專利名稱：耐受除草劑的植物的制作方法
耐受除草劑的植物
相關申請的交叉引用
本申請要求2010年I月7日提交的美國臨時申請?zhí)?1/293，165的權益，該美國臨時申請通過提及而以其整體合并入本文。發(fā)明領域
本發(fā)明涉及耐受除草劑的植物。
發(fā)明背景
P450形成一個大的多樣化的基因家族,在擬南芥屬(Arabidopsis)中鑒定出了大約246種同種型，和在水稻中鑒定出了 372種同種型。P450是血紅素蛋白，其將廣大范圍的底物轉化為或多或少具有生物活性的產物。P450在眾多代謝途徑(包括木質素和色素生物合成，有害化合物的解毒)中是關鍵性的，并且被認為在陸生植物的進化中是重要的。P450 活性的抑制劑包括I-氨基苯并三唑、四環(huán)唑、胡椒基丁醚和滅草環(huán)。
苯喃磺草胺(saflufenacil)是喃唳二酮化學類別的除草劑活性成分(A. I.)。苯嘧磺草胺是與丙炔氟草胺和甲磺草胺類似并且容易被植物的葉、根和莖干組織吸收的活性成分。據信苯嘧磺草胺在原卟啉原氧化酶(PPO)處抑制色素生物合成途徑，這引起快速損害細胞膜的光動力的毒性化合物的積累，并導致細胞死亡?？梢允褂眠@樣的除草組合物，其具有苯嘧磺草胺作為唯一 A. I.或者補充有草甘膦以管理廣譜的雙子葉雜草。已經將包含苯喃磺草胺的除草組合物列為用于在玉米、高粱、小麥、大麥、燕麥、黑麥、黑小麥 (triticale)、大豆和樹/堅果/藤蔓農作制度中的植前或苗前處理。含有苯嘧磺草胺的除草組合物在免耕和耕作農作制度這兩者中對于闊葉雜草均具有良好的葉和殘留活性。但是，在出苗后施用苯嘧磺草胺可以導致迅速且明顯的作物損傷。
在本領域中對于這樣的植物或植物部分仍然存在著需要，所述植物或植物部分展示出對于包含苯嘧磺草胺的除草組合物的耐受性。
發(fā)明簡述
在一個方面，本發(fā)明提供了植物或植物部分，其包含編碼CYP81A或CYP73A多肽的重組多核苷酸，所述CYP81A或CYP73A多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽，所述CYP72A15 多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一些方面，本發(fā)明提供了能夠萌發(fā)成為植物的種子，所述植物在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯B密磺草胺的耐受性。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽,所述 CYP72A15多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一個方面，本發(fā)明提供了植物的植物細胞或能夠再生出植物的植物細胞，所述植物在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物細胞包含與啟動子可操作地連接的所述重組多核苷酸。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽，所述 CYP72A15多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在另一個方面，本發(fā)明提供了植物細胞，其包含與在所述細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A或 CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予所述細胞以對于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表達賦予所述細胞以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在其他方面，本發(fā)明提供了從植物或植物部分制備的植物產品，所述植物或植物部分在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一些方面，本發(fā)明提供了后代或后裔植物，其源自在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸的植物，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述后代或后裔植物在至少一些其細胞中包含與所述啟動子可操作地連接的所述重組多核苷酸，所述多肽在所述后代或后裔植物中的表達賦予所述后代或后裔植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15 多肽，所述CYP72A15多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在其他方面，本發(fā)明提供了用于在用于植物生長的地點處控制雜草的方法，所述方法包括(a)向所述地點施用包含苯嘧磺草胺的除草劑組合物；和6)在所述地點種植種子，其中所述種子能夠產生在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸的植物，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A或 CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一些方面，本發(fā)明提供了用于在用于植物生長的地點處控制雜草的方法，所述方法包括向所述地點施用包含苯嘧磺草胺的除草組合物；其中所述地點為(a)包含植物或能夠產生所述植物的種子的地點；或者(b)待在進行所述施用后包含所述植物或所述種子的地點；其中所述植物或所述種子在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素 P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些實施方案中， 所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型。
在其他方面，本發(fā)明提供了產生具有對于苯嘧磺草胺的耐受性的植物的方法，所述方法包括從植物細胞再生出植物，所述植物細胞用與在所述細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸進行轉化，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A 或CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一個方面，本發(fā)明提供了產生具有對于苯嘧磺草胺的耐受性的后代植物的方法，所述方法包括使耐受苯嘧磺草胺的第一植物與第二植物雜交以產生耐受苯嘧磺草胺的后代植物，其中所述第一植物和所述后代植物在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予對于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表達賦予對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在更進一步的方面，本發(fā)明提供了植物或植物部分，所述植物或植物部分在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物或植物部分進一步展示出第二除草劑耐受性狀。在一些實施方案中，所述重組多核苷酸編碼CYP72A15多肽，所述CYP72A15 多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
附圖
簡述
圖I :呈現(xiàn)了安全劑和苯嘧磺草胺誘導的水稻和玉米P450基因表達的圖。將水稻、 小麥和玉米P450基因的表達顯示為相對于未噴灑的校驗對照而言的倍數(shù)變化(經log2變換的)。
圖2 :示意性的引導樹(guide tree)。將被鑒定用于在玉米、水稻和大豆轉基因系統(tǒng)中進行測試的序列進行比對，并制作引導樹。命名為0sCYP72Al、0sCYP72A15、NSFl的基因在本文所公開的一種或多種轉基因植物系統(tǒng)中賦予對于苯嘧磺草胺的耐受性。用在所有成對序列之間的距離的矩陣上工作的鄰接法(Neighbor Joining method (NJ)),使用 AlignX程序來產生所述引導樹，并且這些距離與所述序列之間的趨異水平相關。將計算出的關于每個分子的距離值展示在括號中。
圖3 :關于用200g ai/ha苯卩密磺草胺+1%MS0處理的獨立TO玉米事件的除草劑損傷得分。數(shù)字指明了落在特定的損傷得分內的事件的數(shù)目。損傷得分為0-9 :0為無損傷， 而9為死亡。未轉化的J553是對照。
圖4:關于用240g ai/ha Kixor+l%MS0處理的分離性獨立Tl玉米事件的除草劑損傷得分。數(shù)字指明了落在特定的損傷得分內的植物的數(shù)目。損傷得分為0-9 :0為無損傷， 而9為死亡。未轉化的J553是對照。
圖5 :關于用25g ai/ha苯卩密磺草胺+1%MS0處理的獨立TO轉基因大豆事件和野生型大豆事件(栽品種Williams 82)的插條的除草劑損傷得分。數(shù)字指明了落在特定的損傷得分內的事件的數(shù)目。損傷得分為0-9 0為無損傷，而9為死亡。
圖6 :來自如所示的那樣進行處理的TO大豆事件的插條的除草劑損傷。標明了苯嘧磺草胺的施用率。
圖7 :來自RTP3173 (ZmNSFl)轉化體的TO大豆插條的苯嘧磺草胺耐受性噴灑測試。在植物下面以g ai/ha標明了苯嘧磺草胺噴灑率。
發(fā)明詳述
定義
如本文中所使用的，“耐受...的”或“耐受除草劑的”是指在通常在非耐受性(例如，野生型)植物或其部分中引起生長抑制的除草劑量存在下能夠生長的植物或其植物部分。通常抑制非耐受性植物生長的除草劑水平是已知的，并且可由本領域技術人員容易地確定。實例包括由制造商推薦用于施用的量。最大比率是通常會抑制非耐受性植物生長的除草劑量的實例。
對于本發(fā)明，術語“耐受除草劑的”和“抗除草劑的”可互換使用，并且意在具有相等的含義和相等的范圍。類似地，術語“除草劑耐受性”和“除草劑抗性”可互換使用，并且意在具有相等的含義和相等的范圍。類似地，術語“耐受...的”和“抗...的”可互換使用，并且意在具有相等的含義和相等的范圍。
如本文中關于在其各種實施方案中有用的除草組合物而使用的，諸如PPO抑制劑 (例如，苯嘧磺草胺)、乙酰羥酸合酶(AHAS)抑制劑、乙酰輔酶A羧化酶(ACCase)抑制劑、 5_烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)抑制劑、咪唑啉酮類、磺酰脲類等的術語，是指那些在本領域中認可的在農藝學上可接受的除草劑活性成分(A. I.)。類似地，諸如殺真菌劑、殺線蟲劑、殺蟲劑等的術語，是指其他在本領域中認可的在農藝學上可接受的活性成分。
當關于特定的突變型酶或多肽進行使用時，諸如“耐受除草劑的”和“除草劑耐受性”的術語是指此類酶或多肽在通常會使所述酶或多肽的野生型(非突變型)形式的活性失活或抑制所述酶或多肽的野生型(非突變型)形式的活性的除草劑A. I.量存在下執(zhí)行其生理學活性的能力。例如，當特別地關于AHAS酶或AHASL多肽進行使用時，它特別地是指耐受AHAS抑制劑的能力。AHAS抑制劑的類別包括，磺酰脲類、咪唑啉酮類、三唑并嘧啶類、磺?；被驶蜻惡袜奏せ趸鵞硫基]苯甲酸酯類。在其中待使用咪唑啉酮類除草劑的一些實施方案中，所述AHASL優(yōu)選地為包含至少一個位于氨基酸殘基位置122、205、 574或653 (擬南芥(Arabidopsis thaliana)AHASL編號)處的除草劑耐受性突變的AHASL ； 和在其中待使用磺酰脲類除草劑的一些實施方案中，所述AHASL優(yōu)選地為包含至少一個位于氨基酸殘基位置197或574 (擬南芥AHASL編號)處的除草劑耐受性突變的AHASL。
如本文中所使用的，“重組(的)”，當涉及核酸或多肽時，是指此類物質已經由于人工應用重組技術(例如通過多核苷酸限制酶切和連接，通過多核苷酸重疊延伸，或者通過基因組插入或轉化)而被改變了。基因序列開放閱讀框是重組的，如果該核苷酸序列已從其天然環(huán)境中移除并克隆到任何類型的人工核酸載體中。術語“重組(的)”還可以指具有重組物質的生物，例如包含重組核酸的植物可以被認為是重組植物。
術語“轉基因植物”是指包含異源多核苷酸的植物。優(yōu)選地，所述異源多核苷酸穩(wěn)定地整合在基因組內，從而該多核苷酸傳遞至相繼世代?？蓪⑺霎愒炊嗪塑账釂为毜鼗蛘咭宰鳛橹亟M表達盒的一部分的方式整合到基因組中。本文中所使用的“轉基因(的)”是指其基因型已通過異源核酸的存在而如此改變了的任何細胞、細胞系、愈傷組織、組織、植物部分或植物，包括最初就如此改變了的那些轉基因生物或細胞，以及從最初的轉基因生物或細胞通過雜交或無性繁殖而產生的那些。在一些實施方案中，“重組(的)”生物是“轉基因(的)”生物。如本文中所使用的，術語“轉基因(的)”并不意在包括通過常規(guī)的植物育種方法(例如，雜交)或者通過天然發(fā)生的事件(例如，自體受精、隨機雜交-受精、非重組病毒感染、非重組細菌轉化、非重組轉座或自發(fā)突變)而引起的基因組(染色體的或染色體外的) 的改變。
如本文中所使用的，“經誘變的”是指相比于相應野生型生物的遺傳物質或DNA的序列而言在其天然遺傳物質的生物分子序列中具有改變的生物或其DNA，其中所述在遺傳物質中的改變通過人工作用來進行誘導和/或選擇?？梢杂糜诋a生經誘變的生物或DNA的人工作用的實例包括但不限于，如關于除草劑耐受性而舉例說明的植物細胞(例如，愈傷組織)的組織培養(yǎng)和用除草劑(例如，苯嘧磺草胺)進行的其選擇；用化學誘變劑處理植物細胞，并隨后用除草劑進行選擇；或者，用X-射線處理植物細胞，并隨后用除草劑進行選擇。 可以使用本領域中已知的任何方法來誘導突變。誘導突變的方法可以在遺傳物質中的隨機位置處誘導突變，或者可以在遺傳物質中的特定位置處誘導突變(即，可以為定向誘變技術)，例如通過使用基因整形術(genoplasty)技術。
如本文中所使用的，“基因改造生物”(GMO)是其遺傳特征包含通過引起轉染的人工努力而產生的改變的生物，所述轉染導致用來自另一或“源”生物的遺傳物質或者用合成的或經修飾的天然遺傳物質轉化了靶生物；或者是作為保留了所插入的遺傳物質的其后裔的生物。源生物可以為不同的生物類型(例如，GMO植物可以包含細菌的遺傳物質)，或者來自相同的生物類型(例如，GMO植物可以包含來自另一植物的遺傳物質)。如本文中關于植物和其他生物而使用的，“重組的/重組體”、“轉基因的”和“GM0”被認為是同義詞，并且表明來自不同來源的遺傳物質的存在；相反地，“經誘變的”用于指這樣的植物或其他生物，或者其DNA，其中沒有此類轉基因物質存在，但其中天然遺傳物質已被突變從而不同于相應野生型生物或DNA。
如本文中所使用的，“野生型”或“相應野生型植物”表示生物或其遺傳物質的典型形式，正如它通常出現(xiàn)的那樣，其區(qū)別于例如經誘變的和/或重組的形式。
如本文中所使用的，“后裔(descendant)”是指任何代的植物。在一些實施方案中， 后裔為第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九或第十代的植物。
如本文中所使用的，“后代(progeny)”是指第一代的植物。
術語“種子”包括所有類型的種子，例如真正的種子(或實生種子)(true seed)、 穎果、瘦果、果實、塊莖、幼苗和類似形式。在蕓苔屬(Brassica)和白芥屬(Sinapis)物種的情形下，“種子”是指真正的種子，除非另有說明。例如，該種子可以是轉基因植物或通過傳統(tǒng)育種方法獲得的植物的種子。傳統(tǒng)育種方法的實例可以包括，雜交育種、自交、回交、胚胎拯救、品種內異系雜交(in-crossing)、異型雜交(out-crossing)、近交、選擇、無性繁殖和其他本領域中已知的傳統(tǒng)技術。
盡管關于特定的植物或植物品種及其雜種進行了舉例，但在各種不同的實施方案中，可以將目前所描述的使用苯嘧磺草胺的方法用于各種商業(yè)上有價值的植物?？梢詫⒃诒疚闹斜幻枋鰹橛杏玫哪褪鼙洁谆遣莅返闹参锲废抵苯拥鼗蜷g接地(即要么作為用于除草劑處理的作物；要么作為苯嘧磺草胺耐受性性狀供體品系以用于進行開發(fā)，如通過傳統(tǒng)植物育種，從而產生包含此類性狀的其他變種作物和/或雜種作物)用在雜草控制方法中。在本文中可以將所有此類所得的包含祖先苯嘧磺草胺耐受性性狀的品種或雜種作物都稱為祖先的耐受苯嘧磺草胺的品系的后代或后裔。可以說此類所得的植物保留了祖先植物的 “除草劑耐受性特征”，即意味著它們具有并表達負責該性狀的祖先遺傳分子組分。721jmaflgwavdi vqrsqf tnhl qrIspdsqqvThllleaqapl llgrgnggaa spgcarecftvglmsgliagtdpdtdmsverrlidaerrrsewamslllnlphessadckgmgrrrcpgerdamggvlreardsgasssv apangtgggg svlaeshcdl gikadalsqi rlppgppavp ehdvtfanrp evramvrrmy aqef kqwde lddgdegekk hpdtIkkaqa vggyniprgs tlalrtrvglv IvTltcdgygsasrtgvkeeasasgnwkeisiaavhqslirnt i IghlhlTkk rfesqllraf raaaaspaga iiphigaanl smiavlltlq eidasvgnsr mllinayaih X g tlx cjc f (3wlyfspwdsvp evlswpptsk Mikkmpsstt shirelslam pmhatmsrla ngaalatasy ariqlkrrlf wdyipalrwf ktepevytdn litaddvtrl rdpavweepe ervdgvevdmlpataspddg qsvrrlevae tktttpsrda dnayiiails erygpvfslr gahwrnlrri evslsvlmet dvfgvrrkil mitaltanlf gylqcivret kfmperfedg tegggltipkfllprfpdvc hwyrlyktdn wivsarsdpf vailfllhyy Igsrravws vavqllsahr iahtkatrpe aavsrrdafI gagtettstt lrlypaapml gcdgnllmpf wpleamcrp
編碼CYP81A6多肽的核酸序列顯示在表2中。
表2. SEQ ID NO:2。
在一個方面，本發(fā)明提供了植物或植物部分，其包含編碼細胞色素P450多肽的重組多核苷酸，所述細胞色素P450多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一些實施方案中，所述細胞色素P450多肽為CYP81A同種型或CY73A同種型多肽。在其他實施方案中，所述細胞色素P450多肽為CYP81A6、NSF1、CYP73A38或CYP72A15。 在一個實施方案中，所述CYP81A同種型為CYP81A6或NSF1。
在其他實施方案中，本發(fā)明提供了植物或植物部分，其包含編碼細胞色素P450多肽的重組多核苷酸，所述細胞色素P450多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯喃磺草胺的耐受性，條件是所述P450多肽為除了 NSFl之外的其他細胞色素P450。在另一個實施方案中，所述NSFl是除了玉米NSFl之外的。
CYP81A6氨基酸序列由例如GenBank登錄號AAK63920. I (其通過提及而以其整體合并入本文)公開。
在一個實施方案中，本發(fā)明的植物或植物部分包含編碼CYP81A6多肽的重組多核苷酸，所述CYP81A6多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性。在另一個實施方案中，所述CYP81A6多肽為水稻多肽。在其他實施方案中，所述CYP81A6多肽具有SEQ ID NO: I中所示的氨基酸序列(表I)。
表I. SEQ ID NO: I。
I611211812413013614214815416016611權利要求
1.植物或植物部分，其包含編碼細胞色素P450多肽的重組多核苷酸，所述細胞色素 P450多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽為 CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
2.權利要求I的植物或植物部分，其中CYP72A15多肽為水稻多肽或其直向同源物，其中所述水稻多肽具有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列。
3.權利要求I的植物或植物部分，其中CYP81A的同種型為水稻CYP81A6多肽或其直向同源物，其中所述水稻CYP81A6多肽具有SEQ ID NO: I或SEQ ID NO: 29中所示的氨基酸序列。
4.權利要求I的植物或植物部分，其中CYP73多肽為水稻CYP73A38多肽或其直向同源物，其中所述水稻CYP73A38多肽具有SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列。
5.能夠萌發(fā)成為植物的種子，所述植物在至少一些其細胞中包含與在所述植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
6.植物的植物細胞或能夠再生出植物的植物細胞，所述植物在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物細胞包含與啟動子可操作地連接的所述重組多核苷酸，其中所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米 NSFl多肽。
7.植物細胞，其包含與在所述細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸， 所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予所述細胞以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A 的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
8.從植物或植物部分制備的植物產品，所述植物或植物部分在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
9.后代或后裔植物，其源自在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸的植物，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述后代或后裔植物在至少一些其細胞中包含與所述調控序列可操作地連接的所述重組多核苷酸，所述多肽在所述后代或后裔植物中的表達賦予所述后代或后裔植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
10.用于在用于植物生長的地點處控制雜草的方法，所述方法包括向所述地點施用包含苯嘧磺草胺的除草劑組合物；其中所述地點為(a)包含植物或能夠產生所述植物的種子的地點；或者(b)待在進行所述施用后包含所述植物或所述種子的地點；其中所述植物或所述種子在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素 P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽為 CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
11.權利要求10的方法，其中步驟(a)在步驟(b)之前、在步驟(b)之后或與步驟(b) 同時發(fā)生。
12.權利要求10的方法，其中向所述雜草和向由所述種子產生的植物施用除草劑組合物。
13.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含除草有效的咪唑啉酮類。
14.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含咪唑乙煙酸。
15.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含甲咪唑煙酸。
16.權利要求10的方法,其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含咪唑喹啉酸。
17.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含咪草啶酸。
18.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含咪唑煙酸。
19.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含除草有效的磺酰脲類。
20.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含煙嘧磺隆。
21.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含甲磺隆。
22.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含噻吩磺隆。
23.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含苯磺隆。
24.權利要求10的方法，其中向所述地點施用的所述除草劑組合物進一步包含嘧草硫醚。
25.產生具有對于苯嘧磺草胺的耐受性的植物的方法，所述方法包括從植物細胞再生出植物，所述植物細胞用與在所述細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸進行轉化，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A 或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
26.產生具有對于苯嘧磺草胺的耐受性的后代植物的方法，所述方法包括使耐受苯嘧磺草胺的第一植物與第二植物雜交以產生耐受苯嘧磺草胺的后代植物，其中所述第一植物和所述后代植物在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A或 CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
27.植物或植物部分，所述植物或植物部分在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物或植物部分進一步展示出第二除草劑耐受特征，其中所述多肽為 CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
28.權利要求27的植物，其中所述第二除草劑耐受特征為咪唑啉酮類除草劑耐受性。
29.權利要求5的種子，其中所述種子具有布置在其表面上的包含至少一種農藝學上可接受的活性成分(A. I.)的組合物。
30.權利要求5的種子，其中所述種子具有布置在其表面上的包含至少一種農藝學上可接受的殺真菌、殺線蟲或殺昆蟲的A. I.或其組合的組合物。
31.權利要求5的種子，其中所述種子具有布置在其表面上的包含至少一種農藝學上可接受的除草、殺真菌、殺線蟲或殺昆蟲的A. I.或其組合的組合物，條件是所述除草的 A. I.不是苯嘧磺草胺A. I.。
32.用于制備經處理的種子的方法，所述方法包括提供權利要求5的種子，并且對其施用種子處理組合物。
33.用于用農藝學上可接受的組合物來處理權利要求I的植物的方法，所述方法包括使所述農藝學上可接受的組合物與所述植物相接觸，其中所述組合物包含苯嘧磺草胺。
34.用于用農藝學上可接受的組合物來處理權利要求I的植物的方法，所述方法包括使所述農藝學上可接受的組合物與所述植物相接觸，條件是所述組合物不含苯嘧磺草胺 A. I.。
35.權利要求33的方法，其中所述組合物進一步包含殺真菌劑、殺昆蟲劑或殺線蟲劑。
36.用于用農藝學上可接受的組合物來處理權利要求I的種子的方法，所述方法包括使所述農藝學上可接受的組合物與所述種子相接觸，其中所述組合物包含苯嘧磺草胺。
37.權利要求36的方法，其中所述組合物進一步包含殺真菌劑、殺昆蟲劑或殺線蟲劑。
38.用于制備后裔種子的方法，所述方法包括種植權利要求I的植物的種子或能夠產生權利要求I的植物的種子。
39.權利要求38的方法，其進一步包括從所述種子生長出后裔植物。
40.權利要求39的方法，其進一步包括從所述后裔植物收獲后裔種子。
41.權利要求39的方法，其進一步包括向所述后裔植物施用生長素除草組合物。
42.用于從權利要求I的植物生產植物產品的方法，所述方法包括加工所述植物或其植物部分以獲得植物產品。
43.權利要求42的方法，其中所述植物產品為草料、種 子磨粉、油或種子處理包衣種子。
44.權利要求42的方法，其中所述植物部分為種子。
45.從植物或其植物部分獲得的植物產品，其中所述植物或植物部分在至少一些其細胞中包含與在植物細胞中可操作的啟動子可操作地連接的重組多核苷酸，所述啟動子能夠表達由所述多核苷酸編碼的細胞色素P450多肽，所述多肽的表達賦予所述植物或植物部分以對于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物或植物部分進一步展示出第二除草劑耐受特征，其中所述多肽為CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同種型，條件是CYP81A的同種型不是玉米NSFl多肽。
46.權利要求45的植物產品，其中所述產品為草料、種子磨粉、油或種子處理包衣種子。
全文摘要
本發(fā)明提供了耐受苯嘧磺草胺(saflufenacil)的植物。本發(fā)明還提供了用于通過施用本發(fā)明的耐受苯嘧磺草胺的植物對其耐受的苯嘧磺草胺來控制雜草生長的方法。本發(fā)明的植物表達細胞色素P450多肽，所述細胞色素P450多肽的表達賦予所述植物以對于苯嘧磺草胺的耐受性。
文檔編號A01H5/10GK102946715SQ201180009409
公開日2013年2月27日 申請日期2011年1月7日 優(yōu)先權日2010年1月7日
發(fā)明者S·L·麥金, D·R·卡爾森, R·賴爾布爾, J·M·史蒂文遜-鮑利克, M·帕斯特納克, A·韋爾澤爾 申請人:巴斯福農業(yè)有限責任公司阿納姆(荷蘭)韋登斯維爾分公司