專(zhuān)利名稱(chēng)：一種耐逆性相關(guān)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種耐逆性相關(guān)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
低溫、干旱、高溫等逆境因子是影響農(nóng)作物產(chǎn)量與品質(zhì)的重要因素，據(jù)估計(jì)，僅 低溫造成世界各地水稻平均每年減產(chǎn)5-10%，嚴(yán)重低溫的年份(3-4年一次)造成減產(chǎn) 20-40% ο在逆境脅迫下植物體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生一系列應(yīng)答反應(yīng)，伴隨著許多生理生化及發(fā)育上的 變化。明確植物對(duì)逆境的反應(yīng)機(jī)制，將為抗逆基因工程研究和應(yīng)用提供科學(xué)論據(jù)。目前，植 物抗逆性研究已逐漸深入到細(xì)胞、分子水平，并與遺傳學(xué)和遺傳工程研究相結(jié)合，探索用生 物技術(shù)來(lái)改進(jìn)植物生長(zhǎng)特性，其目的是提高植物對(duì)逆境的適應(yīng)能力。在干旱、高鹽和低溫等環(huán)境脅迫的逆境條件下，植物能夠在分子、細(xì)胞和整體水平 上做出相應(yīng)的調(diào)整，以最大程度上減少環(huán)境所造成的傷害并得以生存。許多基因受脅迫誘 導(dǎo)表達(dá)，這些基因的產(chǎn)物不僅能夠直接參與植物的脅迫應(yīng)答，而且能夠調(diào)節(jié)其它相關(guān)基因 的表達(dá)或參與信號(hào)傳導(dǎo)途徑，從而使植物避免或減少傷害，增強(qiáng)對(duì)脅迫環(huán)境的抗性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種耐逆性相關(guān)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。本發(fā)明提供的耐逆性相關(guān)蛋白，來(lái)自秈稻(Oryza sativa)，是如下(a)或(b)(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或 添加且與植物耐逆性相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。為了使(a)中的蛋白質(zhì)便于純化，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成 的蛋白質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標(biāo)簽。表1標(biāo)簽的序列
權(quán)利要求
1.一種蛋白，是如下(a)或(b)的蛋白質(zhì)(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加 且與植物耐逆性相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。
2.權(quán)利要求1所述蛋白的編碼基因或基因組基因。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的編碼基因，其特征在于所述編碼基因?yàn)槿缦?)或2)或3) 或4)或5)的DNA分子1)序列表中序列2自5’末端第73至789位核苷酸所示的DNA分子；2)序列表中序列2自5’末端第5至856位核苷酸所示的DNA分子；3)序列表中序列2所示的DNA分子；4)在嚴(yán)格條件下與1)或2)或3)限定的DNA序列雜交且編碼植物耐逆性相關(guān)蛋白的 DNA分子；5)與1)或2)或3)或4)限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼植物耐逆性相 關(guān)蛋白的DNA分子。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因組基因，其特征在于所述基因組基因?yàn)槿缦?)或2)或 3)或4)的DNA分子1)序列表中序列3所示的DNA分子；2)序列表中序列4所示的DNA分子；3)在嚴(yán)格條件下與1)或2)限定的DNA序列雜交且編碼植物耐逆性相關(guān)蛋白的DNA分子；4)與1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼植物耐逆性相關(guān)蛋白 的DNA分子。
5.含有權(quán)利要求2或3或4所述編碼基因或基因組基因的重組表達(dá)載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基 因細(xì)胞系或重組菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的重組表達(dá)載體，其特征在于所述重組表達(dá)載體為在 PCAMBIA1300的Kpn I和Sal I酶切位點(diǎn)之間插入特異DNA片段得到的重組質(zhì)粒；所述特 異DNA片段是用限制性內(nèi)切酶Kpn I和Xhol雙酶切pJIT163_AK068115得到的小片段；所 述pJIT163-AK068115是將序列表中序列2自5，末端第5至856位核苷酸所示的DNA分子 插入pJIT163的BamH I和HindIII酶切位點(diǎn)之間得到的重組質(zhì)粒。
7.擴(kuò)增權(quán)利要求2或3或4所述基因的引物。
8.一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將權(quán)利要求2或3或4所述編碼基因或基因組基因 導(dǎo)入目的植物中，得到如下㈧和/或⑶和/或(C)的轉(zhuǎn)基因植物(A)耐逆性高于所述目的植物的轉(zhuǎn)基因植物；(B)株高高于所述目的植物的轉(zhuǎn)基因植物；(C)谷穗和/或谷粒大于所述目的植物的轉(zhuǎn)基因植物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于權(quán)利要求3所述編碼基因通過(guò)權(quán)利要求6 所述重組表達(dá)載體導(dǎo)入所述目的植物中。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的方法，其特征在于所述目的植物為單子葉植物或雙子 葉植物；所述單子葉植物優(yōu)選為水稻；所述耐逆性為耐寒性。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種耐逆性相關(guān)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。本發(fā)明提供的蛋白，是如下(a)或(b)的蛋白質(zhì)(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐逆性相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。該蛋白與耐逆性、株高以及谷穗和谷粒大小相關(guān)，可用于培育耐逆性轉(zhuǎn)基因植株，也可用于培育生長(zhǎng)速度快、谷穗谷粒大的轉(zhuǎn)基因植株，在作物遺傳改良方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)C12N15/63GK101993484SQ20101024972
公開(kāi)日2011年3月30日 申請(qǐng)日期2010年8月5日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月10日
發(fā)明者夏新界, 黃梅 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所