專利名稱：一種魚腥草注射液的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種注射液的質(zhì)量檢測方法，特別涉及一種魚腥草注射液的質(zhì)量檢測方法。
背景技術(shù)：
魚腥草為三白草科多年生草本植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的帶根全草，又名側(cè)耳根、紫蕺、豬鼻孔、九節(jié)蓮等，其新鮮植株破碎后有刺鼻的腥臭味，廣泛分布于我國中部、東南及西南各省區(qū)，尤以湖南、湖北、四川、江蘇等省居多。魚腥草具有清熱解毒、 消癰排膿、利尿通淋的功效，臨床用于肺癰吐膿、痰熱喘咳、熱痢、熱淋、癰腫瘡毒等病癥。研究表明，魚腥草中含有的揮發(fā)性成分有黃酮類、有機酸、留醇類、生物堿類等成分。魚腥草注射液是經(jīng)過水汽蒸餾后加入輔料滅菌制備而得，主要成分為其揮發(fā)性成分。魚腥草注射液是鮮魚腥草經(jīng)水蒸氣蒸餾制成的滅菌水溶液。法定質(zhì)量標準源于部頒標準《中藥成方制劑》第十七冊WS3-B-3^4-98，及國家藥品標準修訂批件2001ZB0086， 法定質(zhì)量標準中含量測定項僅測定甲基正壬酮一種成分，且僅規(guī)定了較低的下限值，標準未收載中藥指紋圖譜的控制項、未進行揮發(fā)油量的控制、鑒別項僅收載了兩項專屬性不強的化學(xué)反應(yīng)鑒別及一個單一成分的薄層鑒別試驗，現(xiàn)行法定質(zhì)量未能有效對產(chǎn)品的理化性質(zhì)及有效性進行有效控制。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于公開一種魚腥草注射液的質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明目的是通過如下方案實現(xiàn)的本發(fā)明魚腥草注射液的質(zhì)量檢測方法，包括如下含量測定、鑒別和/或指紋圖譜檢測方法A.魚腥草注射液中4種成份同時檢測的含量測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛細管柱為色譜柱；初始70°C保持5分鐘，每分鐘5°C升至140°C，保持5分鐘，每分鐘20°C升至250°C，進樣口溫度為230°C，檢測器為FID，檢測器溫度為^0°C，載氣為N2，載氣流速為l.Oml/min，分流比為5 15 1，進樣為Iy 1，理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計算應(yīng)不低于10000 ；內(nèi)標溶液配制，取正十一碳烯，精密稱定，加正己烷制成每Iml含1 ^ig的溶液；對照品溶液配制，分別取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品、乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮對照品，精密稱定，分別加正己烷制成每Iml含8 12mg、4 6mg、6 10mg、l ^ig的對照品儲備液，分別精密量取各對照品儲備液，加正己烷制成每Iml約含lmg、0. 5mg、0. SmgUmg的混合溶液，作為混合對照品儲備液，取混合對照品儲備液0. 5ml，置2ml量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液配制，取魚腥草注射液50ml，置圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加入正己烷0. 5ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸40分鐘， 冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至2ml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測定，即得；每Iml含α -松油醇(C8H18O)應(yīng)為2. 0 10. 0 μ g，甲基正壬酮(C11H22O)應(yīng)為6. 0 20. 0 μ g，4-萜品醇(C8H18O)應(yīng)不低于5. 0 μ g，乙酸龍腦酯(C12H2tlO2)應(yīng)不低于0. 8 μ g ；B.魚腥草藥材中4種成份同時檢測的含量測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛細管柱作為色譜柱，初始70°C保持5分鐘，每分鐘5°C升至140°C，保持5分鐘，每分鐘20°C升至250°C，進樣口溫度為230°C，檢測器為FID，檢測器溫度為^0°C，載氣為N2，載氣流速為l.Oml/min，分流比為5 15 1，進樣為Iy 1，理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計算應(yīng)不低于10000 ；內(nèi)標溶液配制，取正十一碳烯，精密稱定，加正己烷制成每Iml含1 ^ig的溶液；對照品溶液配制，取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品、乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮對照品，精密稱定，分別加正己烷制成每Iml含0. 5 1. 5mg、0. 2 lmg、6 10mg、8 12mg的對照品儲備液，分別精密移取各對照品儲備液^iil、 ImlUmUml于IOml量瓶中，精密加入Iml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得； 供試品溶液配制，取魚腥草藥材，剪碎，取45 55g，精密稱定，置250ml圓底燒瓶中，加水 150ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加正己烷1ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸4小時，冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 3 0. 5g，振搖，正己烷液移至IOml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入Iml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測定，即得海Ig含α-松油醇(C8H18O)應(yīng)不低于1.5yg，含甲基正壬酮(C11H22O)應(yīng)不低于120 μ g，含4-萜品醇(C8H18O)應(yīng)不低于3. O μ g，含乙酸龍腦酯(C12H2tlO2)應(yīng)不低于 12. Oyg;C.魚腥草注射液指紋圖譜檢測方法按含量測定項下方法進行檢測，記錄色譜圖；積分參數(shù)設(shè)置為切除前4分鐘溶劑峰，去除內(nèi)標峰，斜率(Slope Sensitivity)為5， 峰寬(Peak Width)為 0.1，最小峰面積(Area reject)為 4，最小峰高(Height reject) 為0. 1，以《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2009版)》計算相似度，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度應(yīng)不得低于0. 85 ；指紋圖譜共有11個特征峰，以甲基正壬酮RT =17. 20min為參照峰，各峰相對保留時間為1號峰0. 465士0. 080，2號峰0. 486士0. 049， 3 號峰 0. 557士0. 056,4 號峰 0. 673士0. 067,5 號峰 0. 712士0. 071,6 號峰 0. 741 士0. 074， 7 號峰 0. 810士0. 081,8 號峰 0. 828士0. 082,9 號峰 0. 991 士0. 099，S 峰 1. 000士0. 000， 10 號峰 1. 5 士0. 156 ；相對峰面積為 1 號峰 0. 062士0. 006,2 號峰 0. 041 士0. 004,3 號峰 0. 072 士 0. 007，4 號峰 0. 066 士 0. 007，5 號峰 0. 031 士 0. 003，6 號峰 0. 024 士 0. 002，7 號峰 1. 541 士0. 154，8 號峰 0. 463士0. 046，9 號峰 0. 185士0. 019，S 峰 1. 000士0. 000，10 號峰 0. 021 士 0. 002 ；D.魚腥草藥材指紋圖譜檢測方法按含量測定項下方法進行檢測，記錄色譜圖； 積分參數(shù)設(shè)置為切除前4分鐘溶劑峰，去除內(nèi)標峰，Slope Sensitivity為5，Peak Width 為0. 1，Area reject為4，Height reject為0. 1，以《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng) (2009版)》計算相似度，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度應(yīng)不得低于0. 90 ；指紋圖譜有22個特征峰，以甲基正壬酮RT = 17. 20min為參照峰，各峰相對保留時間為1號峰 0. 383 士 0. 038，2 號峰 0. 397 士 0. 040，3 號峰 0. 418 士 0. 042，4 號峰 0. 457 士 0. 046，5 號
8峰 0. 466 士 0. 047，6 號峰 0. 486 士 0. 049，7 號峰 0. 533 士 0. 053，8 號峰 0. 556 士 0. 056，9 號峰 0. 566士0. 057，10 號峰 0. 587士0. 059，11 號峰 0. 607士0. 061，12 號峰 0. 661 士0. 066，13 號峰 0. 668士0. 067，14 號峰 0. 807士0. 081，15 號峰 0. 826士0. 083，16 號峰 0. 989士0. 099， S 峰 1. 000士0. 000，17 號峰 1. 088士0. 101，18 號峰 1. 134士0. 113，19 號峰 1. 230士0. 123， 20號峰1. 346士0. 135，21號峰1. 567士 157 ；相對峰面積為1號峰0. 009士0. 001,2號峰 0. 606士0. 060,3 號峰 0. 090士0. 009,4 號峰 0. 444士0. 044,5 號峰 1. 113士0. 111,6 號峰 0. 493士0. 049,7 號峰 0. 023士0. 002,8 號峰 0. 354士0. 035,9 號峰 0. 022士0. 002，10 號峰 0. 005士0. 001，11 號峰 0. 036士0. 004，12 號峰 0. 021 士0. 002，13 號峰 0. 012士0. 001，14 號峰 0. 078士0. 008，15 號峰 0. 011 士0. 001，16 號峰 0. 136士0. 014，S 峰 1. 000士0. 000，17 號峰 0.017士0. 002，18 號峰 0. 061 士0. 006，19 號峰 0. 035士0. 004,20 號峰 0. 134士0. 013，21 號峰 0. 029士0. 003 ；E.魚腥草注射液中聚山梨酯80限量檢查的檢測方法為精密移取魚腥草注射液 Iml置錐形瓶中；取硝酸鈷5 8g，硫氰酸銨35 45g，加水溶解并稀釋至200ml，搖勻，制成銨鈷硫氰酸鹽溶液，將銨鈷硫氰酸鹽溶液10 20ml置錐形瓶中，精密加入二氯甲烷8 12ml，稱定重量，用振蕩器振蕩15分鐘，取出，用二氯甲烷補足減失的重量，移至分液漏斗中，靜置15分鐘，分取二氯甲烷層溶液，作為供試品溶液；另取聚山梨酯80對照品至IOml 量瓶中，精密稱定，加二次蒸餾水制成每Iml含2. 5mg的溶液，作為對照品溶液；分別取供試品溶液及對照品溶液，放入紫外分光光度計，在623nm波長下測定吸收度，計算，即得；含聚山梨酯80不得過0. 27% ；F.魚腥草藥材薄層色譜的鑒別方法為取魚腥草藥材125g，剪碎，置250ml圓底燒瓶中，加水150ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加正己烷1ml，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，并保持微沸4小時，放置半小時，取正己烷層，至2ml量瓶中， 加正己烷稀釋至刻度，作為供試品溶液；另取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品和甲基正壬酮對照品，分別加正己烷制成每Iml含0. 8 1. 5mg、0. 3 0. 8mg、l. 0 3. Omg的溶液， 作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液5μ 1、對照品溶液2μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯比例為15 21 3為展開齊IJ，展開，取出，晾干，噴5%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；G.魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品薄層色譜的鑒別方法為取魚腥草注射液50ml， 置圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加入正己烷0. 5ml, 連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸40分鐘，冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至2ml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，作為供試品溶液；另取甲基正壬酮、 α -松油醇對照品和4-萜品醇對照品對照品，分別加正己烷制成每Iml含0. 8 1. 5mg、 0. 3 0. 8mg、1. 0 3. Omg的溶液，作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液5 μ 1、對照品溶液2μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯的比例為15 21 3為展開劑，展開，取出，晾干，噴5%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；H.魚腥草藥材中揮發(fā)油含量的檢測方法為取魚腥草藥材500g，精密稱定，置2000ml圓底燒瓶中，加水IOOOml與玻璃珠數(shù)粒，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，保持微沸5小時，冷卻至室溫，計算本品含揮發(fā)油的總量；含揮發(fā)油不得少于0.03% (ml/g)；I.魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品中揮發(fā)油含量的檢測方法為取魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品500ml，置2000ml圓底燒瓶中，加玻璃珠數(shù)粒，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，保持微沸35 45分鐘，冷卻至室溫，計算本品含揮發(fā)油的總量。本發(fā)明魚腥草注射液的質(zhì)量檢測方法，優(yōu)選如下含量測定、鑒別和/或指紋圖譜檢測方法A.魚腥草注射液中4種成份同時檢測的含量測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛細管柱為色譜柱；初始70°C保持5分鐘，每分鐘5°C升至140°C，保持5分鐘，每分鐘20°C升至250°C，進樣口溫度為230°C，檢測器為FID，檢測器溫度為^0°C，載氣為N2，載氣流速為l.Oml/min，分流比為10 1，進樣為1 μ 1，理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計算應(yīng)不低于10000 ；內(nèi)標溶液配制，取正十一碳烯，精密稱定，加正己烷制成每Iml含2mg的溶液；對照品溶液配制，分別取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品、 乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮對照品，精密稱定，分別加正己烷制成每Iml含10mg、5mg、 8mg、2mg的對照品儲備液，分別精密量取各對照品儲備液，加正己烷制成每Iml約含lmg、 0. 5mg、0. 8mg、lmg的混合溶液，作為混合對照品儲備液，取混合對照品儲備液0. 5ml，置^iil 量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液配制，取魚腥草注射液50ml，置圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分， 加入正己烷0. 5ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸40分鐘，冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至2ml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測定，即得；每Iml含α -松油醇 (C8H18O)應(yīng)為 2. O 10. Oyg,甲基正壬酮(C11H22O)應(yīng)為 6. O 20. Oy g，4-萜品醇(C8H18O) 應(yīng)不低于5. O μ g，乙酸龍腦酯(C12H2tlO2)應(yīng)不低于0. 8 μ g ；B.魚腥草藥材中4種成份同時檢測的含量測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，30mX 0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛細管柱作為色譜柱，初始70°C保持5分鐘，每分鐘5°C升至 140°C，保持5分鐘，每分鐘20°C升至250°C，進樣口溫度為230°C，檢測器為FID，檢測器溫度為^0°C，載氣為N2，載氣流速為l.Oml/min，分流比為10 1，進樣為1 μ 1，理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計算應(yīng)不低于10000 ；內(nèi)標溶液配制，取正十一碳烯，精密稱定，加正己烷制成每Iml含2mg的溶液；對照品溶液配制，取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品、乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮對照品，精密稱定，分別加正己烷制成每Iml含lmg、0. 5mg、8mg、10mg 的對照品儲備液，分別精密移取各對照品儲備液anl、lml、ImUml于IOml量瓶中，精密加入Iml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液配制，取魚腥草藥材，剪碎， 取50g，精密稱定，置250ml圓底燒瓶中，加水150ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加正己烷1ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸4小時，冷卻至室溫， 分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至IOml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入Iml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各ι μ 1，注入氣相色譜儀，測定，即得；每Ig含 α-松油醇(C8H18O)應(yīng)不低于1.5 μ g，含甲基正壬酮(C11H22O)應(yīng)不低于120 μ g，含4_萜品醇(C8H18O)應(yīng)不低于3.0 μ g，含乙酸龍腦酯(C12H20O2)應(yīng)不低于12. Oyg；C.魚腥草注射液指紋圖譜檢測方法按含量測定項下方法進行檢測，記錄色譜圖；積分參數(shù)設(shè)置為切除前6分鐘溶劑峰，去除內(nèi)標峰，斜率(Slope Sensitivity)為5， 峰寬(Peak Width)為 0.1，最小峰面積(Area reject)為 4，最小峰高(Height reject) 為0. 1，以《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2009版)》計算相似度，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度應(yīng)不得低于0. 85 ；指紋圖譜共有11個特征峰，以甲基正壬酮RT = 17. 20min為參照峰，各峰相對保留時間為1號峰0. 465，2號峰0. 486，3號峰0. 557，4號峰 0. 673，5 號峰 0. 712，6 號峰 0. 741，7 號峰 0. 810，8 號峰 0. 828，9 號峰 0. 991，S 峰 1. 000，10 號峰1. 554 ；相對峰面積為1號峰0. 062,2號峰0. 041,3號峰0. 072，4號峰0. 066,5號峰 0. 031，6 號峰 0. 024，7 號峰 1. 541，8 號峰 0. 463，9 號峰 0. 185，S 峰 1. 000，10 號峰 0. 021 (具體數(shù)值見表1、附
圖1)；表1魚腥草注射液指紋圖譜各峰相對保留時間及相對峰面積
權(quán)利要求
1. 一種魚腥草注射液的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括如下含量測定、鑒別和 /或指紋圖譜檢測方法A.魚腥草注射液中4種成份同時檢測的含量測定方法為氣相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛細管柱為色譜柱；初始70°C保持5分鐘，每分鐘5°C升至140°C，保持5分鐘，每分鐘20°C升至250°C，進樣口溫度為230°C，檢測器為 FID，檢測器溫度為280°C，載氣為N2，載氣流速為l.Oml/min，分流比為5 15 1，進樣為Iy 1，理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計算應(yīng)不低于10000 ；內(nèi)標溶液配制，取正十一碳烯，精密稱定，加正己烷制成每Iml含1 ^ig的溶液；對照品溶液配制，分別取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品、乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮對照品，精密稱定，分別加正己烷制成每Iml含8 12mg、4 6mg、6 10mg、l ^ig的對照品儲備液，分別精密量取各對照品儲備液，加正己烷制成每Iml約含lmg、0. 5mg、0. SmgUmg的混合溶液，作為混合對照品儲備液，取混合對照品儲備液0. 5ml，置2ml量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液配制，取魚腥草注射液50ml，置圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加入正己烷0. 5ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸40分鐘，冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至2ml 量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測定，即得；每Iml魚腥草注射液中含α-松油醇(C8H18O)應(yīng)為2. O 10. O μ g，甲基正壬酮(C11H22O)應(yīng)為6. O 20. O μ g，4-萜品醇(C8H18O)應(yīng)不低于5. O μ g,乙酸龍腦酯 (C12H20O2)應(yīng)不低于 0.8yg;B.魚腥草藥材中4種成份同時檢測的含量測定方法為氣相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛細管柱作為色譜柱，初始70°C保持5分鐘，每分鐘5°C升至140°C，保持5分鐘，每分鐘20°C升至250°C，進樣口溫度為230°C，檢測器為FID， 檢測器溫度為^0°C，載氣為N2，載氣流速為l.Oml/min，分流比為5 15 1，進樣為Ιμ ， 理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計算應(yīng)不低于10000 ；內(nèi)標溶液配制，取正十一碳烯，精密稱定， 加正己烷制成每Iml含1 ^ig的溶液；對照品溶液配制，取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品、乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮對照品，精密稱定，分別加正己烷制成每Iml含 0. 5 1. 5mg、0. 2 lmg、6 10mg、8 12mg的對照品儲備液，分別精密移取各對照品儲備液anl、lml、lml、^il于IOml量瓶中，精密加入Iml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻， 即得；供試品溶液配制，取魚腥草藥材，剪碎，取45 55g，精密稱定，置250ml圓底燒瓶中， 加水150ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加正己烷1ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸4小時，冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 3 0. 5g，振搖，正己烷液移至IOml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入Iml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各 μ ，注入氣相色譜儀，測定，即得；每Ig魚腥草藥材含α-松油醇(C8H18O) 應(yīng)不低于1. 5 μ g，含甲基正壬酮(C11H22O)應(yīng)不低于120 μ g，含4-萜品醇(C8H18O)應(yīng)不低于 3. O μ g，含乙酸龍腦酯(C12H2tlO2)應(yīng)不低于12. Oyg;C.魚腥草注射液指紋圖譜檢測方法按含量測定項下方法進行檢測，記錄色譜圖； 積分參數(shù)設(shè)置為切除前4分鐘溶劑峰，去除內(nèi)標峰，斜率(Slope Sensitivity)為5，峰寬(Peak Width)為 0.1，最小峰面積(Area reject)為 4，最小峰高(Height reject)為 0. 1，以《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2009版)》計算相似度，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度應(yīng)不得低于0. 85 ；指紋圖譜共有11個特征峰，以甲基正壬酮RT = 17. 20min為參照峰，各峰相對保留時間為1號峰0. 465士0. 080，2號峰0. 486士0. 049， 3 號峰 0. 557士0. 056,4 號峰 0. 673士0. 067,5 號峰 0. 712士0. 071,6 號峰 0. 741 士0. 074， 7 號峰 0. 810士0. 081,8 號峰 0. 828士0. 082,9 號峰 0. 991 士0. 099，S 峰 1. 000士0. 000， 10 號峰 1. 5 士 0. 156 ；相對峰面積為 1 號峰 0. 062 士 0. 006,2 號峰 0. 041 士 0. 004,3 號峰 0. 072 士 0. 007，4 號峰 0. 066 士 0. 007，5 號峰 0. 031 士 0. 003，6 號峰 0. 024 士 0. 002，7 號峰 1. 541 士0. 154，8 號峰 0. 463士0. 046，9 號峰 0. 185士0. 019，S 峰 1. 000士0. 000，10 號峰 0. 021 士 0. 002 ；D.魚腥草藥材指紋圖譜檢測方法按含量測定項下方法進行檢測，記錄色譜圖；積分參數(shù)設(shè)置為切除前4分鐘溶劑峰，去除內(nèi)標峰，Slope Sensitivity為5，Peak Width為 0. 1，Area reject為4，Height reject為0. 1，以《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng) (2009版)》計算相似度，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度應(yīng)不得低于0. 90 ；指紋圖譜有22個特征峰，以甲基正壬酮RT = 17. 20min為參照峰，各峰相對保留時間為1號峰 0. 383 士 0. 038，2 號峰 0. 397 士 0. 040，3 號峰 0. 418 士 0. 042，4 號峰 0. 457 士 0. 046，5 號峰 0. 466 士 0. 047，6 號峰 0. 486 士 0. 049，7 號峰 0. 533 士 0. 053，8 號峰 0. 556 士 0. 056，9 號峰 0. 566士0. 057，10 號峰 0. 587士0. 059，11 號峰 0. 607士0. 061，12 號峰 0. 661 士0. 066，13 號峰 0. 668士0. 067，14 號峰 0. 807士0. 081，15 號峰 0. 826士0. 083，16 號峰 0. 989士0. 099， S 峰 1. 000士0. 000，17 號峰 1. 088士0. 101，18 號峰 1. 134士0. 113，19 號峰 1. 230士0. 123， 20號峰1. 346士0. 135,21號峰1. 567士 157 ；相對峰面積為1號峰0. 009士0. 001,2號峰 0. 606士0. 060,3 號峰 0. 090士0. 009,4 號峰 0. 444士0. 044,5 號峰 1. 113士0. 111,6 號峰 0. 493士0. 049,7 號峰 0. 023士0. 002,8 號峰 0. 354士0. 035,9 號峰 0. 022士0. 002，10 號峰 0. 005士0. 001，11 號峰 0. 036士0. 004，12 號峰 0. 021 士0. 002，13 號峰 0. 012士0. 001，14 號峰 0. 078士0. 008，15 號峰 0. 011 士0. 001，16 號峰 0. 136士0. 014，S 峰 1. 000士0. 000，17 號峰 0.017士0. 002，18 號峰 0. 061 士0. 006，19 號峰 0. 035士0. 004,20 號峰 0. 134士0. 013，21 號峰 0. 029士0. 003 ；E.魚腥草注射液中聚山梨酯80限量檢查的檢測方法為精密移取魚腥草注射液Iml 置錐形瓶中；取硝酸鈷5 8g，硫氰酸銨35 45g，加水溶解并稀釋至200ml，搖勻，制成銨鈷硫氰酸鹽溶液，將銨鈷硫氰酸鹽溶液10 20ml置錐形瓶中，精密加入二氯甲烷8 12ml，稱定重量，用振蕩器振蕩15分鐘，取出，用二氯甲烷補足減失的重量，移至分液漏斗中，靜置15分鐘，分取二氯甲烷層溶液，作為供試品溶液；另取聚山梨酯80對照品至IOml 量瓶中，精密稱定，加二次蒸餾水制成每Iml含2. 5mg的溶液，作為對照品溶液；分別取供試品溶液及對照品溶液，放入紫外分光光度計，在623nm波長下測定吸收度，計算，即得；含聚山梨酯80不得過0. 27% ；F.魚腥草藥材薄層色譜的鑒別方法為取魚腥草藥材125g，剪碎，置250ml圓底燒瓶中，加水150ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加正己烷1ml，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，并保持微沸4小時，放置半小時，取正己烷層，至2ml量瓶中，加正己烷稀釋至刻度，作為供試品溶液；另取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品和甲基正壬酮對照品，分別加正己烷制成每Iml含0. 8 1. 5mg、0. 3 0. 8mg、l. 0 3. Omg的溶液，作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液5 μ 1、對照品溶液2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯比例為15 21 3為展開劑，展開，取出，晾干，噴5%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；G.魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品薄層色譜的鑒別方法為取魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品50ml，置圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加入正己烷0. 5ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸40分鐘，冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至2ml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，作為供試品溶液；另取甲基正壬酮、α -松油醇對照品和4-萜品醇對照品對照品，分別加正己烷制成每Iml含0. 8 1. 5mg、0. 3 0. 8mg、l. 0 3. Omg的溶液，作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液5 μ 1、對照品溶液2μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯的比例為15 21 3 為展開劑，展開，取出，晾干，噴5%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；H.魚腥草藥材中揮發(fā)油含量的檢測方法為取魚腥草藥材500g，精密稱定，置2000ml 圓底燒瓶中，加水IOOOml與玻璃珠數(shù)粒，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，保持微沸5小時，冷卻至室溫，計算本品含揮發(fā)油的總量；含揮發(fā)油不得少于0. 03% ml/g ；I.魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品中揮發(fā)油含量的檢測方法為取魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品500ml，置2000ml圓底燒瓶中，加玻璃珠數(shù)粒，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，保持微沸35 45分鐘，冷卻至室溫，計算本品含揮發(fā)油的總量。
2.如權(quán)利要求1所述的魚腥草注射液的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括如下含量測定、鑒別和/或指紋圖譜檢測方法A.魚腥草注射液中4種成份同時檢測的含量測定方法為氣相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛細管柱為色譜柱；初始70°C保持5分鐘，每分鐘5°C升至140°C，保持5分鐘，每分鐘20°C升至250°C，進樣口溫度為230°C，檢測器為FID， 檢測器溫度為280°C，載氣為N2，載氣流速為l.Oml/min，分流比為10 1，進樣為Iy 1，理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計算應(yīng)不低于10000 ；內(nèi)標溶液配制，取正十一碳烯，精密稱定，加正己烷制成每Iml含2mg的溶液；對照品溶液配制，分別取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品、乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮對照品，精密稱定，分別加正己烷制成每Iml含10mg、 5mg、8mg、2mg的對照品儲備液，分別精密量取各對照品儲備液，加正己烷制成每Iml約含 lmg、0. 5mg、0. SmgUmg的混合溶液，作為混合對照品儲備液，取混合對照品儲備液0. 5ml, 置2ml量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液配制，取魚腥草注射液50ml，置圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加入正己烷0. 5ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸40分鐘，冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至2ml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測定，即得；每Imi魚腥草注射液含α -松油醇(C8H18O)應(yīng)為2. 0 10. 0 μ g，甲基正壬酮(C11H22O)應(yīng)為6. 0 20. 0 μ g，4-萜品醇(C8H18O)應(yīng)不低于5. 0 μ g，乙酸龍腦酯(C12H2tlO2)應(yīng)不低于0. 8 μ g ；B.魚腥草藥材中4種成份同時檢測的含量測定方法為氣相色譜法，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛細管柱作為色譜柱，初始70°C保持5分鐘，每分鐘5°C升至140°C，保持5分鐘，每分鐘20°C升至250°C，進樣口溫度為230°C，檢測器為FID， 檢測器溫度為280°C，載氣為N2，載氣流速為l.Oml/min，分流比為10 1，進樣為Ιμ ，理論板數(shù)按甲基正壬酮峰計算應(yīng)不低于10000 ；內(nèi)標溶液配制，取正十一碳烯，精密稱定，加正己烷制成每Iml含aiig的溶液；對照品溶液配制，取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品、 乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮對照品，精密稱定，分別加正己烷制成每Iml含lmg、0. 5mg、 SmgUOmg的對照品儲備液，分別精密移取各對照品儲備液^il、lml、lml、^il于IOml量瓶中，精密加入Iml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液配制，取魚腥草藥材，剪碎，取50g，精密稱定，置250ml圓底燒瓶中，加水150ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加正己烷1ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸4小時， 冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至IOml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入Iml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測定，即得；每Ig魚腥草藥材含α-松油醇(C8H18O)應(yīng)不低于1.5 μ g，含甲基正壬酮(C11H22O)應(yīng)不低于120 μ g，含4-萜品醇(C8H18O)應(yīng)不低于3. O μ g，含乙酸龍腦酯(C12H2tlO2)應(yīng)不低于 12. Oyg；C.魚腥草注射液指紋圖譜檢測方法按含量測定項下方法進行檢測，記錄色譜圖；積分參數(shù)設(shè)置為切除前4分鐘溶劑峰，去除內(nèi)標峰，斜率(Slopeknsitivity)為5，峰寬(Peak Width)為0. 1，最小峰面積(Area reject)為4，最小峰高(Height reject)為0· 1，以《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2009版)》計算相似度，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度應(yīng)不得低于0. 85 ；指紋圖譜共有11個特征峰，以甲基正壬酮RT = 17. 20min為參照峰，各峰相對保留時間為1號峰0. 465，2號峰0. 486，3號峰0. 557，4號峰0. 673，5號峰 0. 712，6 號峰 0. 741，7 號峰 0. 810，8 號峰 0. 828，9 號峰 0. 991，S 峰 1. 000，10 號峰 1. 554 ； 相對峰面積為1號峰0. 062，2號峰0. 041，3號峰0. 072，4號峰0. 066，5號峰0. 031，6號峰 0. 024，7 號峰 1. 541，8 號峰 0. 463，9 號峰 0. 185，S 峰 1. 000，10 號峰 0. 021 ；D.魚腥草藥材指紋圖譜檢測方法按含量測定項下方法進行檢測，記錄色譜圖；積分參數(shù)設(shè)置為切除前4分鐘溶劑峰，去除內(nèi)標峰，Slope Sensitivity為5，Peak Width為0. 1， Area reject為4，Height reject為0. 1，以《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2009 版)》計算相似度，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度應(yīng)不得低于0. 90 ；指紋圖譜有22 個特征峰，以甲基正壬酮RT = 17. 20min為參照峰，各峰相對保留時間為1號峰0. 383，2號峰0. 397，3 號峰 0. 418，4 號峰0. 457，5 號峰 0. 466，6 號峰0. 486，7 號峰 0. 533，8 號峰0. 556， 9 號峰 0. 566，10 號峰 0. 587，11 號峰 0. 607，12 號峰 0. 661，13 號峰 0. 668，14 號峰 0. 807， 15 號峰 0. 826，16 號峰 0. 989，S 峰 1. 000，17 號峰 1. 088，18 號峰 1. 134，19 號峰 1. 230，20 號峰1. 346，21號峰1. 567 ；相對峰面積為1號峰0. 009，2號峰0. 606，3號峰0. 090，4號峰 0. 444，5 號峰 1. 113，6 號峰 0. 493，7 號峰 0. 023，8 號峰 0. 354，9 號峰 0. 022，10 號峰 0. 005，·11 號峰 0. 036，12 號峰 0. 021，13 號峰 0. 012，14 號峰 0. 078，15 號峰 0. 011，16 號峰 0. 136， S 峰 1. 000，17 號峰 0. 017，18 號峰 0. 061，19 號峰 0. 035，20 號峰 0. 134，21 號峰 0. 029 ；E.魚腥草注射液中聚山梨酯80限量檢查的檢測方法為精密移取魚腥草注射液Iml 置錐形瓶中；取硝酸鈷6g，硫氰酸銨40g，加水溶解并稀釋至200ml，搖勻，制成銨鈷硫氰酸鹽溶液，將銨鈷硫氰酸鹽溶液15ml置錐形瓶中，精密加入二氯甲烷10ml，稱定重量，用振蕩器振蕩15分鐘，取出，用二氯甲烷補足減失的重量，移至分液漏斗中，靜置15分鐘，分取二氯甲烷層溶液，作為供試品溶液；另取聚山梨酯80對照品至IOml量瓶中，精密稱定，加二次蒸餾水制成每Iml含2. 5mg的溶液，作為對照品溶液；分別取供試品溶液及對照品溶液，放入紫外分光光度計，在623nm波長下測定吸收度，計算，即得；含聚山梨酯80不得過 0. 27% ；F.魚腥草藥材薄層色譜的鑒別方法為取魚腥草藥材125g，剪碎，置250ml圓底燒瓶中，加水150ml，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加正己烷1ml，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，并保持微沸4小時，放置半小時，取正己烷層，至2ml量瓶中，加正己烷稀釋至刻度，作為供試品溶液；另取4-萜品醇對照品、α -松油醇對照品和甲基正壬酮對照品，分別加正己烷制成每Iml含1. 0mg、0. 5mg、2. Omg的溶液，作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液5 μ 1、對照品溶液2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯比例為17 3為展開劑，展開，取出，晾干，噴5%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；G.魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品薄層色譜的鑒別方法為取魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品50ml，置圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，加入正己烷 0. 5ml，連接回流冷凝管，加熱至沸，保持微沸40分鐘，冷卻至室溫，分取正己烷層，加無水硫酸鈉約0. 4g，振搖，正己烷液移至2ml量瓶中，并用正己烷洗滌無水硫酸鈉，洗液并入同一量瓶中，精密加入0. 2ml內(nèi)標溶液，加正己烷稀釋至刻度，作為供試品溶液；另取甲基正壬酮、α-松油醇對照品和4-萜品醇對照品對照品，分別加正己烷制成每Iml含l.Omg、 0. 5mg、2. Omg的溶液，作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液5 μ 1、對照品溶液2 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯的比例為17 3為展開劑，展開，取出，晾干，噴5%香草醛硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；H.魚腥草藥材中揮發(fā)油含量的檢測方法為取魚腥草藥材500g，精密稱定，置2000ml 圓底燒瓶中，加水IOOOml與玻璃珠數(shù)粒，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，保持微沸5小時，冷卻至室溫，計算本品含揮發(fā)油的總量；含揮發(fā)油不得少于0. 03% ml/g ；I.魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品中揮發(fā)油含量的檢測方法為取魚腥草注射液或其中間產(chǎn)品500ml，置2000ml圓底燒瓶中，加玻璃珠數(shù)粒，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水充滿刻度部分，連接回流冷凝管，緩緩加熱至沸，保持微沸40分鐘，冷卻至室溫，計算本品含揮發(fā)油的總量。
全文摘要
本發(fā)明公開一種魚腥草注射液的質(zhì)量檢測方法，該方法包括含量測定、鑒別和/或指紋圖譜檢測方法。該方法照氣相色譜法；取4-萜品醇對照品、α-松油醇對照品、乙酸龍腦酯對照品、甲基正壬酮分別加正己烷制成對照品溶液；取魚腥草注射液加入正己烷，加無水硫酸鈉制成供試品溶液；分別吸取對照品溶液和供試品溶液，注入氣相色譜儀，測定；按含量測定項下方法進行檢測，記錄色譜圖，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度應(yīng)不得低于0.85。本發(fā)明還提供了魚腥草注射液中聚山梨酯80限量檢查的檢測方法、魚腥草藥材或注射液中薄層色譜的鑒別方法及揮發(fā)油含量的檢測方法。本發(fā)明質(zhì)量檢測方法專屬性好，線性關(guān)系良好，儀器精密度良好，重復(fù)性良好。
文檔編號G01N30/02GK102323345SQ20111020880
公開日2012年1月18日 申請日期2011年7月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月25日
發(fā)明者仇萍, 吳建國, 吳飛馳, 朱雅寧, 李清, 李蘇翠, 畢開順, 潘紅炬 申請人:湖南正清制藥集團股份有限公司, 雅安三九藥業(yè)有限公司