專利名稱：一種杜仲葉提取物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物有效成分提取領(lǐng)域，特別涉及一種杜仲葉提取物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著人類生活水平的提高，人們越來越重視生活質(zhì)量的提高以及疾病的預(yù)防和保 健。其中，以乳酸菌為主的各種益生菌被廣泛應(yīng)用到藥品、食品、奶制品以及動物飼料添加 劑等各個領(lǐng)域。目前乳酸菌的飲用廣泛盛行于世界各國，但其穩(wěn)定性不好，為了克服這種缺點，現(xiàn) 在多用乳酸菌純培養(yǎng)品(培養(yǎng)基一種是牛奶，另一種是蛋白胨，牛肉膏，氯化鈉為主要營養(yǎng) 成分的人工培養(yǎng)基)配以奶粉、乳糖、淀粉等輔料和賦形劑加工成各種各樣形態(tài)的活性乳 酸菌產(chǎn)品，又稱“益生菌”產(chǎn)品。臨床應(yīng)用上，隨著抗生素的長期使用，人們也越來越認識到 使用抗生素的負面影響。因此，抗生素的替代療法已迫在眉睫，而益生菌便是最有前景的抗 生素替代療法之一，目前已有大量益生菌用于治療腹瀉、便秘、增強免疫。由于益生菌發(fā)揮作用的前提是活菌數(shù)量，因此所有乳酸菌產(chǎn)品的制造商最關(guān)心的 問題，莫過于乳酸菌的培養(yǎng)條件，培養(yǎng)條件的好壞直接關(guān)系到發(fā)酵水平的好壞，最終又直接 影響到產(chǎn)品的質(zhì)量和制造成本。因此研發(fā)一種新的乳酸菌培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)，以促進乳酸 菌的生長繁殖，從而提高培養(yǎng)效果，改善產(chǎn)品品質(zhì)是本發(fā)明的立足點。2300年前，我國第一部藥書《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載杜仲“久服，輕身，耐勞”。現(xiàn)代科 學(xué)分析，杜仲葉含有21種有機物，17種氨基酸，以及杜仲有機酸，杜仲苷，松脂素苷，綠原酸 等自身獨有的天然有效生物活性成分，其中蛋白質(zhì)含量高達14.5%，碳水化合物含量高達 51%，另外還含有維生素和硒鋅等15種含量均衡的微量元素。如何充分利用這些有效成分 也是一個研究的方向。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種杜仲葉提取物，將其應(yīng)用于乳酸菌培養(yǎng)過程中，以更 好的促進乳酸菌培養(yǎng)過程中的消化吸收和合成代謝。本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下一種杜仲葉提取物，由下法制得將杜仲葉用水煎煮并過濾，調(diào)整濾液PH為 5. 5-7. 5，即得所述的杜仲葉提取物。較好的，杜仲葉在使用前按1 1的比例加水拌勻，浸泡濕潤2小時。進一步，煎煮提取杜仲葉時，將杜仲葉煎煮提取2-4次。更具體的，將杜仲葉煎煮提取三次，第一次的加水量為杜仲葉質(zhì)量的7-10倍，提 取時間為50-60min，提取溫度98-100°C ；第二、三次的加水量為杜仲葉質(zhì)量的2_7倍，煎煮 提取時間分別為40-50min和30-40min，提取溫度98-100°C，合并3次煎煮提取液。合并煎煮提取液后，過濾除去提取液中不溶解于水的雜質(zhì)。
濾液pH值優(yōu)選調(diào)整為6. 0-6. 5。進一步，調(diào)整濾液pH值后，為了換算方便，可以調(diào)整濾液密度為1. 20-1. 25g/cm3， 此密度時每毫升濾液相當于0. 5g杜仲葉中所含營養(yǎng)成分；之后還可噴霧干燥制成粉。具體的，調(diào)整密度時可采用真空減壓濃縮，真空度為0. 06-0. 07Mpa，溫度為 55-60 "C。濃縮液還可經(jīng)轉(zhuǎn)速為16000轉(zhuǎn)/min的筒式離心機高速離心過濾進一步除雜。獲得杜仲葉提取液后經(jīng)檢驗合格可直接分裝入庫，亦可繼續(xù)干燥制成粉粒狀營養(yǎng) 物質(zhì)分裝入庫。杜仲樹是非常古老的樹種，被稱為“活化石植物”，后被引種到世界各地?，F(xiàn)代研 究表明，杜仲葉的主要營養(yǎng)成分和保健功能與杜仲樹皮不相上下，特別在促進人體血管循 環(huán)和微循環(huán)方面的作用，杜仲葉還優(yōu)于杜仲皮。在資源開發(fā)利用方面，采集樹皮無疑會對杜 仲樹的生長造成傷害，采摘杜仲葉可循環(huán)再生，資源量大。杜仲葉的最佳采摘時期為每年的 9-10月份，杜仲鮮葉在使用前及時經(jīng)陽光晾曬或低溫60-80°C干燥后除雜包裝入庫通風(fēng)貯 藏以防止霉爛變質(zhì)。所述的杜仲葉提取物作為乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)促進劑有很好的應(yīng)用。具體應(yīng)用時，杜仲葉提取物的添加量按其中所含杜仲葉的重量計為乳酸菌培養(yǎng)基 重量的0. 5-2. 0%。例如上述制備成密度為1. 20-1. 25g/cm3的濾液時，由于此密度時每毫升濾液相當 于0. 5g杜仲葉中所含營養(yǎng)成分，因此每IOOg乳酸菌培養(yǎng)基只需加入l_4ml濾液即可。杜仲葉中含有的營養(yǎng)成分既是人體保健強身的重要營養(yǎng)物質(zhì)，恰好又是乳酸菌發(fā) 酵和生長繁殖重要的氮源，碳源，無機鹽和微量元素的營養(yǎng)支持，這些重要的純天然性質(zhì)的 營養(yǎng)成分，非常有利于乳酸菌培養(yǎng)過程中的消化吸收和合成代謝。通常乳酸菌生長繁殖需要的營養(yǎng)物質(zhì)主要有牛奶，其次有蛋白胨，牛肉膏，酵母 膏，乳糖，葡萄糖，氯化鈉和碳酸鈣等。本發(fā)明以杜仲葉為原料來源，在作為乳酸菌營養(yǎng)促進劑應(yīng)用時具有綠色天然的優(yōu) 勢。在乳酸菌培養(yǎng)基配方中，杜仲葉提取液或粉與其他乳酸菌常規(guī)營養(yǎng)物質(zhì)配合使用，可 減少常規(guī)營養(yǎng)物質(zhì)用量，其中蛋白胨用量減少1-2 %，牛肉膏減少0. 1-0. 2 %，葡萄糖減少 1-2%。在其他發(fā)酵條件不變的情況下，可以使乳酸菌生長繁殖更加旺盛，培養(yǎng)液每毫升中 所含活性乳酸菌增加20-30億，乳酸菌培養(yǎng)效果提高20-30%。杜仲葉提取液與其他乳酸菌培養(yǎng)時添加營養(yǎng)物質(zhì)相比較，主要優(yōu)點體現(xiàn)在以下幾 個方面1)杜仲葉資源十分豐富，每畝每年可采摘杜仲葉IOOOkg ；2)加工提取杜仲葉的生產(chǎn)工藝簡單易行；3)杜仲葉提取液的營養(yǎng)成分，不但豐富而且非常全面均衡，尤其可貴的是含有人 體必需的八種游離氨基酸，特別有利于乳酸菌培養(yǎng)過程中的營養(yǎng)需求；4)杜仲葉提取液豐富的營養(yǎng)成分，明顯增強了乳酸菌的活力，發(fā)酵液含活性菌數(shù) 量增高，發(fā)酵水平顯著提高；5)乳酸菌培養(yǎng)基成分中，增加杜仲提取液(或粉粒狀營養(yǎng)物質(zhì))，可以減少其他價 格相對比較昂貴的蛋白胨，牛肉膏，乳糖等營養(yǎng)物質(zhì)的用量，因此可以降低益生菌產(chǎn)品的制造成本。杜仲葉提取設(shè)備無嚴格要求，無論是在實驗室階段的玻璃儀器、放大初試的20L 提取濃縮熱回流機組還是最后擴大到3立方的多功能提取設(shè)備和500L單效真空減壓濃縮 設(shè)備以及離心和壓力噴霧干燥設(shè)備，提取工藝參數(shù)和杜仲葉提取液的終端產(chǎn)品的質(zhì)量都是 一致的。本發(fā)明制得的杜仲葉提取液(密度為1. 20-1. 25g/cm3)的性能參數(shù)如下 本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)，有以下優(yōu)點本發(fā)明杜仲葉提取物制備方法簡單、應(yīng)用于乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)促進劑可以顯著提高 發(fā)酵液含活性菌數(shù)量，效果顯著。
具體實施例方式以下以具體實施例來說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但本發(fā)明的保護范圍不限于此實施例1稱取杜仲葉400g，第一次加水3200ml (1 8)控制煎煮提取溫度98°C，煎煮提取 時間1小時，收集提取液，葉渣第二次加水2400ml (1 6)，煎煮提取溫度98°C，煎煮提取時 間為45分鐘，收集提取液，葉渣第三次加水2400ml，煎煮提取溫度98°C，煎煮提取時間為30 分鐘，合并三次煎煮提取液，過濾，除去不溶解于水的雜質(zhì)，再濃縮至密度1. 20-1. 25g/cm3, 體積約800ml，調(diào)整濾液PH值6. 4，最后經(jīng)過精濾，即得每毫升相當于杜仲葉0. 5g的提取 液。本實施例是在實驗室玻璃儀器中進行的。實施例2使用設(shè)備20L提取濃縮熱回流機組，稱取杜仲葉1500g，加水15kg，控制煎煮提取 內(nèi)溫98°C，加熱過程中啟動攪拌將杜仲葉與水充分混勻，升溫時間約1.5小時，最高內(nèi)溫 98°C，啟動真空，開始真空濃縮，設(shè)定內(nèi)膽溫度75°C，夾套溫度80°C，進入正常濃縮時控制 內(nèi)膽溫度58°C，實際溫度54-55°C，真空度0. 09MPa,真空減壓濃縮全程時間2小時，放料 過程除去雜質(zhì)，濾液調(diào)整PH6. 0-6. 5，最后進行精濾和調(diào)整濃度，熱測比重1. 20-1. 25，獲取3200ml杜仲葉提取液(此液每毫升相當于杜仲葉0. 5g)。實施例3稱取杜仲葉凈重208. 34kg，置3立方多功能提取罐內(nèi)，第一次加水量1600kg，提取 溫度98-100°C，提取時間1小時，第二次加水500kg，提取溫度98°C，提取時間45分鐘，第三 次加水500kg，提取溫度98°C，提取時間30分鐘。合并三次煎煮提取液，過濾后的提取液總 重為2250kg，將2250kg提取液分次泵入真空減壓濃縮器內(nèi)(單效濃縮器)控制內(nèi)罐真空壓 力0. 08-0. 086MPa，溫度控制58°C，夾層蒸汽壓力0. 2MPa，濃縮至原體積的一半時，料液重 量1125kg，熱測比重1. 12，調(diào)整PH6. 4，進行精濾后，再減壓濃縮至料液重量約500kg(實際 重420kg)，熱測比重1. 20，每毫升該杜仲葉提取液相當于杜仲葉0. 5g。將此液用蠕動泵泵 入25型離心噴霧干燥機，控制進風(fēng)溫度180-240°C，出風(fēng)溫度60-80°C，制成含水量6%粉粒 狀的固體營養(yǎng)物質(zhì)。實施例4在原乳酶生生產(chǎn)發(fā)酵培養(yǎng)基中加入營養(yǎng)促進劑，加入后培養(yǎng)基的重量百分組成 為杜仲葉提取液(每毫升相當于杜仲葉0. 5g)0. 75%，蛋白胨3%，牛肉膏0. 3%，氯化鈉 (食鹽)0. 5 %，葡萄糖3 %，碳酸鈣1 %，豬肝浸液2.2%，純凈水89. 25 %。在1. 5萬毫升的圓底燒瓶中配置1個9公斤的生產(chǎn)發(fā)酵培養(yǎng)基，其實際操作方法 如下依次稱取杜仲葉提取液135ml，蛋白胨270g，牛肉膏27g，氯化鈉(食鹽)45g，葡萄糖 270g,碳酸鈣90g，除葡萄糖和碳酸鈣之外，其余成分放入一不銹鋼加熱容器中，再加入配方 用量約1/2的純凈水，加熱到90°C攪拌使其全部溶解后，并加入豬肝浸液200ml，以20%的 氫氧化鈉溶液調(diào)PH至7. 2-7. 4，置于先加入葡萄糖和碳酸鈣的1. 5萬毫升的圓底燒瓶中，并 補充純凈水至9公斤，再以防潮紙和棉塞包扎瓶口，再放入高壓滅菌容器內(nèi)，控制容器內(nèi)壓 力0. 1-0. llMPa，溫度121°C，滅菌時間30分鐘，取出降溫至40°C，按培養(yǎng)基體積的4%接種 量將預(yù)先準備好的腸鏈球菌菌液，在無菌室內(nèi)按無菌操作程序，將菌種液接入上述培養(yǎng)基 內(nèi)，然后在37士2°C的恒溫培養(yǎng)箱進行發(fā)酵培養(yǎng)，每隔1小時啟動搖床或人工搖床一次，詳 細做好記錄，發(fā)酵培養(yǎng)16小時后，觀察碳酸鈣消失情況(同時取樣進行鏡檢計數(shù)，用培養(yǎng)方 法進行化驗)。對比數(shù)據(jù)作為對照的加入促進劑后的培養(yǎng)基組成(重量百分比)為蛋白胨4%，牛肉膏 0.5%,氯化鈉(食鹽)0. 5 %，葡萄糖4 %，碳酸鈣1 %，豬肝浸液2.2%，純凈水87.8%。配制與檢測方法同上。兩者對比，培養(yǎng)液每毫升含活性腸鏈球菌菌數(shù)增加20-30億，發(fā)酵率提高了 20-30%。
權(quán)利要求
一種杜仲葉提取物，其特征在于，由下法制得將杜仲葉用水煎煮并過濾，調(diào)整濾液pH為5.5 7.5，即得所述的杜仲葉提取物。
2.如權(quán)利要求1所述的杜仲葉提取物，其特征在于，調(diào)整濾液PH值后，噴霧干燥制成粉。
3.如權(quán)利要求1或2所述的杜仲葉提取物，其特征在于，將杜仲葉煎煮提取三次，第一 次的加水量為杜仲葉質(zhì)量的7-10倍，提取時間為50-60min，提取溫度98-100°C ；第二、三 次的加水量為杜仲葉質(zhì)量的2-7倍，煎煮提取時間分別為40-50min和30-40min，提取溫度 98-100°C ；合并3次煎煮提取液。
4.權(quán)利要求1所述的杜仲葉提取物的制備方法，其特征在于，將杜仲葉用水煎煮并過 濾，調(diào)整濾液PH為5. 5-7. 5，即得所述的杜仲葉提取物。
5.如權(quán)利要求4所述的杜仲葉提取物的制備方法，其特征在于，調(diào)整濾液pH值為 6. 0-6. 5。
6.如權(quán)利要求4所述的杜仲葉提取物的制備方法，其特征在于，調(diào)整濾液pH值后噴霧 干燥制成粉。
7.如權(quán)利要求4-6之一所述的杜仲葉提取物的制備方法，其特征在于，調(diào)整濾液pH后 調(diào)整濾液密度為1. 20-1. 25g/cm3，調(diào)整密度時采用真空減壓濃縮，真空度為0. 06-0. 07Mpa, 溫度為55-60°C。
8.如權(quán)利要求4-6之一所述的杜仲葉提取物的制備方法，其特征在于，將杜仲葉煎 煮提取三次，第一次的加水量為杜仲葉質(zhì)量的7-10倍，提取時間為50-60min，提取溫度 98-1000C ；第二、三次的加水量為杜仲葉質(zhì)量的2-7倍，煎煮提取時間分別為40-50min和 30-40min，提取溫度98-100°C ；合并3次煎煮提取液。
9.權(quán)利要求1或2所述的杜仲葉提取物作為乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)促進劑的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求9所述的杜仲葉提取物作為乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)促進劑的應(yīng)用，其特征在 于，杜仲葉提取物的添加量按其中所含杜仲葉的重量計為乳酸菌培養(yǎng)基重量的0. 5-2. 0%o
全文摘要
本發(fā)明屬于植物有效成分提取領(lǐng)域，特別涉及一種杜仲葉提取物及其制備方法和應(yīng)用。所述杜仲葉提取物由下法制得將杜仲葉用水煎煮并過濾，調(diào)整濾液pH為5.5-7.5，即得所述的杜仲葉提取物。本發(fā)明杜仲葉提取物制備方法簡單、應(yīng)用于乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)促進劑可以顯著提高發(fā)酵液含活性菌數(shù)量，效果顯著。
文檔編號C12N1/20GK101914472SQ201010237719
公開日2010年12月15日 申請日期2010年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月27日
發(fā)明者周改朝, 張少少, 朱圣和, 蘇印泉, 鄒吉祥 申請人:靈寶上洋科技有限責(zé)任公司