專利名稱：一種臺(tái)灣長壽菜的快速繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種植物的培養(yǎng)方法，尤其涉及一種臺(tái)灣長壽菜的快速繁殖方法。
背景技術(shù)：
長壽菜，又名葉用甘薯，俗稱白薯葉、番薯葉、地瓜葉，是甘薯的葉、葉柄和芽梢部，學(xué)名Ipomoea atatas (L. ) Lam ,為旋花科(Convolvulaceae)牽牛花屬草本匍匍性蔓生植物。在熱帶為多年生。原產(chǎn)于熱帶美洲?，F(xiàn)廣泛栽培于全世界熱帶和亞熱帶地區(qū)。我國南 北各地都有栽培，以收獲地下塊根為主，葉蔓作飼料，民間也有采食葉作為粗菜。近年發(fā)現(xiàn)，薯葉中含豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，是維生素歷、礦物質(zhì)鉀、鈣之來源，而且其病蟲害甚少，很少使用農(nóng)藥，比其他葉菜類較抗暴風(fēng)雨，生長迅速，為良好的夏季葉菜。它在人們追求享受自然的風(fēng)味中獲得重視，在臺(tái)灣省它作為一種優(yōu)良的深綠色蔬菜發(fā)展很快。，利用組培技術(shù)繁育長壽菜的技術(shù)尚未有人研究，組織培養(yǎng)體系尚未建立，優(yōu)良品種的推廣普及尚未完成，供求矛盾日益加劇，嚴(yán)重影響了長壽菜的應(yīng)用和推廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對現(xiàn)有的不足提供了一種臺(tái)灣長壽菜的快速繁殖方法。本發(fā)明通過以下方法實(shí)現(xiàn)上述目的。一種臺(tái)灣長壽菜的快速繁殖方法，該方法包括下列步驟
(1)外植體的選擇于5 7月采取生長健壯的長壽菜葉片或塊莖作外植體；
(2)材料處理方法先用軟毛刷將外植體表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射10 min，轉(zhuǎn)入超凈工作臺(tái)，在超凈工作臺(tái)上先用70%的乙醇浸泡20-50秒，然后用無菌水沖洗，再轉(zhuǎn)入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升汞溶液中浸泡5-7min，依時(shí)間長短用無菌水沖洗3 4次,最后在無菌條件下分割材料。莖段切割成0. I 0. 6 cm長，葉片分割成約0. 3 cm XO. 3 cm的小片；
(3)初代培養(yǎng)在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在 MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 2，4_D、0. 4mg/L 的 BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L蛋白酪、0. 5mg/L的GA，PH 6. 0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為2000-22001ux，待培養(yǎng)25天左右后，新芽長至3. Ocm左右時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
(4)繼代培養(yǎng)將初代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在3/4MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L 蛋白酪、0. 3mg/L 的IBA、0. 3mg/L的KT，PH 6. 0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為2000_22001ux，待新芽長至2. Ocm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
(5)生根培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在生根培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在1/3MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 6mg/L 的 IBA、0. 6mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，0. 4mg/L 的 NAA、
0.5mg/L蛋白酪、PH 6. 0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為22001ux，待新苗長至2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
(6)煉苗先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后解開封口膜，煉苗4d，煉苗期間適當(dāng)遮光，使光照強(qiáng)度為自然光的50%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒的重量比腐殖土 草炭珍珠巖蛭石=3 3 I 2的混合基質(zhì)中，溫度控制在29°C，前7d濕度控制在85%左右，以后逐漸降低濕度；
(7)移栽移栽時(shí)間10月12-22日將扦插播種成活的小苗移栽到預(yù)先準(zhǔn)備好的苗圃地，選擇地勢平坦，排水良好，土層深厚肥沃的土地建立苗圃地；
移栽方法移栽前將苗圃地做成長5m、寬2. 5 m的低床，施足底肥，然后將扦插苗按15cmX25 cm株行距進(jìn)行移栽,移栽深度2. 5 cm,移栽后及時(shí)燒透水；
移栽苗管理生長期每隔15 d葉面噴施有機(jī)復(fù)合肥100倍溶液，大田苗移栽后，移植苗 成活率達(dá)到96%以上；
所述的有機(jī)復(fù)合肥的制備方法為
該復(fù)合肥按照如下方法制備
(a)按所述重量份數(shù)選取配方量的原料；所述原料為尿素5-20%,磷酸一銨2-5%,硫酸鉀4-5%，磷酸二氫鉀4-6%，腐植酸10-15%，木質(zhì)素5-7%，BA3_5%，水5_10%，殼聚糖1-5%，硼砂3-7%，氯化鋅0. 5-1%，鑰酸鈉0. 05-0. 3%，硫酸錳0. 05-0. 1%，十二烷基苯磺酸鈉
0.05-0. 3%,硫酸亞鐵 0. 8-2%,硫酸鎂 0. 03-0. 8%,硫酸銅 0. 01-0. 05%, 二甲基亞砜 0. 2-2% ；大田作物秸桿2-10%，禽畜糞便2-3% ；
所述禽畜糞便為豬糞、牛糞、羊糞、雞鴨糞中的一種或任意幾種混合；
(b)將所述植物纖維粉碎為粉末；
(c)將所述禽畜糞便、植物纖維粉末混合、拌勻，在發(fā)酵池中堆置濕料發(fā)酵，上覆保濕保溫材料，經(jīng)過60小時(shí)后，堆內(nèi)溫度達(dá)到50-70°C時(shí)第一次翻堆，并每隔24小時(shí)翻堆一次，經(jīng)過3次翻堆后，發(fā)酵結(jié)束；
(d)將發(fā)酵產(chǎn)物與所述的尿素，磷酸一銨，硫酸鉀，磷酸二氫鉀，納米硫酸亞鐵，納米碳，腐植酸，木質(zhì)素，BA，水，殼聚糖，硼砂，氯化鋅，鑰酸鈉，硫酸錳，十二烷基苯磺酸鈉，硫酸亞鐵，硫酸鎂，硫酸銅，二甲基亞砜混合放入反應(yīng)釜中，用水溶解，在100-120°C下攪拌混合反應(yīng)2小時(shí)；待混合工藝完成后,用200目篩過濾溶液,去掉殘洛。有益效果本發(fā)明對長壽菜采用組織培養(yǎng)技術(shù)，以莖段和葉片為外植體，經(jīng)外植體滅菌、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽步驟，研究培養(yǎng)過程中試管苗的營養(yǎng)需求、激素對苗木生長分化的調(diào)控，解決盤葉忍冬的微體快速增殖、誘導(dǎo)生根的重要技術(shù)問題，建立了完善的盤葉忍冬組織培養(yǎng)體系，達(dá)到了高效誘導(dǎo)外植體分化增殖和高質(zhì)量保證幼苗成活的目的，并且保存了母體的全部優(yōu)良性狀，遺傳性狀穩(wěn)定。這種方法可在短期內(nèi)形成大量優(yōu)良試管苗，進(jìn)行規(guī)?；⒐S化生產(chǎn)，并具體具有一下優(yōu)點(diǎn)
1、本發(fā)明針對盤葉忍冬原產(chǎn)地的氣候特點(diǎn)，降低了組培過程中的培養(yǎng)溫度，并且延長了光照周期，增強(qiáng)了光強(qiáng)度，從而使培養(yǎng)環(huán)境更接近其原生地的氣候；
2、本發(fā)明通過對初代培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基配方的精確篩選，達(dá)到了增殖速度快、遺傳性狀穩(wěn)定、繁殖系數(shù)高、試管苗生長旺盛的優(yōu)良效果。3、在煉苗移栽中通過逐漸提高光照強(qiáng)度，并且在移栽過程中，逐漸降低濕度、嚴(yán)格控制溫度，采用合適的基質(zhì)配方，最終提高了生根試管苗的成活率。
4、后期管理中采用了復(fù)合有機(jī)肥，降低了藥殘，復(fù)合無公害蔬菜的生菜要求。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，下述實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，對本發(fā)明并沒有限制。一種臺(tái)灣長壽菜的快速繁殖方法，該方法包括下列步驟
(1)外植體的選擇于5 7月采取生長健壯的長壽菜葉片或塊莖作外植體；
(2)材料處理方法先用軟毛刷將外植體表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射10 min，轉(zhuǎn)入超凈工作臺(tái)，在超凈工作臺(tái)上先用70%的乙醇浸泡20-50秒，然后用 無菌水沖洗，再轉(zhuǎn)入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升汞溶液中浸泡5-7min，依時(shí)間長短用無菌水沖洗3 4次,最后在無菌條件下分割材料。莖段切割成0. I 0. 6 cm長，葉片分割成約0. 3 cm X0. 3 cm的小片；
(3)初代培養(yǎng)在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在 MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 2，4_D、0. 4mg/L 的 BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L蛋白酪、0. 5mg/L的GA，PH 6. 0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為2000-22001ux，待培養(yǎng)25天左右后，新芽長至3. Ocm左右時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
(4)繼代培養(yǎng)將初代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在3/4MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L 蛋白酪、0. 3mg/L 的IBA、0. 3mg/L的KT，PH 6. 0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為2000_22001ux，待新芽長至2. Ocm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
(5)生根培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在生根培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在1/3MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 6mg/L 的 IBA、0. 6mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，0. 4mg/L 的 NAA、
0.5mg/L蛋白酪、PH 6. 0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為22001ux，待新苗長至2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段；
(6)煉苗先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后解開封口膜，煉苗4d，煉苗期間適當(dāng)遮光，使光照強(qiáng)度為自然光的50%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒的重量比腐殖土 草炭珍珠巖蛭石=3 3 I 2的混合基質(zhì)中，溫度控制在29°C，前7d濕度控制在85%左右，以后逐漸降低濕度；
(7)移栽移栽時(shí)間10月12-22日將扦插播種成活的小苗移栽到預(yù)先準(zhǔn)備好的苗圃地，選擇地勢平坦，排水良好，土層深厚肥沃的土地建立苗圃地；
移栽方法移栽前將苗圃地做成長5m、寬2. 5 m的低床，施足底肥，然后將扦插苗按15cmX25 cm株行距進(jìn)行移栽,移栽深度2. 5 cm,移栽后及時(shí)燒透水；
移栽苗管理生長期每隔15 d葉面噴施有機(jī)復(fù)合肥100倍溶液，大田苗移栽后，移植苗成活率達(dá)到96%以上；
所述的有機(jī)復(fù)合肥的制備方法為
該復(fù)合肥按照如下方法制備
(a)按所述重量份數(shù)選取配方量的原料；所述原料為尿素5-20%,磷酸一銨2-5%,硫酸鉀4-5%，磷酸二氫鉀4-6%，腐植酸10-15%，木質(zhì)素5-7%，BA3_5%，水5_10%，殼聚糖1-5%，硼砂3-7%，氯化鋅0. 5-1%，鑰酸鈉0. 05-0. 3%，硫酸錳0. 05-0. 1%，十二烷基苯磺酸鈉0.05-0. 3%，硫酸 亞鐵 0. 8-2%，硫酸鎂 0. 03-0. 8%，硫酸銅 0. 01-0. 05%，二甲基亞砜 0. 2-2% ；大田作物秸桿2-10%，禽畜糞便2-3% ；
所述禽畜糞便為豬糞、牛糞、羊糞、雞鴨糞中的一種或任意幾種混合；
(b)將所述植物纖維粉碎為粉末；
(c)將所述禽畜糞便、植物纖維粉末混合、拌勻，在發(fā)酵池中堆置濕料發(fā)酵，上覆保濕保溫材料，經(jīng)過60小時(shí)后，堆內(nèi)溫度達(dá)到50-70°C時(shí)第一次翻堆，并每隔24小時(shí)翻堆一次，經(jīng)過3次翻堆后，發(fā)酵結(jié)束；
(d)將發(fā)酵產(chǎn)物與所述的尿素，磷酸一銨，硫酸鉀，磷酸二氫鉀，納米硫酸亞鐵，納米碳，腐植酸，木質(zhì)素，BA，水，殼聚糖，硼砂，氯化鋅，鑰酸鈉，硫酸錳，十二烷基苯磺酸鈉，硫酸亞鐵，硫酸鎂，硫酸銅，二甲基亞砜混合放入反應(yīng)釜中，用水溶解，在100-120°C下攪拌混合反應(yīng)2小時(shí)；待混合工藝完成后,用200目篩過濾溶液,去掉殘洛。
權(quán)利要求
1.一種臺(tái)灣長壽菜的快速繁殖方法，其特征在于該方法包括下列步驟 (1)外植體的選擇于5 7月采取生長健壯的長壽菜葉片或塊莖作外植體； (2)材料處理方法先用軟毛刷將外植體表面的灰塵輕輕刷去，用流水沖洗Ih后用紫外燈照射10 min，轉(zhuǎn)入超凈工作臺(tái)，在超凈工作臺(tái)上先用70%的乙醇浸泡20-50秒，然后用無菌水沖洗，再轉(zhuǎn)入滴加了 2 3滴土溫80的0. I %的升汞溶液中浸泡5-7min，依時(shí)間長短用無菌水沖洗3 4次,最后在無菌條件下分割材料,莖段切割成0. I 0. 6 cm長,葉片分割成約0. 3 cm X0. 3 cm的小片； (3)初代培養(yǎng)在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在 MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 2，4_D、0. 4mg/L 的 BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L蛋白酪、0. 5mg/L的GA，PH 6. 0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為2000-22001ux，待培養(yǎng)25天左右后，新芽長至3. Ocm左右時(shí)，即開始下一個(gè)階段； (4)繼代培養(yǎng)將初代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在繼代培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在3/4MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 5mg/L 的 6_BA、0. 4mg/L 的 NAA、0. 5mg/L 蛋白酪、0. 3mg/L 的IBA、0. 3mg/L的KT，PH 6. 0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為2000_22001ux，待新芽長至2. Ocm時(shí)，即開始下一個(gè)階段； (5)生根培養(yǎng)將繼代培養(yǎng)的外植體新芽剪下接種在生根培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基是在.1/3MS 常規(guī)培養(yǎng)基中添加了 0. 6mg/L 的 IBA、0. 6mg/L 的 NAA，0. 3mg/L 的 KT，0. 4mg/L 的 NAA、.0. 5mg/L蛋白酪、PH 6.0，培養(yǎng)溫度為24°C，光照周期13h/d，光強(qiáng)度為22001ux，待新苗長至2. 5cm時(shí)，即開始下一個(gè)階段； (6)煉苗先將培養(yǎng)瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后解開封口膜，煉苗4d，煉苗期間適當(dāng)遮光，使光照強(qiáng)度為自然光的50%，煉苗完成后取出小苗洗凈根部附著的培養(yǎng)基，移栽到經(jīng)消毒的重量比腐殖土 草炭珍珠巖蛭石=3 3 I 2的混合基質(zhì)中，溫度控制在29°C，前7d濕度控制在85%左右，以后逐漸降低濕度； (7)移栽移栽時(shí)間10月12-22日將扦插播種成活的小苗移栽到預(yù)先準(zhǔn)備好的苗圃地，選擇地勢平坦，排水良好，土層深厚肥沃的土地建立苗圃地； 移栽方法移栽前將苗圃地做成長5m、寬2. 5 m的低床，施足底肥，然后將扦插苗按15cmX25 cm株行距進(jìn)行移栽,移栽深度2. 5 cm,移栽后及時(shí)燒透水； 移栽苗管理生長期每隔15 d葉面噴施有機(jī)復(fù)合肥100倍溶液，大田苗移栽后，移植苗成活率達(dá)到96%以上； 所述的有機(jī)復(fù)合肥的制備方法為 該復(fù)合肥按照如下方法制備 (a)按所述重量份數(shù)選取配方量的原料；所述原料為尿素5-20%,磷酸一銨2-5%,硫酸鉀4-5%，磷酸二氫鉀4-6%，腐植酸10-15%，木質(zhì)素5-7%，BA3_5%，水5_10%，殼聚糖1-5%，硼砂3-7%，氯化鋅0. 5-1%，鑰酸鈉0. 05-0. 3%，硫酸錳0. 05-0. 1%，十二烷基苯磺酸鈉.0. 05-0. 3%,硫酸亞鐵 0. 8-2%,硫酸鎂 0. 03-0. 8%,硫酸銅 0. 01-0. 05%, 二甲基亞砜 0. 2-2% ；大田作物秸桿2-10%，禽畜糞便2-3% ； 所述禽畜糞便為豬糞、牛糞、羊糞、雞鴨糞中的一種或任意幾種混合； (b)將所述植物纖維粉碎為粉末； (c)將所述禽畜糞便、植物纖維粉末混合、拌勻，在發(fā)酵池中堆置濕料發(fā)酵，上覆保濕保溫材料，經(jīng)過60小時(shí)后，堆內(nèi) 溫度達(dá)到50-70°C時(shí)第一次翻堆，并每隔24小時(shí)翻堆一次，經(jīng)過3次翻堆后，發(fā)酵結(jié)束； (d)將發(fā)酵產(chǎn)物與所述的尿素，磷酸一銨，硫酸鉀，磷酸二氫鉀，納米硫酸亞鐵，納米碳，腐植酸，木質(zhì)素，BA，水，殼聚糖，硼砂，氯化鋅，鑰酸鈉，硫酸錳，十二烷基苯磺酸鈉，硫酸亞鐵，硫酸鎂，硫酸銅，二甲基亞砜混合放入反應(yīng)釜中，用水溶解，在100-120°C下攪拌混合反應(yīng)2小時(shí)；待混合工藝完成后,用200目篩過濾溶液,去掉殘洛。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種臺(tái)灣長壽菜的快速繁殖方法，主要通過對初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)以及煉苗移栽、后期管理的步驟，達(dá)到了增殖速度快、遺傳性狀穩(wěn)定、繁殖系數(shù)高、苗生長旺盛的優(yōu)良效果，愈傷組織的萌動(dòng)率達(dá)到了96%，增殖倍數(shù)達(dá)到了4.7倍，生根率達(dá)到了100%，最終的成活率達(dá)到了96%。
文檔編號(hào)C05G3/00GK102630447SQ201210085689
公開日2012年8月15日 申請日期2012年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月28日
發(fā)明者董國新 申請人:常熟市濱江農(nóng)業(yè)科技有限公司