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賦予細(xì)胞質(zhì)雄性不育的制作方法

文檔序號:40461271發(fā)布日期:2024-12-27 09:26閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種用于賦予植物品系細(xì)胞質(zhì)雄性不育(cms)的方法,所述方法包括

2.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述cms細(xì)胞質(zhì)選自由以下組成的組:cms-c、cms-s和cms-t。

3.如權(quán)利要求2所述的方法,其中所述cms細(xì)胞質(zhì)是cms-c。

4.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述chip是雌性可育的和cms雄性可育的。

5.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述chip是雌性可育的和cms雄性不育的。

6.如權(quán)利要求4所述的方法,其中所述chip是父本單倍體誘導(dǎo)系。

7.如權(quán)利要求6所述的方法,其中所述chip包含cenh3突變。

8.如權(quán)利要求7所述的方法,其中所述cenh3突變是敲除突變。

9.如權(quán)利要求8所述的方法,其中所述cenh3敲除突變是通過基因編輯獲得的。

10.如權(quán)利要求9所述的方法,其中所述cenh3敲除突變包括seq?id?no:5或seq?id?no:6。

11.如權(quán)利要求10所述的方法,其中所述cenh3敲除突變是雜合的。

12.如權(quán)利要求11所述的方法,其中使用crispr-cas12a編輯所述cenh3敲除突變。

13.如權(quán)利要求12所述的方法,其中所述crispr-cas12a選自由以下組成的組:ascas12a、lbcas12a和fncas12a、mbcas12a、mb2cas12a等。

14.如權(quán)利要求13所述的方法,其中所述crispr-cas12a是lbcas12a。

15.如權(quán)利要求7所述的方法,其中所述chip進(jìn)一步包含花色素苷標(biāo)記。

16.如權(quán)利要求15所述的方法,其中所述花色素苷標(biāo)記選自由r1-navajo和r1-scm2組成的組。

17.如權(quán)利要求16所述的方法,其中所述花色素苷標(biāo)記是r1-navajo。

18.如權(quán)利要求16所述的方法,其中所述花色素苷標(biāo)記是r1-scm2。

19.如權(quán)利要求16所述的方法,其中所述花色素苷標(biāo)記是純合的。

20.如權(quán)利要求7所述的方法,其中所述chip進(jìn)一步包含恢復(fù)系等位基因。

21.如權(quán)利要求20所述的方法,其中所述恢復(fù)系等位基因選自由以下組成的組:rf3、rf4、rf10、rf11和rf12。

22.如權(quán)利要求5所述的方法,其中所述chip包含非恢復(fù)系等位基因,其中所述非恢復(fù)系等位基因選自由以下組成的組:rf3、rf4、rf10、rf11和rf12。

23.如權(quán)利要求21所述的方法,其中所述恢復(fù)系等位基因是rf4。

24.如權(quán)利要求22所述的方法,其中所述非恢復(fù)系等位基因是rf4。

25.如權(quán)利要求23所述的方法,其中所述恢復(fù)系等位基因是純合的。

26.如權(quán)利要求24所述的方法,其中所述非恢復(fù)系等位基因是純合的。

27.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述chip包含cenh3突變、r1-navajo標(biāo)記、以及恢復(fù)系因子4基因的恢復(fù)系等位基因。

28.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述chip包含cenh3突變、r1-scm2標(biāo)記、以及恢復(fù)系因子4基因的恢復(fù)系等位基因。

29.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述chip包含cenh3突變、r1-navajo標(biāo)記、以及恢復(fù)系因子4基因的非恢復(fù)系等位基因。

30.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述chip包含cenh3突變、r1-scm2標(biāo)記、以及恢復(fù)系因子4基因的非恢復(fù)系等位基因。

31.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述chip選自由以下組成的組:玉米、小麥、水稻、向日葵、番茄、大麥、蕓苔屬植物、黃瓜和西瓜。

32.如權(quán)利要求31所述的方法,其中所述chip是玉米。

33.如權(quán)利要求1所述的方法,其中在步驟c的雜交中,所述dip是花粉供體。

34.如權(quán)利要求1所述的dip,其中所述dip關(guān)于非恢復(fù)系等位基因為純合的或雜合的。

35.如權(quán)利要求34所述的dip,其中所述dip關(guān)于非恢復(fù)系等位基因為純合的。

36.如權(quán)利要求35所述的恢復(fù)系因子,其中所述非恢復(fù)系等位基因選自由以下組成的組:rf3、rf4、rf10、rf11和rf12。

37.如權(quán)利要求36所述的恢復(fù)系因子,其中所述非恢復(fù)系等位基因是rf4。

38.如權(quán)利要求1所述的方法,其中所述dip選自由以下組成的組:玉米、小麥、水稻、和向日葵、番茄、大麥、蕓苔屬植物、黃瓜以及西瓜。

39.如權(quán)利要求38所述的方法,其中所述dip是玉米。

40.一種通過如權(quán)利要求1所述的方法產(chǎn)生的植物,其中所述植物是cms單倍體植物。

41.如權(quán)利要求40所述的cms單倍體植物,其中所述cms單倍體植物包含所述chip的cms細(xì)胞質(zhì)和所述dip的核基因組。

42.如權(quán)利要求41所述的cms單倍體植物,其中所述cms單倍體植物缺乏花色素苷標(biāo)記、恢復(fù)系等位基因和cenh3敲除突變。

43.如權(quán)利要求42所述的cms單倍體植物,其中用加倍劑處理所述cms單倍體植物。

44.如權(quán)利要求43所述的加倍劑,其中所述加倍劑選自由以下組成的組:秋水仙堿、拿草特、氟硫草定、氟樂靈、一氧化二氮、或另一種已知的抗微管劑。

45.如權(quán)利要求44所述的加倍劑,其中所述加倍劑是秋水仙堿。

46.如權(quán)利要求42所述的cms單倍體植物,其中用來自所述dip的花粉對所述cms單倍體植物授粉。

47.如權(quán)利要求42所述的cms單倍體植物,其中用保存的花粉對所述cms單倍體植物授粉。

48.如權(quán)利要求40所述的cms單倍體植物,其中通過基因分型或其他分子分析來確認(rèn)所述cms單倍體植物。


技術(shù)總結(jié)
本文提供了用于賦予植物品系細(xì)胞質(zhì)雄性不育(CMS)的方法。這些方法包括獲得包含CMS細(xì)胞質(zhì)的第一植物,該CMS細(xì)胞質(zhì)也是單倍體誘導(dǎo)系(CHIP),并且將該第一植物與包含希望的核基因組(DIP)的第二植物雜交。該CHIP還包含cenh3突變,并且可含有花色素苷標(biāo)記和恢復(fù)系因子。該方法進(jìn)一步包括由所述雜交生成子代。由該方法的雜交產(chǎn)生的子代是單倍體,并且包含該CHIP的CMS細(xì)胞質(zhì)以及該DIP的希望的核基因組。該子代進(jìn)一步缺乏任何花色素苷標(biāo)記或恢復(fù)系因子。

技術(shù)研發(fā)人員:E·波蒂里,T·凱利赫
受保護(hù)的技術(shù)使用者:先正達(dá)農(nóng)作物保護(hù)股份公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2024/12/26
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