一種促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法。具體操作步驟：(1)種子的收集與干燥；(2)種子凈選消毒；(3)種子層積處理；(4)發(fā)芽培養(yǎng)。本發(fā)明的益效：1.本發(fā)明方法操作簡單、成本低、無危險(xiǎn)、易于人工操作、無污染、易于推廣等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)垂序商陸的種子育苗、規(guī)?；N植具有很高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。2.本發(fā)明方法通過14～28天的處理可有效地促進(jìn)垂序商陸種子的萌發(fā)與成苗，使垂序商陸種子萌發(fā)率從不到10％提高到96～100％。
【專利說明】一種促進(jìn)垂序間陸種子萌發(fā)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物種子休眠解除的技術(shù)。具體是一種促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]垂序商陸(Phytolacca americana L.)是商陸科多年生草本植物,藥用部位為干燥根，具有逐水消腫，通利二便，解毒散結(jié)功效，主治水腫脹滿，二便不通，臃腫，瘡毒，為歷版《中華人民共和國藥典》收載品種。此外，垂序商陸是良好的土壤和水體污染修復(fù)植物，垂序商陸在錳礦廢棄地生長良好，對(duì)生長介質(zhì)中錳具有超強(qiáng)的吸附能力，在錳污染土壤和水體修復(fù)方面具有很大的應(yīng)用前景。
[0003]垂序商陸結(jié)實(shí)量大，種子壽命長，但種子萌發(fā)率低，存在種子休眠現(xiàn)象(周兵，聞小紅，肖宜安，等.外來入侵植物美洲商陸的繁殖生物學(xué)特性及其入侵性的關(guān)系[J].生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2013，22(4):567-574)。垂序商陸種子休眠的原因主要是存在硬實(shí)現(xiàn)象，未經(jīng)處理的種子萌發(fā)率很低，不足10%，種子難萌發(fā)已經(jīng)成為制約其進(jìn)一步有效利用的嚴(yán)重問題。
[0004]目前，生產(chǎn)上解除硬實(shí)種子休眠的方法主要是濃硫酸處理，劉麗莉等人對(duì)美洲商陸種子的研究表明，濃硫酸處理后發(fā)芽率可達(dá)90%以上(劉麗莉，馮濤，嚴(yán)明理，等.幾種破除美洲商陸種子休眠的方法[J].植物生理學(xué)通訊，2007，43，(4):795-796)。然而，經(jīng)過硫酸處理的種子，在萌 發(fā)過程中容易出現(xiàn)霉?fàn)€，會(huì)導(dǎo)致成苗率降低，且濃硫酸是一種具有極強(qiáng)的腐蝕性的化學(xué)試劑，價(jià)格高，難回收，易造成環(huán)境污染，燒種操作具有一定的危險(xiǎn)性。因此，亟需一種低成本無危險(xiǎn)操作簡單的促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是為了提供一種促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法，是一種低成本、無危險(xiǎn)、操作簡單的促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法。
[0006]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下:
[0007]—種促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法，操作步驟如下:
[0008]I)種子的收集和干燥:在每年8~10月，當(dāng)垂序商陸漿果從紫紅色變紫黑色時(shí)收集果實(shí)，種子剝出后用流動(dòng)的水沖洗干凈，自然晾干。
[0009]2)種子凈選消毒:將步驟I)自然晾干的垂序商陸種子用篩孔為2.5mm的方孔篩篩選出凈種子，將凈種子放入質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1 %的高錳酸鉀溶液中進(jìn)行浸泡消毒，消毒后用蒸餾水沖洗除凈消毒液。
[0010]3)種子層積處理:將經(jīng)過步驟2)消毒后的垂序商陸種子與濕珍珠巖混合，置于5°C的條件下層積28天，或置于15°C的條件下層積14天。
[0011]所述的種子層積處理過程中種子與珍珠巖混合的體積比為1: 3，珍珠巖的消毒方法是用質(zhì)量百分濃度為I %的漂白粉液浸泡30分鐘，然后再用蒸餾水沖洗至無氯味，濕珍珠巖的絕對(duì)含水量為200~300%。
[0012]4)發(fā)芽培養(yǎng):將經(jīng)過步驟3)層積處理的垂序商陸種子置于直徑為9cm的培養(yǎng)皿中，在變溫和交替光照條件下萌發(fā)，以24小時(shí)作為一個(gè)循環(huán)周期，培養(yǎng)28天。
[0013]所述變溫和交替光照的條件為:每天先在25°C光照條件下處理12h，再在15°C黑暗條件下處理12小時(shí)；或每天先在30°C光照條件下處理12小時(shí)，再在20°C黑暗條件下處理12小時(shí)。
[0014]所述發(fā)芽培養(yǎng)的操作過程為:
[0015](I)培養(yǎng)皿和發(fā)芽床的消毒:9cm的玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)鋪2層定性濾紙，牛皮紙包扎好后置于120攝氏度高溫下蒸汽消毒20分鐘，取出后晾干。
[0016](2)種子消毒:先用體積百分濃度為75%的乙醇浸種0.5min，再用質(zhì)量百分濃度為I %的次氯酸鈉浸種5分鐘，最后用無菌蒸餾水沖洗3次。
[0017](3)擺放種子:打開已經(jīng)消毒過的培養(yǎng)皿，先用5ml的無菌水浸濕濾紙，再將種子均勻擺放在濾紙上，每皿擺種子50粒，最后用封口膜將培養(yǎng)皿封好后置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)28天。整個(gè)擺種過程在無菌操作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
[0018]本發(fā)明的益效:
[0019]1.本發(fā)明方法操作簡單、成本低、無危險(xiǎn)、易于人工操作、無污染、易于推廣等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)垂序商陸的種子育苗、規(guī)?；N植具有很高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。 [0020]2.本發(fā)明方法通過14~28天的處理可有效地促進(jìn)垂序商陸種子的萌發(fā)與成苗，使垂序商陸種子萌發(fā)率從不到10%提高到96~100%。
【具體實(shí)施方式】
[0021 ] 下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述，但本發(fā)明并不局限于此。
[0022]下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所述試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。
[0023]實(shí)施例1
[0024]促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法，操作步驟如下:
[0025]1.采種、干燥及消毒:2013年9月，在廣西藥用植物園內(nèi)采收成熟的垂序商陸果實(shí)，將種子剝出后再用流動(dòng)的自來水沖洗干凈，于室內(nèi)攤開，自然晾干7天，篩取粒徑大于
2.5mm的種子5g，重復(fù)3份，然后用50mL的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1 %高錳酸鉀溶液浸泡消毒5分鐘，過濾后用蒸餾水沖洗3遍。
[0026]2.種子層積處理:將經(jīng)過消毒的種子與絕對(duì)含水量為200%的濕珍珠巖混合，種子與珍珠巖的體積比為1:3，置于5°C冰箱中層積28天。
[0027]3.發(fā)芽培養(yǎng):將層積種子取出，標(biāo)記為CJl ;以未經(jīng)層積處理的種子作對(duì)照，標(biāo)記為CKl。兩個(gè)處理的種子分別先用75%乙醇浸種0.5分鐘，再用I %次氯酸鈉浸種5分鐘，最后用無菌蒸餾水沖洗3次。將50粒消毒種子均勻擺放到玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)(直徑9cm的培養(yǎng)皿內(nèi)預(yù)先鋪2層定性濾紙，經(jīng)過120攝氏度高溫滅菌處理20min)，封口膜封口后置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)28天，各處理均重復(fù)4次。設(shè)置光照培養(yǎng)箱的光照和溫度條件為每天8:00至20:00光照1000~30001x、溫度30°C ;其余時(shí)間為黑暗、溫度20°C。
[0028]28天后以胚根突破種皮的種子粒數(shù)占供試種子粒數(shù)的百分比記為種子發(fā)芽率，層積處理CJl的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為100%、98%、98%、98%，平均發(fā)芽率達(dá)98.5% ；而對(duì)照處理CKl的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為8%、12%、10%、8%，平均發(fā)芽率僅9.5 %。本專利方法使垂序商陸的發(fā)芽率增加了 89.0%。
[0029]實(shí)施例2
[0030]促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法:
[0031]本實(shí)施例操作過程與實(shí)施例1所述采種、干燥、消毒、發(fā)芽培養(yǎng)條件相同，但所用的層積條件為將經(jīng)過消毒的種子與絕對(duì)含水量為300%的濕珍珠巖混合，種子與珍珠巖的體積比為1:3，置于15°C冰箱中層積14天。將層積處理種子標(biāo)記為CJ2，對(duì)照種子未作任何處理標(biāo)記為CK2。
[0032]28天后層積處理CJ2的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為100%、100%、100%、100%，平均發(fā)芽率達(dá)100.0 %;而對(duì)照處理CK2的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為8%、12%、10%、8%，平均發(fā)芽率僅9.5%。本專利方法使垂序商陸的發(fā)芽率增加了 90.5%。
[0033]實(shí)施例3
[0034]促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法: [0035]本實(shí)施例操作過程與實(shí)施例2所述的采種、干燥、消毒、層積處理相同，但種子發(fā)芽培養(yǎng)所設(shè)置的光照和溫度條件為每天8:00至20:00光照1000~30001x、溫度25°C ;其余時(shí)間為黑暗、溫度15°C。將層積處理種子標(biāo)記為CJ3，對(duì)照種子未作任何處理標(biāo)記為CK3。
[0036]28天后層積處理CJ3的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為98%、96%、98%、96%，平均發(fā)芽率達(dá)97.0而對(duì)照處理CK3的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為2%、2%、0、0，平均發(fā)芽率僅1.0 %。本專利方法使垂序商陸的發(fā)芽率增加了 96.0 %。
[0037]實(shí)施例4
[0038]促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法:
[0039]本實(shí)施例操作過程與實(shí)施例1所述的采種、層積處理、發(fā)芽培養(yǎng)條件相同，但所采種子經(jīng)室內(nèi)自然陰干10d，篩取粒徑大于2.5mm的種子5g，然后用50mL的0.1%高錳酸鉀溶液浸泡消毒5分鐘，過濾后用蒸餾水沖洗3遍。將層積處理種子標(biāo)記為CJ4，對(duì)照種子未作任何處理標(biāo)記為CK4。
[0040]28天后層積處理CJ4的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為98%、96%、98%、96%，平均發(fā)芽率達(dá)97.0 %;而對(duì)照處理CK4的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為8 %、12 %、10 %、8 %，平均發(fā)芽率僅9.5%。本專利方法使垂序商陸的發(fā)芽率增加了 87.5%。
[0041]實(shí)施例5
[0042]促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法:
[0043]本實(shí)施例操作過程與實(shí)施例2所述的層積溫度和層積時(shí)間、發(fā)芽培養(yǎng)條件相同，但所用實(shí)驗(yàn)材料為2013年10月在廣西武鳴縣采集到的野生垂序商陸種子。將種子剝出后再用流動(dòng)的自來水沖洗干凈，于室內(nèi)攤開，自然晾干14天，篩取粒徑大于2.5_的種子5g，重復(fù)2份，然后用50mL的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1 %高錳酸鉀溶液浸泡消毒5分鐘，過濾后用蒸餾水沖洗3遍。將消毒的種子與絕對(duì)含水量為250%的濕珍珠巖進(jìn)行混合層積。
[0044]28天后層積處理CJ5的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為96%、96%、98%、96%，平均發(fā)芽率達(dá)96.5 % ;而對(duì)照處理CK5的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為8%、8%、10 %、8%，平均發(fā)芽率僅8.5 %。本專利方法使垂序商陸的發(fā)芽率增加了 88.0 %。[0045]實(shí)施例6
[0046]促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法:
[0047]本實(shí)施例操作過程與實(shí)施例5所述的實(shí)驗(yàn)材料、干燥、消毒、層積處理相同，但種子發(fā)芽培養(yǎng)所設(shè)置的光照和溫度條件為每天8:00至20:00光照1000~30001x、溫度25°C;其余時(shí)間為黑暗、溫度15°C。將層積處理種子標(biāo)記為CJ6，對(duì)照種子未作任何處理標(biāo)記為CK6。
[0048]28天后層積處理CJ6的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為98%、94%、94%、98%，平均發(fā)芽率達(dá)96.0% ;而對(duì)照處理CK6的種子發(fā)芽率4次重復(fù)分別為4%、8%、6%、4%平均發(fā)芽率僅5.5%。本專利 方法使垂序商陸的發(fā)芽率增加了 90.5%。
【權(quán)利要求】
1.一種促進(jìn)垂序商陸種子萌發(fā)的方法，其特征在于，操作步驟如下: 1)種子的收集和干燥:在每年8~10月，當(dāng)垂序商陸漿果從紫紅色變紫黑色時(shí)收集果實(shí)，種子剝出后用流動(dòng)的水沖洗干凈，自然晾干； 2)種子凈選消毒:將步驟I)自然晾干的垂序商陸種子用篩孔為2.5mm的方孔篩篩選出凈種子，將凈種子放入質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1 %的高錳酸鉀溶液中進(jìn)行浸泡消毒，消毒后用蒸餾水沖洗除凈消毒液； 3)種子層積處理:將經(jīng)過步驟2)消毒后的垂序商陸種子與濕珍珠巖混合，置于5°C的條件下層積28天，或置于15°C的條件下層積14天； 所述的種子層積處理過程中種子與珍珠巖混合的體積比為1: 3，珍珠巖的消毒方法是用質(zhì)量百分濃度為I %的漂白粉液浸泡30分鐘，然后再用蒸餾水沖洗至無氯味，濕珍珠巖的絕對(duì)含水量為200~300% ; 4)發(fā)芽培養(yǎng):將經(jīng)過步驟3)層積處理的垂序商陸種子置于直徑為9cm的培養(yǎng)皿中，在變溫和交替光照條件下萌發(fā)，以24小時(shí)作為一個(gè)循環(huán)周期，培養(yǎng)28天； 所述變溫和交替光照的條件為:每天先在25°C光照條件下處理12h，再在15°C黑暗條件下處理12小時(shí)；或每天先在30°C光照條件下處理12小時(shí)，再在20°C黑暗條件下處理12小時(shí)； 所述發(fā)芽培養(yǎng)的操作過程為: (1)培養(yǎng)皿和發(fā)芽床的消毒:9cm的玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)鋪2層定性濾紙，牛皮紙包扎好后置于120攝氏度高溫下蒸汽消毒20分鐘，取出后晾干； (2)種子消毒:先用體積百分濃度為75%的乙醇浸種0.5min，再用質(zhì)量百分濃度為1%的次氯酸鈉浸種5分鐘，最后用無菌蒸餾水沖洗3次； (3)擺放種子:打開已經(jīng)消毒過的培養(yǎng)皿，先用5ml的無菌水浸濕濾紙，再將種子均勻擺放在濾紙上，每皿擺種子50粒，最后用封口膜將培養(yǎng)皿封好后置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)28天。整個(gè)擺種過程在無菌操作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
【文檔編號(hào)】A01C1/00GK104025761SQ201410244197
【公開日】2014年9月10日 申請(qǐng)日期:2014年6月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月4日
【發(fā)明者】潘春柳, 朱艷霞, 黃燕芬, 董青松, 柯芳 申請(qǐng)人:廣西壯族自治區(qū)藥用植物園