(jié)果顯示三維多孔石墨烯支架的生物相容性良好，細(xì)胞生長狀態(tài)、MTT檢測結(jié)果顯示，細(xì)胞生長狀態(tài)均優(yōu)于其在二維平面石墨烯和TCPS襯底上的生長狀態(tài)，細(xì)胞存活率提高50 %。實(shí)施例4
采用CVD的方法，以孔隙率95 %、孔徑在100-300微米的泡沫銅鎳合金為催化劑，在900°〇條件下，以甲烷為碳源生長1-5層石墨烯。將含有催化劑鎳的三維多孔石墨烯支架浸泡在含50 %酒精的水溶液中5 min，抽氣使壓力小于100 Pa，保持30 min，去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣；然后通入空氣至常壓后，加入100倍體積的酸性硝酸鐵腐蝕液以去除催化劑鎳；然后依次采用O. 1，0.01 mol/L的硝酸溶液各洗滌I次，再用去離子水洗滌3次。制得的三維多孔石墨烯支架干燥后孔徑在50-300微米之間，比泡沫鎳模板的孔徑略有減小，密度約為2-3 mg/cm3。用TCPS基底將三維多孔石墨烯支架撈起，直接采用道康寧3140硅酮粘合劑固定，將液池壁固定于三維多孔石墨烯支架的周圍，并在室溫條件下固化時間24h，形成培養(yǎng)池；繼而用丙酮處理5 h，然后用大量的去離子水清洗，并浸泡48 h。將制得的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體浸泡于I mg/mL的多聚賴氨酸PBS溶液中12 h，然后用大量的滅菌PBS緩沖液沖洗。向培養(yǎng)池中注入含15%血清培養(yǎng)基，并浸泡10 h，用于原代海馬神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)。實(shí)施例5
采用CVD的方法，以孔隙率95 %、孔徑在100-300微米的泡沫鎳為催化劑，在900 V條件下，以甲烷為碳源生長5-10層石墨烯。將含有催化劑鎳的三維多孔石墨烯支架浸泡在含75 %酒精的水溶液中20 min，抽氣使壓力小于10 kPa，保持50 min，去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣；然后通入空氣至常壓后，加入1000倍體積的酸性氯化鐵腐蝕液，在密封容器中浸泡24 h以去除催化劑鎳；然后依次采用1，O. I, O. 01，O. 001 mol/L的鹽酸溶液各洗滌I次，再用去離子水洗滌6次。制得的三維多孔石墨烯支架干燥后孔徑在100-300微米之間，比泡沫鎳模板的孔徑略有減小，密度約為4-5 mg/cm3。用玻璃基底將三維多孔石墨烯撈起，直接采用道康寧3140硅酮粘合劑固定，將液池壁固定于三維多孔石墨烯支架的周圍，并在室溫條件下固化時間12 h，形成培養(yǎng)池；繼而用丙酮、異丙醇和酒精各處理I h，然后用大量的去離子水清洗，并浸泡120 h。將培養(yǎng)池中的三維多孔石墨烯支架采用生物親和分子層粘連蛋白O. lyg/mL修飾120 h，然后用大量的滅菌PBS緩沖液沖洗。采用選擇培養(yǎng)基篩選方法，培養(yǎng)得到神經(jīng)球樣小鼠神經(jīng)干細(xì)胞，采用單細(xì)胞分散的方法在三維多孔石墨烯支架表面接種細(xì)胞，密度為IO4細(xì)胞/cm2。兩天后MTT及LDH酶活性檢測結(jié)果顯示，該三維多孔石墨烯載體具有良好的生物相容性，與TCPS (對照組)相比，存活率為對照組光吸收值的98%，LDH分析結(jié)果是對照組熒光光強(qiáng)的101%，兩者表面相對細(xì)胞存活率、膜完整性無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異；而在去除催化劑模板前，不采用溶劑浸潤三維多孔石墨烯支架，以及不經(jīng)過抽真空去除材料表面吸附的空氣制備的三維石墨烯襯底表面細(xì)胞存活率僅為 40%，LDH酶活性(反比于細(xì)胞膜完整性)為 400%。
實(shí)施例6
采用CVD的方法，以孔隙率90 %、孔徑在100-400微米的泡沫鎳為催化劑，在900 °〇條件下，以甲烷為碳源生長10-20層石墨烯。將含有催化劑鎳的三維多孔石墨烯浸泡在含75%酒精的水溶液中20 min，抽氣使壓力小于100 Pa，保持30 min，去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣；然后通入空氣至常壓后，加入1000倍體積的酸性氯化鐵(I mol/L)溶液，在密閉環(huán)境中腐蝕120 h去除催化劑鎳；然后依次采用1，0.1，0.01, O. 001 mol/L的鹽酸溶液各洗滌I次，再用去離子水洗滌6次。制得的三維多孔石墨烯支架干燥后孔徑在50-300微米之間，密度約為4-6 mg/cm3。用玻璃基底將三維多孔石墨烯撈起，直接采用道康寧3140硅酮粘合劑固定，將液池壁固定于三維多孔石墨烯支架的周圍，并在室溫條件下固化時間12 h，形成培養(yǎng)池；繼而用丙酮、異丙醇和酒精各處理2 h，然后用大量的去離子水清洗，并浸泡120 h。向培養(yǎng)池中注入含10 %血清的DMEM培養(yǎng)基，并浸泡12 h，用于小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)。需要說明的是，在本文中，術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設(shè)備不僅包括那些要素，而且還包括沒有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。以上所述僅是本申請的具體實(shí)施方式
，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本申請?jiān)淼那疤嵯拢€可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本申請的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體，其特征在于，所述載體為三維多孔石墨烯支架。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體，其特征在于，所述三維多孔石墨烯支架的外表修飾有生物活性分子。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體，其特征在于，所述生物活性分子為多聚賴氨酸或?qū)诱尺B蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體，其特征在于，所述三維多孔石墨烯支架的孔徑為20-500微米，密度為2-20 mg/cm3。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體，其特征在于，該載體所培養(yǎng)的細(xì)胞至少為腫瘤細(xì)胞、原代神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞中的一種或幾種。
6.權(quán)利要求I至5任一所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體的制備方法，其特征 在于，它包括以下步驟 (a)制備含有金屬泡沫的三維多孔石墨烯支架； (b)用酒精和水的混合溶劑浸潤步驟(a)獲得的三維多孔石墨烯支架，采用真空抽氣去除三維多孔石墨烯支架表面吸附的空氣； (C)在封閉容器中，去除三維多孔石墨烯支架中的金屬泡沫。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體制備方法，其特征在于，所述金屬泡沫為泡沫鎳、泡沫銅、泡沫金銅合金或泡沫鎳銅合金。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體制備方法，其特征在于，步驟(b)中真空抽氣后壓力小于IOkPa,并保持至少30分鐘。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體，所述載體為三維多孔石墨烯支架；將所述三維多孔石墨烯支架固定于透明聚苯乙烯或玻璃材料基底上，在其周圍固定液池壁形成培養(yǎng)池，用于細(xì)胞培養(yǎng)；本發(fā)明還公開了一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的載體的制備方法，與現(xiàn)有技術(shù)相比，在去除金屬催化劑模板前，先采用溶劑浸潤三維多孔石墨烯支架，然后采用真空抽氣去除支架表面吸附的空氣；避免材料因表面張力和密度的原因漂浮在液體表面，更易在后續(xù)處理過程中去除金屬和離子的殘余。本發(fā)明采用三維多孔石墨烯支架作為培養(yǎng)載體，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞的三維培養(yǎng)，模擬細(xì)胞的體內(nèi)生長環(huán)境，有利于維持細(xì)胞的生長狀態(tài)和活性，促進(jìn)細(xì)胞生長。
文檔編號C12N5/09GK102864119SQ201210364420
公開日2013年1月9日 申請日期2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月27日
發(fā)明者程國勝, 張琦, 李寧, 宋琴, 徐駿, 杜瑜揚(yáng), 唐明亮, 齊琳, 王龍, 姜自云, 劉立偉 申請人:中國科學(xué)院蘇州納米技術(shù)與納米仿生研究所