促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物種子萌發(fā)技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 戰(zhàn)骨，為馬鞭草科植物黃毛豆腐柴，其莖或根入藥稱斑鳩占，味辛、微甘，性微溫； 有活血散瘀、強(qiáng)筋健骨、祛風(fēng)止痛的功效，用于風(fēng)濕痹痛、肥大性脊接骨椎炎、肩周炎、腎虛 陽痿、月經(jīng)延期等癥。
[0003] 戰(zhàn)骨的生產(chǎn)主要靠野生資源，地域分布零散且蘊(yùn)藏量稀少。隨著以戰(zhàn)骨為主要原 料的"健骨注射液"、"跌打生骨顆粒"、"復(fù)方黃毛豆腐柴搽劑"等系列產(chǎn)品的開發(fā)，其市場需 求量逐年攀升，野生資源遭到過度采挖，瀕臨枯竭。在自然條件下，戰(zhàn)骨主要依靠種子進(jìn)行 繁殖，但因其結(jié)實(shí)量大而葉片的光合產(chǎn)物供應(yīng)有限，致使果實(shí)細(xì)小，種子發(fā)育不完整、生活 力低，生產(chǎn)上難以實(shí)現(xiàn)大面積栽培。經(jīng)統(tǒng)計分析，國內(nèi)外只有1篇關(guān)于戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的報道 (截止2015年10月8日），史艷財?shù)妊芯堪l(fā)現(xiàn)，戰(zhàn)骨種子浸種12h后，30°C培養(yǎng)時發(fā)芽率最 尚，為18 %。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的一個目的是提供一種促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，其解決戰(zhàn)骨種子在自然 狀態(tài)下萌發(fā)慢、萌發(fā)率低、出苗不整齊的問題，為大規(guī)模人工栽培提供大量的優(yōu)良種苗，以 滿足生產(chǎn)上的需要。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，提供了一種促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方 法，在培養(yǎng)戰(zhàn)骨種子之前將戰(zhàn)骨種子用浸種劑浸泡，所述浸種劑中GA3、激動素和萘乙酸的 濃度分別為 100-500mg/L、50-200mg/L 和 10-100mg/L。
[0006] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，所述浸種劑中GA3、激動素和萘乙酸 的濃度分別為 250mg/L、100mg/L 和 100mg/L。
[0007] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，用浸種劑浸泡的時間為10-14小時。
[0008] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，培養(yǎng)戰(zhàn)骨種子的方法為：戰(zhàn)骨種子放 入溫度為28-32°C、濕度為60-80%的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)35-45天。
[0009] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，在用浸種劑浸泡戰(zhàn)骨種子之前，還包 括：
[0010] 步驟a、將戰(zhàn)骨種子放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的次氯酸鈉溶液中浸泡15-25分鐘，然后 將戰(zhàn)骨種子放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的高錳酸鉀溶液中浸泡25-35分鐘，取出戰(zhàn)骨種子用蒸餾 水沖洗3-7次；
[0011] 步驟b、將步驟a得到的戰(zhàn)骨種子放入溫度為40_60°C的水中浸泡5-7小時；
[0012] 步驟c、將步驟b得到的戰(zhàn)骨種子放入超聲波清洗器中超聲處理15-25分鐘。 [0013] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，所述恒溫培養(yǎng)箱為12小時光照與12 小時黑暗交替的恒溫培養(yǎng)箱。
[0014] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，所述超聲處理過程中的超聲波頻率 為 40kHz。
[0015] 優(yōu)選的是，所述的促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，在步驟c之后還包括：
[0016] 步驟d、將步驟c得到的戰(zhàn)骨種子放入一個布袋中，然后加入戰(zhàn)骨種子重量3倍的 河沙，混合均勻，將布袋封口，揉搓布袋10-15分鐘；
[0017] 步驟e、取100重量份的米糠，加入其重量的15%的水潤濕，等量分為四堆，然后向 第一堆米糠中添加〇. 2-0. 3重量份的酵母菌，向第二堆米糠中添加0. 3-0. 5重量份的乳酸 菌，向第三堆米糠中添加0. 2-0. 3重量份的放線菌，向第四堆米糠中添加0. 5-0. 8重量份的 芽孢桿菌，分別發(fā)酵5天后，將步驟d得到的戰(zhàn)骨種子依次在第一堆米糠、第二堆米糠、第三 堆米糠和第四堆米糠中分別埋藏8小時。
[0018] 本發(fā)明至少包括以下有益效果：
[0019] (1)采用的浸種劑能夠有效解除障礙戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的各種因素，包括種皮障礙和 明發(fā)抑制物等，提尚戰(zhàn)骨種子吸水能力，最終促進(jìn)種子明發(fā)，提尚種子明發(fā)率。
[0020] (2)用溫水浸種處理、超聲波處理和恒溫培養(yǎng)的方法，結(jié)合浸種劑又進(jìn)一步提高了 戰(zhàn)骨種子的萌發(fā)率和出苗整齊度。
[0021] (3)操作簡便、成本低、對環(huán)境友好，具有較強(qiáng)的實(shí)用性和推廣價值。
[0022] (4)步驟d和步驟e首先用河沙對戰(zhàn)骨種子摩擦對戰(zhàn)骨種子進(jìn)行機(jī)械刺激，并使戰(zhàn) 骨種子表面產(chǎn)生微小的細(xì)紋，然后用米糠發(fā)酵產(chǎn)生的生物熱和發(fā)酵產(chǎn)生的酵素來刺激戰(zhàn)骨 種子，促進(jìn)戰(zhàn)骨種子的新陳代謝，從而促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)。微小的細(xì)紋還有利于戰(zhàn)骨種子對 酵素的吸收。本發(fā)明將米糠分為四堆，每堆所用的發(fā)酵菌劑各不相同，這樣，發(fā)酵5天后，每 堆米糠的內(nèi)部溫度不一樣，每堆米糠內(nèi)部生成的有益物質(zhì)即酵素也不一樣，因此將戰(zhàn)骨種 子在四堆米糠中各埋藏8小時，這樣戰(zhàn)骨種子可以接收米糠中各菌種產(chǎn)生的有益物質(zhì)，使 這些有效物質(zhì)共同對戰(zhàn)骨種子形成良性刺激，充分促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)。
[0023] 本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本 發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
【具體實(shí)施方式】
[0024] 下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書 文字能夠據(jù)以實(shí)施。
[0025] -種促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，包括如下步驟
[0026] 1、浸泡戰(zhàn)骨種子之前需要預(yù)先處理戰(zhàn)骨種子，將成熟的戰(zhàn)骨果實(shí)，搓去果皮，洗 凈，從中挑選飽滿、無破損、質(zhì)地均勻、不攜帶蟲卵的種子備用；將挑選好的種子置于質(zhì)量百 分?jǐn)?shù)為3%的次氯酸鈉溶液中浸泡20min，再置于質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為2%的高錳酸鉀溶液浸泡消 毒30min，蒸餾水沖洗5次；將消毒處理過的種子放入40-60°C的溫水中浸泡6h ;將溫水處 理過的種子放入頻率為40kHz的超聲波清洗器中處理20min。
[0027] 2、將預(yù)處理過的戰(zhàn)骨種子分成兩份，一份作為空白對照浸泡在相同體積的水中， 另一份完全浸泡于浸種劑中，浸泡時間為12h，所述浸種劑的有效成分及其配比為：赤霉素 GA3 為 100-500mg/L，激動素 KT 為 50-200mg/L，萘乙酸 NAA 為 10-100mg/L，其余為水。
[0028] 3、將空白對照的戰(zhàn)骨種子和浸泡后的戰(zhàn)骨種子分別置于兩層充分濕潤的萌發(fā)紙 上，然后將萌發(fā)紙放于透明玻璃培養(yǎng)皿中，蓋上蓋子；再將透明玻璃培養(yǎng)皿放于恒溫培養(yǎng)箱 中進(jìn)行光照和黑暗交替培養(yǎng)，所述恒溫培養(yǎng)箱為12h光照/12h黑暗交替的恒溫培養(yǎng)箱，所 述恒溫培養(yǎng)箱溫度為30°C，所述恒溫培養(yǎng)箱濕度為60-80%，培養(yǎng)時間為40d，40d后統(tǒng)計萌 發(fā)率。
[0029] 改變浸種劑中赤霉素、激動素和萘乙酸的含量（實(shí)施例1-9)，重復(fù)上述步驟1-3， 統(tǒng)計的萌發(fā)率結(jié)果如表1所示。數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，浸種劑對戰(zhàn)骨種子的萌發(fā)具有顯著的影 響，其中最佳的浸種劑溶液配比為A2B2C3，即實(shí)施例5中的方案：赤霉素 GA3250mg/L，激動素 KT100mg/L，萘乙酸NAA100mg/L，該條件下的萌發(fā)率高達(dá)83%，遠(yuǎn)高于空白對照的的萌發(fā)率 27%。
[0030] 本發(fā)明首次對促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)進(jìn)行研究，得到的戰(zhàn)骨種子萌發(fā)快、萌發(fā)率高、出 苗整齊、種苗健壯，同時本發(fā)明方法操作簡便、成本低、對環(huán)境友好，具有較強(qiáng)的實(shí)用性和推 廣價值，為戰(zhàn)骨的規(guī)?；N植提供有力的保障。
[0031] 表1浸種劑有效成分及其配比和對應(yīng)的萌發(fā)率
[0033] 注：
[0034] 在第一列中 1、2、3 分別代表 100mg/L、250mg/L、500mg/L ;
[0035] 在第二列中 1、2、3 分別代表 50mg/L、100mg/L、200mg/L ;
[0036] 在第三列中 1、2、3 分別代表 10mg/L、50mg/L、100mg/L ;
[0037] K1/3為水平1的3次指標(biāo)值的平均；
[0038] Κ2/3為水平2的3次指標(biāo)值的平均；
[0039] Κ3/3為水平3的3次指標(biāo)值的平均；
[0040] R表示赤霉素 GA3、激動素 ΚΤ以及萘乙酸ΝΑΑ在各自取值范圍內(nèi)的極差。
[0041] 實(shí)施例10
[0042] -種促進(jìn)戰(zhàn)骨種子萌發(fā)的方法，在培養(yǎng)戰(zhàn)骨種子之前將戰(zhàn)骨種子用浸種劑浸泡， 所述浸種劑中GA3、激動素和萘乙酸的濃度分別為100mg/L、50mg/L和10mg/L。
[0043] 用浸種劑浸泡的時間為10小時。
[0044] 培養(yǎng)戰(zhàn)骨種子的方法為：戰(zhàn)骨種子放入溫度為28°C、濕度為60%的恒溫培養(yǎng)箱中 培養(yǎng)35天。
[0045] 在用浸種劑浸泡戰(zhàn)骨種子之前，還包括：
[0046] 步驟a、將戰(zhàn)骨種子放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3 %的次氯酸鈉溶液中浸泡15分鐘，然后將戰(zhàn) 骨種子放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的高錳酸鉀溶液中浸泡25分鐘，取出戰(zhàn)骨種子用蒸餾水沖洗3 次；
[0047] 步驟b、將步驟a得到的戰(zhàn)骨種子放入溫度為40°C的水中浸泡5小時；
[0048] 步驟c、將步驟b得到的戰(zhàn)骨種子放入超聲波清洗器中超聲處理15分鐘。
[0049] 所述恒溫培養(yǎng)箱為12小時光照與12小時黑暗交