一種高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法，本發(fā)明中紅芽芋試管微球莖是指在組織培養(yǎng)條件下，以經(jīng)過莖尖分生組織培養(yǎng)脫去主要病毒的紅芽芋脫毒苗為材料，通過控制培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件及環(huán)境溫度，誘導試管苗形成微球莖。該方法繁殖速度快，生產(chǎn)效率高，生產(chǎn)成本低，能周年工廠化生產(chǎn)；生產(chǎn)出來的試管微球莖具有無病毒、體積小、貯藏運輸方便特點，是一項具有產(chǎn)業(yè)前景，能從根本上解決種芋退化的先進技術。
【專利說明】一種高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)和生物工程【技術領域】。尤其涉及一種高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法。
【背景技術】
[0002]植物組織培養(yǎng)是生物工程技術中應用最廣泛的技術之一，目前組織培養(yǎng)脫毒與快繁技術在馬鈴薯、甘薯、甘蔗、草莓等主要經(jīng)濟作物上已成功應用，試管微球莖的誘導在馬鈴薯、半夏等植物上是一項比較成熟的技術，但在紅芽芋生產(chǎn)上試管微球莖的生產(chǎn)未見報道。
[0003]紅芽芋(CZoca1Sia escalenta是芋艿的優(yōu)良品種，即球莖的頂芽和側(cè)芽苞葉為紅色故名紅芽芋，俗稱“芋頭”。屬單子葉，天南星科，多年生宿根性草本植物，葉卵形，葉柄長而肥大，花黃綠色，地下有肉質(zhì)球莖，食用部分富含淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪，可作蔬菜或主食。紅芽芋因其肉質(zhì)松、香，極易煮熟，風味獨特而久負盛名，深受消費者的青睞。《本草衍義》記載芋頭具有吞之開胃，通腸閉，產(chǎn)后煮食之破血，飲其汁，止血、渴；益胃、健脾、寬腸、通便；解毒、散結(jié)、化痰、消腫止痛；補中益肝腎、調(diào)節(jié)中氣、添精益髓等功效。因此，紅芽芋經(jīng)濟價值高，將其作為藥食兩用植物，具有良好的開發(fā)應用前景。紅芽芋無性繁殖，傳統(tǒng)種芋的生產(chǎn)，田間多代繁殖，病毒積累，植株種性退化嚴重。脫毒試管微球莖的應用是解決紅芽芋種芋退化、提高紅芽芋生產(chǎn)效益的有效技術。本發(fā)明同步法即是一種簡化培養(yǎng)程序，省略了母苗生根壯苗的培養(yǎng)過程，減少試管苗培養(yǎng)周期，提高接種效率，節(jié)省人工，能源，是一種降低試管微球莖生產(chǎn)成本的有效途徑。試管微球莖的應用取決于兩個關鍵技術，一是試管微球莖的生產(chǎn)效率是否滿足規(guī)?；a(chǎn)要求，二是試管微球莖的生產(chǎn)成本不能過高，前者是前提，在此基礎上解決田間配套技術問題。
[0004]
【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的是提供一種高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法。
[0005]本發(fā)明通過以下技術方案實現(xiàn):
一種高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法，其特征在于，該方法以組織培養(yǎng)的脫毒紅芽芋無病毒苗為材料，高蔗糖濃度、短日照和低溫的培養(yǎng)條件是誘導試管薯的基本條件，采用MS培養(yǎng)基，在光照、變溫條件誘導、培養(yǎng)下獲得試管微球莖。
[0006]所述的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，不添加任何生長激素，蔗糖濃度為6-8%，光照強度為1500-2000LX，光周期每天8-10小時，根據(jù)紅芽芋種芋形成對短日照和低溫的敏感的特性，通過光照、變溫調(diào)節(jié)，實現(xiàn)紅芽芋的試管微球莖的生產(chǎn)。
[0007]所述的紅芽芋試管微球莖的誘導培養(yǎng)采用同步法培養(yǎng)，將增殖培養(yǎng)基中具有3-5片葉的單苗或叢生苗直接接種于微球莖誘導培養(yǎng)基上，促使植株基部形成試管微球莖，而3片葉以下的小苗接種在增殖培養(yǎng)基繼續(xù)增殖培養(yǎng)，周而復始，周年生產(chǎn)。目的是加快試管微球莖的繁殖，縮短生產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本。
[0008]本發(fā)明有益效果:本發(fā)明中紅芽芋試管微球莖是指在組織培養(yǎng)條件下，以經(jīng)過莖尖分生組織培養(yǎng)脫去主要病毒的紅芽芋脫毒苗為材料，通過控制培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件及環(huán)境溫度，誘導形成試管微球莖。生產(chǎn)出來的試管微球莖具有無病毒、體積小、貯藏運輸方便等優(yōu)點，同時，通過同步法繁殖可大幅度降低生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效率，具有工廠化周年生產(chǎn)等顯著優(yōu)點，是一項具有產(chǎn)業(yè)前景，從根本上解決種芋退化的先進技術。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0009]圖1為莖尖脫毒。
[0010]圖2為試管微球莖誘導。
[0011]圖3為紅芽芋單苗誘導的微球莖。
[0012]圖4為紅芽芋試管微球莖。
【具體實施方式】
[0013]實施例1:
紅芽芋試管微球莖培養(yǎng)基設計:MS培養(yǎng)基，添加蔗糖6% (60g/L)，瓊脂粉0.3% (3 g/L)配制成固體培養(yǎng)基，調(diào)整pH為5.8，每培養(yǎng)瓶裝30ml，在121 °C高溫下20min左右滅菌備用；每瓶接種紅芽芋脫毒試管苗6-8株(叢)，在光照強度為1500LX，控制光周期每天8-10小時，培養(yǎng)3個月，平均每株(叢)收獲1.5粒，每100個培養(yǎng)瓶累計收獲試管微球莖900-1200粒。
[0014]實施例2:
紅芽芋試管微球莖培養(yǎng)基設計:MS培養(yǎng)基，添加蔗糖8% (80 g/L)，瓊脂粉0.3% (3 g/L)配制成固體培養(yǎng)基，調(diào)整pH為5.8，每培養(yǎng)瓶裝30 ml，在121°C高溫下20min左右滅菌備用；每瓶接種紅芽芋脫毒試管苗6-8株/叢，在光照強度為2000LX，控制光周期每天8-10小時左右，培養(yǎng)3個月，平均每株(叢)收獲2粒，每100個培養(yǎng)瓶累計收獲試管微球莖1200-1600 粒。
[0015]實施例3:
紅芽芋試管微球莖培養(yǎng)基設計:MS培養(yǎng)基，添加蔗糖8% (80 g/L)，瓊脂粉0.3% (3 g/L)配制成固體培養(yǎng)基，每培養(yǎng)瓶裝30ml，調(diào)整pH為5.8，在121°C高溫下20min左右滅菌備用；每瓶接種紅芽芋脫毒試管苗6-8株/叢，在光照強度為2000LX的光照下培養(yǎng)30天，控制光周期每天8小時左右，然后轉(zhuǎn)自然光培養(yǎng)，共培養(yǎng)3個月，平均每株/叢收獲2.5粒，每100個培養(yǎng)瓶累計收獲試管微球莖1500-2000粒。
[0016]實施例4:
紅芽芋試管微球莖培養(yǎng)基設計:MS培養(yǎng)基，配置大量元素和微量元素，添加蔗糖8%(80g/L)，瓊脂粉0.3% (3 g/L)配制成固體培養(yǎng)基，每培養(yǎng)瓶裝30ml，調(diào)整pH為5.8，在121。。高溫下23min滅菌備用；每瓶接種紅芽芋脫毒試管苗6-8株，變溫培養(yǎng)(白天25±3°C，夜間在18-20°C)，在光照強度為2000Lx的光照下培養(yǎng)30天，控制光周期每天8小時左右，然后轉(zhuǎn)自然光培養(yǎng)，共培養(yǎng)3個月，平均每株/叢收獲3粒，每100個培養(yǎng)瓶累計收獲試管微球1800-2400 粒。
[0017]實施例5:紅芽芋試管微球莖同步法設計:試管微球莖誘導中，從增殖培養(yǎng)瓶中選取3-5片葉的試管苗單株苗或叢生苗轉(zhuǎn)接到誘導培養(yǎng)基中，共培養(yǎng)3個月可直接誘導成微球莖，少于3片葉的試管苗繼續(xù)轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中同步增殖繁殖，以此類推，可以實現(xiàn)分期分批不停的周年生產(chǎn)。總生產(chǎn)量=年生產(chǎn)批 次X每批生產(chǎn)量。
【權利要求】
1.一種高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法，其特征在于，該方法以組織培養(yǎng)的脫毒紅芽芋無病毒苗為材料，高蔗糖濃度、短日照和低溫的培養(yǎng)條件是誘導試管薯的基本條件，采用MS培養(yǎng)基,在光照、變溫條件誘導、培養(yǎng)下獲得試管微球莖。
2.根據(jù)權利要求1所述的高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基,不含任何生長激素,其鹿糖濃度為6-8%,置于培養(yǎng)瓶中，光照強度為1500-2000LX，控制光周期每天8-10小時，根據(jù)紅芽芋種芋形成對短日照和低溫的敏感的特性，通過光照、溫度調(diào)節(jié)，實現(xiàn)紅芽芋的試管微球莖生產(chǎn)。
3.根據(jù)權利要求1所述的高效生產(chǎn)紅芽芋微球莖的方法的方法，其特征在于，所述的紅芽芋試管微球莖的生產(chǎn)采用球莖誘導培養(yǎng)與試管苗增殖同步法培養(yǎng)，即將增殖培養(yǎng)基中具有3-5片葉的單苗或叢生苗直接接種于微球莖誘導培養(yǎng)基上，促使植株基部形成試管微球莖，而3片葉以下的小苗繼續(xù)增殖培養(yǎng)。
【文檔編號】A01H4/00GK103535277SQ201310429988
【公開日】2014年1月29日 申請日期:2013年9月18日 優(yōu)先權日:2013年9月18日
【發(fā)明者】江芹, 廖華俊, 董玲, 陳靜嫻, 湯婷婷, 寧志怨, 李衛(wèi)文 申請人:安徽省農(nóng)業(yè)科學院園藝研究所