專利名稱：一種提高黃原膠產(chǎn)量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種發(fā)酵生產(chǎn)方法，具體是ー種提高黃原膠產(chǎn)量的方法。
背景技術(shù)：
黃原膠(Xanthan gum)是美國農(nóng)業(yè)部北方研究室在20世紀(jì)50年代發(fā)現(xiàn)的ー種細(xì)菌胞外多糖，由野油菜黃單胞菌(Xa nthomonas campestris)以碳水化合物為主要原料經(jīng)好氧發(fā)酵而生產(chǎn)。黃原膠為乳白、淡黃至淺褐色顆?；蚍勰铙w，微臭，易溶于水，水溶液呈中性，為半透明體。1969年美國FDA批準(zhǔn)黃原膠可用做食品添加剤，1983年世界衛(wèi)生組織和國際糧農(nóng)組織批準(zhǔn)黃原膠可作為食品エ業(yè)中的穩(wěn)定劑、乳化剤、增稠劑。它是目前世界上生產(chǎn)規(guī)模最大且用途最為廣泛的微生物多糖，是ー種多功能的生物高分子聚合物。目前提高黃原膠產(chǎn)量的方法主要有提高攪拌轉(zhuǎn)速、增加氣體流速、添加雙氧水，未見添加維生素C來提高黃原膠產(chǎn)量的方法，本發(fā)明采用在發(fā)酵前期添加少量維生素C具有顯著增產(chǎn)效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種廉價(jià)、生產(chǎn)成本低的黃原膠增產(chǎn)方法。本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下I. 一種提高黃原膠產(chǎn)量的方法，操作包括以下步驟I) Xcc 8004種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)種子培養(yǎng)基組成為蔗糖2g，蛋白胨0.5g，磷酸氫ニ鉀0.3g，水100ml。種子液250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，培養(yǎng)溫度為26 30°C，搖床轉(zhuǎn)速為180 220rpm，培養(yǎng)時(shí)間為16 20h，種子檢查標(biāo)準(zhǔn)為鏡檢無雜菌。2) Xcc 8004 發(fā)酵培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)基成分為蔗糖5g，黃豆粉0. 4g，碳酸鈣0. 2g，水100ml，pH7. 5 ;發(fā)酵液用250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，接種量為發(fā)酵液體積的6%，溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速220rpm,發(fā)酵時(shí)間為72h，在發(fā)酵周期前的0 36h添加15 20mg的維生素C，得到發(fā)酵液；3)黃原膠的分離(I)將發(fā)酵液加自來水稀釋5倍，在6000轉(zhuǎn)/分鐘條件下離心10分鐘；(2)將經(jīng)過步驟(I)離心的上清液加入等體積的無水こ醇，攪拌過濾得到沉淀；(3)將經(jīng)過步驟⑵的沉淀于60 80°C干燥，得到食品級(jí)的黃原膠。2.根據(jù)權(quán)利要求書I所述的黃原膠的發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于，所述的Xcc8004種子是野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004(Xanthomonas campestris pv. campestris8004)。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明以Xcc 8004作為原始菌株進(jìn)行發(fā)酵，通過應(yīng)用該方法使黃原膠產(chǎn)量比不加維生素C提高12 15%，エ藝簡單易行，節(jié)約了生產(chǎn)成本。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)ー步描述。實(shí)施例I生產(chǎn)黃原膠的發(fā)酵方法步驟如下I.菌種野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004，購于英國植物病原細(xì)菌國家保藏中心(The National Collection of Plant Pathogentic Bacteria, NCPPB),保藏號(hào)為NCPPB No. 1145。2 培養(yǎng)基I)種子培養(yǎng)基鹿糖2g,蛋白胨 0. 5g,磷酸氫ニ鉀 0. 3g,水 100ml, 121°C滅菌 20min。2)發(fā)酵培養(yǎng)基鹿糖5g,黃豆粉 0. 4g，碳酸I丐 0. 2g,水 100ml, pH7. 5,121°C滅菌 20min。3.培養(yǎng)條件I)種子液250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，28°C搖床180rpm培養(yǎng)18h。2)發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)72h。添加維生素C發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)24h添加20mg/l維生素C，而后繼續(xù)發(fā)酵48h。4.測定方法I)粘度測定NDJ_5S型粘度計(jì)，3號(hào)轉(zhuǎn)子，60轉(zhuǎn)/min。2)黃原膠產(chǎn)量測定取IOg發(fā)酵液加自來水稀釋到50ml，6000rpm離心lOmin，取上清，加入無水こ醇50ml，攪拌濾紙過濾得黃原膠沉淀，取沉淀60°C干燥至恒重。不添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 1970g，添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 2253g。產(chǎn)品符合GB 13886-2007食品添加劑黃原膠相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。5.發(fā)酵過程檢查I)種子檢查鏡檢無雜菌，無莢膜，菌種數(shù)量多。2)發(fā)酵液鏡檢菌體老化分裂，變小，發(fā)酵液不再變粘稠。實(shí)施例2生產(chǎn)黃原膠的的發(fā)酵方法步驟如下I.菌種野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004，購于英國植物病原細(xì)菌國家保藏中心(The National Collection of Plant Pathogentic Bacteria, NCPPB),保藏號(hào)為 NCPPBNo.1145。2.培養(yǎng)基I)種子培養(yǎng)基鹿糖2g,蛋白胨 0. 5g,磷酸氫ニ鉀 0. 3g,水 100ml, 121°C滅菌 20min。2)發(fā)酵培養(yǎng)基 鹿糖5g,黃豆粉 0. 4g，碳酸I丐 0. 2g,水 100ml, pH7. 5,121°C滅菌 20min。3.培養(yǎng)條件
(I)種子液250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)16h。(2)發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)72h。添加維生素C發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)24h添加15mg/l維生素C，而后繼續(xù)發(fā)酵48h。4.測定方法I)粘度測定與實(shí)施 例I相同。2)黃原膠產(chǎn)量測定取IOg發(fā)酵液加自來水稀釋到50ml，6000rpm離心lOmin，取上清，加入無水こ醇50ml，攪拌濾紙過濾得黃原膠沉淀，取沉淀60°C干燥至恒重。不添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 1969g，添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 2211g。產(chǎn)品符合GB 13886-2007食品添加劑黃原膠相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。5.發(fā)酵過程檢查與實(shí)施例I相同。實(shí)施例3生產(chǎn)黃原膠的發(fā)酵方法步驟如下I.菌種野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004，購于英國植物病原細(xì)菌國家保藏中心(The National Collection of Plant Pathogentic Bacteria, NCPPB),保藏號(hào)為 NCPPBNo.1145。2.培養(yǎng)基I)種子培養(yǎng)基鹿糖2g,蛋白胨 0. 5g,磷酸氫ニ鉀 0. 3g,水 100ml, 121°C滅菌 20min。2)發(fā)酵培養(yǎng)基鹿糖5g,黃豆粉 0. 4g,碳酸I丐 0. 2g,水 100ml, pH7. 5,121°C滅菌 20min。3.培養(yǎng)條件I)種子液250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，26°C搖床220rpm培養(yǎng)20h。2)發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)72h。添加維生素C發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)Oh添加20mg/l維生素C，而后繼續(xù)發(fā)酵48h。4.測定方法I)粘度測定與實(shí)施例I相同。2)黃原膠產(chǎn)量測定取IOg發(fā)酵液加自來水稀釋到50ml，6000rpm離心lOmin，取上清，加入無水こ醇50ml，攪拌濾紙過濾得黃原膠沉淀，取沉淀60°C干燥至恒重。不添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 1976g，添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 2250g。產(chǎn)品符合GB 13886-2007食品添加劑黃原膠相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。5.發(fā)酵過程檢查與實(shí)施例I相同。實(shí)施例4生產(chǎn)黃原膠的發(fā)酵方法步驟如下I.菌種野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004，購于英國植物病原細(xì)菌國家保藏中心(The National Collection of Plant Pathogentic Bacteria, NCPPB),保藏號(hào)為 NCPPBNo.1145。2 培養(yǎng)基I)種子培養(yǎng)基鹿糖2g,蛋白胨 0. 5g,磷酸氫ニ鉀 0. 3g,水 100ml, 121°C滅菌 20min。2)發(fā)酵培養(yǎng)基鹿糖5g,黃豆粉 0. 4g,碳酸I丐 0. 2g,水 100ml, pH7. 5,121°C滅菌 20min。3.培養(yǎng)條件I)種子液250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，28°C搖床220rpm培養(yǎng)18h。
2)發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)72h。添加維生素C發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)12h添加20mg/l維生素C，而后繼續(xù)發(fā)酵48h。4.測定方法I)粘度測定與實(shí)施例I相同。2)黃原膠產(chǎn)量測定取IOg發(fā)酵液加自來水稀釋到50ml，6000rpm離心lOmin，取上清，加入無水こ醇50ml，攪拌濾紙過濾得黃原膠沉淀，取沉淀60°C干燥至恒重。不添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 1971g，添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 2287g。產(chǎn)品符合GB 13886-2007食品添加劑黃原膠相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。5.發(fā)酵過程檢查與實(shí)施例I相同。實(shí)施例5生產(chǎn)黃原膠的發(fā)酵方法步驟如下I.菌種野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004，購于英國植物病原細(xì)菌國家保藏中心(The National Collection of Plant Pathogentic Bacteria, NCPPB),保藏號(hào)為 NCPPBNo.1145。2.培養(yǎng)基I)種子培養(yǎng)基鹿糖2g,蛋白胨 0. 5g,磷酸氫ニ鉀 0. 3g,水 100ml, 121°C滅菌 20min。2)發(fā)酵培養(yǎng)基鹿糖5g,黃豆粉 0. 4g，碳酸I丐 0. 2g,水 100ml, pH7. 5,121°C滅菌 20min。3.培養(yǎng)條件I)種子液250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)18h。2)發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)72h。添加維生素C發(fā)酵250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養(yǎng)36h添加20mg/l維生素C，而后繼續(xù)發(fā)酵48h。4.測定方法I)粘度測定與實(shí)施例I相同2)黃原膠產(chǎn)量測定取IOg發(fā)酵液加自來水稀釋到50ml，6000rpm離心lOmin，取上清，加入無水こ醇50ml，攪拌濾紙過濾得黃原膠沉淀，取沉淀60°C干燥至恒重。不添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 1979g，添加維生素C的情況下得黃原膠沉淀0. 2263g。產(chǎn)品符合GB 13886-2007食品添加劑黃 原膠相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。5.發(fā)酵過程檢查與實(shí)施例I相同。
權(quán)利要求
1.一種提高黃原膠產(chǎn)量的方法，其特征在于，操作包括以下步驟 DXcc 8004種子培養(yǎng)基的培養(yǎng) 種子培養(yǎng)基組成為蔗糖2g,蛋白胨0. 5g，磷酸氫ニ鉀0. 3g，水IOOml。種子液250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，培養(yǎng)溫度為26 30°C，搖床轉(zhuǎn)速為180 220rpm，培養(yǎng)時(shí)間為16 20h，種子檢查標(biāo)準(zhǔn)為鏡檢無雜菌。
2)Xcc 8004發(fā)酵培養(yǎng) 發(fā)酵培養(yǎng)基成分為鹿糖5g,黃豆粉0. 4g,碳酸I丐0. 2g,水100ml, pH7. 5 ;發(fā)酵液用250ml廣ロ三角瓶裝液量50ml，接種量為發(fā)酵液體積的6%，溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速220rpm，發(fā)酵時(shí)間為72h，在發(fā)酵周期前的0 36h添加15 20mg的維生素C，得到發(fā)酵液； 3)黃原膠的分離 (1)將發(fā)酵液加自來水稀釋5倍，在6000轉(zhuǎn)/分鐘條件下離心10分鐘； (2)將經(jīng)過步驟(I)離心的上清液加入等體積的無水こ醇，攪拌過濾得到沉淀； (3)將經(jīng)過步驟(2)的沉淀于60 80°C干燥，得到食品級(jí)的黃原膠。
2.根據(jù)權(quán)利要求書I所述的黃原膠的發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于，所述的Xcc8004種子是野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004(Xanthomonas campestris pv. campestris8004)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提高黃原膠產(chǎn)量的方法。方法通過Xcc8004種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)、添加15～20mg的維生素C的Xcc 8004發(fā)酵培養(yǎng)和黃原膠的分離得到食品級(jí)的黃原膠。本發(fā)明的有益效果是以Xcc 8004作為原始菌株進(jìn)行發(fā)酵，通過應(yīng)用該方法使黃原膠產(chǎn)量比不加維生素C提高12～15％，工藝簡單易行，節(jié)約了生產(chǎn)成本。
文檔編號(hào)C12R1/64GK102628069SQ201210115900
公開日2012年8月8日 申請(qǐng)日期2012年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月19日
發(fā)明者嚴(yán)偉, 唐紀(jì)良, 李群良 申請(qǐng)人:廣西大學(xué)