專利名稱：一種?？谙衙复制返闹苽浞椒?br> 技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生化試劑酶技術(shù)領(lǐng)域，它解決了目前沒有?？谙衙钢?品的問題。具體涉及一種?？谙衙复制返闹苽浞椒ā?脊景技術(shù)目前，我國對牛口涎成分、作用機理研究的很少，還沒有關(guān)于牛 口涎酶制品的發(fā)明專利。據(jù)資料表明唾涎是由遍布口腔粘膜深處的 許多大大小小的唾涎腺分泌出來的。大的唾液現(xiàn)有三對腮腺、頜下 腺、舌下腺，小的有唇腺、舌腺、頰腺、腭腺等。唾涎95%以上是水 分，還有動物健康必需的淀粉酶、溶菌酶、過氧化酶、過氧化氫酶、 粘蛋白、球蛋白、腎上腺皮質(zhì)激素、高血糖、維生素C、氨基酸、磷 酸鋅'、鉀、鈉、鈣、鎂、氯等多種成分。唾涎淀粉酶是三大唾液腺中 腮腺所分泌的一種水解的酶類，其主要作用是分解淀粉，使淀粉鏈中 a-1，4葡萄糖苷鍵水解，生成麥芽糖，麥芽丙糖和糊精混合物，因 而，唾液淀粉酶是消化代謝過程中必不可少的酶類；唾液還有可以清 除口腔中食物殘渣和異物，保持口腔的清潔；唾涎具有抗菌和凝血 的作用，如口腔里的傷口往往比其它地方好得快，主要原因在于唾涎 中的溶菌酶有殺菌的能力，可阻止口腔內(nèi)細(xì)菌的大量繁殖；唾涎中的 過氧'化物酶、過氧化氫酶和維生素C等具有抗癌能力，能過消除致癌 物質(zhì)的毒性。?？谙衙傅墓π？谙衙甘强赡苁且环N復(fù)合酶，它含有a-1,4淀粉酶，還可能含有蛋白酶、纖維素酶、溶菌酶、過氧化物酶及過氧化氫酶等等。中醫(yī)認(rèn)為?？谙训墓δ苁侵我酰次竾I吐；外用可治 疣目，目睛損傷等癥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明?？谙衙复制返闹苽浞椒ń鉀Q了目前沒有牛口涎酶制品 的問題，其產(chǎn)品便于生化研究和生物制品的應(yīng)用。 本發(fā)明的技術(shù)方案如下'一種?？谙衙复制返闹苽浞椒?，其特征在于，它是由以下的制備 方法獲得的。1、 實驗動物長春市奮進鄉(xiāng)5頭黃牛，身體健康，檢疫合格。2、 ?？谙巡墒蘸蛢Σ嘏？谙褳榕？苿游稂S?；蛩５耐傧?。 以水洗?？?，從試驗牛的口腔中拉出舌頭，涂抹少放食鹽或生姜， 稍候接取自然流出口腔外的唾涎，用塑料袋收集，鮮用或冷藏。3、 粗酶提取方法制備條件是?？谙衙钢苽錅囟刃∮?(TC， 將收集的?？谙延?0目篩網(wǎng)過濾，去雜質(zhì)，取濾液，在攪拌下加 5mol/LHCl，調(diào)pH值為4一5，加0. 6mol/L ZnCh適量，再用5mol/L NaOH在攪拌下調(diào)pH值為8—9，離心或過濾，棄上清液或濾液，取 沉淀，采用自然風(fēng)干或小于4(TC低溫干燥法(氣流干燥、冷凍干燥)， 水分小于16%，即得?？谙衙复制?。4、蛋白質(zhì)含量測定法采用考馬斯亮藍(lán)法(Bradford法)。5、 唾涎淀粉酶活性的測定按崔福生《醫(yī)學(xué)生化檢測手冊》天津天津科學(xué)技術(shù)出版社，1982， 785—795記載的方法進行唾涎淀 粉,活性的測定。6、 工藝流程驗驗無病的?？谙岩恢苽錀l件是牛口涎溫度小于10°C—用40目 篩網(wǎng)過濾一棄雜質(zhì)一留濾液一在攪拌下加5mol/L HC1，調(diào)pH值為4 一5—加牛口涎體積的三分之一的0.6mol/L ZnCl2—用5mol/L NaOH 在攪拌下調(diào)pH值為8—9—離心或過濾一棄上清液或濾液一取沉淀一 用自然風(fēng)干或小于4(TC低溫干燥法(氣流干燥、冷凍干燥)，水分小 于16%—包裝即得牛口涎酶粗品，4'C冷藏保存。7、 技術(shù)要點(1) ?？谙言向炇赵囼瀯游锉仨毥?jīng)過嚴(yán)格檢驗，來源于非 疫區(qū)、無疾病牛的?？谙?。制備條件是牛口涎溫度小于10'C。(2) 去雜質(zhì)用40目篩網(wǎng)過濾，棄雜質(zhì)，留濾液。(3) 調(diào)酸性在攪拌下加5mol/L HC1，調(diào)pH值為4一5，便于 下面的ZnCl2更好溶解。,(4)中性鹽沉淀加?？谙洋w積的三分之一的0.6mol/L ZnCl2 使牛口涎中的酶和蛋白質(zhì)沉淀。選擇氯化鋅是因為用量少、鹽析作用 強、對粗酶的使用無毒副作用及不良影響。(5)調(diào)堿性用5mol/L Na0H調(diào)pH值8—9是從沉淀和產(chǎn)品含 量考慮。 一方面pH越高越有利于沉淀，另一方面?？谙阎械闹行缘鞍酌冈趐H值7處對?？谙阎懈鞣N酶和蛋白質(zhì)分解越大，還有pH值 太低與太高都不有利于?？谙衙傅姆€(wěn)定。(6) 離心或過濾離心方法是離心機轉(zhuǎn)速大于4000轉(zhuǎn)/分，過 濾方法可采用真空過濾、加壓過濾或常壓過濾，棄上清液或濾液，取 沉淀。(7) 干燥用自然風(fēng)干或小于4(TC低溫干燥法(氣流干燥、冷 凍干燥)，水分小于16%。(8) 包裝放入瓶內(nèi)或塑料袋包裝，也可采用真空包裝，4t冷 藏保存。本發(fā)明產(chǎn)品的特點粉狀、色澤灰白，可溶于水。本發(fā)明的優(yōu)點工藝穩(wěn)定，收率高，適合廣大農(nóng)戶從牛口涎中提 取粗酶制品。
具體實施方式
實施例本發(fā)明牛口涎酶粗品原輔料如下?？谙?l公斤5mol/L HC1 約20ml0. 6mol/L ZnCl2 330ml(約0. 027公斤ZnCl2)5mol/L Na0H 約50ml制作過程制備條件是?？谙褱囟刃∮趌(TC，將收集的?？谙延?0目篩網(wǎng) 過濾，去雜質(zhì)，取濾液，在攪拌下加5mol/L HC1，調(diào)pH值為4一5， 加0. 6mol/L ZnCl2適量，再用5mol/L NaOH在攪拌下i周pH值為8— 9，離心或過濾，棄上清液或濾液，取沉淀，采用自然風(fēng)干或小于 4CTC低溫干燥法(氣流干燥、冷凍干燥)，水分小于16%，即得牛 口涎酶粗品約10克。水分分析法采用烘干法測水分，牛口涎酶粗的水分含量15% 。蛋白質(zhì)含量測定法采用考馬斯亮藍(lán)法(Bradford法)，牛口 涎酶粗的蛋白質(zhì)含量為45%。唾涎淀粉酶活性的測定按崔福生《醫(yī)學(xué)生化檢測手冊》天津 天津科學(xué)技術(shù)出版社，1982， 785—795記載的方法進行唾涎淀粉酶 活性的測定。?？谙衙复值耐傧训矸勖富钚詾?1 IU/g ( IU/g指每 克粗酶樣中唾涎淀粉酶活性為酶的國際單位)。
權(quán)利要求
1、一種?？谙衙复制返闹苽浞椒?，其特征在于它用中性鹽氯化鋅制備牛口涎酶粗品。
2、 如權(quán)利要求l所述的一種?？谙衙复制返闹苽浞椒ǎ涮卣?是制備步驟和條件如下制備條件是?？谙阎苽浯置傅姆磻?yīng)溫度小 于1(TC，將收集的?？谙延?0目篩網(wǎng)過濾，去雜質(zhì)，取濾液，在攪拌下加HCl，調(diào)pH值為4一5，加ZnCl2溶液適量，再用NaOH在攪 拌下調(diào)pH值為8—9，離心或過濾，棄上清液或濾液，取沉淀，采 用自然風(fēng)干或小于40'C低溫干燥法(氣流干燥、冷凍干燥)，水分 小于16%，即得?？谙衙复制贰?br> 全文摘要
本發(fā)明屬于生化試劑酶技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種?？谙衙复制返闹苽浞椒ǎ洚a(chǎn)品便于生化研究和生物制品的應(yīng)用。本發(fā)明通過中性鹽氯化鋅制備?？谙汛置?，其的優(yōu)點是工藝穩(wěn)定，收率高，便于操作，適合廣大基層農(nóng)戶從?？谙阎刑崛〈置浮?br> 文檔編號C12N9/98GK101245341SQ20081005053
公開日2008年8月20日 申請日期2008年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月24日
發(fā)明者麗 焦, 王有為 申請人:焦 麗;王有為