專利名稱：：一種耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法及其在飼料中的用途的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及本發(fā)明涉及生化酶領域，特別是涉及一種耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法并提供該耐熱木聚糖酶在飼料中的用途。
背景技術：
：木聚糖是一種多聚五碳糖，主鏈是由多個吡喃木糖基通過1,4-木糖苷鍵相連。側鏈上連著多種大小不同的短的取代基，通過木糖殘基上的02和03原子與阿拉伯糖殘基相連，所以又稱為阿拉伯木聚糖。有時阿拉伯木聚糖分子中還含有少量其它側鏈殘基，如六碳糖、葡萄糖醛酸、阿魏酸。阿拉伯木聚糖通過這些殘基以共價鍵結合在細胞壁的其它成分上。阿拉伯糖側鏈的數(shù)量和分布隨谷物種類和品種的不同而變異，阿拉伯糖和木糖的比例大約為0.65-0.74:1。阿拉伯木聚糖的取代降低了主鏈化學鍵的作用力，從而使其具有水溶性和粘稠性，側鏈數(shù)量越多，阿拉伯糖基的取代程度越高，水分子越容易滲入，溶解度就越大。根據(jù)溶解性可將木聚糖分為水溶性木聚糖(25%~30%)和不溶性木聚糖兩大類(約占70%~75%)。木聚糖主要存在于植物細胞的次生壁上，處于木質素和其它多聚糖之間，起著連接作用。飼料原料不同，其中木聚糖含量差別很大。木聚糖是影響麥類原料在飼料中應用的最主要抗營養(yǎng)因子，小麥、黑麥和黑小麥中主要含有大量水溶性阿拉伯木聚糖。實際上，在我國最常用的飼料原料玉米、豆粕中，木聚糖也是最主要的抗營養(yǎng)因子，玉米中木聚糖含量在3.7%~4.4%,占細胞壁總成分的40%左右，是玉米中含量最高的抗營養(yǎng)因子。豆粕中木聚糖的含量也達到6%,此外，在其他一些加工副產(chǎn)物如麩皮、米糠以及雜粕中木聚糖的含量更高。因此，木聚糖在各種伺料原料中普遍存在，是伺料中最主要的抗營養(yǎng)因子之一。表l:常見飼料原料中非淀粉多糖的種類及含量(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>木聚糖的抗營養(yǎng)作用主要表現(xiàn)在:1.增加腸道食糜黏度，影響動物消化吸收單胃動物本身不能分泌分解木聚糖的酶。當動物采食含水溶性木聚糖高的祠料時，可溶性木聚糖在動物腸道內(nèi)形成粘性物質，提高腸道內(nèi)容物的黏度。黏度的上升降低了腸道內(nèi)食糜通過消化道的速度，導致釆食量下降，妨礙消化液與底物的混合，延緩消化酶對底物的消化。同時，降低腸道內(nèi)食糜中營養(yǎng)物質在腸道內(nèi)的擴散速度，妨礙養(yǎng)分吸收。2.影響消化道內(nèi)源酶活性，刺激消化器官代償性增大阿拉伯木聚糖也可直接與腸道中胰蛋白酶、脂肪酶等消化酶絡合，降低消化酶的活性，當單胃動物采食含水溶性高的飼料時，由于對營養(yǎng)成分消化不充分，可刺激動物代償性地大量分泌消化液，從而使動物胰臟、肝臟等消成內(nèi)源性氮的損失增加。3.影響脂肪的消化吸收木聚糖在腸道內(nèi)能相互結成網(wǎng)狀物，降低了詞料的擴散率，阻止脂肪與膽鹽結合，不能形成脂肪微粒，抑制了脂肪的消化吸收。4.促使腸道有害微生物的增殖，影響動物健康腸道黏度的增加導致營養(yǎng)物質在腸道內(nèi)蓄積，形成富含養(yǎng)分的食糜，使微生物在這里發(fā)酵，損害腸道黏膜正常的形態(tài)和功能。對于家禽，濕潤的糞便易黏附在泄殖腔周圍，污染禽和禽蛋，并提供微生物發(fā)酵的場所，從而產(chǎn)生大量的氨氣，并可促使真菌孢子繁殖，不利家禽的健康。5.物理屏障作用，影響?zhàn)B分的消化木聚糖作為細胞壁的主要成分，包裹營養(yǎng)物質，隔離減少了營養(yǎng)物質與消化液的接觸面積，降低飼料中養(yǎng)分的利用率。伺用酶制劑是指利用微生物技術生產(chǎn)的胞外酶，用作銅料添加劑。祠用酶制劑既能提高飼料的消化率和利用率，提高禽畜及魚類的生產(chǎn)性能，又能減少禽畜排泄物中的氮、磷的排泄量，保護水體和土壤免受污染。近幾年，隨著人們生活水平的提高及環(huán)保意識的增強，飼用酶制劑作為高效、無毒副作用和環(huán)保型的"綠色"飼料添加劑，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上得到了廣泛推廣應用。伺料中使用的酶制劑種類和功效列舉如下1.半纖維素酶與木聚糖酶木聚糖酶是一組可將木聚糖降解成低聚糖和木糖的復合酶系。木聚糖在植物細胞壁中的含量僅次于纖維素，是半纖維素中含量最豐富的一種，約占細胞干重的35%,是谷物籽實中的主要非淀粉多糖之一，它的存在使谷物中的營養(yǎng)物質不能被充分暴露于動物消化液的表面，進而影響動物的消化吸6收，降低了飼料的營養(yǎng)價值。木聚糖酶類專一降解木聚糖，具有很大的商業(yè)開發(fā)價值。飼料工業(yè)中添加木聚糖酶可以為畜禽生產(chǎn)帶來良好的生產(chǎn)效果和經(jīng)濟效益。許多試驗表明，添加木聚糖酶可以提高畜禽的生產(chǎn)性能。其主要作用才幾理如下(1)降解木聚糖，降低腸道食糜黏度，破壞植物細胞壁結構，消除其抗營養(yǎng)作用，改善動物生產(chǎn)性能。提高飼料代謝能，促進養(yǎng)分吸收利用，增強銅料和養(yǎng)殖企業(yè)贏利能力。(2)消除木聚糖對內(nèi)源酶的抑制，防止消化器官代償性肥大。(3)生成大量功能性寡糖(木二糖、木三糖等)，改善腸道微生物區(qū)系，減少胃腸道疾病，增進動物健康。(4)減少伺料原料品質變異造成的飼料產(chǎn)品質量波動，穩(wěn)定產(chǎn)品質量，減少投訴。(5)拓寬飼料原料使用范圍，加大非常規(guī)飼料如麩皮、次粉、米糠等在祠料中的用量，降低飼料配方成本。(6)增加營養(yǎng)物質的吸收利用，減少糞便排放，保護環(huán)境，同時減少糞便有機物質分解產(chǎn)生的有害氣體對畜禽的刺激，減少呼吸道疾病的發(fā)生。木聚糖酶要廣泛經(jīng)濟高效的應用于詞料工業(yè)應具備一定條件。例如，豬胃中的pH—般為23.5,十二指腸、空腸和回腸的pH范圍分別為46、5.56.7和7.07.5，因此要求飼用木聚糖酶在pH較廣的范圍內(nèi)能保持較高的活性。另一方面，現(xiàn)在顆粒料制粒過程中有一個短暫的高溫過程，溫度在7593°C，多數(shù)木聚糖酶在此高溫下會大幅度地喪失活性；同時，飼料中的木聚糖酶最終的作用場所是豬正常體溫(37。C)的胃腸中，因此能耐制粒高溫，且在動物正常體溫下具有較高活性成為木聚糖酶在生產(chǎn)中應用的關鍵。2.纖維素酶纖維素酶是一類能分解纖維素的酶類通稱。在飼料中添加纖維素酶一方面可以破壞富含纖維素的細胞壁，使被其包圍的淀粉、蛋白質等營養(yǎng)成分得以釋放并被消化利用；另一方面可使纖維素被降解成為可吸收利用的糖。3.植酸酶植酸酶能將麩皮、米糠中不被畜禽利用的植酸(肌醇六磷酸)分解出六個單位的磷酸供畜禽使用。單胃畜禽由于缺乏植酸酶，所以有些口糧必須添加大量無4幾磷。飼料中添加才直S臾酶后可以少加或不加磷礦物添加劑，減少畜禽隨糞便排出的無機磷對環(huán)境的污染。4.果膠酶果膠酶是一類分解果膠質的酶。果膠酶可裂解單糖之間的糖苷鍵，并脫去水分子，分解包裹在植物表皮的果膠,降低腸道內(nèi)容物的粘度,并促使植物組織的分解。果膠酶與木聚糖酶合用能降低銅料在畜禽消化道內(nèi)的粘度，有利于消化酶與營養(yǎng)物質接觸和降解，并可抑制腸道有害微生物的生長。5.P-葡聚糖酶(3-葡聚糖是由葡萄糖依靠P-1,3葡萄糖苷鍵與(3-1,4糖苷鍵連結而成的多糖。多存在于大麥、燕麥等谷物中,可溶于水形成粘性的凝膠，成為一種抗營養(yǎng)因子,阻礙動物(特別是幼畜)對營養(yǎng)物質的利用,使其生長下降，(3-葡聚糖酶可水解(3-葡聚糖,降低腸道內(nèi)容物的粘度。6.蛋白酶蛋白酶是催化蛋白質水解的酶類，是農(nóng)業(yè)上應用最多的酶制劑之一。蛋白酶制劑的種類很多，重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶，等等。蛋白酶廣泛存在于人和動物的消化道中，在植物及微生物中含量豐富。由于動植物資源有限，農(nóng)業(yè)上用蛋白酶制劑主要通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)，所以祠用蛋白酶主要來源于微生物，生產(chǎn)蛋白酶的微生物種類很多，有細菌和真菌，如芽孢桿菌屬、曲霉屬、青霉屬等等。在單胃動物飼料中添加蛋白酶主要有兩大作用，一是補充動物體內(nèi)源蛋白酶的不足。幼豬和幼禽消化系統(tǒng)發(fā)育不完善，產(chǎn)酶不足，微生物活性較低，在飼料中添加蛋白酶就可以幫助幼齡動物對蛋白質的消化。二是消除抗營養(yǎng)因子的作用。銅料中植物性成分，特別是豆類植物，廣泛存在蛋白酶抑制劑和凝集素，它們對飼料營養(yǎng)價值有很大影響，不過對家禽而言，還有待進一步的研究。實驗表明，許多微生物蛋白酶可以降解動物消化道中對蛋白酶有抑制作用的蛋白酶抑制劑和凝集素，消除它們的影響，減輕這些因子的抗營養(yǎng)作用。7.淀粉酶淀粉一般是由直鏈淀粉和支鏈淀粉組成。主要用于詞料工業(yè)的淀粉酶有淀粉酶、支鏈淀粉酶、葡萄糖淀粉酶。支鏈淀粉酶的特點是，能專一性的切開支鏈淀粉和糖原等分支點的l-6糖苷鍵，形成直鏈淀粉。所以將該酶與其他淀粉酶配合使用，可使淀粉完全糖化。近年來支鏈淀粉酶作為淀粉酶中的一個新品種應用于飼料工業(yè)和食品工業(yè)。目前銅料中的主要成分是玉米，其中支鏈淀粉難以利用，造成飼料的浪費。如添加一定的支鏈淀粉酶，再在動物內(nèi)源和外源淀粉酶的作用下，就能很好的消化吸收，提高詞料利用率，降低成本。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種能耐制粒高溫，且在動物正常體溫下、在pH較廣的范圍內(nèi)具有較高活性的耐熱木聚糖酶，并提供該耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)工藝及其在飼料中的用途。木聚糖酶的生產(chǎn)可采取固體發(fā)酵和液體發(fā)酵兩種途徑，雖然針對真菌液體發(fā)酵產(chǎn)酶條件的研究很多，方法較為成熟。但由于液體發(fā)酵對設備要求4交高，投入較大，生產(chǎn)成本也較高。所以本發(fā)明采用固體發(fā)酵，其優(yōu)點為使用的培養(yǎng)基非常簡單便宜(玉米芯干粉+料水)；原料處理簡單；產(chǎn)物提取9容易，固體發(fā)酵后的物料粉碎后就是產(chǎn)品，整個過程無廢物排出；培養(yǎng)基含水量小，減少了污染雜菌的機會等。本發(fā)明的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法，采用嗜熱真菌DSM10635為生產(chǎn)菌種，通過固體發(fā)酵方法生產(chǎn)耐熱木聚糖酶。其酶產(chǎn)品無需進一步提純，與培養(yǎng)基一起干燥后使用于飼料工業(yè)。嗜熱真菌所分泌的木聚糖酶已完成安全評估，按美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)的評價標準證實可以按需要量添加使用。所述嗜熱真菌DSM10635從德國菌種保藏中心購買獲得。購得的菌株在PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得孢子，紫外照射誘變得到更高產(chǎn)的菌抹。篩選辦法為RBB-木聚糖瓊脂平板篩選法。所得到的木聚糖酶蛋白質數(shù)據(jù)庫編號為1YNA，理論分子量為21294.96Dalton,實際檢測到分子量為21295.17Dalton。共有194個氨基酸，其氨基酸序列為(從N端到C端，l-194位氨基酸)xttpnsegwhdgyyyswwsdggaqatytnleggtyeiswgdggnlvggkgw叩glnaraihfegvyqpngnsylavygwtmplveyyivenfgtydpssgatdlgtvecdgsiyrlgkttrvnapsidgtqtfdqywsvrqdkrtsgtvqtgchfdawaraglnvngdhyyqivategyfssgyaritvadvg本發(fā)明的耐熱木聚糖酶還可以通過培養(yǎng)其它分泌耐熱木聚糖酶的微生物來完成，包括但不限于基因工程改造的工程菌。本發(fā)明的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法，其特征在于包括如下生產(chǎn)步驟(1)玉米皮、玉米芯和玉米稈中的任意一種為原料，將其粉碎至直徑為0.53毫米的顆粒后用水浸濕23小時，蒸汽殺菌后冷卻到50~55°C,獲得底物；(2)將步驟(1)的底物與緩沖液以1:2.8~1:3.6的料水比例混合均勻，形成培養(yǎng)基；所述緩沖液由酵母浸出汁與磷酸二氫鉀組成；酵母浸出汁濃度為510g/l,磷酸二氫鉀濃度為25g/l;所述緩沖液的pH=6.06.5;(3)嗜熱真菌按8%的接種量(體積比)接種在所述培養(yǎng)基上，在50~55。C的發(fā)酵溫度下培養(yǎng)912天，菌體在整個培養(yǎng)基上繁殖；(4)干燥從步驟(3)得到的發(fā)酵后的培養(yǎng)基得到木聚糖酶產(chǎn)品，將其進一步磨粉后過篩，得到酶活性大于10000IU/g的粉末狀的嗜熱木聚糖酶；所述篩為60100目的篩。優(yōu)選地，在步驟(3)中，在所述的培養(yǎng)基中添加0,2%(重量比)的甘油。本發(fā)明的耐熱木聚糖酶在飼料中的用途，其特征在于所述耐熱木聚糖酶作為飼料添加劑使用，所述耐熱木聚糖酶在所述飼料添加劑中的含量為100%，每千克所述飼料中的所述祠料添加劑的含量為0.030.3克。優(yōu)選地，每千克所述飼料中的所述飼料添加劑的含量為0.1克。本發(fā)明的耐熱木聚糖酶在祠料中的用途，其特征在于所述耐熱木聚糖酶與其他酶混合制成飼料復合酶制劑使用，在每千克所述飼料中，所述飼料復合酶制劑的含量為0.010.3克，所述其他酶是蛋白酶、果膠酶、淀粉酶、纖維素酶和植酸酶中的任意一種或多種的組合，所述耐熱木聚糖酶的用量大于所述其它酶。優(yōu)選地，每千克所述伺料中的所述耐熱木聚糖酶的含量為1000IU。在飼料中添加含有耐熱木聚糖酶的酶制劑的顯著效果在于提高飼料的轉化比，同時可以更廣泛的采納利用廉價飼料原料組成飼料配方。按照不同階段和飼養(yǎng)動物要求，飼料復合酶制劑將按照設計劑量混合不同種類的酶制成復合酶制劑。具體的酶品種和配方將依據(jù)不同飼養(yǎng)要求設計。例如，針對利用豆粕替代魚粉的雞料配方，可以多添加耐熱蛋白酶；對于含小麥或高粱的飼料配方，多添加耐熱(3-葡聚糖酶和耐熱果膠酶；對于幼畜禽伺料配方，適量添加耐熱蛋白酶和耐熱淀粉酶。在所有這些飼料復合酶制劑中，木聚糖酶、纖維素酶和植酸酶均應該添加，且木聚糖酶起關鍵作說明書第9/ll頁用，酶活力用量也最大。圖1表示本發(fā)明的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)流程圖圖2表示本發(fā)明的底物對嗜熱真菌DSM10635生產(chǎn)木聚糖酶的影響結果示意圖。其中，底物l為松木屑、2為樺木屑、3為麩皮、4為玉米桿、5為玉米芯、6為玉米皮。圖3表示發(fā)酵溫度對嗜熱真菌DSM10635生產(chǎn)木聚糖酶的影響結果示意圖。圖4表示料水比例對嗜熱真菌DSM10635生產(chǎn)木聚糖酶的影響結果示意圖。具體實施例方式本發(fā)明的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)流程圖如圖l所示利用嗜熱真菌DSM10635的本發(fā)明的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)1.底物的選擇如圖2所示，嗜熱真菌DSM10635在50。C下，以廉價的玉米皮、玉米芯、玉米稈、麩皮、闊葉(白楊)和針葉(紅松)為原料進行產(chǎn)酶的研究，得到酶產(chǎn)量的大小順序為玉米皮培養(yǎng)基(1673.54IU/g)>玉米芯培養(yǎng)基(1306.34IU/g)>玉米稈培養(yǎng)基(379.07IU/g)>麩皮培養(yǎng)基(155.09IU/g)>闊葉木培養(yǎng)基(19.11IU/g)>針葉木培養(yǎng)基(2,03IU/g)。該結果表明玉米皮和玉米芯為嗜熱真菌DSM10635在50。C下生產(chǎn)耐熱木聚糖酶的最佳誘導底物，在酶工業(yè)生產(chǎn)中應用將大大降低生產(chǎn)成本，具有重要的經(jīng)濟價值。2.底物顆粒大小的選擇以不同直徑的玉米芯(0.1cm、0.2~0.3cm和0.5~lcm)顆粒作為培養(yǎng)底12物，且玉米芯培養(yǎng)基組分構成均為33.33%(重量百分比)玉米芯顆粒和66.67%(重量百分比)的由酵母浸出汁和磷酸組成的緩沖液(pH6.5)，用嗜熱真菌ThermomyceslanuginosusDSM10635按8%體積比的接種量接種后在50。C進行固體發(fā)酵生產(chǎn)木聚糖酶，得到的木聚糖酶的酶活力分別為1228.75IU/g、948.59IU/g和599.39IU/g。上述結果表明，酶產(chǎn)量大小的順序為小顆粒(粒徑O.lcm)玉米芯培養(yǎng)基>中顆粒(粒徑0.2~0.3cm)玉米芯培養(yǎng)基>大顆粒(粒徑0.5lcm)。小果頁并立玉米芯(豐立4圣<0.1cm)為p耆熱真菌ThermomyceslanuginosusDSM10635生產(chǎn)木聚糖酶的最佳誘導底物。3.發(fā)酵溫度的選擇選擇一個合適的發(fā)酵溫度對于保證菌體生長與酶產(chǎn)物合成的順利進行很重要。如圖3所示，本發(fā)明以20。/。玉米芯干^f分(重量百分比)和80%(重量百分比)的由酵母浸出汁和磷酸組成的緩沖液(pH6.5)為培養(yǎng)基的組分構成，用嗜熱真菌ThermomyceslanuginosusDSM10635按8%(體積百分比)的接種量接種后，分別在45、50、55、60和65。C下進行培養(yǎng)發(fā)酵產(chǎn)酶，得到的木聚糖酶的酶活力分別為4192.62IU/g、4686.05IU/g、3卯1.71IU/g、1887.54IU/g和727.68IU/g。該結果表明嗜熱真菌ThermomyceslanuginosusDSM10635在5CTC發(fā)酵產(chǎn)酶時酶活力最高，溫度過高或過低均不利于產(chǎn)酶。4.培養(yǎng)基料水比例的選擇培養(yǎng)基的料水比例對木聚糖酶的生產(chǎn)有明顯的影響。料水比例太大,會引起固體基質物理性質發(fā)生變化，從而影響氧的傳輸和發(fā)酵熱的散失，同時也會引起培養(yǎng)基表面粘連，造成培養(yǎng)基溶氧量不足，容易導致發(fā)酵不徹底，培養(yǎng)基利用率下降，從而酶產(chǎn)量降低。料水比例過低，基質內(nèi)水活度下降，13不利于營養(yǎng)物質的溶解與傳遞，也會使孢子萌發(fā)的遲滯期延長，進而影響菌絲體的生長周期，導致酶產(chǎn)量較低。因此，適當水分含量的培養(yǎng)基不僅對菌抹的生長至關重要，而且是木聚糖酶合成的關鍵因素。如圖4所示，本發(fā)明的嗜熱真菌DSM10635在料水比分別為1:2.4、1:2.8、1:3.2、1:3.6和1:4.0的玉米芯固體培養(yǎng)基上于50。C下發(fā)酵產(chǎn)酶，得到的木聚糖酶產(chǎn)品的酶活力分別為1644.04IU/g、2845.96IU/g、2350.56IU/g、2174.92IU/g和1730.11lU/g。上述結果表明，培養(yǎng)基料水比例為1:2.8時，菌抹的酶產(chǎn)量達到最大。增加或減少培養(yǎng)基的含水量,酶產(chǎn)量均顯著降低。5.最大木聚糖酶產(chǎn)量的結果比較本發(fā)明還進行了下述實驗，以確定營養(yǎng)因子與誘導效果的關系在1000ml大燒杯中，按照重量百分比，加入25%玉米芯千粉、74.8%的緩沖液(pH6.5)和0.2%的甘油，所述緩沖液由酵母浸膏(10g/L)、牛肉膏(10g/L)和KH2P04(5g/L)組成，將混合物攪拌均勻后，分裝到錐形瓶中，以8%(體積百分比)的接種量接種嗜熱真菌DSM10635，放置培養(yǎng)箱中，在5(TC下發(fā)酵9天。結果發(fā)現(xiàn)，每克絕干玉米芯培養(yǎng)基的酶產(chǎn)量達到12525.80IU，是目前國內(nèi)固體發(fā)酵產(chǎn)木聚糖酶的較高產(chǎn)量，高于國內(nèi)其它菌抹的產(chǎn)量。劉月英等利用棒曲霉UA22菌林進行固態(tài)發(fā)酵，所產(chǎn)木聚糖酶活力為2696IU/g;蔡敬民等篩選了一抹高產(chǎn)木聚糖酶的黑曲霉(Aspergillusniger)A3菌抹,研究其在固體培養(yǎng)基中的發(fā)酵條件，得到的木聚糖酶活力也只達5147IU/g培養(yǎng)基干重。以上所用的微生物不僅產(chǎn)量低，而且所產(chǎn)木聚糖酶的熱穩(wěn)定性和耐酸堿度性能都沒有嗜熱真菌DSM10635好。與之相比，本發(fā)明的利用嗜熱真菌DSM10635固體發(fā)酵生產(chǎn)得到的耐熱木聚糖酶，其產(chǎn)率高，酶耐熱性耐酸堿度好，而且不產(chǎn)生纖維素酶。擁有這些獨特優(yōu)點的DSM10635菌抹具有廣闊的應用前景。權利要求1、耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法，其特征在于包括如下生產(chǎn)步驟(1)玉米皮、玉米芯和玉米稈中的任意一種為原料，將其粉碎至直徑為0.5～3毫米的顆粒后用水浸濕2～3小時，蒸汽殺菌后冷卻到50～55℃，獲得底物；(2)將步驟(1)的底物與緩沖液以1∶2.8～1∶3.6的料水比例混合均勻，形成培養(yǎng)基；所述緩沖液由酵母浸出汁與磷酸二氫鉀組成；酵母浸出汁濃度為5～10g/l，磷酸二氫鉀濃度為2～5g/l；所述緩沖液的pH＝6.0～6.5；(3)嗜熱真菌Thermomyceslanuginosus按8％的接種量(體積比)接種在所述培養(yǎng)基上，在50～55℃的發(fā)酵溫度下培養(yǎng)9～12天，菌體在整個培養(yǎng)基上繁殖；(4)干燥從步驟(3)得到的發(fā)酵后的培養(yǎng)基得到木聚糖酶產(chǎn)品，將其進一步磨粉后過篩，得到酶活性大于10000IU/g的粉末狀的嗜熱木聚糖酶；所述篩為60～100目的篩。2、根據(jù)權利要求1所述的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法，其特征在于在步驟(3)中，在所述的培養(yǎng)基中添加0.2%(重量比)的甘油。3、根據(jù)權利要求1所述的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法，其特征在于所述料水比例為1:2.8。4、根據(jù)權利要求1所述的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法，其特征在于在步驟(1)的原料為玉米芯，所述粒徑為lmm。5、根據(jù)權利要求1所述的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法，其特征在于步驟(3)中的所述發(fā)酵溫度為50°C。6、根據(jù)權利要求1所述的耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法，其特征在于所述嗜熱真菌為嗜熱真菌DSM10635,所述耐熱木聚糖酶，屬于第U酶家族，屬于蛋白質數(shù)據(jù)庫編號為1YNA。7、用權利要求1的生產(chǎn)方法得到的耐熱木聚糖酶在飼料中的用途，其特征在于所述耐熱木聚糖酶作為祠料添加劑使用，所述耐熱木聚糖酶在所述銅料添加劑中的含量為100%,每千克所述飼料中的所述飼料添加劑的含量為0.030.3克。8、根據(jù)權利要求7的耐熱木聚糖酶在飼料中的用途，其特征在于每千克所述飼料中的所述飼料添加劑的含量為0.1克。9、用權利要求1的生產(chǎn)方法得到的耐熱木聚糖酶在飼料中的用途，其特征在于所述耐熱木聚糖酶與其他酶混合制成銅料復合酶制劑使用，在每千克所述祠料中，所述飼料復合酶制劑的含量為0.01~0.3克，所述其他酶是蛋白酶、果膠酶、淀粉酶、纖維素酶和植酸酶中的任意一種或多種的組合，所述耐熱木聚糖酶的酶活力用量大于所述其它酶。10、根據(jù)權利要求9的耐熱木聚糖酶在飼料中的用途，其特征在于每千克所述飼料中的所述耐熱木聚糖酶的含量為IOOOIU。全文摘要本發(fā)明描述了利用嗜熱真菌DSM10635生產(chǎn)耐熱木聚糖酶的生產(chǎn)方法以及所述耐熱木聚糖酶在飼料中的用途。作為飼料添加劑這種耐熱木聚糖酶可直接使用或混合其它酶制成復合酶制劑使用。其優(yōu)點為使用的培養(yǎng)基非常簡單便宜(玉米芯干粉+料水)；原料處理簡單；產(chǎn)物提取容易，固體發(fā)酵后的物料粉碎后就是產(chǎn)品，整個過程無廢物排出；培養(yǎng)基含水量小，減少了污染雜菌的機會。文檔編號C12N9/24GK101487000SQ20091011910公開日2009年7月22日申請日期2009年3月3日優(yōu)先權日2009年3月3日發(fā)明者熊海容申請人:熊海容