專利名稱：野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種野生地被植物組織培養(yǎng)快繁技術(shù)，尤其涉及一種野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法。
背景技術(shù)：
中國野生百里香資源豐富，在中國主要分布于“三北”地區(qū)海拔1100-3600m左右的多石山地、砂質(zhì)地等干旱向陽環(huán)境。蒙古百里香(Thymus mongolicus Rorm.)是唇形科百里香屬(Thymus)植物，多年生矮小半灌木，野外常呈地毯狀分布，枝、葉、花具有強(qiáng)香味。 抗旱性很強(qiáng)，可作為優(yōu)良的節(jié)水型園林綠化材料在城市園林綠地中應(yīng)用。目前，還沒有一種實(shí)用的野生蒙古百里香的快速繁殖的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，包括步驟培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度24士2°C，光照度3000士 lOOLux，光照12士 lh. cf1 ；無菌材料的獲得選取生長健壯、無病蟲害的野生蒙古百里香植株，剪取帶腋芽的莖段并進(jìn)行無菌處理，制成無菌莖段；不定芽的分化將上述處理好的無菌莖段，在超凈工作臺上剪切成2 3cm長帶有 2 3個腋芽的莖段，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)至腋芽處長出小芽，并分化出多個叢生芽；叢生芽快速增殖當(dāng)分化出的叢生芽長到Icm以上時，將叢生芽剪切為每叢2至3 個芽，接種到增殖培養(yǎng)基上，形成新的叢生芽，再將新的叢生芽接種到相同的增殖培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，繁殖叢生芽小苗；由上述本發(fā)明提供的技術(shù)方案可以看出，本發(fā)明提供的野生蒙古百里香(Thymus mongolicus Ronn.)組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，由于在無菌材料的獲得、不定芽的分化、叢生芽快速增殖等技術(shù)環(huán)節(jié)。通過嚴(yán)格的多重比較試驗(yàn)研究，從不同的培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基的配方、培養(yǎng)條件及移栽基質(zhì)的組成和配比等有獨(dú)到的創(chuàng)新，成活率可以在80%左右。應(yīng)用本發(fā)明建立野生蒙古百里香快繁技術(shù)體系，進(jìn)行人工繁殖，能加速野生蒙古百里香的擴(kuò)繁，可作為優(yōu)良的節(jié)水型園林綠化地被植物應(yīng)用。
具體實(shí)施例方式下面將對本發(fā)明實(shí)施例作進(jìn)一步地詳細(xì)描述。本發(fā)明的野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，其較佳的具體實(shí)施方式
包括步驟培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度24士2°C，光照度3000士 lOOLux，光照12士 lh. cf1 ；
無菌材料的獲得選取生長健壯、無病蟲害的野生蒙古百里香植株，剪取帶腋芽的莖段并進(jìn)行無菌處理，制成無菌莖段；不定芽的分化將上述處理好的外植體材料，在超凈工作臺上剪切成2 3cm長帶有2 3個腋芽的莖段，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，接種后4d時，腋芽明顯膨大，培養(yǎng)15d 時，腋芽處長出小芽，并分化出多個叢生芽；叢生芽快速增殖當(dāng)分化出的叢生芽長到Icm以上，將叢生芽剪切為每叢2至3個芽，接種到增殖培養(yǎng)基上，形成新的叢生芽，再將新的叢生芽接種到相同的增殖培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，繁殖叢生芽小苗；增殖系數(shù)為22. 5。所述培養(yǎng)條件具體可以為培養(yǎng)溫度M±2°C，光照度3000LUX，光質(zhì)為熒光燈，光照 12h. cT1。所述無菌材料的獲得過程中對莖段并進(jìn)行無菌處理的步驟具體可以包括對帶腋芽的莖段沖洗表面，然后用洗滌靈溶液浸泡lOmin，流水沖洗30min后，在超凈工作臺上，用 75%酒精浸泡30s消毒，無菌水沖洗3遍，再用0. 1 %升汞浸泡8min，用無菌水沖洗5次，切掉與藥液接觸部位。所述不定芽的分化的步驟中所述叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方可以為MS+蔗糖30g/ L+ 瓊脂 7g/L+6-BA 0. 5mg/L+IAA0. lmg/L, ρΗ5· 8-6. O ；所述無菌莖段在叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)21天后，每個莖段可誘導(dǎo)出叢生芽數(shù)量 5-10 個。所述叢生芽快速增殖步驟中所述增殖培養(yǎng)基的配方可以為MS+蔗糖30g/L+瓊月旨 7g/L+6-BA lmg/L+IAAO. 5mg/L, ρΗ5·8-6.O。所述叢生芽快速增殖步驟中當(dāng)叢生芽長到Icm以上以上，將叢生芽剪切為每叢2 至3個芽，接種到增殖培養(yǎng)基上，可形成新的叢生芽。再接種到相同的培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)， 可繁殖大量的叢生芽，增殖系數(shù)為22. 5。通過本發(fā)明的方法進(jìn)行人工繁殖的野生蒙古百里香作為節(jié)水型園林綠化植物。 具體實(shí)施例培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度，光照度3000LUX，光質(zhì)為熒光燈，光照12h. cf1。無菌材料的獲得選取生長健壯、無病蟲害的植株，剪取帶腋芽的莖段，沖洗表面， 洗滌靈溶液浸泡lOmin，流水沖洗30min后，在超凈工作臺上，用75%酒精浸泡30s消毒，無菌水沖洗3遍，再用0. 1 %升汞浸泡8min，用無菌水沖洗5次，切掉與藥液接觸部位，備用。不定芽的分化將無菌莖段接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基的配方為MS+蔗糖 30g/L+ 瓊脂 7g/L+6-BA 0. 5mg/L+IAA0. lmg/L, pH5. 8-6. 0，培養(yǎng) 14 天后，腋芽處長出小芽， 21天分化出較多的叢生芽，每個莖段可誘導(dǎo)出叢生芽數(shù)量5-10個。叢生芽快速增殖當(dāng)叢生芽長到Icm以上以上，將叢生芽剪切為每叢2至3個芽， 接種到增殖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基的配方為MS+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L+6-BA lmg/L+IAAO. 5mg/ L，pH5. 8-6.0，可形成新的叢生芽。再接種到相同的培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，可繁殖大量的叢生芽，增殖系數(shù)為22.5。本發(fā)明的野生蒙古百里香(Thymus mongolicus Rorm.)組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，包括無菌材料的獲得、不定芽的分化、叢生芽快速增殖等技術(shù)環(huán)節(jié)。通過嚴(yán)格的多重比較試驗(yàn)研究，從不同的培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基的配方、培養(yǎng)條件及移栽基質(zhì)的組成和配比等有獨(dú)到的創(chuàng)新，成活率可以在80%左右。應(yīng)用本發(fā)明建立野生蒙古百里香快繁技術(shù)體系，進(jìn)行人工繁殖，能加速野生蒙古百里香的擴(kuò)繁，可作為優(yōu)良的節(jié)水型園林綠化地被植物應(yīng)用。 以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式
，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此， 任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換， 都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，其特征在于，包括步驟培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度M±2°C，光照度3000士 lOOLux，光照12士 lh. cf1 ；無菌材料的獲得選取生長健壯、無病蟲害的野生蒙古百里香植株，剪取帶腋芽的莖段并進(jìn)行無菌處理，制成無菌莖段；不定芽的分化將上述處理好的無菌莖段，在超凈工作臺上剪切成2 3cm長帶有2 3個腋芽的莖段，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)至腋芽處長出小芽，并分化出多個叢生芽；叢生芽快速增殖當(dāng)分化出的叢生芽長到Icm以上時，將叢生芽剪切為每叢2至3個芽，接種到增殖培養(yǎng)基上，形成新的叢生芽，再將新的叢生芽接種到相同的增殖培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，繁殖叢生芽小苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，其特征在于，所述培養(yǎng)條件具體為培養(yǎng)溫度M±2°C，光照度3000LUX，光質(zhì)為熒光燈，光照12h. cT1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，其特征在于，所述無菌材料的獲得過程中對莖段并進(jìn)行無菌處理的步驟具體包括對帶腋芽的莖段沖洗表面，然后用洗滌靈溶液浸泡IOmin，流水沖洗30min后，在超凈工作臺上，用75%酒精浸泡30s消毒，無菌水沖洗3遍，再用0. 1 %升汞浸泡8min，用無菌水沖洗5次，切掉與藥液接觸部位。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，其特征在于，所述不定芽的分化的步驟中所述叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+蔗糖30g/L+瓊脂 7g/L+6-BA 0. 5mg/L+IAA0. lmg/L, ρΗ5·8-6.0 ；所述無菌莖段在叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)21天后，每個莖段誘導(dǎo)出叢生芽數(shù)量5-10個。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野生蒙古百里香組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，其特征在于，所述叢生芽快速增殖步驟中所述增殖培養(yǎng)基的配方為MS+蔗糖30g/L+瓊脂7g/ L+6-BA lmg/L+IAAO. 5mg/L, ρΗ5·8-6.0。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種野生蒙古百里香(Thymus mongolicus Ronn.)組織培養(yǎng)叢芽誘導(dǎo)、快速增殖方法，包括無菌材料的獲得、不定芽的分化、叢生芽快速增殖等技術(shù)環(huán)節(jié)。通過嚴(yán)格的多重比較試驗(yàn)研究，從不同的培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基的配方、培養(yǎng)條件及移栽基質(zhì)的組成和配比等有獨(dú)到的創(chuàng)新，成活率可以在80％左右。應(yīng)用本發(fā)明建立野生蒙古百里香快繁技術(shù)體系，進(jìn)行人工繁殖，能加速野生蒙古百里香的擴(kuò)繁，可作為優(yōu)良的節(jié)水型園林綠化地被植物應(yīng)用。
文檔編號A01H4/00GK102524060SQ201110346229
公開日2012年7月4日 申請日期2011年11月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月4日
發(fā)明者于涵, 劉冬梅, 劉廣亮, 吳宗凱, 吳巖, 唐進(jìn)群, 徐榮, 王玉圳, 賈建中, 陳戰(zhàn)是, 馬玉 申請人:北京市園林學(xué)校