專利名稱：黃芪水提取物用于生物農(nóng)藥的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及黃芪水提取物的一種新用途，具體涉及黃芪水提取物在農(nóng)藥方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
全世界廣泛分布的雜草有30000種，每年約1800種對(duì)作物造成不同程度的危害， 每年因雜草危害造成的農(nóng)作物減產(chǎn)高達(dá)9. 7%。采用化學(xué)除草劑雖然有效地控制了許多雜草，但化學(xué)藥劑的大量使用也引發(fā)了很多不良問(wèn)題，如除草劑抗性雜草植株的出現(xiàn)、土壤污染、水質(zhì)的退化、以及對(duì)人、畜的危害等。
小麥穎枯病原菌(Septoria nodorum)是引發(fā)小麥穎枯病的主要病原菌之一，主要為害小麥未成熟穗部和莖桿，也為害葉片和葉鞘。穗部染病后，先在頂端或上部小穗上發(fā)生，穎殼上開(kāi)始為深褐色斑點(diǎn)，后變?yōu)榭莅咨U(kuò)展到整個(gè)穎殼，其上長(zhǎng)滿菌絲和小黑點(diǎn) (分生孢子器)；莖節(jié)染病后呈褐色病斑，能侵入導(dǎo)管并將其堵塞，使節(jié)部畸變、扭曲，上部莖桿折斷而死；葉片染病后，初為長(zhǎng)梭形淡褐色小斑，后擴(kuò)大成不規(guī)則形大斑，邊緣有淡黃暈圈，中央灰白色，其上密生小黑點(diǎn)，劍葉被害扭曲枯死。葉鞘發(fā)病后變黃，使葉片早枯。小麥穎枯病危害較大，已成為我國(guó)小麥生產(chǎn)上的一類重要病害，多雨年份和潮濕地區(qū)發(fā)生尤其嚴(yán)重。
早疫病病原菌(Alternaria solani)是引發(fā)茄科植物早疫病的病原菌，主要為害西紅柿、馬鈴薯、辣 椒、茄子等蔬菜。多在苗期發(fā)病，葉尖或頂芽產(chǎn)生暗褐色水潰狀病斑，引起腐爛，手感滑溜，幼苗上部腐爛后，形成無(wú)頂苗，甚至爛到床土面，致使苗期就死亡，危害很大。
為了防治病害，人們一方面通過(guò)選育抗病品種來(lái)增加抗性，一方面進(jìn)行化學(xué)防治。 前者有一定的局限性，后者會(huì)帶來(lái)環(huán)境污染。因此開(kāi)發(fā)高效、低毒、低殘留的新型農(nóng)藥尤其是生物源農(nóng)藥越來(lái)越受到重視。
黃芪藥材來(lái)源于為豆科草本植物蒙古黃芪、膜莢黃芪的根，又稱棉芪、綿芪、綿黃芪(《本草圖經(jīng)》)、棉黃芪、黃蓍、黃耆、箭芪(劉仕廉《醫(yī)學(xué)集成》)、箭黃芪、內(nèi)蒙古黃芪、 王孫(《藥性論》)、戴芪、戴糝(《本經(jīng)》)、戴椹，獨(dú)椹，蜀脂，百本(《別錄》)、百藥棉、百藥綿(侯寧極《藥譜》)、土山爆張根(《新疆藥材》)、獨(dú)根(《甘肅中藥手冊(cè)》)、大抽、二人抬 (《遼寧經(jīng)濟(jì)植物志》)、大有芪、蒙芪、元芪、紅藍(lán)芪、白皮芪、黑皮芪、膜莢黃芪、東北黃芪、內(nèi)蒙黃芪、沖正芪、武川芪。黃芪具有補(bǔ)氣固表、利尿托毒、排膿、斂瘡生肌等功效，用于治療氣虛乏力、食少便溏、中氣下陷、久瀉脫肛、便血崩漏、表虛自汗、癰疽難潰、久潰不斂、血虛萎黃、內(nèi)熱消渴等，現(xiàn)代研究表明黃芪具有增強(qiáng)特異、非特異性免疫功能、強(qiáng)心、抗病毒性心肌炎、抗?jié)?、增加紅細(xì)胞數(shù)、保肝、抗疲勞、抗衰老的作用、調(diào)節(jié)血壓等作用。但其在農(nóng)藥方面的應(yīng)用未見(jiàn)報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容
為了開(kāi)發(fā)新的生物源農(nóng)藥，本發(fā)明提供了黃芪水提取物在農(nóng)藥方面的用途，主要涉及除雜草(Brassica rapa L. Chinensis Group)、抗小麥穎枯病(Septoria nodorum)及抗?fàn)斂浦参镌缫卟?Alternaria solani)。
黃芪水提取物在應(yīng)用時(shí)，先用DMSO溶解制備成母液。
應(yīng)用在殺除雜草時(shí)，將上述母液用0. 025%吐溫20稀釋至黃芪乙醇提取物的濃度為 60 μ g/cm2 ο
應(yīng)用在防治茄科植物早疫病和小麥穎枯病時(shí)，將上述母液用0. 025%吐溫20稀釋至黃芪乙醇提取物的濃度為20 200ppm(mg/L)。
本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)利用黃芪水提取物作為除草、抗菌劑，能有效除草、抑制植物病原菌；黃芪水提取物來(lái)源廣泛；黃芪水提取物對(duì)人畜無(wú)毒，易降解，不會(huì)產(chǎn)生化學(xué)農(nóng)藥使用過(guò)程中產(chǎn)生的“三R”，對(duì)環(huán)境的污染較小。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明黃芪水提取物在農(nóng)藥方面的應(yīng)用進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
供試樣品黃芪藥材購(gòu)于南京藥業(yè)股份有限公司。
實(shí)驗(yàn)儀器高速萬(wàn)能粉碎機(jī)；立式自動(dòng)壓力蒸汽滅菌器；搖床；超聲波震蕩儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；恒溫水浴鍋；電子天平；智能人工氣候箱；真空泵。
提取方法黃芪藥材在8倍量(W/V)的水中煮沸2小時(shí)后過(guò)濾，濾渣再用8倍量水煮沸2小時(shí)后過(guò)濾，濾液合并后減壓濃縮，60°C下干燥，得褐色浸膏。
母液配置取黃芪水提取物(褐色浸膏)用DMSO溶解，制備成濃度為10mg/mL的母液。測(cè)試溶液的配置使用時(shí)將母液用0. 025% Tween 20稀釋至適當(dāng)濃度。
實(shí)施例一
供試草油菜(Brassicarapa L. Chinensis Group)、狗牙根(Cynodon dactylon L.)、浮萍(Lemna minor),由湖北省農(nóng)科院提供。
試驗(yàn)方法采用小白菜和狗牙根為靶標(biāo)時(shí)篩選方法為瓊脂培養(yǎng)基表面涂布法。采用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加入水瓊脂300 μ L和約10顆種子，然后加入稀釋藥液20 μ L，初篩藥液濃度為1. 0mg/mL、0. 3mg/mL、0. lmg/mL。一周后,檢查種子萌發(fā)及植株生長(zhǎng)情況。復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。
以浮萍為靶標(biāo)時(shí)采用水培法。采用24孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加入浮萍培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)液 2mL，接入3個(gè)浮萍葉片，再加入稀釋藥液20 μ L。初篩時(shí)藥液濃度為1. 0mg/mL，一周后檢查浮萍的生長(zhǎng)情況。復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。
復(fù)篩時(shí)，對(duì)油菜及狗牙根的濃度為60ug/cm2，對(duì)浮萍的濃度為lOppm。
試驗(yàn)結(jié)果黃芪水提物在濃度為60 μ g/em2時(shí)對(duì)油菜完全抑制，對(duì)浮萍和狗牙根沒(méi)有抑制作用，具有一定的選擇性。
實(shí)施例二
供試菌終極腐霉菌(Pythium ultimum)、灰霉菌(Botrytis cinerea)、小麥穎枯病原菌(Septoria nodorum)、早疫病病原菌(Alternaria Solani)、小麥赤霉病原菌 (Fusariumculmorum)、立枯病原菌(Rhizoctonia solani),由湖北省農(nóng)科院提供。
試驗(yàn)方法半固體培養(yǎng)基法。采用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加入90 μ L培養(yǎng)基和待測(cè)真菌的菌絲體或孢子的混合物，每孔加入藥液量為 ο μ L0初篩濃度為20ppm，復(fù)篩濃度根據(jù)初篩結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。
試驗(yàn)結(jié)果黃芪水提取物在濃度為20ppm時(shí)對(duì)小麥穎枯病原菌和茄科植物早疫病病原菌有較強(qiáng)的抑制作用，抑制率為77%。
權(quán)利要求
1.黃芪水提取物在農(nóng)藥方面的應(yīng)用。
2.權(quán)利要求1所述黃芪水提取物為黃芪藥材用水煮沸2小時(shí)后過(guò)濾、濾液濃縮干燥所得的褐色浸膏。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述黃芪水提取物用于除雜草。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于所述黃芪水提取物在應(yīng)用時(shí)，先采用DMSO 溶解制備母液，使用前取所述母液用O. 025%吐溫20稀釋至黃芪水提取物的應(yīng)用濃度為 60 μ g/cm2。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述黃芪水提取物可以抑制小麥穎枯病原菌，用于防治小麥穎枯病。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述黃芪水提取物可以抑制植物早疫病病原菌，用于防治茄科植物早疫病。
7.根據(jù)權(quán)利要求5-6所述的用途，其特征在于所述黃芪水提取物在應(yīng)用時(shí)，先采用 DMSO溶解制備母液，使用前取所述母液用O. 025%吐溫20稀釋至黃芪水提取物的濃度為 20ppmo
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了黃芪水提取物在農(nóng)藥方面的用途，尤其涉及黃芪水提取物在除草、抗小麥穎枯病及植物早疫病方面的用途。本發(fā)明所述黃芪水提物能有效除雜草及抑制小麥穎枯病原菌、植物早疫病病原菌，擴(kuò)大了生物農(nóng)藥的選擇范圍。
文檔編號(hào)A01P3/00GK102986742SQ20121055157
公開(kāi)日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2012年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月18日
發(fā)明者馬麗, 李維林, 王開(kāi)梅, 顧玉誠(chéng), 劉玲玲 申請(qǐng)人:江蘇省中國(guó)科學(xué)院植物研究所