專(zhuān)利名稱(chēng)：一種具有抑菌活性作用的假升麻根提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以假升麻(Aruncus sylvester Kostel. ex Maxim.)根為原料制備的具有抑菌活性作用的假升麻根提取物。 1、本發(fā)明產(chǎn)品對(duì)金黃色葡萄球菌等5種常見(jiàn)致病菌及食品腐敗菌具有良好的抑菌效果，對(duì)5種供試菌的抑制效果依次為金黃色葡萄球菌>沙門(mén)氏菌>大腸桿菌>鏈球菌>枯草芽孢桿菌。本發(fā)明產(chǎn)品可開(kāi)發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。 2. —種以假升麻根為原料制備的具有抑菌活性作用的假升麻根提取物制劑，其特征在于制備該提取物包括以下過(guò)程 (1)取假升麻根，挑去雜物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8-10倍量75% _85%的乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1. 5h，溫度為3(TC功率為80W，然后用綢布與濾紙分別過(guò)濾一次，得到濾液； (2)假升麻根經(jīng)(1)處理后的濾渣再分別用6倍量與4倍量75% _85%的乙醇重
復(fù)(1)步驟各一次，分別得到濾液，合并三次濾液； (3)將上述(2)濾液回收乙醇，得假升麻根提取物。 3.根據(jù)本發(fā)明所述的制備提取物的原料為假升麻(Aruncus sylvester Kostel.ex Maxim.)根。
3
4.根據(jù)本發(fā)明，假升麻根提取物對(duì)金黃色葡萄球菌>沙門(mén)氏菌>大腸桿菌>鏈球 菌>枯草芽孢桿菌均有不同程度的抑制作用。 5.根據(jù)本發(fā)明所述的假升麻根提取物，其特征在于該提取物可作為天然抗菌劑用
于食品、藥品等行業(yè)，代替有毒副作用的合成抗菌劑。 根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明中的"％ "是重量百分比。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明所述的制備假升麻根提取物包括以下實(shí)施例，下面的實(shí)施例可進(jìn)一步說(shuō)明
本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例1 : (1)取假升麻根，挑去雜物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用10倍量85%的乙醇室溫下 浸提6h后超聲1. 5h，溫度為3(TC功率為80W，然后用綢布與濾紙分別過(guò)濾一次，得到濾液；
(2)假升麻根經(jīng)(1)處理后的濾渣再分別用6倍量與4倍量85%的乙醇重復(fù)(1) 步驟各一次，分別得到濾液，合并三次濾液； (3)將上述(2)濾液回收乙醇，得假升麻根提取物，收率為25%。
實(shí)施例2: (1)取假升麻根，挑去雜物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8倍量75 % %的乙醇室溫 下浸提4h后超聲lh，溫度為3(TC功率為80W，然后用綢布與濾紙分別過(guò)濾一次，得到濾液；
(2)假升麻根經(jīng)(1)處理后的濾渣再分別用6倍量與4倍量75%的乙醇重復(fù)(1) 步驟各一次，分別得到濾液，合并三次濾液； (3)將上述(2)濾液回收乙醇，得假升麻根提取物，收率為22%。
藥理試驗(yàn)例假升麻根提取物的抑菌作用
1材料、試劑
1. 1材料與試劑 假升麻根提取物、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、分析用水為超純水。
1. 2供試菌種 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli)、 沙門(mén)氏菌(Salmonella enterica)、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)、鏈球菌 (Str印tococcus)均由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。
2實(shí)驗(yàn)方法 2. 1試驗(yàn)樣品假升麻根提取物。
2. 2假升麻根提取物抑菌試驗(yàn) 2. 2. 1營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的制備牛肉膏3. Og、蛋白胨10. 0g、 NaC15. Og、蒸餾水 1000ml、瓊脂20. 0g、pH7. 0 2. 2. 2濾紙片法測(cè)定最小抑菌濃度(MIC):將2. 1提取物用二倍稀釋法進(jìn)行稀釋?zhuān)?培養(yǎng)皿上分別接種金黃葡萄球菌，大腸桿菌，沙門(mén)氏菌，巴氏菌，鏈球菌菌懸液各0. 2ml (菌 濃度106CFU)，涂布均勻，然后將直徑5mm的滅菌濾紙片在提取液中浸泡2h后貼在培養(yǎng)基 上，每皿3片等距放置，每菌三份平行，另外，每個(gè)菌種用滅菌的濾紙片做一份空白對(duì)照及 鏈霉素(100ug/ml)進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照，置培養(yǎng)箱中37t:下培養(yǎng)24h。用十字交叉法測(cè)量并記錄抑菌圈的大小，結(jié)果取三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的平均值，得不同濃度提取物對(duì)供試菌的抑菌效果，抑 菌圈不明顯所對(duì)應(yīng)的提取物濃度即為最低抑菌濃度。 2. 2. 3熱和壓力穩(wěn)定性的測(cè)定用試管分裝2ml 400mg/ml的提取液，分別置于溫 度40、60、80、10(TC水浴和12rC濕熱處理30min，以金黃色葡萄球菌和巴氏菌為指示菌采 用濾紙片法測(cè)定其抑菌效果。 2. 2. 4紫外穩(wěn)定性測(cè)定將2ml 400mg/ml提取液分裝于9cm培養(yǎng)皿中，置紫外燈 365nm下分別照射5、 15、30、45、60min，以金黃色葡萄球菌和巴氏菌為指示菌采用濾紙片法 測(cè)定其抑菌效果。 2. 2. 5酸堿穩(wěn)定性測(cè)定用0. lmol/L稀鹽酸和稀氨水溶液將400mg/ml假升麻根 提取液的pH值分別調(diào)至2、4、6、7、8、10、12，以金黃色葡萄球菌和巴氏菌為指示菌采用濾紙 片法測(cè)定其抑菌效果。
3結(jié)果與分析 3. 1最小抑菌濃度(MIC)的測(cè)定抑菌作用結(jié)果如表1所示。
表1假升麻根提取液對(duì)5種細(xì)菌的抑菌作用 Table 1 The antibacterial activities of Syringea Reticulata extract to
five bacteria
濃度(mg/ml) 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 沙門(mén)氏菌_枯草芽孢桿菌 鏈球菌
^ +++ +++ +++~
柳 +++ +++ +++ ++ +++
2朋 ++ +++ +++ ++ ++
柳 ++ + ++ + ++
50 +++ +- ++ +- +-
25 ++ — ++ — -
/25 ++ - + - -
ft25 ++ - + - -
"25 + - - - - 注_無(wú)抑菌圈出現(xiàn)；+_抑菌圈不明顯；+抑菌圈直徑為6_7mm ;++抑菌圈直徑為
8-10mm ;+++抑菌圈直徑為11mm以上. 由表1可知假升麻根提取物對(duì)5種供試菌均有不同程度的抑制作用，其對(duì)金黃色 葡萄球菌的最小抑菌濃度為3. 125mg/ml，對(duì)沙門(mén)氏菌的最小抑菌濃度為6. 25mg/ml，對(duì)大 腸桿菌、枯草芽孢桿菌和鏈球菌的最小抑菌濃度均為50mg/ml。 3. 2熱處理和壓力對(duì)假升麻根提取液抑菌活性的影響測(cè)定不同溫度下假升麻根 提取液的抑菌活性結(jié)果如

圖1。由圖l可知假升麻根提取物具有良好的熱穩(wěn)定性，即使經(jīng) 高溫12rC處理后，仍具有較高的抑菌活性。 3. 3紫外光對(duì)假升麻根提取液抑菌活性的影響測(cè)定不同紫外光照時(shí)間下假升麻 根提取液的抑菌活性結(jié)果如圖2。由圖2可知假升麻根提取物在紫外光照射的條件下，抑 菌活性基本穩(wěn)定，在紫外光照射60min時(shí)仍有一定的抑制效果。 3. 4不同pH對(duì)假升麻根提取液抑菌活性的影響測(cè)定不同pH下假升麻根提取液 的抑菌活性結(jié)果如圖3。 由圖3可知假升麻根提取物穩(wěn)定，pH8時(shí)其抑菌效果最好。
圖1是熱處理和壓力對(duì)假升麻根提取液抑菌活性的影響圖；
圖2是紫外光對(duì)假升麻 提取液抑菌活性的影響圖；
圖3是pH值對(duì)假升麻根提取物抑菌活性的影響圖。
權(quán)利要求
本發(fā)明涉及以假升麻(Aruncus sylvester Kostel.ex Maxim.)根為原料制備的具有抑菌活性作用的假升麻根提取物，本發(fā)明產(chǎn)品對(duì)金黃色葡萄球菌等5種常見(jiàn)致病菌及食品腐敗菌具有良好的抑菌效果，對(duì)5種供試菌的抑制效果依次為金黃色葡萄球菌＞沙門(mén)氏菌＞大腸桿菌＞鏈球菌＞枯草芽孢桿菌，本發(fā)明產(chǎn)品可開(kāi)發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。
2. —種以假升麻根為原料制備的具有抑菌活性作用的假升麻根提取物，其特征在于該提取物制備包括以下過(guò)程(1) 取假升麻根，挑去雜物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8-10倍量75% -85%的乙醇室溫下浸提4-6h后超聲1-1. 5h，溫度為3(TC功率為80W，然后用綢布與濾紙分別過(guò)濾一次，得到濾液；(2) 假升麻根經(jīng)(1)處理后的濾渣再分別用6倍量與4倍量75% _85%的乙醇重復(fù)(1)步驟各一次，分別得到濾液，合并三次濾液；(3) 將上述(2)濾液回收乙醇，得假升麻根提取物。
3. 根據(jù)本發(fā)明所述的制備提取物的原料為假升麻(Aruncus Sylvester Kostel. exMaxim.)根。
4. 根據(jù)本發(fā)明，假升麻根提取物對(duì)金黃色葡萄球菌>沙門(mén)氏菌>大腸桿菌>鏈球菌>枯草芽孢桿菌均有不同程度的抑制作用。
5. 根據(jù)本發(fā)明所述的假升麻根提取物，其特征在于該提取物可作為天然抗菌劑用于食品、藥品等行業(yè)，代替有毒副作用的合成抗菌劑。
全文摘要
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開(kāi)發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及以假升麻(Aruncus sylvesterKostel.ex Maxim.)根為原料制備的具有抑菌活性作用的假升麻根提取物。本發(fā)明產(chǎn)品對(duì)金黃色葡萄球菌等5種常見(jiàn)致病菌及食品腐敗菌具有良好的抑菌效果，對(duì)5種供試菌的抑制效果依次為金黃色葡萄球菌＞沙門(mén)氏菌＞大腸桿菌＞鏈球菌＞枯草芽孢桿菌。本發(fā)明產(chǎn)品可開(kāi)發(fā)為天然抗菌劑應(yīng)用于食品、藥品等行業(yè)，制備出具有抑菌作用的各種形式的產(chǎn)品。
文檔編號(hào)A23L1/28GK101721505SQ200910226018
公開(kāi)日2010年6月9日 申請(qǐng)日期2009年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月16日
發(fā)明者張崇禧 申請(qǐng)人:山東大學(xué)威海分校