一種山羊肉用性狀快速高效選育方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及畜禽育種【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是一種山羊肉用性狀快速高效選育方法，包括以下步驟：體重測定、DNA樣采集、引物合成、模板PCR擴(kuò)增引物、基因型判定與分型、不同基因型個體PCR產(chǎn)物的測序驗(yàn)證、個體MBLUP遺傳評估、選配建立家系、群體繼代選育形成核心群體、優(yōu)良基因人工擴(kuò)散；本發(fā)明通過通過測定體重和檢測分子標(biāo)記基因型，以MBLUP技術(shù)評估種羊育種值進(jìn)行選配，按設(shè)計(jì)的選育目標(biāo)在選育后代中進(jìn)行體重測定和基因型檢測，以MBLUP法進(jìn)行群體繼代選育。最終形成黔北麻羊肉用新品系。以黔北麻羊的選育為例，通過本方法選育出的黔北麻羊肉用型核心群體公羊和母羊的體重分別比基礎(chǔ)群體提高14.12kg、9.61kg。
【專利說明】一種山羊肉用性狀快速高效選育方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及畜牧育種【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是一種山羊肉用性狀快速高效選育方法。
【背景技術(shù)】
[0002]最佳線性無偏預(yù)測BLUP，是20世紀(jì)80年代中后期發(fā)展起來的一種育種值估算方法，目前已經(jīng)成為國內(nèi)外學(xué)者普遍認(rèn)可的、先進(jìn)的遺傳評估方法；現(xiàn)有技術(shù)中，普遍將最佳線性無偏預(yù)測估算育種值的方法運(yùn)用于畜禽水產(chǎn)品種的育種，對于該方法適用于水產(chǎn)品種的報(bào)道包括有期刊論文文獻(xiàn)，也涵蓋有專利文獻(xiàn)5件，并且在這些大量的文獻(xiàn)中介紹了最佳線性無偏預(yù)測育種值估算方法比其他育種值估算方法具有明顯的有點(diǎn):其選育是針對育種值而不是表型，剝離了環(huán)境效應(yīng)，因而選擇效率較高；通過設(shè)計(jì)交配策略，有效的控制近交技術(shù)難題，有效控制種質(zhì)資源，從而保障了育種企業(yè)和生產(chǎn)者的利益。
[0003]標(biāo)記輔助BLUP(MBLUP)育種技術(shù)，國內(nèi)外主要是將其利用在水產(chǎn)品種中，而還沒有應(yīng)用于哺乳動物之中；山羊作為哺乳動物中的一種，也是我國畜禽遺傳資源重要組成部分，具有適應(yīng)能力強(qiáng)、耐粗飼、繁殖率高、產(chǎn)肉性能良好、膻味輕、肉鮮美可口等優(yōu)點(diǎn)；但山羊品種仍具有生長速度慢、經(jīng)濟(jì)效益不高的技術(shù)難題，同時，一個山羊品種種質(zhì)保護(hù)是一個長期性的工作，其經(jīng)濟(jì)不足、資源分散使得山羊品種擺脫不了遺傳品質(zhì)不斷退化的命運(yùn)。
[0004]因此，如何對地方山羊品種進(jìn)行快速高效選育，迅速提高生產(chǎn)性能，充分實(shí)現(xiàn)對地方優(yōu)良山羊遺傳資源的保護(hù)和利用，成為廣大本領(lǐng)域技術(shù)人員需要解決的問題。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種
[0006]具體是通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的:
[0007]—種山羊肉用性狀快速高效選育方法，包括以下步驟:
[0008](I)性能檢測:主要對山羊的體重進(jìn)行測定；測定時，要記錄好每只山羊的體重、性別、年齡、耳標(biāo)號，并收集山羊的系譜資料；所述的體重測定時，羊只禁食16~24h，禁飲2h后空腹稱測山羊的重量，單位為kg ；
[0009](2)DNA樣采集:按常規(guī)方法采集每只山羊的血樣或耳組織樣，并提取樣品DNA，每只山羊的DNA樣要與其耳標(biāo)號對應(yīng)；
[0010](3)標(biāo)記基因引物合成:將DNA樣合成包含生長獨(dú)立因子IB基因340bp處G/A突變的與山羊體重顯著相關(guān)的SNP位點(diǎn)的特定引物；
[0011](4)模板PCR擴(kuò)增引物:將2XTaqPCRMasterMix、ddH20、引物、模板DNA混合構(gòu)建成 PCR 反應(yīng)體系，其中 2 X Taq PCR MasterMix 為 5 μ L、ddH20 為 3.4 μ L、引物為 0.8 μ L、模板DNA為0.8 μ L ;混合均勻后，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物；
[0012](5)基因型判定與分型:將擴(kuò)增產(chǎn)物在99°C下變性5min后，置于10%的聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳，電泳完畢后，進(jìn)行硝酸銀染色拍照，并根據(jù)電泳結(jié)果直接判定個體基因型；[0013](6)不同基因型個體PCR產(chǎn)物的測序驗(yàn)證:對不同基因型個體各5個50 μ L擴(kuò)增體系，經(jīng)瓊脂糖凝膠檢測，有目的條帶后，進(jìn)行基因純化測序；記錄各個個體的基因型，均與體重、DNA樣、個體耳標(biāo)號要--對應(yīng)；
[0014](7)個體MBLUP遺傳評估:將各個體系譜、年齡、性別、基因型和體重信息納入標(biāo)記輔助BLUP (MBLUP)模型估計(jì)出各個個體的育種值，其模型如下:
[0015]y = Zu+Q v +e
[0016]其中:y為體重測量值向量；u為育種值隨機(jī)向量，其均值為0，方差協(xié)方差矩陣為Ao1a ；
[0017]V是固定分子標(biāo)記效應(yīng)向量，e為誤差向量，其均值為0，方差協(xié)方差矩陣為/σ|;
[0018]Z、Q是相應(yīng)的關(guān)聯(lián)矩陣；
[0019]隨機(jī)向量u和誤差向量e的數(shù)學(xué)期望和方差定義為:
[0020]EO= (U) VarC) = (^0),G=^^ , σ; = σ；-σ24 = σ；.(1-h2)
[0021]A為所有個體的血緣系數(shù)矩陣，σ24為個體育種值方差；
[0022](8)山羊選配建立家系:以公羊?yàn)閱挝?，選取育種值較近的山羊作為家系建立個體(各家系公羊育種值不能低于母羊育種值，公母羊之間應(yīng)避免近交，公母羊三代內(nèi)無共親關(guān)系)，每個家系母羊> 15只，至少建立30個家系；
[0023](9)山羊群體繼代選育形成核心群體:按照山羊肉用性狀快速高效選育目標(biāo)，在步驟8)的家系后代中進(jìn)行生產(chǎn)性能測定和基因型檢測，以BLUP法進(jìn)行群體繼代選育，重復(fù)步驟1-8) >二世代后，即可獲得山羊肉用核心群體；
[0024](10)優(yōu)良基因人工擴(kuò)散:在核心群體中，母羊直接送到山羊保種區(qū)去作種羊；公羊采用人工授精的方式，在山羊群體中進(jìn)行山羊擴(kuò)繁，最終選育形成山羊肉用新品系。
[0025]通過以上程序，即可達(dá)到對山羊肉用性狀快速高效選育的目的。
[0026]優(yōu)選地，所述的步驟I)中，體重檢測時，羊只禁食20h。
[0027]進(jìn)一步的，所述的步驟4)中，模板PCR擴(kuò)增引物采用的是混合法，具體是先把引物、2 X Taq PCR MasterMix, ddH20混勻后分裝，加入模板DNA進(jìn)行離心5s后，轉(zhuǎn)入PCR擴(kuò)增程序；所述的PCR擴(kuò)增程序?yàn)?4°C下預(yù)變性5min后，轉(zhuǎn)入35個循環(huán)的延伸前擴(kuò)增程序，待35個循環(huán)完成后，在72°C下延伸lOmin，即可獲得擴(kuò)增產(chǎn)物。
[0028]進(jìn)一步的，所述 的35個循環(huán)的延伸前擴(kuò)增程序，其中一個循環(huán)為:94°C下變性30s后，轉(zhuǎn)入50.7°C下退火30s，再在72°C下延伸30s。
[0029]進(jìn)一步的，所述的引物為兩種，其序列分別為:
[0030]F-CCTGGACAGGACTCATCAAACT ；
[0031 ] R-GCAAATAGGGGAGGATTTCTCT ;其中在模板PCR擴(kuò)增體系中，上、下游引物各占
0.4 μ L。
[0032]優(yōu)選地，所述的山羊選配建立家系步驟中，各家系公羊育種值 > 母羊育種值，公母羊三代內(nèi)無共親關(guān)系。
[0033]進(jìn)一步的，所述的家系不低于40個，每個家系的母羊> 20只。
[0034]進(jìn)一步的，所述的家系不低于60個，每個家系的母羊> 25只。[0035]進(jìn)一步的，所述的繼代選育，重復(fù)步驟1-8) ≥三世代。
[0036]進(jìn)一步的，所述的繼代選育，重復(fù)步驟1-8)≥四世代。
[0037]生長獨(dú)立因子IB基因340bp處G/A突變的與山羊體重顯著相關(guān)的SNP位點(diǎn)，兩者之間的顯著關(guān)系參見:Cai HF, Chen Z, Luo W X.Associations between polymorphismsof the GFIlB gene and growth traits of indigenous Chinese goats[J].Genetics andmolecular research:GMR, 2013, 13 (I):872_880。
[0038]2 X Taq PCR MasterMix為DNA模板PCR擴(kuò)增引物過程中生物酶。
[0039]引物濃度為IOpmol/ μ L ;模板DNA濃度為50ng/m。
[0040]另外，在進(jìn)行模板DNA引物PCR擴(kuò)增程序時，即引物、酶、ddH20的份數(shù)均比擴(kuò)增量要稍微多一點(diǎn)，混合均勻后分裝，并在各分裝的混合物中加入DNA模板后離心處理一定時間后，就進(jìn)入PCR擴(kuò)增程序。
[0041]標(biāo)記輔助 BLUP計(jì)算方法為:針對模型，輸入各自需要的方差組分先驗(yàn)值，利用MTDFREML軟件計(jì)算得到，根據(jù)REML算法迭代計(jì)算，估計(jì)方差組分；方差組分初始值的選取是依據(jù)表型方差，并根據(jù)張?zhí)鞎r在海洋水產(chǎn)研究期刊2008年29卷第3期題目為中國對蝦體重育種值估計(jì)的動物模型分析一文以及其他相關(guān)育種值計(jì)算方法的資料文獻(xiàn)進(jìn)行分析，收斂標(biāo)準(zhǔn)為兩次迭代所得估計(jì)值的方差小于10_13 ;為保證所獲得育種估計(jì)值是全局最大估計(jì)值，利用不同的初值進(jìn)行多次估計(jì)計(jì)算，比較收斂后的函數(shù)值，取其中最大的函數(shù)值的一次結(jié)果作為遺傳參數(shù)估計(jì)值，利用達(dá)到收斂標(biāo)準(zhǔn)的方差組分，求解模型方差，獲得山羊個體育種值，并根據(jù)個體育種值的相似度和相近度，進(jìn)行山羊公母羊的匹配雜交育種，對于家系育種值是家系所有個體的育種值的平均值。
[0042]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下技術(shù)效果:
[0043]①本方法獲得的核心群體黔北麻羊山羊和母羊的體重分別比基礎(chǔ)群體的公羊、母羊的體重分別提高14.12kg,9.61kg。
[0044]②通過育種值的估算，確保山羊遺傳資源能夠被可控性的進(jìn)行匹配，縮短了山羊的育種周期，提高了山羊遺傳資源的保存和保護(hù)能力。
[0045]③通過基因人工擴(kuò)散，使山羊優(yōu)秀基因在群體中的快速擴(kuò)散，優(yōu)秀山羊群體迅速擴(kuò)大，降低山羊養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖成本，促進(jìn)了山羊養(yǎng)殖，使得山羊種質(zhì)資源得到最大程度的保護(hù)。
[0046]④本發(fā)明可以提供個體選育和家系選育的基準(zhǔn)，準(zhǔn)確定位需要保護(hù)的遺傳資源，使得山羊遺傳資源能夠充分、準(zhǔn)確的被保存和保護(hù)。
[0047]⑤本發(fā)明通過育種值的計(jì)算和恰當(dāng)?shù)慕M配，避免了山羊的近交。
[0048]⑥本發(fā)明采用MBLUP技術(shù)，將與目標(biāo)性狀顯著相關(guān)的基因標(biāo)記納入傳統(tǒng)的BLUP模型，進(jìn)一步提高了山羊選育的準(zhǔn)確性和可靠性。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0049]圖1為本發(fā)明山羊肉用性狀快速高效選育方法的基因型判定過程中，對GFIlB基因SNP位點(diǎn)(340bpG/A)電泳圖。
[0050]圖2為本發(fā)明山羊肉用性狀快速高效選育方法的基因型為CC的GFIlB基因SNP位點(diǎn)(340bpG/A)測序圖。[0051]圖3為本發(fā)明山羊肉用性狀快速高效選育方法的基因型為DD的GFIlB基因SNP位點(diǎn)(340bpG/A)測序圖。
[0052]圖4為本發(fā)明山羊肉用性狀快速高效選育方法的基因型為⑶的GFIlB基因SNP位點(diǎn)(340bpG/A)測序圖。
[0053]圖5為本發(fā)明本發(fā)明山羊肉用性狀快速高效選育方法的工藝流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0054]下面結(jié)合附圖和具體的實(shí)施方式來對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的限定，但要求保護(hù)的范圍不僅局限于所作的描述。
[0055]實(shí)施例:
[0056]通過測定體重和檢測分子標(biāo)記基因型，以MBLUP技術(shù)評估種羊育種值進(jìn)行選配，按設(shè)計(jì)的選育目標(biāo)在選育后代中進(jìn)行生產(chǎn)性能測定和基因型檢測，以MBLUP法進(jìn)行群體繼代選育；最終形成黔北麻羊肉用新品系。
[0057]具體是:以習(xí)水縣富興牧業(yè)有限公司黔北麻羊原種場內(nèi)進(jìn)行的關(guān)于一種山羊肉用性狀快速高效選育方法，包括以下步驟:
[0058](I)生產(chǎn)性能測定:主要對山羊的體重指標(biāo)進(jìn)行測定；測定時，要記錄好每只山羊的體重、性別、年齡、耳標(biāo)號，并收集山羊的系譜資料；所述的體重檢測時，羊只禁食20h，禁飲2h后空腹稱測山羊的重量，單位為kg ；
[0059](2)DNA樣采集:按常規(guī)方法采集每只山羊的血樣或耳組織樣，并提取樣品DNA，每只山羊的DNA樣要與其耳標(biāo)號對應(yīng)；
[0060](3)標(biāo)記基因引物合成:將DNA樣合成包含標(biāo)記基因一生長獨(dú)立因子IB基因340bp處G/A突變的與山羊體重顯著相關(guān)的SNP位點(diǎn)的特定引物；
[0061 ] (4)模板PCR擴(kuò)增引物:將2 X TaqPCRMasterMix, ddH20、弓丨物、模板DNA混合構(gòu)建成 PCR 反應(yīng)體系，其中 2 X Taq PCR MasterMix 為 5 μ L、ddH20 為 3.4 μ L、引物為 0.8 μ L、模板DNA為0.8 μ L ;混合均勻后，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物；所述的模板PCR擴(kuò)增引物采用的是混合法，具體是先把引物、2 X Taq PCR MasterMix^ddH2O混勻后分裝，加入模板DNA進(jìn)行離心5s后，轉(zhuǎn)入PCR擴(kuò)增程序；所述的PCR擴(kuò)增程序?yàn)?4°C下預(yù)變性5min后，轉(zhuǎn)入35個循環(huán)的延伸前擴(kuò)增程序，待35個循環(huán)完成后，在72°C下延伸lOmin，即可獲得擴(kuò)增產(chǎn)物。所述的35個循環(huán)的延伸前擴(kuò)增程序，其中一個循環(huán)為:94°C下變性30s后，轉(zhuǎn)入50.7°C下退火30s，再在72°C下延伸30s ;所述的引物為兩種，其序列分別為:
[0062]F-CCTGGACAGGACTCATCAAACT ；
[0063]R-GCAAATAGGGGAGGATTTCTCT ；
[0064]其中在模板PCR擴(kuò)增引物的原料配比中各占0.4μ L ;
[0065](5)基因型判定與分型:將擴(kuò)增產(chǎn)物在99°C下變性5min后，置于10%的聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳，電泳完畢后，進(jìn)行硝酸銀染色拍照，并根據(jù)電泳結(jié)果直接判定個體基因型；
[0066](6)不同基因型個體PCR產(chǎn)物的測序驗(yàn)證:對不同基因型個體各5個50 μ L擴(kuò)增體系，經(jīng)瓊脂糖凝膠檢測，有目的條帶后，進(jìn)行基因純化測序；記錄各個個體的基因型，均與體重、DNA樣、個體耳標(biāo)號要--對應(yīng)；[0067](7)個體MBLUP遺傳評估:將各個體系譜、年齡、性別、基因型和體重信息納入標(biāo)記輔助BLUP (MBLUP)模型估計(jì)出各個個體的育種值，其模型如下:
[0068]y = Zu+Q V +e
[0069]其中:y為體重測量值向量；u為育種值隨機(jī)向量，其均值為0，方差協(xié)方差矩陣為
[0070]V是固定分子標(biāo)記效應(yīng)向量，e為誤差向量，其均值為0，方差協(xié)方差矩陣為/O'2;
[0071]Z、Q是相應(yīng)的關(guān)聯(lián)矩陣；
[0072]隨機(jī)向量u和誤差向量e的數(shù)學(xué)期望和方差定義為:
[0073]EO= (o) VarO = C0^0),, σ； = σ；-σ24 = σ； (1-h2)
[0074]A為所有個體的血緣系數(shù)矩陣，σ〗.為個體育種值方差；
[0075](8)山羊選配建立家系:以公羊?yàn)閱挝?，選取育種值較近的山羊作為家系建立個體，每個家系母羊> 15只，至少建立30個家系；各家系公羊育種值>母羊育種值，公母羊三代內(nèi)無共未關(guān)系；
[0076](9)山羊群體繼代選育形成核心群體:按照山羊肉用性狀快速高效選育目標(biāo)，在步驟8)的家系后代中進(jìn)行生產(chǎn)性能測定和基因型檢測，以BLUP法進(jìn)行群體繼代選育，重復(fù)步驟1-8) >二世代后，即可獲得山羊肉用性狀核心群體；
[0077](10)優(yōu)良基因人工擴(kuò)散:在核心群體中，母羊直接送到山羊保種區(qū)去作種羊；公羊采用人工受精的方式，在山羊群體中進(jìn)行山羊擴(kuò)繁，即可使肉用型山羊能夠得到快速高效選育并對山羊優(yōu)良基因能夠得到保種處理。
[0078]在此有必要指出的是:以上實(shí)施例僅限于對本發(fā)明的有益效果和實(shí)施方式做進(jìn)一步的闡述，不能理解為對本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步限制，本領(lǐng)域的技術(shù)人員在上述內(nèi)容中作出的與本發(fā)明的不具有突出的實(shí)質(zhì)性和顯著的改進(jìn)的發(fā)明創(chuàng)造，仍然屬于本發(fā)明的技術(shù)方案的保護(hù)范疇。
【權(quán)利要求】
1.一種山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)性能測定:主要對山羊肉用性狀的主要指標(biāo)體重進(jìn)行測定；測定時，要記錄好每只山羊的體重、性別、年齡、耳標(biāo)號，并收集山羊的系譜資料；所述的體重測定時，羊只禁食16~24h，禁飲2h后空腹稱測山羊的重量，單位為kg ； (2)DNA樣采集:按常規(guī)方法采集每只山羊的血樣或耳組織樣，并提取樣品DNA，每只山羊的DNA樣要與其耳標(biāo)號對應(yīng)； (3)標(biāo)記基因引物合成:將DNA樣合成包含目的基因中與山羊體重顯著相關(guān)的SNP位點(diǎn)的特定引物； (4)模板PCR擴(kuò)增引物:將2X Taq PCR MasterMix, ddH20、引物、模板DNA混合構(gòu)建成PCR 反應(yīng)體系，其中 2 X Taq PCR MasterMix 為 5 μ L、ddH20 為 3.4 μ L、引物為 0.8 μ L、模板DNA為0.8 μ L ;混合均勻后，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物； (5)基因型判定與分型:將擴(kuò)增產(chǎn)物在99°C下變性5min后，置于10%的聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳，電泳完畢后，進(jìn)行硝酸銀染色拍照，并根據(jù)電泳結(jié)果直接判定個體基因型； (6)不同基因型個體PCR產(chǎn)物的測序驗(yàn)證:對不同基因型個體各5個50μ L擴(kuò)增體系，經(jīng)瓊脂糖凝膠檢測，有目的條帶后，進(jìn)行基因純化測序；記錄各個個體的基因型，均與體重、DNA樣、個體耳標(biāo)號要--對應(yīng)； (7)個體MBLUP遺傳評估:將各個體系譜、年齡、性別、基因型和體重信息納入標(biāo)記輔助BLUP(MBLUP)模型估計(jì)出各個個體的育種值，其模型如下:
y = Zu+Q V +e 其中:y為體重測量值向量；u為育種值隨機(jī)向量，其均值為0，方差協(xié)方差矩陣為Ασ V是固定分子標(biāo)記效應(yīng)向量，e為誤差向量，其均值為0，方差協(xié)方差矩陣為 Z、Q是相應(yīng)的關(guān)聯(lián)矩陣； 隨機(jī)向量u和誤差向量e的數(shù)學(xué)期望和方差定義為: EO= OVarO=(S),0=^^ , α；=σ；-^=^ (1-h2) A為所有個體的血緣系數(shù)矩陣，σ〗;為個體育種值方差； (8)山羊選配建立家系:以公羊?yàn)閱挝?，選取育種值較近的山羊作為家系建立個體(各家系公羊育種值不能低于母羊育種值，公母羊之間應(yīng)避免近交，公母羊三代內(nèi)無共親關(guān)系)，每個家系母羊> 15只，至少建立30個家系； (9)山羊群體繼代選育形成核心群體:按照山羊肉用性狀快速高效選育目標(biāo)，在步驟8)的家系后代中進(jìn)行體重測定和基因型檢測，以MBLUP法進(jìn)行群體繼代選育，重復(fù)步驟1-8) >二世代后，即可獲得山羊肉用核心群體； (10)優(yōu)良基因人工擴(kuò)散:在核心群體中，母羊直接送到保種區(qū)去作種羊；公羊采用人工授精的方式，在山羊群體中進(jìn)行山羊擴(kuò)繁。
2.如權(quán)利要求1所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的步驟I)中，體重測定檢測時,羊只禁食20h。
3.如權(quán)利要求1所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的步驟4)中，模板PCR擴(kuò)增引物采用的是混合法，具體是先把引物、2XTaq PCR MasterMix, ddH20混勻后分裝，加入模板DNA進(jìn)行離心5s后，轉(zhuǎn)入PCR擴(kuò)增程序；所述的PCR擴(kuò)增程序?yàn)?4°C下預(yù)變性5min后，轉(zhuǎn)入35個循環(huán)的延伸前擴(kuò)增程序，待35個循環(huán)完成后，在72°C下延伸lOmin，即可獲得擴(kuò)增產(chǎn)物。
4.如權(quán)利要求3所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的35個循環(huán)的延伸前擴(kuò)增程序，其中一個循環(huán)為:94°C下變性30s后，轉(zhuǎn)入50.7°C下退火30s，再在72°C下延伸30s。
5.如權(quán)利要求1所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的引物為上游引物和下游引物兩種，其序列分別為:
F-CCTGGACAGGACTCATCAAACT ； R-GCAAATAGGGGAGGATTTCTCT ;其中在模板PCR擴(kuò)增體系中,上下游引物各占0.4 μ I。
6.如權(quán)利要求1所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的山羊選配建立家系步驟中，各家系公羊育種值>母羊育種值，公母羊三代內(nèi)無共親關(guān)系。
7.如權(quán)利要求1所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的家系不低于40個，每個家 系的母羊> 20只。
8.如權(quán)利要求1所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的家系不低于60個,每個家系的母羊> 25只。
9.如權(quán)利要求1所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的繼代選育，重復(fù)步驟1-8)≥三世代。
10.如權(quán)利要求1所述的山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，所述的繼代選育，重復(fù)步驟1-8)≥四世代。
【文檔編號】A01K67/027GK104017865SQ201410211282
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年5月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月19日
【發(fā)明者】肖禮華, 徐紅, 徐云峰, 曾瓊, 楊方福, 趙文金, 趙維 申請人:習(xí)水縣富興牧業(yè)有限公司