專(zhuān)利名稱(chēng)：微生物易感性的快速測(cè)定的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種快速測(cè)定微生物對(duì)各種物質(zhì)易感性的方法。
自1920年以來(lái)，已有多種方法被提出用于檢查微生物對(duì)諸如抗微生物素/抗生素等物質(zhì)的易感性。但是，只有兩種方法被廣泛接受而成為臨床實(shí)踐的標(biāo)準(zhǔn)方法。這兩種方法是稀釋易感性試驗(yàn)和紙片擴(kuò)散試驗(yàn)(見(jiàn)L.M. Prescott等編著1996年Wm.C.Brown出版社在美國(guó)波斯頓出版的《微生物學(xué)》第三版660-662頁(yè))。
在稀釋易感性試驗(yàn)中，標(biāo)準(zhǔn)數(shù)目的待測(cè)微生物被接種于含有一系列濃度抗微生物素/抗生素的肉湯培養(yǎng)管中，然后檢查這些被接種管的微生物群體生長(zhǎng)狀態(tài)。在所有不顯示微生物生長(zhǎng)的管子中，抗微生物素/抗生素濃度最低的那一管即代表最小抑制濃度。微生物生長(zhǎng)狀況是通過(guò)測(cè)定培養(yǎng)物的混濁度而確定。這種測(cè)定通常需要16到20小時(shí)方可顯示有顯著意義的變化。
在紙片擴(kuò)散法中，待測(cè)微生物被接種于瓊脂平板上，然后在其上放置一個(gè)含有抗微生物素/抗生素的圓紙片。抗微生物素/抗生素的擴(kuò)散形成一個(gè)抗微生物素/抗生素的濃度梯度最高濃度位于紙片中，最低濃度位于擴(kuò)散的前緣。在含有有效抗微生物素/抗生素的地方，微生物不能生長(zhǎng)而顯示出一個(gè)環(huán)繞紙片的透明圈。在此圈之外，由于抗微生物素/抗生素濃度低于最小抑制濃度，微生物生長(zhǎng)而形成菌苔。由于形成肉眼可見(jiàn)的菌苔需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間，微生物的易感性通常在培養(yǎng)16-18小時(shí)后才可報(bào)告。
在紙片擴(kuò)散法中，位于透明圈邊緣的抗微生物素/抗生素濃度不是由紙片擴(kuò)散法本身得出，而是需要另外進(jìn)行稀釋易感性試驗(yàn)，以得出透明圈與最小抑制濃度關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和表格，然后查圖或查表得出該濃度。由于透明圈大小受抗微生物素/抗生素的最初濃度、溶解性和擴(kuò)散速度、以及瓊脂平板的狀況等因素影響，如要準(zhǔn)確地從紙片擴(kuò)散法估計(jì)最小抑制濃度，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)或標(biāo)準(zhǔn)表格應(yīng)以同批抗微生物素/抗生素紙片和同批瓊脂平板為基準(zhǔn)。因此，盡管紙片擴(kuò)散法比稀釋易感性試驗(yàn)容易實(shí)施，但它卻依賴(lài)于后一方法才能獲得完整的結(jié)果。
所有常規(guī)的微生物易感性試驗(yàn)都要求將樣本在瓊脂平板上進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)以觀察微生物生長(zhǎng)和鑒定微生物，然后進(jìn)行次級(jí)培養(yǎng)富集微生物群體以獲得足夠的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)目的微生物用于接種稀釋易感性實(shí)驗(yàn)的肉湯管或紙片擴(kuò)散試驗(yàn)的瓊脂平板。加上這些準(zhǔn)備工作所需的時(shí)間，完整的微生物易感性測(cè)定通常要兩到三天才能完成。常規(guī)微生物易感性測(cè)定法使用陪氏培養(yǎng)皿和試管進(jìn)行培養(yǎng)。因此，需用大量的培養(yǎng)基和大量的待測(cè)物質(zhì)。另外，培養(yǎng)和貯存這些器件也要較大的儀器和空間。
近來(lái)，一些改良的方法已被提出用于微生物易感性的快速測(cè)定。例如美國(guó)專(zhuān)利5789173號(hào)，微生物易感性快速測(cè)定方法。
美國(guó)專(zhuān)利5770373號(hào)，用針對(duì)核糖體RNA前體的寡核甘酸探針對(duì)耐藥性分枝桿菌進(jìn)行快速和敏感的檢測(cè)。
美國(guó)專(zhuān)利5738989號(hào)，使用核糖體核酸雜交測(cè)定微生物對(duì)抗微生物物質(zhì)的敏感性。
美國(guó)專(zhuān)利5738988號(hào)，用核糖體探針雜交檢查樣本中未知的微生物和抗微生物的物質(zhì)。
美國(guó)專(zhuān)利5712095號(hào)，使用針對(duì)核糖體RNA前體的寡核甘酸探針對(duì)有耐藥性的分枝桿菌進(jìn)行快速和敏感的檢測(cè)。
美國(guó)專(zhuān)利5948633號(hào)，測(cè)定化合物對(duì)連續(xù)培養(yǎng)之微生物的作用。
美國(guó)專(zhuān)利5789173號(hào)所述的快速微生物易感性試驗(yàn)依賴(lài)于對(duì)短期培養(yǎng)的樣本進(jìn)行DNA放大以達(dá)到早期判定抗生素效率的目的。該法不需要對(duì)樣本進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)。通過(guò)對(duì)放大后的DNA的進(jìn)行檢測(cè)而不是對(duì)肉湯管混濁度或平板抑菌圈的進(jìn)行檢測(cè)，此法縮短了報(bào)告最小抑制濃度(MIC)所需的時(shí)間。據(jù)稱(chēng)此法全過(guò)程可短至12小時(shí)。
美國(guó)專(zhuān)利5770373號(hào)描述一種專(zhuān)門(mén)用于檢測(cè)耐藥性分枝桿菌的快速和敏感的方法。通過(guò)使用特別設(shè)計(jì)的能與分枝桿菌核糖體RNA前體(pre-RNA)結(jié)合的寡核甘酸探針，此法可檢查出分枝桿菌的存在與生長(zhǎng)狀況。關(guān)于分枝桿菌Pre-RNA的檢查已于早期的一項(xiàng)發(fā)明(美國(guó)專(zhuān)利5712095)中介紹。
美國(guó)專(zhuān)利5738989號(hào)描述一種使用核糖體核酸雜交法確定微生物對(duì)抗微生物物質(zhì)的敏感性測(cè)定的方法，該法需要制備僅對(duì)某些選定的微生物的核糖體核酸菜一特別亞基的序列能結(jié)合的探針。
美國(guó)專(zhuān)利5948633號(hào)描述一種檢測(cè)化合物對(duì)連續(xù)培養(yǎng)的微生物的作用的方法。在該法中，營(yíng)養(yǎng)和測(cè)試化合物被分別以控制的流速加入生長(zhǎng)室內(nèi)，使得測(cè)試化合物的濃度逐漸增高。測(cè)試化合物對(duì)待測(cè)微生物的作用通過(guò)對(duì)流出生長(zhǎng)室(恒化器)的細(xì)胞密度的測(cè)定而得知。當(dāng)微生物細(xì)胞密度不增加時(shí)，化合物的濃度即為對(duì)該待測(cè)微生物的最小抑制濃度。
標(biāo)準(zhǔn)的微生物易感性測(cè)定方法消耗時(shí)間、人力和材料。已有的改良方法雖然克服了標(biāo)準(zhǔn)方法的一些缺點(diǎn)，但仍有這樣或那樣的缺陷。
美國(guó)專(zhuān)利5789173號(hào)所述之方法需要額外的復(fù)雜步驟以多聚酶鏈反應(yīng)放大DNA、用特別報(bào)告分子標(biāo)記DNA、定量測(cè)定所標(biāo)記的報(bào)告分子。該法需要額外的儀器，如熱循環(huán)機(jī)和瑩光計(jì)。該法還要對(duì)所測(cè)定的微生物的DNA有一定的知識(shí)以設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)囊镉糜贒NA放大反應(yīng)。
美國(guó)專(zhuān)利5770373號(hào)(連同美國(guó)專(zhuān)利5712095號(hào))和美國(guó)專(zhuān)利5738989號(hào)均要求特別設(shè)計(jì)的探針和對(duì)應(yīng)的檢測(cè)探針的儀器。這些方法由于探針的特異性不同而僅適合某一選定范圍的微生物。如果放射性同位素被用于標(biāo)記探針，還需要有特別的儀器、執(zhí)照和安全培訓(xùn)。
美國(guó)專(zhuān)利5948633號(hào)所描述的微生物易感性檢測(cè)法能在單一試驗(yàn)中高準(zhǔn)確度地測(cè)定某一化合物對(duì)微生物的最小抑制濃度。但是為了在同一試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)這一最小抑制濃度，微生物的群體密度必須在增加測(cè)試化合物濃度的不同時(shí)間多次測(cè)定。這意味著每個(gè)連續(xù)培養(yǎng)微生物易感性實(shí)驗(yàn)必須運(yùn)行較長(zhǎng)時(shí)間。該法需要特別的培養(yǎng)裝置和大量的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基和待測(cè)化合物。最終該法對(duì)培養(yǎng)物細(xì)胞密度的測(cè)定仍舊依賴(lài)于常規(guī)方法如顯微鏡計(jì)數(shù)，電子顆粒計(jì)數(shù)，和流動(dòng)細(xì)胞儀。
因此，盡管已有很多努力花在發(fā)明其它方法以測(cè)定微生物易感性，沒(méi)有任何新的發(fā)明在臨床實(shí)驗(yàn)室獲得接受。常規(guī)的微生物易感性測(cè)試法仍為日常實(shí)踐所用的標(biāo)準(zhǔn)方法。
本發(fā)明的目的是克服上述常規(guī)方法和改良方法的不足而創(chuàng)造一種快速、敏感、特異、簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、易行的微生物易感性測(cè)定法。
本發(fā)明的目的是通過(guò)如下措施來(lái)達(dá)到(a)使用粘稠液體培養(yǎng)基進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。粘稠液體培養(yǎng)基的使用使接種微生物、加培養(yǎng)基成份、和加待測(cè)物質(zhì)更為方便。也更有利于營(yíng)養(yǎng)成份、測(cè)試物質(zhì)和微生物之間的混合。更重要的是，它使得來(lái)自同一祖先微生物的后代可以呆在一起而形成菌落。
(b)在菌落形成的早期，即微菌落期，就進(jìn)行微生物對(duì)待測(cè)物質(zhì)易感性的觀察。微菌落是指僅含數(shù)個(gè)細(xì)胞而只有通過(guò)顯微鏡才可見(jiàn)到的菌落，而不是通常所指的肉眼可見(jiàn)的大菌落。從理論上講，能被肉眼看見(jiàn)的大菌落需含上百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。而由一個(gè)單細(xì)胞繁殖成上百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞需要進(jìn)行即少十幾個(gè)生殖周期長(zhǎng)時(shí)間的培養(yǎng)。與此相比，證實(shí)微菌落的形成只需一兩個(gè)生殖周期的培養(yǎng)就可見(jiàn)分曉。與常規(guī)方法和其它改良方法相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)(a)極大地縮短報(bào)告微生物易感性所需要的時(shí)間。
(b)可排除對(duì)預(yù)培養(yǎng)的依賴(lài)。
(c)允許對(duì)含有未知混合微生物的樣本進(jìn)行易感性測(cè)試。
(d)允許使用不同的微生物接種濃度。
(e)減少營(yíng)養(yǎng)物耗竭和產(chǎn)物抑制對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。
(f)允許快速處理大批標(biāo)本與眾多待測(cè)物質(zhì)。
(g)給予高度敏感和特異的測(cè)試結(jié)果。
(h)提供與原位微生物濃度有關(guān)的最小抑制濃度。
(i)極大地減少微生物易感性試驗(yàn)的材料費(fèi)用。
(j)節(jié)省大量的培養(yǎng)和貯存空間。
(k)使用常規(guī)操作過(guò)程和大多實(shí)驗(yàn)室都有的普通儀器。
(l)可實(shí)現(xiàn)不同程度的自動(dòng)化。
(m)便于與其它實(shí)驗(yàn)相結(jié)合。
(n)便于現(xiàn)場(chǎng)接種。
(o)便于在轉(zhuǎn)送已種培養(yǎng)的過(guò)程中進(jìn)行培養(yǎng)。
(p)便于歸類(lèi)和典藏測(cè)試材料。
(q)減少實(shí)驗(yàn)室人員對(duì)待測(cè)微生物的接觸。
(r)減少待測(cè)物質(zhì)如抗微生物素/抗生素釋放于環(huán)境之中。
以上優(yōu)點(diǎn)將結(jié)合以下的實(shí)施過(guò)程進(jìn)一步闡述。
本發(fā)明的具體實(shí)施可通過(guò)以下步驟進(jìn)行(a)加一定組成成份的粘稠液體培養(yǎng)基到空的培養(yǎng)器皿中，(b)加一定濃度的待測(cè)物質(zhì)如抗微生物素/抗生素到已裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿中并混合好，(c)接種懷疑含有微生物的標(biāo)本，(d)在適當(dāng)條件下培養(yǎng)已接種的培養(yǎng)物，(e)在適當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間檢查培養(yǎng)物的細(xì)胞密度和細(xì)胞聚集形式，
(f)通過(guò)細(xì)胞數(shù)增減和微菌落形成的情況來(lái)確定微生物對(duì)所測(cè)物質(zhì)的易感性。
粘稠液體培養(yǎng)基的制備可通過(guò)加入一種粘稠物質(zhì)如聚乙烯比咯烷酮、甲基纖維糖、明膠于培養(yǎng)基中。加入粘稠物質(zhì)的時(shí)間可在加入待測(cè)物質(zhì)到培養(yǎng)基之前或之后。
使用粘稠液體培養(yǎng)基進(jìn)行易感性試驗(yàn)克服了肉湯培養(yǎng)和平板培養(yǎng)兩者的短處而保留了各自的長(zhǎng)處。與固體培養(yǎng)基相比，粘稠液體培養(yǎng)基使得營(yíng)養(yǎng)成份與待測(cè)物質(zhì)可以充分混勻。它也使得接種待測(cè)標(biāo)本微生物更為容易并形成均勻的微生物群體的初始分布。這將極大地減小由于濃度差別對(duì)微生物生長(zhǎng)所造成的影響和由于抽樣誤差而造成的微生物計(jì)數(shù)方面的偏差。因此它將增加易感性試驗(yàn)的準(zhǔn)確性和精確度。微生物群體在常規(guī)的液體培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)的結(jié)果是形成更多單細(xì)胞的混懸液。與此相比，粘稠液體培養(yǎng)基允許從祖先細(xì)胞形成微菌落，檢測(cè)微菌落與檢查肉湯培養(yǎng)物混濁度相比更為簡(jiǎn)單，它可在不采取培養(yǎng)物的情況下進(jìn)行原位檢查。同時(shí)，這種檢查也更為敏感和準(zhǔn)確。因?yàn)槲⒕淇稍谶M(jìn)行一或兩次生殖周期時(shí)就可檢測(cè)到，而且微菌落的形成一定表明微生物群體的生長(zhǎng)。
使用粘稠液體培養(yǎng)基進(jìn)行易感性試驗(yàn)便利于各種類(lèi)型的標(biāo)本的接種。如果接種液態(tài)的標(biāo)本，可用一注射器抽取標(biāo)本并準(zhǔn)確地將一定量的標(biāo)本注入每一個(gè)培養(yǎng)器皿內(nèi)。接種后應(yīng)用一無(wú)菌的接種針或接種環(huán)將培養(yǎng)物混勻。如要接種固態(tài)標(biāo)本，先應(yīng)將標(biāo)本打碎至能被培養(yǎng)器皿容納的大小，并應(yīng)當(dāng)充分的混勻以正確表現(xiàn)微生物在原始標(biāo)本的濃度分布。
使用粘稠液體培養(yǎng)基進(jìn)行易感性試驗(yàn)便利于與各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)檢查相結(jié)合。這是因?yàn)橥后w培養(yǎng)基中添加物質(zhì)較向固體培養(yǎng)基中添加物質(zhì)更為容易且混合更為均勻。本發(fā)明可與多種微生物鑒定反應(yīng)相結(jié)合而達(dá)到微生物易感性和分類(lèi)鑒定在同一實(shí)驗(yàn)完成的目的。
液體化的粘稠培養(yǎng)基可以很方便地大批量生產(chǎn)。待測(cè)物質(zhì)也可在所需要的時(shí)候加入培養(yǎng)中。這些優(yōu)越性可使進(jìn)行微生物易感性試驗(yàn)的人員從繁鎖的手工制備培養(yǎng)基中解放出來(lái)，并縮短完成試驗(yàn)的總時(shí)間。使用同一質(zhì)量的培養(yǎng)基和待測(cè)物質(zhì)也將減少實(shí)驗(yàn)室之間和實(shí)驗(yàn)員之間在實(shí)驗(yàn)操作上的差異，從而使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具可比性。
常規(guī)的微生物易感性實(shí)驗(yàn)通常需要預(yù)培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)物作為接種物。對(duì)標(biāo)本中所含微生物的易感性試驗(yàn)的結(jié)果需與純培養(yǎng)物的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相比較而判定。本發(fā)明能對(duì)原始標(biāo)本中所存在的微生物直接進(jìn)行檢查。不管該微生物的種類(lèi)如何，通過(guò)記錄細(xì)胞和細(xì)胞聚集形式的圖像的變化而判定其對(duì)待測(cè)物質(zhì)的易感性。因此，本發(fā)明具有高度的效率，能檢查標(biāo)本中所含的所有的可疑病原菌對(duì)抗微生物素/抗生素的敏感性。事實(shí)上，所記錄的微生物的形態(tài)信息也許能對(duì)微生物的鑒定提供初步的邦助。
常規(guī)的微生物易感性實(shí)驗(yàn)需要高濃度標(biāo)準(zhǔn)化的接種物，以在平板上形成菌苔或在肉湯中形成較高的混濁度以獲可靠而一致的檢查。本發(fā)明所具有的高敏感度和高分辮率使得對(duì)易感性的檢查可在微生物在標(biāo)本中的原始濃度下進(jìn)行。
由于早期觀察微生物菌落生長(zhǎng)可在微觀范圍內(nèi)進(jìn)行，本發(fā)明將極大量地減少對(duì)微生物標(biāo)本、微生物培養(yǎng)基和待測(cè)物質(zhì)的需要量。由于本發(fā)明可使用比常規(guī)方法小得多的器皿進(jìn)行培養(yǎng)和觀察，本發(fā)明也極大程度地減少了器皿材料方面的消耗和對(duì)培養(yǎng)與貯存空間及儀器設(shè)備的需求。
微型化的微生物易感性試驗(yàn)便于將培養(yǎng)基和待測(cè)物質(zhì)制成預(yù)裝好的密封套合。這種套合完全可以攜帶至各種現(xiàn)場(chǎng)如醫(yī)生辦公室、外科手術(shù)室、或其它邊遠(yuǎn)少醫(yī)的地方進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)接種。這種套合可以做得如此之小，以至于在接種后放進(jìn)便攜式培養(yǎng)箱就可在從現(xiàn)場(chǎng)送至檢驗(yàn)室的途中進(jìn)行培養(yǎng)。這些額外的好處將使完成易感性實(shí)驗(yàn)的時(shí)間更為縮短。
微型化的微生物易感性試驗(yàn)將極大量地減少微生物、待測(cè)物質(zhì)和其它廢物及有害物的排放。這一方面有利于環(huán)境的保護(hù)，一方面也減少處理垃圾廢物的開(kāi)支。如待測(cè)物質(zhì)為抗菌素，減少其向環(huán)境的排放也有利于緩解日益嚴(yán)重的微生物耐藥性擴(kuò)散。如待測(cè)微生物為有害的病原微生物，試驗(yàn)的微型化和密封化將有效地減少操作人員的感染機(jī)會(huì)。
對(duì)培養(yǎng)物中細(xì)胞的密度和細(xì)胞聚集的形式的檢查，可用各種形式的光學(xué)顯微技術(shù)。可將關(guān)閉好的培養(yǎng)裝置放在顯微鏡的載物臺(tái)上，光線(xiàn)穿過(guò)培養(yǎng)井，在不同的聚焦平面獲得培養(yǎng)井內(nèi)容的圖像。為了顯微圖象檢查的正確性，應(yīng)當(dāng)檢查培養(yǎng)物多個(gè)不同的地區(qū)，這樣細(xì)胞密度和微菌落的數(shù)目的平均數(shù)會(huì)更接近其在培養(yǎng)物內(nèi)的真實(shí)數(shù)目。
顯微圖象可呈現(xiàn)在顯微鏡的目鏡、與顯微鏡相聯(lián)的電視屏幕或計(jì)算機(jī)屏幕上。顯微圖象的記錄可是不同的信息載體如光感膠片、磁帶、磁盤(pán)或光盤(pán)。對(duì)顯微圖象的識(shí)別和判斷，可以人工進(jìn)行也可以自動(dòng)進(jìn)行。這種識(shí)別和判斷可以在實(shí)驗(yàn)觀察的同時(shí)進(jìn)行，可以在實(shí)驗(yàn)觀察之后通過(guò)檢查記錄的圖象進(jìn)行。這種識(shí)別和判斷可以在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行，可以在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)觀察現(xiàn)場(chǎng)的方根據(jù)互聯(lián)網(wǎng)獲得的圖象信息進(jìn)行。這種對(duì)已存圖象的離開(kāi)顯微鏡的檢查賦予檢查人員充分的自由以合理安排工作日程。同時(shí)，由于檢查可重復(fù)進(jìn)行，甚至可由不同檢查人員相互校對(duì)，檢查的客觀性和準(zhǔn)確度將增加。使用具有人工智能的計(jì)算機(jī)軟件可對(duì)細(xì)胞數(shù)目自動(dòng)計(jì)算和報(bào)告培養(yǎng)物中細(xì)胞的聚集形式。使用這樣的圖像分析軟件將極大地降低本發(fā)明的人工消耗而使本發(fā)明更有效和容易實(shí)行。
權(quán)利要求
1.一種快速測(cè)定微生物易感性的方法，包括(a)在含有一種特定成份的粘稠液體培養(yǎng)基的限定空間內(nèi)培養(yǎng)微生物，(b)測(cè)定培養(yǎng)物內(nèi)微生物的細(xì)胞數(shù)目和聚集形式，(c)根據(jù)微生物細(xì)胞數(shù)目和聚集形式的變化判斷微生物對(duì)待測(cè)物質(zhì)的易感性。
2.權(quán)力要求1所指粘稠液體培養(yǎng)基的基本特征在于能有效地限制微生物運(yùn)動(dòng)包括被動(dòng)的布朗運(yùn)動(dòng)和主動(dòng)的游動(dòng)。
3.權(quán)力要求1所指粘稠液體培養(yǎng)基可通過(guò)加入粘稠物質(zhì)制成，這些粘稠物質(zhì)包括但不限于聚乙烯毗咯烷酮、甲基纖維糖和明膠。
4.權(quán)力要求1所指特定成份培養(yǎng)基包含支持待測(cè)微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成份和生長(zhǎng)條件。
5.權(quán)力要求1所指特定成份培養(yǎng)基包含特定濃度的某一需測(cè)定微生物對(duì)其易感性的物質(zhì)。
6.權(quán)力要求5所指待測(cè)物質(zhì)特定濃度包括零濃度作為空白對(duì)照。
7.權(quán)力要求1所述測(cè)定微生物細(xì)胞數(shù)目和聚集形式的手段包括但不限于顯微鏡圖象檢查。
8.權(quán)力要求7所述顯微鏡圖象檢查包括但不限于檢查呈現(xiàn)在顯微鏡接目鏡的圖象，檢查呈現(xiàn)在與顯微鏡相連的電視或計(jì)算機(jī)監(jiān)視器上的圖象，以及檢查記錄在各種信息載體如照像膠片或電影膠片、錄像帶、光盤(pán)和計(jì)算機(jī)硬盤(pán)與軟盤(pán)上的圖象。
9.權(quán)力要求1所述對(duì)微生物對(duì)待測(cè)物質(zhì)易感性的判斷的手段包括但不限于以下所列方式人工識(shí)別判斷和機(jī)器識(shí)別判斷。
10.權(quán)力要求9所述的機(jī)器識(shí)別判斷包括使用電子計(jì)算機(jī)圖象識(shí)別分析軟件。
全文摘要
本發(fā)明闡述一種用于微生物易感性快速測(cè)定的方法。待測(cè)微生物被接種于含有某一濃度待測(cè)物質(zhì)的粘稠液體培養(yǎng)基中。在培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)對(duì)細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞聚集形式進(jìn)行檢查。如果細(xì)胞數(shù)目增加和有微菌落形成,表示微生物群體增長(zhǎng)和對(duì)待測(cè)物質(zhì)如抗微生物素/抗生素不敏感。待測(cè)物質(zhì)的最小抑制濃度表現(xiàn)為無(wú)細(xì)胞數(shù)目的增加和無(wú)微菌落的形成。
文檔編號(hào)C12Q1/04GK1333374SQ0110328
公開(kāi)日2002年1月30日 申請(qǐng)日期2001年1月20日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月20日
發(fā)明者劉實(shí) 申請(qǐng)人:劉勝, 劉實(shí)