本發(fā)明屬于植物栽培技術領域，具體涉及牛大力種子直接誘導從芽并快速繁育種苗的方法。
背景技術：
牛大力為崖豆藤屬美麗崖豆藤的塊根，具有舒筋活絡，清熱止咳，潤肺滋腎等功效，分布在廣西、廣東、海南、臺灣、貴州和東南亞，是一種具有良好保健功效的藥食兩用植物。近年來，由于以牛大力為主要原料生產(chǎn)的壯腰健腎丸、強力健身膠囊等多種中成藥，在市場上銷量不斷增加，導致對其原料的需求量也急劇增加，野生牛大力藥材成瀕危品種，人工種植牛大力成為必然趨勢。目前，牛大力種植面積約3萬畝，按每畝種600株苗計，需要1800萬株幼苗。由于牛大力的花期和果期均較長，同批采收的種子成熟度不一致，導致牛大力種子發(fā)芽極不整齊，有一個月內(nèi)發(fā)芽的，也有半年后發(fā)芽的，且發(fā)芽率較低，平均在42.5-61.25％之間。
與牛大力組培苗和扦插苗相比，用牛大力種植繁殖的種苗，生長快速、種植頭一年直徑已有手指大，即形成膨大的主塊根(薯塊)，種子繁殖苗人工種植牛大力的最佳選擇。但目前市面上牛大力種子育苗都是小規(guī)模進行，加上種子發(fā)芽率低和發(fā)芽不整齊，難以滿足市場的大規(guī)模需求。因此，本發(fā)明對滿足牛大力種子繁殖苗的市場需求有重要的實際意義。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個目的是解決至少上述問題和/或缺陷，并提供至少后面將說明的優(yōu)點。
本發(fā)明還有一個目的是提供牛大力種子直接誘導從芽并快速繁育種苗的方法，該方法可實現(xiàn)牛大力種子規(guī)模化育苗，一次可育苗幾十萬株到幾百萬株，而且幼苗整齊，種子發(fā)芽率在97％以上，成活率在98％以上，育苗總成功率在95％以上，育苗時間可提前1-2個月。
為了實現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點，提供了牛大力種子直接誘導從芽并快速繁育種苗的方法，包括，
初代培養(yǎng)的步驟如下：剪取牛大力半木質化莖條，去掉葉片，剪成3-5cm的長莖段，用水沖洗干凈，超聲波滅菌7-10min后，用無菌水沖洗5-6次，剪除兩端切口，剪成1-1.5em長的帶芽莖段，接種到初代培養(yǎng)基，暗培養(yǎng)7-8d后，腋芽萌動，再弱光培養(yǎng)25d，腋芽長到1cm，轉移至強光下進行培養(yǎng)30d，腋芽長成1.5-3cm長的單一芽苗，無葉片分化。
從芽增殖培養(yǎng)的步驟如下：將初代培養(yǎng)長成的芽苗莖剪成1.5-2cm的長莖段橫放接入到從芽增殖培養(yǎng)基，經(jīng)過28d的培養(yǎng)，從每個莖段腋芽處萌發(fā)5-7個叢生芽，待小芽長至3-6cm，逐漸分化出1-3片復葉。
壯苗培養(yǎng)的步驟如下：剪取高約4cm，有2片復葉的芽苗單株豎放轉接到壯苗培養(yǎng)基，弱光下培養(yǎng)5-6d，轉移至強光下培養(yǎng)；培養(yǎng)16-20d，苗高4-5cm，葉片濃綠，莖木質化程度高，生長旺盛。
瓶外快速繁的步驟如下：育培養(yǎng)移栽基質按黃心土∶河沙∶泥炭土(10-15∶1∶1)的比例拌勻，用8cm×12cm營養(yǎng)袋裝好備用；移栽前一天用0.1％-0.2％高錳酸鉀溶液進行消毒，移栽時用清水把基質淋透；移栽前，將瓶內(nèi)壯苗用清水洗凈基部培養(yǎng)基，再置于500mg/labt生根粉中浸蘸約1min，扦插在營養(yǎng)袋基質中，立即搭小拱棚覆蓋塑料薄膜及黑網(wǎng)，保持苗床溫、濕度，棚內(nèi)相對濕度保持在90％以上，溫度控制在30℃以下，移栽1周后，可揭開部分薄膜透氣，以后揭開薄膜的面積可逐漸加大，每間隔7d噴施1次殺菌劑及葉面肥，移栽40d出主根2條，生根率達75％-85％；90d后生根苗高達10cm，主根1-4條，多數(shù)為2條，粗度達0.15cm，根長最長可達15cm，須根10-20條；180d后，主根膨大成圓柱狀或兩個紡錘體連成一串，膨大處直徑達0.8-1.3cm。
優(yōu)選的是，所述培養(yǎng)基為ms培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基均加蔗糖3％，ph值5.6-5.8，培養(yǎng)溫度(26±1)℃，光照時間12h/d，光照強度400-20001x；所述初代培養(yǎng)基中添加由催生素。
本發(fā)明至少包括以下有益效果：
第一、本發(fā)明提供的方法，實現(xiàn)了牛大力種子直接誘導從芽并快速繁育種苗，一次可育苗幾十萬株到幾百萬株，而且幼苗整齊，種子發(fā)芽率在97％以上，成活率在98％以上，育苗總成功率在95％以上，育苗時間可提前1-2個月，解決了牛大力種子發(fā)芽不整齊、不能規(guī)模化育種和發(fā)芽率低的難題；
第二、通過優(yōu)化培養(yǎng)基并從芽增殖培養(yǎng)，能有效防止牛大力組織培養(yǎng)過程中材料褐化及異常愈傷組織產(chǎn)生，并能促進復葉分化，增加繼代苗高度及莖的木質化程度，為瓶外快速繁育提供高質量的有效芽苗。
本發(fā)明的其他優(yōu)點、目標和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本發(fā)明的研究和實踐而為本領域的技術人員所理解。
具體實施方式
下面結合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領域技術人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。
下述實施例中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法，所述試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。
實施例：
牛大力種子直接誘導從芽并快速繁育種苗的方法，包括，
初代培養(yǎng)的步驟如下：剪取牛大力半木質化莖條，去掉葉片，剪成4cm的長莖段，用水沖洗干凈，超聲波滅菌8min后，用無菌水沖洗5次，剪除兩端切口，剪成1cm長的帶芽莖段，接種到初代培養(yǎng)基，暗培養(yǎng)7d后，腋芽萌動，再弱光培養(yǎng)25d，腋芽長到1cm，轉移至強光下進行培養(yǎng)30d，腋芽長成1.5cm長的單一芽苗，無葉片分化。
從芽增殖培養(yǎng)的步驟如下：將初代培養(yǎng)長成的芽苗莖剪成1.5的長莖段橫放接入到從芽增殖培養(yǎng)基，經(jīng)過28d的培養(yǎng)，從每個莖段腋芽處萌發(fā)5個叢生芽，待小芽長至3cm，逐漸分化出2片復葉。
壯苗培養(yǎng)的步驟如下：剪取高約4cm，有2片復葉的芽苗單株豎放轉接到壯苗培養(yǎng)基，弱光下培養(yǎng)5d，轉移至強光下培養(yǎng)；培養(yǎng)16d，苗高4cm，葉片濃綠，莖木質化程度高，生長旺盛。
瓶外快速繁的步驟如下：育培養(yǎng)移栽基質按黃心土：河沙：泥炭土(10∶1∶1)的比例拌勻，用8cm×12cm營養(yǎng)袋裝好備用；移栽前一天用0.1％高錳酸鉀溶液進行消毒，移栽時用清水把基質淋透；移栽前，將瓶內(nèi)壯苗用清水洗凈基部培養(yǎng)基，再置于500mg/labt生根粉中浸蘸約1min，扦插在營養(yǎng)袋基質中，立即搭小拱棚覆蓋塑料薄膜及黑網(wǎng)，保持苗床溫、濕度，棚內(nèi)相對濕度保持在90％以上，溫度控制在27℃，移栽1周后，可揭開部分薄膜透氣，以后揭開薄膜的面積可逐漸加大，每間隔7d噴施1次殺菌劑及葉面肥，移栽40d出主根2條，生根率達75％；90d后生根苗高達10cm，主根2條，粗度達0.15cm，根長最長可達15cm，須根15條；180d后，主根膨大成圓柱狀或兩個紡錘體連成一串，膨大處直徑達1.3cm。
盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運用。它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領域。對于熟悉本領域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改。因此在不背離權利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細節(jié)和這里示出與描述的實例。