專(zhuān)利名稱：由于巖藻糖基化程度的改變而表現(xiàn)出改善的效應(yīng)子功能的含F(xiàn)c區(qū)的多肽及其使用方法
由于巖藻糖基化程度的改變而表現(xiàn)出改善的效應(yīng)子功能的含F(xiàn)e區(qū)的多肽及其使用方法I.相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)要求美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)序號(hào)61/249，510 (2009年10月7日提交)的優(yōu)先權(quán)，其在此通過(guò)引用整體并入。本申請(qǐng)還通過(guò)引用整體并入美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)序號(hào)11/952,568(2007年12月7日提交)和60/869，254(2006年12月6日提交)。2.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及由于巖藻糖基化程度的改變而表現(xiàn)出改善的效應(yīng)子功能的含F(xiàn)e區(qū)的多肽，還涉及使用這種多肽治療或預(yù)防癌癥和其他疾病的方法。本發(fā)明的含F(xiàn)e區(qū)的多肽優(yōu)選是免疫球蛋白(例如，抗體)，其中所述Fe區(qū)相對(duì)于野生型Fe區(qū)的相應(yīng)氨基酸序列包括 至少ー個(gè)氨基酸取代，并且所述氨基酸取代足以減弱翻譯后巖藻糖基化井介導(dǎo)提高的對(duì)激活性Fe受體的結(jié)合以及降低的對(duì)抑制性Fe受體的結(jié)合。本發(fā)明方法特別用于預(yù)防、治療或改善與其中希望由Fe Y R介導(dǎo)的效應(yīng)細(xì)胞功能(例如，ADCC)的效カ得到增強(qiáng)的疾病、疾患或感染(例如，癌癥、傳染病)相關(guān)的ー種或多種癥狀。本發(fā)明方法還用于增強(qiáng)其效應(yīng)由ADCC介導(dǎo)的治療性抗體的治療效力。反過(guò)來(lái)，本發(fā)明方法特別用于預(yù)防、治療或改善與其中希望由Fe Y R介導(dǎo)的效應(yīng)細(xì)胞功能的效カ降低的疾病或疾患(例如，炎癥等)相關(guān)的ー種或多種癥狀。因此，本發(fā)明方法還用于增強(qiáng)減弱炎癥過(guò)程的治療性抗體的治療效カ。3.
背景技術(shù)：
3. IFc受體及其在免疫系統(tǒng)中的作用抗體-抗原復(fù)合物與免疫系統(tǒng)細(xì)胞的相互作用導(dǎo)致范圍從效應(yīng)子功能(例如抗體依賴性細(xì)胞毒性、肥大細(xì)胞脫粒和吞噬)到免疫調(diào)節(jié)信號(hào)(例如調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞増殖和抗體分泌)的一系列廣泛應(yīng)答。所有這些相互作用通過(guò)抗體或免疫復(fù)合物的Fe結(jié)構(gòu)域與造血細(xì)胞上專(zhuān)門(mén)細(xì)胞表面受體的結(jié)合而開(kāi)始。由抗體和免疫復(fù)合物觸發(fā)的細(xì)胞應(yīng)答的多祥性源于Fe受體的結(jié)構(gòu)異質(zhì)性。Fe受體共有結(jié)構(gòu)上相關(guān)的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其據(jù)推測(cè)介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)。Fe受體是免疫球蛋白基因超家族蛋白成員，是可以結(jié)合免疫球蛋白分子的Fe部分的表面糖蛋白。該家族的每個(gè)成員通過(guò)Fe受體α鏈上的識(shí)別結(jié)構(gòu)域識(shí)別ー個(gè)或多個(gè)同種型的免疫球蛋白。通過(guò)Fe受體對(duì)免疫球蛋白亞型的特異性來(lái)定義Fe受體。IgG的Fe受體被稱為Fe Y R，IgE的Fe受體被稱為F ε R，而IgA的Fe受體被稱為Fe a R。不同的佐細(xì)胞攜帶不同同種型抗體的Fe受體，并且抗體的同種型決定哪種佐細(xì)胞參與給定應(yīng)答(綜述于 Ravetch J. V.等人 1991, Annu. Rev. Immunol. 9 :457-92 ;Gerber J. S.等人 2001 Microbes and Infection, 3 :131-139 ；Billadeau D. D.等人 2002, The Journalof Clinical Investigation,2 (109) :161-1681 ;Ravetch J. V.等人 2000, Science,290 84-89 ；Ravetch J. V.等人，2001Annu. Rev. Tmmunol. 19 :275-90 ；Ravetch J. V. 1994, Cell,78(4) :553-60)。不同的Fe受體、表達(dá)它們的細(xì)胞及其同種型特異性是本領(lǐng)域公知的，參見(jiàn)例如 Tmmunob io logy The i mmune system in Health and Disease (免疫牛.物學(xué)健康與疾病中的免疫系統(tǒng))，第 4 版.1999, Elsevier Science Ltd/Garland Publishing, New York,其在此通過(guò)引用整體并入。Fe Y 受體該家族的每個(gè)成員是膜內(nèi)在糖蛋白，具有與C2-組的免疫球蛋白相關(guān)結(jié)構(gòu)域相關(guān)的胞外結(jié)構(gòu)域、單次跨膜結(jié)構(gòu)域和各種長(zhǎng)度的胞質(zhì)內(nèi)結(jié)構(gòu)域。有三種已知的Fe Y R，命名為Fe yRI(CD64)、Fc yRII(CD32)和Fcy RIII (CD 16)。這三種受體由不同基因編碼;然而，三個(gè)家族成員之間的廣泛同源性表明，它們可能通過(guò)基因復(fù)制而來(lái)自共同祖先。FcyRII(CD32)Fe YRII蛋白是40KDa膜內(nèi)在糖蛋白，它由于對(duì)單體Ig的低親和カ(IO6M-I)而僅結(jié)合復(fù)合IgG。該受體是最廣泛表達(dá)的Fe Y R，存在于所有造血細(xì)胞上，包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞和血小板。Fe Y RII在其免疫球蛋白結(jié)合鏈中僅具有兩個(gè)免疫球蛋白樣區(qū)域，因此對(duì)IgG的親和カ比Fe Y RI低得多。有三種人Fe Y RII基因(FCyRII-A、FCyRII-B、FCyRII-C)，它們都結(jié)合聚合物或免疫復(fù)合物中的IgG。Fe Y RII-A和Fe Y RII-B的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域內(nèi)的明顯差異產(chǎn)生兩種功能上不同的對(duì)受體連接的應(yīng)答?；静町愒诟桑珹同種型開(kāi)始細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)，導(dǎo)致細(xì)胞激活，例如吞噬和呼吸爆發(fā)，而B(niǎo)同種型開(kāi)始抑制性信號(hào)，例如抑制B細(xì)胞激活。通過(guò)Fe Y R的信號(hào)傳導(dǎo)在連接之后，激活性和抑制性信號(hào)都通過(guò)Fe Y R轉(zhuǎn)導(dǎo)。這些完全相反的功能源于不同受體同種型的結(jié)構(gòu)差異。受體的胞質(zhì)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域內(nèi)稱為免疫受體酪氨酸激活基序(ITAM)或免疫受體酪氨酸抑制基序(IHMS)的兩個(gè)不同結(jié)構(gòu)域負(fù)責(zé)不同的應(yīng)答。這些結(jié)構(gòu)的不同胞質(zhì)酶的募集指示Fe Y R介導(dǎo)的細(xì)胞應(yīng)答的結(jié)果。含有ITAM的Fe Y R復(fù)合物包括Fe Y RI、Fe Y RIIA, Fe y RIIIA,而含有 ITIM 的復(fù)合物僅包括 Fe Y RIIB。人中性粒細(xì)胞表達(dá)Fe Y RIIA基因。通過(guò)免疫復(fù)合物或特異性抗體交聯(lián)而簇集的Fe Y RIIA發(fā)揮作用以聚集ITAM和促進(jìn)ITAM磷酸化的受體相關(guān)的激酶。ITAM磷酸化用作Syk激酶的停靠位點(diǎn)，Syk激酶的激活導(dǎo)致下游底物(例如，PI3K)的激活。細(xì)胞激活導(dǎo)致促炎介質(zhì)的釋放。Fe Y RIIB基因表達(dá)在B淋巴細(xì)胞上；其胞外域與Fe YRIIA 96%相同并且以不能區(qū)別的方式結(jié)合IgG復(fù)合物。Fe Y RIIB的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域中Ι Μ的存在確定Fe Y R的這種抑制性亞類(lèi)。最近，建立了該抑制的分子基礎(chǔ)。當(dāng)與激活性Fe Y R連接吋，F(xiàn)e Y RIIB中的Ι Μ變得磷酸化并吸引肌醇多磷酸鹽5’ -磷酸酶(SHIP)的SH2結(jié)構(gòu)域，肌醇多磷酸鹽5’ -磷酸酶(SHIP)水解由于含ITAM的Fe Y R介導(dǎo)的酪氨酸激酶激活而釋放的磷酸肌醇信使，因此防止細(xì)胞內(nèi)Ca++內(nèi)流。因此，F(xiàn)e YRIIB的交聯(lián)抑制對(duì)Fe Y R連接的激活性應(yīng)答并抑制細(xì)胞應(yīng)答性。B細(xì)胞激活、B細(xì)胞增殖和抗體分泌因此被中止。3. 2相關(guān)疾病3. 2. I 癌癥 贅生物或腫瘤是由異常的不受控制的細(xì)胞生長(zhǎng)導(dǎo)致的贅生物塊，它可以是良性的或惡性的。良性腫瘤一般保持在局部。惡性腫瘤統(tǒng)稱為癌癥。術(shù)語(yǔ)“惡性” 一般意味著腫瘤可以入侵和破壞鄰近的機(jī)體結(jié)構(gòu)并擴(kuò)散至遠(yuǎn)端部位而引起死亡(綜述參見(jiàn)，Robbins和Angell, 1976, Basic Pathology,第 2 版，W. B. Saunders Co.，Philadelphia, pp. 68-122)。癌癥可以產(chǎn)生于機(jī)體的多個(gè)部位并且根據(jù)其起源而有不同的表現(xiàn)。癌細(xì)胞破壞它們起源的機(jī)體部分，然后擴(kuò)散至它們開(kāi)始新生長(zhǎng)并引起更多破壞的機(jī)體其他部分。毎年超過(guò)120萬(wàn)美國(guó)人發(fā)生癌癥。在美國(guó)，癌癥是第二大主要死因，并且如果目前趨勢(shì)持續(xù)，則預(yù)期到2010年，癌癥是首要死因。肺癌和前列腺癌是美國(guó)男性的頭號(hào)癌癥殺手。肺癌和乳腺癌是美國(guó)女性的頭號(hào)癌癥殺手。二分之一的美國(guó)男性會(huì)在他生命的某個(gè)時(shí)刻診斷出癌癥。三分之一的美國(guó)女性會(huì)在她生命的某個(gè)時(shí)刻診斷出癌癥。還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)癌癥的治愈。目前的治療選擇(例如手術(shù)、化療和放射治療)經(jīng)常是無(wú)效的或產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。癌癥療法 目前，癌癥療法可以包括手術(shù)、化療、激素療法和/或放射治療以消除患者的贅生性細(xì)胞(參見(jiàn)例如，Stockdale, 1998, “Principles of Cancer Patient Management (癌癥患者管理原則)’’，Scientific American Medicine,第 3 卷,Rubenstein 和 Federman 編輯，第12章，第IV節(jié))。最近，癌癥療法還可包括生物療法或免疫療法。所有這些方法對(duì)患者產(chǎn)生顯著的缺點(diǎn)。例如，手術(shù)可能由于患者健康狀況而被禁止或者可能是患者不可接受的。此外，手術(shù)可能不完全去除贅生組織。放射療法只有當(dāng)贅生組織表現(xiàn)出比正常組織更高的放射敏感性時(shí)是有效的，并且放射療法還可以經(jīng)常引發(fā)嚴(yán)重的副作用。激素療法很少作為単獨(dú)藥劑使用，并且盡管可能是有效的，但通常在其他治療已經(jīng)去除大部分癌細(xì)胞之后使用以預(yù)防或延遲癌癥復(fù)發(fā)。生物療法/免疫療法數(shù)目有限并且可能產(chǎn)生副作用，例如疹子或腫脹、流感樣癥狀(包括發(fā)熱、寒戰(zhàn)和疲勞)、消化道問(wèn)題或過(guò)敏反應(yīng)。關(guān)于化療，有多種可用于癌癥治療的化療劑。絕大部分癌癥化療藥物通過(guò)抑制DNA合成(直接或間接通過(guò)抑制脫氧核糖核苷酸三磷酸前體的生物合成)以防止DNA復(fù)制和并存的細(xì)胞分裂來(lái)起作用(參見(jiàn)例如Gilman等人,Goodman和Gilman The PharmacoloRicalBasis of Therapeutics (治療劑的藥理學(xué)基石出)，英文版(Pergamom Press, New York,1990))。這些藥劑包括烷化劑(例如亞硝基服)、抗代謝藥(例如氨甲喋呤和羥基服)和其他藥劑(例如依托泊甙、喜樹(shù)堿、博來(lái)霉素、阿霉素、柔紅霉素等)，雖然不一定是細(xì)胞周期特異性的，但是因?yàn)槠鋵?duì)DNA復(fù)制的影響而殺傷S期細(xì)胞。其他藥劑，特別是秋水仙素和長(zhǎng)春花生物堿，例如長(zhǎng)春花堿和長(zhǎng)春新堿，干擾微管組裝，導(dǎo)致有絲分裂停止?；煼桨敢话惆ㄊ┯没焺┙M合以增加治療效力。盡管多種化療劑具有可用性，但化療劑具有許多缺點(diǎn)(參見(jiàn)例如，Stockdale,1998, “Principles Of Cancer Patient ManaRement (癌癥患者治療原則)” ScientificAmerican Medicine,第 3 卷，Rubenstein 和 Federman 編輯,第 12 章,第 10 節(jié))。幾乎所有化療劑是毒性的，并且化療引起顯著且經(jīng)常危險(xiǎn)的副作用，包括嚴(yán)重的惡心、骨髄抑制、免疫抑制等。此外，即使施用化療劑組合，許多腫瘤細(xì)胞對(duì)化療劑是耐受的或產(chǎn)生對(duì)化療劑的耐受性。事實(shí)上，對(duì)治療方案中使用的特定化療劑耐受的那些細(xì)胞經(jīng)常證明是對(duì)其他藥物耐受的，即使那些藥劑通過(guò)與特定治療中使用的藥物的作用機(jī)制不同的機(jī)制起作用；該現(xiàn)象被稱為多向耐藥性(pleiotropic drug resistance)或多藥耐藥性(multidrugresistance)。因此，因?yàn)槟退幮?，許多癌癥證明是用標(biāo)準(zhǔn)化療治療方案難治的。非常需要替代的癌癥治療，特別是已經(jīng)證明用標(biāo)準(zhǔn)癌癥治療(例如手術(shù)、放射療法、化療和激素療法)難治的癌癥的治療。有前景的替代方法是免疫療法，其中癌細(xì)胞被癌抗原特異性抗體特異性靶向。主要努力目標(biāo)是利用免疫應(yīng)答的特異性，例如，雜交瘤技術(shù)實(shí)現(xiàn)了腫瘤選擇性單克隆抗體的開(kāi)發(fā)(參見(jiàn)Green M. C.等人,2000Cancer TreatRev. ,26 :269-286 ；ffeiner LM, 1999 Semin Oncol. 26(增刊 14) :43-51)，并且在過(guò)去幾年，美國(guó)食品和藥品管理局已經(jīng)批準(zhǔn)用于癌癥療法的首批MAb:用于非霍奇金淋巴瘤的Rituxin(抗-CD20)和用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌的赫賽汀[抗-(c-erb_2/HER-2) ] (SuzanneA. Eccles, 2001,Breast Cancer Res. ,3 :86-90)。然而,抗體效應(yīng)子功能例如介導(dǎo)抗體依賴性細(xì)胞毒性(“ADCC”)的效能是此類(lèi)治療的阻礙。因此需要提高此類(lèi)免疫療法效力的方法。

3.2.2炎性疾病和自身免疫疾病炎癥是機(jī)體白細(xì)胞和化學(xué)物質(zhì)藉以保護(hù)我們機(jī)體免受外來(lái)物質(zhì)例如細(xì)菌和病毒感染的過(guò)程。它通常以受累區(qū)域的疼痛、腫脹、發(fā)熱和發(fā)紅為特征。稱為細(xì)胞因子和前列腺素的化學(xué)物質(zhì)控制該過(guò)程并且以有序和自我限制的級(jí)聯(lián)釋放入血液或受累組織。這種化學(xué)物質(zhì)的釋放増加了到損傷或感染區(qū)域的血流，并且可以導(dǎo)致發(fā)紅和發(fā)熱。ー些化學(xué)物質(zhì)引起流體滲入組織，導(dǎo)致腫脹。該保護(hù)性過(guò)程可以刺激神經(jīng)并引起疼痛。當(dāng)在相關(guān)區(qū)域發(fā)生持續(xù)有限時(shí)段時(shí)，這些變化對(duì)機(jī)體產(chǎn)生益處。在自身免疫和/或炎性疾患中，當(dāng)沒(méi)有要攻擊的外來(lái)物質(zhì)并且機(jī)體正常保護(hù)性免疫系統(tǒng)通過(guò)錯(cuò)誤攻擊自身而引起對(duì)其自身組織的損傷吋，免疫系統(tǒng)觸發(fā)炎癥反應(yīng)。有許多不同的以不同方式影響機(jī)體的自身免疫疾患。例如，在具有多發(fā)性硬化的個(gè)體中大腦受影響，在具有克羅恩病的個(gè)體中腸受影響，并且在具有類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的個(gè)體中各種關(guān)節(jié)的滑膜、骨和軟骨受影響。隨著自身免疫疾患進(jìn)展，可以導(dǎo)致一種或多種類(lèi)型的機(jī)體組織的破壞、器官的異常生長(zhǎng)或器官功能的變化。自身免疫疾患可以僅影響ー個(gè)器官或組織類(lèi)型，或者可以影響多個(gè)器官和組織。通常受自身免疫疾患影響的器官和組織包括紅細(xì)胞、血管、結(jié)締組織、內(nèi)分泌腺(例如，甲狀腺或胰腺)、肌肉、關(guān)節(jié)和皮膚。自身免疫疾患的實(shí)例包括但不限于橋本氏甲狀腺炎、惡性貧血、愛(ài)迪生氏病(Addison’ s disease)、I型糖尿病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、皮肌炎、干燥綜合征、皮肌炎、紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、自身免疫性內(nèi)耳病、重癥肌無(wú)力、瑞特綜合征(Reiter’ s syndrome)、格雷夫斯病、自身免疫性肝炎、家族性腺瘤性息肉病和潰瘍性結(jié)腸炎。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)和幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是炎性關(guān)節(jié)炎的類(lèi)型。關(guān)節(jié)炎是描述關(guān)節(jié)炎癥的一般術(shù)語(yǔ)。一些但非全部類(lèi)型的關(guān)節(jié)炎是誤導(dǎo)炎癥的結(jié)果。除了類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，其他類(lèi)型的與炎癥相關(guān)的關(guān)節(jié)炎包括以下銀屑病關(guān)節(jié)炎、瑞特綜合征、強(qiáng)直性脊柱炎關(guān)節(jié)炎和痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是在身體兩側(cè)的關(guān)節(jié)(例如兩個(gè)手、手腕或膝蓋)中發(fā)生的慢性關(guān)節(jié)炎類(lèi)型。這種對(duì)稱性幫助區(qū)分類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎與其他類(lèi)型的關(guān)節(jié)炎。除了影響關(guān)節(jié)，類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎可以偶爾影響皮膚、眼睛、肺、心臟、血液或神經(jīng)。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎影響世界人ロ的約1%并且可能使之殘疾。在美國(guó)有大約290萬(wàn)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病率。受累女性是男性的2至3倍。發(fā)生類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的典型年齡是25至50。幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎影響71，000年輕的美國(guó)人(年齡在18歲以下)，受影響的女孩是男孩的6倍。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是自身免疫疾患，其中機(jī)體免疫系統(tǒng)不適當(dāng)?shù)貙㈥P(guān)節(jié)中分泌滑液的滑膜識(shí)別為外來(lái)物質(zhì)。炎癥產(chǎn)生，并且關(guān)節(jié)中和關(guān)節(jié)周?chē)能浌呛徒M織受到損害或破壞。在嚴(yán)重病例中，該炎癥延伸至其他關(guān)節(jié)組織和周?chē)浌牵渲兴梢郧治g或破壞骨和軟骨并導(dǎo)致關(guān)節(jié)變形。機(jī)體用瘢痕組織替代受損組織，導(dǎo)致關(guān)節(jié)內(nèi)的正?？臻g變窄并導(dǎo)致骨融合在一起。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎產(chǎn)生僵硬、腫脹、疲勞、貧血、體重減輕、發(fā)熱和經(jīng)常的癱瘓性疼痛(crippling pain)。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的一些常見(jiàn)癥狀包括在睡醒后持續(xù)I小時(shí)或更長(zhǎng)的關(guān)節(jié)僵硬；特定的指或腕關(guān)節(jié)的腫脹；關(guān)節(jié)周?chē)浗M織的腫脹；和關(guān)節(jié)兩側(cè)的腫脹。腫脹可以伴隨疼痛或沒(méi)有疼痛而發(fā)生，并且可 以逐漸惡化或在進(jìn)展之前數(shù)年保持不變。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷基于包括以下的因素的組合疼痛關(guān)節(jié)的具體位置和對(duì)稱性，在早上關(guān)節(jié)僵硬的存在，皮膚下腫塊和結(jié)節(jié)(類(lèi)風(fēng)濕結(jié)節(jié))的存在，表明類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的X射線測(cè)試結(jié)果，和/或稱為類(lèi)風(fēng)濕因子的血液測(cè)試的陽(yáng)性結(jié)果。許多但非全部的具有類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的人在其血液中具有類(lèi)風(fēng)濕因子抗體。類(lèi)風(fēng)濕因子可以存在于沒(méi)有類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的人中。其他疾病也可以導(dǎo)致在血液中產(chǎn)生類(lèi)風(fēng)濕因子。這是為什么類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷基于幾個(gè)因素的組合而不僅基于血液中類(lèi)風(fēng)濕因子的存在的原因。該疾病的典型過(guò)程是持久但波動(dòng)的關(guān)節(jié)癥狀之一，并且在約10年之后，90%的患者將顯現(xiàn)骨和軟骨的結(jié)構(gòu)損傷。小百分比的患者將具有完全清除的微恙，并且另ー小百分比的患者將具有非常嚴(yán)重的疾病，具有許多關(guān)節(jié)變形以及偶爾該疾病的其他表現(xiàn)。炎癥過(guò)程引起關(guān)節(jié)中骨和軟骨的侵蝕或破壞。在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，存在持久抗原呈遞、T細(xì)胞刺激、細(xì)胞因子分泌、滑膜細(xì)胞激活和關(guān)節(jié)破壞的自身免疫周期。該疾病對(duì)個(gè)人和社會(huì)都具有重要影響，引起顯著疼痛、功能受損和殘疾，并且在護(hù)理支出和エ資損失上花費(fèi)數(shù)百萬(wàn)美元。(參見(jiàn)例如，NIH網(wǎng)站和NIAID網(wǎng)站)。目前可用的關(guān)節(jié)炎療法集中于用抗炎或免疫抑制藥物治療來(lái)減少關(guān)節(jié)炎癥。任何關(guān)節(jié)炎的一線治療通常是抗炎劑，例如阿司匹林、布洛芬和Cox-2抑制劑，例如塞來(lái)考西和羅非考西?！哎司€藥物”包括金、氨甲喋呤和類(lèi)固醇。盡管這些是完善的關(guān)節(jié)炎治療，但極少患者僅用這些治療而恢復(fù)。對(duì)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識(shí)的最新進(jìn)展導(dǎo)致氨甲喋呤與細(xì)胞因子抗體或重組可溶受體結(jié)合使用。例如，腫瘤壞死因子(TNF)-Ci的重組可溶受體已經(jīng)與氨甲喋呤結(jié)合用于治療關(guān)節(jié)炎。然而，用氨甲喋呤與抗TNF-α劑例如TNF-α的重組可溶受體的組合治療的患者中僅約50%顯示臨床上顯著的改善。許多患者盡管治療但仍是難治的。對(duì)于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者依然存在難治療問(wèn)題。許多目前的治療具有高的副作用發(fā)生率，或者不能完全防止疾病進(jìn)展。迄今為止，沒(méi)有治療是理想的，并且沒(méi)有治愈。需要更有效治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其他自身免疫疾患的新治療劑。3. 2. 3 傳染病引起疾病的傳染因子(infectious agent)分為五組病毒、細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物和寄生蟲(chóng)(蠕蟲(chóng))。這些病原體的明顯多樣性引起適應(yīng)性免疫的兩個(gè)關(guān)鍵特征的自然選擇。首先，能夠識(shí)別多種不同病原體的優(yōu)點(diǎn)驅(qū)使相等或更大多祥性的B細(xì)胞和T細(xì)胞上受體的發(fā)展。其次，病原體不同的棲息地和生命周期必然受多種不同的效應(yīng)機(jī)制抵抗。每種病原體的特征是其傳播方式、其復(fù)制機(jī)制、其致病機(jī)制或它引起疾病的方式、以及其引發(fā)的應(yīng)答。罹患天花、霍亂、斑疹傷寒、痢疾、瘧疾等的人和由它們引起的死亡的記錄確立了傳染病的重大危害。盡管改善的衛(wèi)生、免疫和抗菌療法提供了在控制中的卓越成就，但傳染病依然是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的常見(jiàn)且重要的問(wèn)題。人類(lèi)最常見(jiàn)的疾病普通感冒是傳染病，可怕的現(xiàn)代疾病AIDS也是傳染病。之前被認(rèn)為是退行性疾病的ー些慢性神經(jīng)病已經(jīng)證明是傳染性的。毫無(wú)疑問(wèn)，未來(lái)將繼續(xù)掲示作為主要的醫(yī)學(xué)問(wèn)題的傳染病。許多人和動(dòng)物疾病源于來(lái)自上述傳染因子的任何ー種的毒害性和機(jī)會(huì)性感染(參見(jiàn) Belshe (編著)1984 Textbook of Human Virology (人類(lèi)病毒學(xué)教科書(shū)),PSGPublishing, Littleton, MA)。例如，傳染病的ー個(gè)類(lèi)別是病毒感染。包括呼吸道、CNS、皮膚、生殖泌尿道、眼、耳、免疫系統(tǒng)、胃腸道和骨骼肌系統(tǒng)在內(nèi)的許多組織的病毒性疾病影響所有年齡的許多人(參見(jiàn)以下文獻(xiàn)中的表 328-2 ffyngaarden 和 Smith, 1988, Cecil Textbook of Medicine (希氏內(nèi)科學(xué))，第 18 版，W. B. Saunders Co. , Philadelphia, pp. 1750-1753)。盡管在設(shè)計(jì)有效的抗病毒療法中投入了相當(dāng)大的努力，但病毒感染依然威脅世界上數(shù)百萬(wàn)人的生命。一般，開(kāi)發(fā)抗病毒藥物的嘗試集中于病毒生命周期的幾個(gè)階段(參見(jiàn)例如，Mitsuya等人，1991，F(xiàn)ASEB J. 5 :2369-2381，討論HIV)。然而，使用許多目前抗病毒藥物伴隨的常見(jiàn)缺點(diǎn)是其有害的副作用，例如對(duì)宿主的毒性或某些病毒株的耐受性。4.發(fā)明概述本發(fā)明涉及使用分子、優(yōu)選多肽和更優(yōu)選免疫球蛋白(例如，抗體)治療或預(yù)防癌癥和其他疾病、疾患和感染的方法，所述分子包括變異Fe區(qū)(variant Fe region),所述變異Fe區(qū)具有在ー個(gè)或多個(gè)區(qū)域的一個(gè)或多個(gè)氨基酸修飾(例如，取代，但也包括插入或缺失)，所述修飾改變(目對(duì)于野生型Fe區(qū))變異Fe區(qū)對(duì)激活性Fe Y R(例如Fe Y RIIA或Fe Y RIIIA)的親和カ相對(duì)于對(duì)抑制性FcyR(例如Fe y RIIB)的親和カ之比
權(quán)利要求
1.一種減弱人IgG Fe區(qū)的翻譯后巖藻糖基化的方法，所述方法包括修飾所述Fe區(qū)以包括位置L234、L235、F243、R292、Y300、V305或P396的氨基酸取代，并在能夠介導(dǎo)正常糖基化的宿主細(xì)胞中表達(dá)所述Fe區(qū)。
2.如權(quán)利要求I所述的方法，其中所述Fe區(qū)包括位置F243、R292、Y300或P396的氨基酸取代。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中 (a)在位置F243的所述取代是F243C、F243L或F243R； (b)在位置R292 的所述取代是 R292G、R292L、R292M、R292P、R292S 或 R292Y ； (c)在位置Y300的所述取代是Y300L； (d)在位置P396的所述取代是P396L。
4.如權(quán)利要求I所述的方法，其中所述Fe區(qū)對(duì)⑶16A受體、⑶16B受體或⑶32A受體表現(xiàn)出改變的親和力。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述Fe區(qū)對(duì)CD32B受體表現(xiàn)出減少的親和力。
6.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述Fe區(qū)對(duì)CD16A受體表現(xiàn)出增加的親和力。
7.如權(quán)利要求I所述的方法，其中所述Fe區(qū)是包括所述重鏈和輕鏈的單克隆抗體、嵌合抗體、人源化抗體、人抗體或單鏈抗體的Fe區(qū)。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述抗體特異性結(jié)合CD16A、CD32B、HER2/neu、A33、CD5、CDllc、CD19、CD20、CD22、CD23、CD27、CD40、CD45、CD79a、CD79b、CD103、CTLA4、ErbBl、ErbB3、ErbB4、VEGF 受體、TNF-α 受體、TNF-β 受體或 TNF-Y 受體 CD16A。
9.如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述抗體特異性結(jié)合癌抗原。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述癌癥是乳腺癌、卵巣癌、前列腺癌、宮頸癌、肺癌或胰腺癌。
11.如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述癌癥是乳腺癌并且所述抗原是HER2/neu。
12.—種特異性結(jié)合癌癥特有的癌抗原的抗體，所述癌癥選自由乳腺癌、卵巣癌、前列腺癌、宮頸癌、肺癌或胰腺癌組成的組，其中所述抗體包括通過(guò)權(quán)利要求I所述的方法產(chǎn)生的Fe區(qū)。
13.—種包含變異的人IgG Fe區(qū)的多肽，其中所述Fe區(qū)包括 (A)位置L234、L235、F243、R292、Y300、V305 或 P396 的氨基酸取代，和 (B)大于O.2的高甘露寡糖糖基化與復(fù)合寡糖糖基化之比。
14.如權(quán)利要求13所述的多肽，其中所述Fe區(qū)包括位置F243、R292、Y300或P396的氨基酸取代。
15.如權(quán)利要求14所述的多肽，其中 (a)位置F243的所述取代是F243C、F243L或F243R； (b)位置R292 的所述取代是 R292G、R292L、R292M、R292P、R292S 或 R292Y ； (c)位置Y300的所述取代是Y300L； (d)位置P396的所述取代是P396L。
16.如權(quán)利要求13所述的多肽，其中所述Fe區(qū)對(duì)⑶16A受體、⑶16B受體或⑶32A受體表現(xiàn)出改變的親和力。
17.如權(quán)利要求16所述的多肽，其中所述Fe區(qū)對(duì)CD32B受體表現(xiàn)出減少的親和力。
18.如權(quán)利要求16所述的多肽，其中所述Fe區(qū)對(duì)CD16A受體表現(xiàn)出增加的親和力。
19.如權(quán)利要求13所述的多肽，其中所述Fe區(qū)是包括所述重鏈和輕鏈的單克隆抗體、嵌合抗體、人源化抗體、人抗體或單鏈抗體的Fe區(qū)。
20.如權(quán)利要求19所述的多肽，其中所述抗體特異性結(jié)合⑶16A、⑶32B、HER2/neu、A33、CD5、CDllc、CD19、CD20、CD22、CD23、CD27、CD40、CD45、CD79a、CD79b、CD103、CTLA4、ErbBl、ErbB3、ErbB4、VEGF 受體、TNF-α 受體、TNF-β 受體或 TNF-Y 受體 CD16A。
21.如權(quán)利要求19所述的多肽，其中所述抗體特異性結(jié)合癌抗原。
22.如權(quán)利要求21所述的多肽，其中所述癌癥是乳腺癌、卵巣癌、前列腺癌、宮頸癌、肺癌或胰腺癌。
23.如權(quán)利要求21所述的多肽，其中所述癌癥是乳腺癌并且所述抗原是HER2/neu。
24.—種在有相應(yīng)需要的受治療者中治療疾病的方法,所述方法包括給所述患者施用治療有效量的權(quán)利要求20所述的多肽。
25.ー種在有相應(yīng)需要的受治療者中治療癌癥的方法，所述方法包括給所述患者施用治療有效量的權(quán)利要求21所述的多肽。
26.如權(quán)利要求25所述的方法，其中所述癌癥是乳腺癌并且所述抗原是HER2/neu。
27.ー種藥物組合物，包含治療有效量的權(quán)利要求20所述的抗體和藥學(xué)可接受的載體。
28.ー種藥物組合物，包含治療有效量的權(quán)利要求21所述的抗體和藥學(xué)可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及由于巖藻糖基化程度的改變而表現(xiàn)出改善的效應(yīng)子功能的含F(xiàn)c區(qū)的多肽，還涉及使用這種多肽治療或預(yù)防癌癥和其他疾病的方法。本發(fā)明的含F(xiàn)c區(qū)的多肽優(yōu)選是免疫球蛋白(例如，抗體)，其中所述Fc區(qū)相對(duì)于野生型Fc區(qū)的相應(yīng)氨基酸序列包括至少一個(gè)氨基酸取代，并且所述氨基酸取代足以減弱翻譯后巖藻糖基化并介導(dǎo)提高的對(duì)激活性Fc受體的結(jié)合以及降低的對(duì)抑制性Fc受體的結(jié)合。本發(fā)明方法特別用于預(yù)防、治療或改善與其中希望由FcγR介導(dǎo)的效應(yīng)細(xì)胞功能的效力得到增強(qiáng)(例如，癌癥、傳染病)或希望由FcγR介導(dǎo)的效應(yīng)細(xì)胞應(yīng)答得到抑制(例如，炎癥、自身免疫疾病)的疾病、疾患或感染相關(guān)的一種或多種癥狀。
文檔編號(hào)C12P21/08GK102666874SQ201080055367
公開(kāi)日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2010年10月7日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月7日
發(fā)明者S·戈?duì)柪蟹? 勞拉·勒納, 戈弗雷·喬納·安德森·雷尼, 萊斯利·S·約翰遜 申請(qǐng)人:宏觀基因有限公司