本發(fā)明涉及一種8×9蘋果多品種高接獲得雜交種子的方法，尤其涉及一種蘋果單株多品種高接自然雜交培育實生育種的雜交后代方法，屬于果樹育種領域。

背景技術：

隨著我國蘋果栽培面積迅速擴大，市場上對蘋果的品質(zhì)要求顯著提高，無論是出于消費者還是栽培者的角度，蘋果品種創(chuàng)新顯得尤為重要。

目前蘋果育種的方法有很多，雜交育種雖然古老依然占有統(tǒng)治地位，如目前我國廣為栽培的蘋果主栽品種‘富士’、‘嘎啦’、‘秦冠’、‘華冠’、‘喬納金’，歐美廣泛栽培的主栽品種‘布瑞本’、‘粉紅佳人’、‘密脆’、‘太平洋玫瑰’等都是通過人工雜交手段獲得的，這些雜交后選育出的蘋果品種，普遍表現(xiàn)出前所未有的優(yōu)良品質(zhì)，受到市場追捧，占目前栽培面積的70％以上。因此在目前階段，通過雜交手段選育蘋果新品種依然具有極大的現(xiàn)實意義。

但是傳統(tǒng)的人工雜交實生方法，獲得雜交種子，是十分瑣碎的艱辛的工作。人工雜交需要耗費大量的人力進行人工授粉，包括采粉、去雄、雜交、套袋等種種程序，費時又費力。僅僅雜交一個環(huán)節(jié)，一個熟練的操作者，一天大約可以授粉300朵，按照目前的育種規(guī)律，每個組合至少應該取得1000粒上的種子才能捕獲足夠變異，以座果率30％計算，每個果實獲得5粒正常種子計算，需要工作兩天。由于花期有限，往往一個生長季只能完成2-3個組合的雜交工作。工作環(huán)境惡劣，工作量大，生產(chǎn)成本不斷增加，制約了大規(guī)模雜交育種的進行，這也導致了我國育種效率不高、突出品種較少的現(xiàn)狀。急需一種節(jié)約人力物力、組合多樣、變異豐富的雜交技術。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有生產(chǎn)中蘋果品種人工雜交繁瑣的不足，提供一種方便操作、變異類型多、易于選擇的8×9蘋果多品種高接獲得雜交種子的方法。

為了達到上述目的，本發(fā)明采用以下方案：

1)選取3-5年生長勢健壯的蘋果樹作為母株，所述母株品種選用龍富短枝；

2)在蘋果母株上同時分別多頭高接金帥、美國8號、蜜脆(Honey crisp)、秦冠、首紅(Red chief)、紅愛(red love)、粉紅佳人(pink lady)和龍紅蜜八個品種作為母本；嫁接時，將首紅嫁接在母株頂端高處，其余八個品種均勻嫁接在母株四周，每株母株上嫁接20-30個位點，每個品種嫁接2-3頭，每個品種之間互不臨接；嫁接完成后對未嫁接的枝條全部重剪，使之和嫁接后的枝條一同生長；期間按常規(guī)管理；一般2年即可恢復樹冠，3年完全可以豐產(chǎn)結實；

3)結果后，根據(jù)母本分類采摘果實，得到多品種雜交蘋果種子；第二年春天層積播種，便于下一年進一步播種觀察；

4)步驟3)中播種的種子出苗結果后，采用常規(guī)實生育種程序，發(fā)現(xiàn)豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的優(yōu)系以后，取嫩葉或新梢通過SSR或AFLP技術鑒定其父本來源，用做進一步研究的優(yōu)系。

在本發(fā)明中，所選用的龍富為短枝蘋果芽變新品種，是山東農(nóng)業(yè)大學選育的性狀優(yōu)良品種，具有樹冠比較緊湊，更新能力強，不易早衰，葉片肥大而厚，同化能力強，成花容易，豐產(chǎn)性和穩(wěn)定性極好，連續(xù)結果能力強，果實整齊度高，著色速度快，優(yōu)質(zhì)果多，香味濃厚，口感品質(zhì)優(yōu)良等優(yōu)點，其綜合性狀明顯優(yōu)于目前栽培的煙富6等晚熟蘋果品種，發(fā)展前景廣闊。它既能體現(xiàn)富士傳統(tǒng)的優(yōu)良口感，又具有緊湊的樹形何易于成花的優(yōu)良特性，所以選擇它作為嫁接母體；金帥后代容易出現(xiàn)多倍體，豐產(chǎn)性能好；首紅具有濃郁的香氣，是培育香味品種的重要資源；美國8號外觀好，果形優(yōu)美，遺傳效率高；蜜脆質(zhì)地細膩，口味酸甜，是現(xiàn)在歐美育種的重要親本；秦冠豐產(chǎn)性極佳，尤其在粗放管理條件下，無出其右；紅愛果肉具有花色苷，有較高的保健價值；粉紅佳人果形指數(shù)高，含酸量高，耐貯藏性強；龍紅蜜果實蠟質(zhì)厚，表光特別好，口味甜；特別是這幾個品種在以往的雜交育種中都有著較好的表現(xiàn)，是從外觀、風味、豐產(chǎn)性綜合考量最具育種潛力的雜交組合。

綜上所述，本發(fā)明的有益效果：

1、一次嫁接，可保證多年收獲雜交種子，成本低廉，極大地節(jié)約了人力物力資源；

2、龍富為短枝品種，多品種嫁接后可以給其他果樹授粉，具有授粉樹的作用；

3、果園中長期多品種果樹長期混合，有利于獲得更多的變異品種的后代；

4、理論上建立72個雜交組合，一畝地栽植55棵，以2000千克普通生產(chǎn)水平計，年可獲種子60000粒，育種效率極大提高。

5、本發(fā)明利用蘋果具有異花授粉的特性，多品種花近距離接觸，在授粉過程中，使其自然授粉，不需要借助人力即可形成具有不同親本的果實，操作簡單。

附圖說明

圖1、3-5年生龍富短枝樹體示意圖；

圖2、＝為示高接換頭短截部位；

圖3、高接換頭嫁接示意圖，其中1為嫁接首紅的枝條，2-9為可隨機嫁接金帥、美國8號、蜜脆、秦冠、紅愛、粉紅佳人和龍紅蜜八個品種的枝條，注意間歇性保留不嫁接枝條，因為母株本身也是一個雜交親本；

圖4、樹冠恢復和結果示意圖。

具體實施方式

1、接穗準備

如果想在春季時枝接，應該在前一年冬季修剪時，在剪下的一年生枝條中，選取長勢好、無病蟲害、粗度適宜的枝條保留，剪取這些枝條的中間一段，作為下一年枝接的接穗使用。

分別將剪取好的八個蘋果品種(即金帥、美國8號、蜜脆、秦冠、首紅、紅愛、粉紅佳人和龍紅蜜)的接穗分類束成捆，做好標記，埋在陰涼微濕的沙土中，防止水分蒸發(fā)，以保持接穗的生命力，而且可以延遲枝條的萌發(fā)時間。在埋入沙土前，將每條接穗的兩端涂上石蠟，更好的防止水分的蒸干。埋入沙土時，務必做好埋入地址的記錄，便于來年尋找。第二年春天嫁接時，將埋在沙土中的接穗取出使用，取出后用濕布包裹，防止水分流失。

2、嫁接時間

選取春季枝接時間在早春樹液流動，芽眼萌發(fā)時或萌發(fā)后進行。

3、嫁接方法

選取3-5年生長勢健壯的龍富短枝蘋果樹作為母株。

采用枝接的嫁接方法，具體方法如下：選取接穗枝條的一段在砧木樹的骨干枝或者中央領導枝干上進行枝接。嫁接前先對砧木修剪整形，以便留出更好的位置嫁接其他的品種。選取剪鋸口下2-3cm直徑的幼齡枝條嫁接，太粗的枝條愈合慢；骨干枝和側枝用舌接等方法。

4、嫁接數(shù)量

將八個品種分別均勻嫁接在母株四周，3-5年生母株樹可嫁接部位約有40個左右，選擇20個左右位點嫁接，每個品種嫁接2-3頭，品種之間互不臨接。嫁接后對未嫁接枝條全部重剪，使之和嫁接枝條一同生長，精心管理，一般2年即可恢復樹冠，3年完全可以豐產(chǎn)結實。

5、嫁接后管理

(1)、澆水

砧木樹高接后要澆水兩次左右，供給水分，提高樹木成活率。

(2)、選取合適時間解開捆綁物

枝接當新梢長到30-40cm時，解除捆綁物，發(fā)現(xiàn)未成活的接芽時及時補接。

(3)、新梢綁護

為了防止高接的新品種枝條風吹后損毀，要用小木棍延伸著新梢生長的方向捆綁固定。

(4)、新梢摘心

當枝接新梢長到40-50cm時，摘除新梢嫩尖，當二次新梢長出時留2葉或3葉摘心。

(5)、病蟲害防治

嫁接后的病蟲害以防為主，防治結合。早春樹液開始流動,芽眼萌發(fā)前對母株骨干枝、主干枝杈及全樹冠均勻噴一次波美3°～5°石灰硫磺合劑,殺死各種病菌和越冬蟲卵。在枝條長出新葉時每隔半月噴一次1∶1.5∶200倍波爾多液,在新梢葉片旺長時及時噴霧溴氰菊酯和殺螨類菌劑等防治紅蜘蛛的發(fā)生。

(6)、根外追肥

當新梢長出3～5片葉時，交替噴施尿素0.2％水溶液或磷酸二氫鉀0.2％水溶液，10～15d噴1次，以葉片滴水為度。增加葉片營養(yǎng)，促進新梢長勢，加速愈合。

6、果實和種子的獲取

秋季果實成熟后，按照不同的接穗分類采摘果實，做好標記分類存放。將果肉吃掉，保留種子，得到雜交種子，洗凈陰暗，避光干燥存放。

7、后續(xù)工作

嫁接后形成多種長期共存，互相授粉，產(chǎn)生較多雜交組合。保存的種子等第二年春天層積播種，出苗結果后，采用常規(guī)實生育苗程序，對豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)有希望的優(yōu)系，確定進入復選階段的，采用現(xiàn)有SSR或AFLP等分子方法鑒定其父本并做好記錄，進入下一步育種程序。