專利名稱：一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于菌類作物栽培技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基及其制備方法
背景技術(shù)：
羊肚菌(Morehellaesculenta(L. )Pers)隸屬于子囊菌亞門(Ascomycoti na)、盤菌綱(Discomycetes)、盤菌目(Pezizales)、羊肚菌科(Morchellaceae)、羊肚菌屬(Morehella),因其子實體形態(tài)酷似羊肚而得名。羊肚菌味道鮮美，含有豐富的谷氨酸、賴氨酸、天冬氨酸，是世界性著名珍稀食用菌，擁有“ 食用菌皇后”之美譽。此外，羊肚菌還具有顯著的藥用價值，據(jù)《本草綱目》記載羊肚菌甘寒無毒，益腸胃，化痰理氣?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，羊肚菌含有多糖、酶類、吡喃酮抗生素、脂肪酸類等多種化合物，對降血脂、調(diào)節(jié)機體免疫力、抗疲勞、保肝、抗病毒、抑制腫瘤、減輕放化療引起的毒副作用等方面具有較為顯著的功效。羊肚菌作為一種珍稀的食、藥用真菌，其人工栽培技術(shù)的突破一直是國內(nèi)外菌物學(xué)界、微生物學(xué)界研究的熱點和難點，目前已積累了大量的關(guān)于羊肚菌栽培的研究資料和數(shù)據(jù)。大量的試驗數(shù)據(jù)使得越來越多的研究者認為菌核是羊肚菌子實體發(fā)生和分化的基礎(chǔ)，因此如何培養(yǎng)出發(fā)育和分化能力強的菌核成為了突破羊肚菌人工栽培技術(shù)的關(guān)鍵技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的問題在于提供一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基及其制備方法，該方法制備的羊肚菌栽培種具有菌絲健壯、濃密、長速均勻、氣生菌絲發(fā)達、菌絲扭結(jié)能力強等優(yōu)良性狀。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)—種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基，以充分吸水的木屑與棉籽殼、麩皮的混合物作為主料，添加輔料和核桃枝浸提液充分混合；以質(zhì)量份數(shù)計，主料中包括2 10份的木屑、2 5份的棉籽殼和I 2份的麩皮；輔料中包括0. I 0. 5份的蔗糖、0. I 0. 6份的石膏、0. I 0. 6份的石灰、0. I 0. 5份的羊肚菌根際土、0 0. 05份的磷酸二氫鉀、0 0. 05份硫酸鎂和0 0. 02份的維生素B1 ;核桃枝浸提液是I 3份的核桃樹枝條用其質(zhì)量I. 5 5倍的水煎煮后的過濾液。以質(zhì)量份數(shù)計，主料中包括4 5份的木屑、2 4份的棉籽殼和I 2份的麩皮；輔料中包括0. 2 0. 5份的蔗糖、0. 2 0. 5份的石膏、0. 2 0. 5份的石灰、0. 2 0. 5份的羊肚菌根際土、0. 01 0. 05份的磷酸二氫鉀、0. 01 0. 04份硫酸鎂、0. 01 0. 02份的維生素B:。所述的培養(yǎng)基的pH值控制為6. 5 7. 5。所述的培養(yǎng)基中水分質(zhì)量含量控制為50% 65%。所述的培養(yǎng)基在118 126°C下滅菌I. 5 2. 5小時。
一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟I)按質(zhì)量份數(shù)，將I 3份新鮮、無蟲害的核桃樹枝條，剪成小段，加入其質(zhì)量I. 5 5倍的水，煮沸10 30min，過濾，收集得到核桃枝浸提液；2)按質(zhì)量份數(shù)，將2 10份的新鮮、無霉變、無蟲蛀的木屑，加足量的水，攪拌均勻，使木屑充分吸水，過夜；3)按質(zhì)量份數(shù)，將2 5份的棉籽殼、I 2份的麩皮與充分吸水的木屑混合后攪拌均勻，作為主料備用；按質(zhì)量份數(shù)，將0. I 0.5份的蔗糖、0. I 0.6份的石膏、0. I 0.6份的石灰、 0. I 0. 5份的羊肚菌根際土、0 0. 05份的磷酸二氫鉀、0 0. 05份硫酸鎂和0 0. 02份的維生素B1以及核桃枝浸提液分別加入到水中，充分攪拌后加入到主料中，攪拌均勻，得到培養(yǎng)基；控制培養(yǎng)基中的水分質(zhì)量含量為50% 65% ；4)將培養(yǎng)基裝入菌袋中，然后在118 126°C下滅菌I. 5 2. 5小時。所述的木屑堆成龜背狀，使木屑能夠充分吸水。一種基于所述羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的羊肚菌栽培種的制備方法，包括以下步驟羊肚菌栽培種培養(yǎng)基裝入菌袋中，在118 126°C下滅菌I. 5 2. 5小時；待培養(yǎng)基冷卻至30°C以下時，在無菌環(huán)境下將羊肚菌菌種接入菌袋，接種量為培養(yǎng)料干重的3% 5% ；2)將接種后的菌袋放在溫度為22 28°C、相對濕度65% 80%的條件下，黑暗或暗光環(huán)境培養(yǎng)，35 50天菌絲即可長滿菌袋；3)待菌絲滿袋后，控制晝夜溫度，白晝溫度為15 22°C，黑夜溫度為12 15°C，光照強度100 300勒克斯；通過溫差刺激與弱光照刺激，7 10天菌絲即可扭結(jié)形成大量初期為白色的菌核，繼續(xù)培養(yǎng)后菌核長大且顏色加深轉(zhuǎn)成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培種制作完成。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益的技術(shù)效果本發(fā)明提供的羊肚菌栽培種培養(yǎng)基，不僅可以使羊肚菌菌絲體在栽培種培養(yǎng)基上菌絲生長的健壯、濃密、長速均勻、菌絲扭結(jié)能力強且形成的菌核較大，直徑多在5 8mm個別菌核直徑在8mm以上，而且比普通栽培種能夠多產(chǎn)生25% 35%的羊肚菌菌核，因此在羊肚菌人工馴化中能夠提高子實體的產(chǎn)量。
具體實施例方式下面結(jié)合具體的實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，所述是對本發(fā)明的解釋而不是限定。—種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基，以充分吸水的木屑與棉籽殼、麩皮的混合物作為主料，添加輔料和核桃枝浸提液充分混合；以質(zhì)量份數(shù)計，主料中包括2 10份的木屑、2 5份的棉籽殼和I 2份的麩皮；輔料中包括0. I 0. 5份的蔗糖、0. I 0. 6份的石膏、0. I 0. 6份的石灰、0. I 0. 5份的羊肚菌根際土、0 0. 05份的磷酸二氫鉀、0 0. 05份硫酸鎂和0 0. 02份的維生素B1 ;核桃枝浸提液是I 3份的核桃樹枝條用其質(zhì)量I. 5 5倍的水煎煮后的過濾液。具體的，以質(zhì)量份數(shù)計，主料中包括4 5份的木屑、2 4份的棉籽殼和I 2份的麩皮；輔料中包括o. 2 0. 5份的蔗糖、0. 2 0. 5份的石膏、0. 2 0. 5份的石灰、0. 2 0. 5份的羊肚菌根際土、0. 01 0. 05份的磷酸二氫鉀、0. 01 0. 04份硫酸鎂、0. 01 0. 02
份的維生素B:。更進一步，以質(zhì)量份數(shù)計，主料中包括4. 5份的木屑(闊葉樹木屑)、3份的棉籽殼和2份的麩皮；輔料中包括0. I份的蔗糖、0. I份的石膏、0. I份的石灰、0. I份的羊肚菌根際土、0. 05份的磷酸二氫鉀、0. 04份硫酸鎂、0. 01份的維生素B1, pH值為6. 5 7. 5 ;培養(yǎng)基中水分質(zhì)量含量控制為60% 65%。實施例I一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟I)稱取新鮮、無蟲害的核桃樹枝條1000g，剪成2 4cm長的小段，加入3000g水，煮沸2(T30min,過濾取汁。 2)提前一天稱取無蟲害、無霉變的干燥木屑5000g，加入5000g清水，攪拌均勻并建堆將木屑堆成龜背狀，讓木屑能夠充分吸水，過夜。3)稱取棉籽殼3000g，麩皮1500g與預(yù)濕的木屑攪拌均勻；稱取蔗糖100g、石膏100g、石灰100g、磷酸二氫鉀50g、羊肚菌根際土 100g、硫酸鎂40g、維生素B1IOg用水溶解后加入料中攪拌均勻，加入5000g清水。4)將攪拌均勻的料裝入14X22cm規(guī)格的菌袋中，每袋裝干料約為175g。然后將菌袋在121°C下，滅菌2小時，制成栽培種培養(yǎng)基。待培養(yǎng)基冷卻的30°C以下時，在無菌接種間用無菌的接種鏟將粗腿羊肚菌菌種切成小塊接入菌袋，接種量規(guī)格約為2cmX2cm ；5)選用上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司生產(chǎn)的QHX-300BS / H- III型人工氣候箱對接種后的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)?？刂迫斯夂蛳涞臅円箿囟?，白晝溫度為22°C，黑夜溫度為16°C，相對濕度90%，并控制白晝光照時間為12h，黑夜時間為12h，暗光培養(yǎng)。待菌絲滿袋后，調(diào)節(jié)人工氣候箱的晝夜溫度，白晝溫度為18°C，黑夜溫度為12°C，光照強度300Lx，通過溫差刺激與弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，繼續(xù)培養(yǎng)菌核長大至5 8mm且顏色加深轉(zhuǎn)成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培種制作完成。所形成的菌核較大，直徑多在5 8mm個別菌核直徑在8mm以上，而且比普通栽培種能夠多產(chǎn)生25% 35%的羊肚菌菌核。實施例2一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟I)稱取新鮮、無蟲害的核桃樹枝條1500g，剪成2 4cm長的小段，加入3000g水，煮沸2(T30min,過濾取汁。2)提前一天稱取無蟲害、無霉變的干燥木屑6000g，加入5000g清水，攪拌均勻并建堆將木屑堆成龜背狀，讓木屑能夠充分吸水，過夜。3)稱取棉籽殼4000g，麩皮1200g與預(yù)濕的木屑攪拌均勻；稱取鹿糖200g、石膏150g、石灰120g、羊肚菌根際土 200g、硫酸鎂50g、用水溶解/混懸后加入料中攪拌均勻，加入5000g清水。4)將攪拌均勻的料裝入14X22cm規(guī)格的菌袋中，每袋裝干料約為175g。然后將菌袋在118°C下，滅菌I. 5小時，制成栽培種培養(yǎng)基。待培養(yǎng)基冷卻的30°C以下時，在無菌接種間用無菌的接種鏟將粗腿羊肚菌菌種切成小塊接入菌袋，接種量規(guī)格約為2cmX2cm ；
5)選用上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司生產(chǎn)的QHX-300BS / H- III型人工氣候箱對接種后的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)?？刂迫斯夂蛳涞臅円箿囟?，白晝溫度為25°C，黑夜溫度為20°C，相對濕度90%，并控制白晝光照時間為12h，黑夜時間為12h，暗光培養(yǎng)。待菌絲滿袋后，調(diào)節(jié)人工氣候箱的晝夜溫度，白晝溫度為22°C，黑夜溫度為15°C，光照強度300Lx，通過溫差刺激與弱光照刺激，8天后菌袋中即形成白色的小菌核，繼續(xù)培養(yǎng)菌核長大至5 8mm且顏色加深轉(zhuǎn)成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培種制作完成。實施例3一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟I)稱取新鮮、無蟲害的核桃樹枝條1000g，剪成2 4cm長的小段，加入2500g水，煮沸2(T30min,過濾取汁。2)提前一天稱取無蟲害、無霉變的干燥木屑5000g，加入4000g清水，攪拌均勻并 建堆將木屑堆成龜背狀，讓木屑能夠充分吸水，過夜。3)稱取棉籽殼2500g，麩皮2000g與預(yù)濕的木屑攪拌均勻；稱取蔗糖150g、石膏120g、石灰80g、磷酸二氫鉀60g、羊肚菌根際土 90g、硫酸鎂50g、維生素BfOg用水溶解后加入料中攪拌均勻，加入5000g清水。4)將攪拌均勻的料裝入14X22cm規(guī)格的菌袋中，每袋裝干料約為175g。然后將菌袋在120°C下，滅菌2小時，制成栽培種培養(yǎng)基。待培養(yǎng)基冷卻的30°C以下時，在無菌接種間用無菌的接種鏟將粗腿羊肚菌菌種切成小塊接入菌袋，接種量規(guī)格約為2cmX2cm ；5)選用上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司生產(chǎn)的QHX-300BS / H- III型人工氣候箱對接種后的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。控制人工氣候箱的晝夜溫度，白晝溫度為22°C，黑夜溫度為16°C，相對濕度90%，并控制白晝光照時間為12h，黑夜時間為12h，暗光培養(yǎng)。待菌絲滿袋后，調(diào)節(jié)人工氣候箱的晝夜溫度，白晝溫度為18°C，黑夜溫度為12°C，光照強度300Lx，通過溫差刺激與弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，繼續(xù)培養(yǎng)菌核長大至5 8mm且顏色加深轉(zhuǎn)成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培種制作完成。實施例4一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟I)稱取新鮮、無蟲害的核桃樹枝條800g，剪成2 4cm長的小段，加入2000g水，煮沸2(T30min,過濾取汁。2)提前一天稱取無蟲害、無霉變的干燥木屑5000g，加入3500g清水，攪拌均勻并建堆將木屑堆成龜背狀，讓木屑能夠充分吸水，過夜。3)稱取棉籽殼4000g，麩皮2500g與預(yù)濕的木屑攪拌均勻；稱取鹿糖180g、石膏100g、石灰150g、磷酸二氫鉀65g、羊肚菌根際土 150g、硫酸鎂30g、維生素BJ5g用水溶解后加入料中攪拌均勻，加入6000g清水。4)將攪拌均勻的料裝入14X22cm規(guī)格的菌袋中，每袋裝干料約為175g。然后將菌袋在120°C下，滅菌2小時，制成栽培種培養(yǎng)基。待培養(yǎng)基冷卻的30°C以下時，在無菌接種間用無菌的接種鏟將粗腿羊肚菌菌種切成小塊接入菌袋，接種量規(guī)格約為2cmX2cm ；5)選用上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司生產(chǎn)的QHX-300BS / H- III型人工氣候箱對接種后的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)?？刂迫斯夂蛳涞臅円箿囟?，白晝溫度為22°C，黑夜溫度為16°C，相對濕度90%，并控制白晝光照時間為12h，黑夜時間為12h，暗光培養(yǎng)。
待菌絲滿袋后，調(diào)節(jié)人工氣候箱的晝夜溫度，白晝溫度為18°C，黑夜溫度為12°C，光照強度300Lx，通過溫差刺激與弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，繼續(xù)培養(yǎng)菌核長大至5 8mm且顏色加深轉(zhuǎn)成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培種制作完成。實施例5一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟I)稱取新鮮、無蟲害的核桃樹枝條1500g，剪成2 4cm長的小段，加入2000g水，煮沸2(T30min,過濾取汁。2)提前一天稱取無蟲害、無霉變的干燥木屑5000g，加入3500g清水，攪拌均勻并建堆將木屑堆成龜背狀，讓木屑能夠充分吸水，過夜。
3)稱取棉籽殼3200g，麩皮1800g與預(yù)濕的木屑攪拌均勻；稱取蔗糖200g、石膏50g、石灰100g、磷酸二氫鉀50g、羊肚菌根際土 200g、硫酸鎂50g、維生素Bi25g用水溶解后加入料中攪拌均勻，加入6000g清水。4)將攪拌均勻的料裝入14X22cm規(guī)格的菌袋中，每袋裝干料約為175g。然后將菌袋在125°C下，滅菌I. 5小時，制成栽培種培養(yǎng)基。待培養(yǎng)基冷卻的30°C以下時，在無菌接種間用無菌的接種鏟將粗腿羊肚菌菌種切成小塊接入菌袋，接種量規(guī)格約為2cmX2cm ；5)選用上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司生產(chǎn)的QHX-300BS / H- III型人工氣候箱對接種后的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。控制人工氣候箱的晝夜溫度，白晝溫度為20°C，黑夜溫度為15°C，相對濕度90%，并控制白晝光照時間為12h，黑夜時間為12h，暗光培養(yǎng)。待菌絲滿袋后，調(diào)節(jié)人工氣候箱的晝夜溫度，白晝溫度為20°C，黑夜溫度為14°C，光照強度200Lx，通過溫差刺激與弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，繼續(xù)培養(yǎng)菌核長大至5 8mm且顏色加深轉(zhuǎn)成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培種制作完成。
權(quán)利要求
1.一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基，其特征在于，以充分吸水的木屑與棉籽殼、麩皮的混合物作為主料，添加輔料和核桃枝浸提液充分混合； 以質(zhì)量份數(shù)計，主料中包括2 10份的木屑、2 5份的棉籽殼和I 2份的麩皮；輔料中包括0. I 0. 5份的蔗糖、0. I 0. 6份的石膏、0. I 0. 6份的石灰、0. I 0. 5份的羊肚菌根際土、0 0. 05份的磷酸二氫鉀、0 0. 05份硫酸鎂和0 0. 02份的維生素B1 ；核桃枝浸提液是I 3份的核桃樹枝條用其質(zhì)量I. 5 5倍的水煎煮后的過濾液。
2.如權(quán)利要求I所述的羊肚菌栽培種培養(yǎng)基，其特征在于，以質(zhì)量份數(shù)計，主料中包括4 5份的木屑、2 4份的棉籽殼和I 2份的麩皮；輔料中包括0. 2 0. 5份的蔗糖、0.2 0. 5份的石膏、0. 2 0. 5份的石灰、0. 2 0. 5份的羊肚菌根際土、0. 01 0. 05份的磷酸二氫鉀、0. 01 0. 04份硫酸鎂、0. 01 0. 02份的維生素Biq
3.如權(quán)利要求I所述的羊肚菌栽培種培養(yǎng)基，其特征在于，所述的培養(yǎng)基的PH值控制為 6. 5 7. 5。
4.如權(quán)利要求I所述的羊肚菌栽培種培養(yǎng)基，其特征在于，所述的培養(yǎng)基中水分質(zhì)量含量控制為50% 65%。
5.如權(quán)利要求I所述的羊肚菌栽培種培養(yǎng)基，其特征在于，所述的培養(yǎng)基在118 126°C下滅菌I. 5 2. 5小時。
6.一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 1)按質(zhì)量份數(shù)，將I 3份新鮮、無蟲害的核桃樹枝條，剪成小段，加入其質(zhì)量I.5 5倍的水，煮沸10 30min，過濾，收集得到核桃枝浸提液； 2)按質(zhì)量份數(shù)，將2 10份的新鮮、無霉變、無蟲蛀的木屑，加足量的水，攪拌均勻，使木屑充分吸水，過夜； 3)按質(zhì)量份數(shù)，將2 5份的棉籽殼、I 2份的麩皮與充分吸水的木屑混合后攪拌均勻，作為主料備用； 按質(zhì)量份數(shù)，將0. I 0.5份的蔗糖、0. I 0.6份的石膏、0. I 0.6份的石灰、0. I 0.5份的羊肚菌根際土、0 0. 05份的磷酸二氫鉀、0 0. 05份硫酸鎂和0 0. 02份的維生素B1以及核桃枝浸提液分別加入到水中，充分攪拌后加入到主料中，攪拌均勻，得到培養(yǎng)基；控制培養(yǎng)基中的水分質(zhì)量含量為50% 65% ； 4)將培養(yǎng)基裝入菌袋中，然后在118 126°C下滅菌I.5 2. 5小時。
7.如權(quán)利要求6所述的羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述的木屑堆成龜背狀，使木屑能夠充分吸水。
8.一種基于權(quán)利要求I所述羊肚菌栽培種培養(yǎng)基的羊肚菌栽培種的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 1)將所述羊肚菌栽培種培養(yǎng)基裝入菌袋中，在118 126°C下滅菌I.5 2. 5小時；待培養(yǎng)基冷卻至30°C以下時，在無菌環(huán)境下將羊肚菌菌種接入菌袋，接種量為培養(yǎng)料干重的3% 5% ； 2)將接種后的菌袋放在溫度為22 28°C、相對濕度65% 80%的條件下，黑暗或暗光環(huán)境培養(yǎng)，35 50天菌絲即可長滿菌袋； 3)待菌絲滿袋后，控制晝夜溫度，白晝溫度為15 22°C，黑夜溫度為12 15°C，光照強度100 300勒克斯；7 10天菌絲即可扭結(jié)形成白色菌核，繼續(xù)培養(yǎng)后菌核長大且顏色加深轉(zhuǎn)成褐色或深褐色 。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種羊肚菌栽培種培養(yǎng)基及其制備方法，以充分吸水的木屑與棉籽殼、麩皮的混合物作為主料，添加輔料和核桃枝浸提液充分混合；以質(zhì)量份數(shù)計，主料中包括2～10份的木屑、2～5份的棉籽殼和1～2份的麩皮；輔料中包括0.1～0.5份的蔗糖、0.1～0.6份的石膏、0.1～0.6份的石灰、0.1～0.5份的羊肚菌根際土、0～0.05份的磷酸二氫鉀、0～0.05份硫酸鎂和0～0.02份的維生素B1；核桃枝浸提液是1～3份的核桃樹枝條用其質(zhì)量1.5～5倍的水煎煮后的過濾液。該方法制備的羊肚菌栽培種菌絲健壯、濃密、長速均勻、氣生菌絲發(fā)達、菌絲扭結(jié)能力強、能夠比普通栽培種多產(chǎn)生25%～35%的羊肚菌菌核。
文檔編號A01G1/04GK102757291SQ20121028455
公開日2012年10月31日 申請日期2012年8月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月10日
發(fā)明者吳小杰, 張黎光, 戴璐, 李安利, 李峻志, 祁鵬 申請人:陜西省微生物研究所