專利名稱：一種培養(yǎng)地木耳的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)，更具體涉及微藻生物的培養(yǎng)。
但由于野生地木耳的資源十分有限，極大地限制了人們對地木耳的食物需求，至今尚未見到地木耳人工養(yǎng)殖的報道。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案將地木耳用70-95％乙醇溶液浸泡20-40秒，在滅菌培養(yǎng)液中洗滌2-3次，放入勻漿器中，加入地木耳重量0.5-3倍的水或者培養(yǎng)液，研磨成漿狀物；然后將漿狀物接種到培養(yǎng)液中，溫度控制在10-40℃，光強(qiáng)控制在10-1800μE·m-2·s-1，每10-20天更換培養(yǎng)液，直至地木耳球形體長到所需的直徑。
上所培養(yǎng)液為磷酸氫二鉀20-60mg/L、硫酸鎂40-80mg/L、氯化鈣20-40mg/L、檸檬酸4-8mg/L、檸檬酸鐵銨5-9mg/L、乙二胺四乙酸二鈉鹽1-2mg/L、碳酸鈉5-30mg/L、微量元素0.5-3ml/L、余者為水。
上所培養(yǎng)液最好為硝酸鈉200-1500mg/L、磷酸氫二鉀20-60mg/L、硫酸鎂40-80mg/L、氯化鈣20-40mg/L、檸檬酸4-8mg/L、檸檬酸鐵銨5-9mg/L、乙二胺四乙酸二鈉鹽1-2mg/L、碳酸鈉5-30mg/L、微量元素0.5-3ml/L、余者為水。
上所的微量元素為每1000毫升含硼酸1.5-3g、氯化錳1-2g、硫酸鋅0.1-0.25g、鎳酸鈉0.2-0.4g、硫酸銅0.02-0.1g、硝酸鈷0.03-0.05g、余者為水。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果設(shè)備簡單、操作方便、無污染，營養(yǎng)好、生長周期短、產(chǎn)量高。10-20天就可完成對數(shù)生長，每立方米培養(yǎng)液每月可收獲直徑為3-7mm的鮮地木耳40kg。適用于城鄉(xiāng)規(guī)模化培養(yǎng)，豐富人們的物質(zhì)生活。
1、培養(yǎng)液配制每升含磷酸氫二鉀20-60mg、硫酸鎂40-80mg、氯化鈣20-40mg、檸檬酸4-8mg、檸檬酸鐵銨5-9mg、乙二胺四乙酸二鈉鹽1-2mg、碳酸鈉5-30mg、微量元素0.5-3ml、余者為水；也可在上述培養(yǎng)液中加入硝酸鈉200-1500mg/L。
其中微量元素為每1000毫升含硼酸1.5-3g、氯化錳1-2g、硫酸鋅0.1-0.25g、鎳酸鈉0.2-0.4g、硫酸銅0.02-0.1g、硝酸鈷0.03-0.05g、余者為水。
配制好的培養(yǎng)液最好能在118-122℃高溫條件下滅菌20分鐘，冷卻后使用，也可采用過濾除菌。
2、藻種制備將地木耳用70％-95％的乙醇溶液洗滌20-40秒，然后在滅過菌的培養(yǎng)液中洗滌2-3遍，放在勻漿器中，加入地木耳重量0.5-3倍的水或者培養(yǎng)液，研磨成漿狀物。最好能將地木耳漿狀物勻漿液涂布在0.8-1.5％的無菌瓊脂板上，用封口膜將培養(yǎng)皿封好，置于溫度為20-30℃、光強(qiáng)為10-100μE·m-2·s-1光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，10-20天后，就可看到有小的微球形體生長在瓊脂平板上，在瓊脂平板上劃線分離2-4次，可獲得較純的地木耳藻種；3、擴(kuò)大培養(yǎng)將上述藻種接種于培養(yǎng)液，在培養(yǎng)容器中通氣培養(yǎng)；在液體中培養(yǎng)時，通氣量為1-10L/min，溫度為10-40℃，光強(qiáng)為10-1800μE·m-2·s-1。每10-20天更換一次培養(yǎng)液，至地木耳球形體直徑長到0.5-2mm；4、培養(yǎng)接種與培養(yǎng)將直徑0.5-2mm的地木耳球形體接種到培養(yǎng)液中，以每升培養(yǎng)液10-100g鮮藻的比例接種為佳；將培養(yǎng)條件控制在溫度10-40℃，光強(qiáng)10-1800μE·m-2·s-1；每10-20天更換一次培養(yǎng)液，至地木耳球形體長到所需的直徑。
權(quán)利要求
1.一種培養(yǎng)地木耳的方法，其特征在于，該方法是將地木耳用70-95％乙醇溶液浸泡20-40秒，在滅菌培養(yǎng)液中洗滌2-3次，放入勻漿器中，加入地木耳重量0.5-3倍的水或者培養(yǎng)液，研磨成漿狀物；然后將漿狀物接種到培養(yǎng)液中，溫度控制在10-40℃，光強(qiáng)控制在10-1800μE·m-2·s-1，每10-20天更換培養(yǎng)液，直至地木耳球形體長到所需的直徑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種培養(yǎng)地木耳的方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)液為磷酸氫二鉀20-60mg/L、硫酸鎂40-80mg/L、氯化鈣20-40mg/L、檸檬酸4-8mg/L、檸檬酸鐵銨5-9mg/L、乙二胺四乙酸二鈉鹽1-2mg/L、碳酸鈉5-30mg/L、微量元素0.5-3ml/L、余者為水。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種培養(yǎng)地木耳的方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)液為硝酸鈉200-1500mg/L、磷酸氫二鉀20-60mg/L、硫酸鎂40-80mg/L、氯化鈣20-40mg/L、檸檬酸4-8mg/L、檸檬酸鐵銨5-9mg/L、乙二胺四乙酸二鈉鹽1-2mg/L、碳酸鈉5-30mg/L、微量元素0.5-3ml/L、余者為水。
4.根據(jù)權(quán)利要求2、3所述的一種培養(yǎng)地木耳的方法，其特征在于，所述的微量元素為每1000毫升含硼酸1.5-3g、氯化錳1-2g、硫酸鋅0.1-0.25g、鎳酸鈉0.2-0.4g、硫酸銅0.02-0.1g、硝酸鈷0.03-0.05g、余者為水。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種培養(yǎng)地木耳的方法，該方法將地木耳用乙醇溶液浸泡，在滅菌培養(yǎng)液中洗滌，放入勻漿器中，研磨成漿狀物，然后接種到培養(yǎng)液中，溫度控制在10－40℃，光強(qiáng)控制在10－1800μE·m
文檔編號C12N1/12GK1450161SQ0311909
公開日2003年10月22日 申請日期2003年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月19日
發(fā)明者鄧中洋, 胡征宇, 劉國祥, 閻春蘭, 李運(yùn)廣, 韓丹翔, 畢永紅, 趙先富, 徐敏 申請人:中國科學(xué)院水生生物研究所