專利名稱：野生冬蟲夏草菌種無性繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
目前，冬蟲夏草的菌種人工繁殖大多采用人工栽培的蟲草進(jìn)行組織分離，該方法存在的問題是1、菌株活性差，易受霉菌、細(xì)菌污染，致使產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定。2、變異速度快， 致使蟲草有效營養(yǎng)成分偏低，嚴(yán)重時導(dǎo)致弱株、病株、甚至絕產(chǎn)。3、菌株P(guān)DA培養(yǎng)基營養(yǎng)成分偏低，C:N比不合理。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種野生冬蟲夏草菌種無性繁殖方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)菌株活性差，易受霉菌、細(xì)菌污染，致使產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定。變異速度快，致使蟲草有效營養(yǎng)成分偏低，嚴(yán)重時導(dǎo)致弱株、病株、甚至絕產(chǎn)。菌株P(guān)DA培養(yǎng)基營養(yǎng)成分偏低，C:N比不合理等問題。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是采用野生冬蟲夏草的活體細(xì)胞為菌株，利用特制的PDA培養(yǎng)基，通過克隆技術(shù)，獲得適宜人工栽培的蟲草菌種；其PDA培養(yǎng)基組分及配比為水950-1050g、馬鈴薯280-320g、蛋白胨4_8g、磷酸二氫鉀3_5g、硫酸鎂l_2g、 瓊脂15-20g、葡萄糖18-23g，ph值6. 0-7. 0。其菌株制作工藝如下
1、選取活體細(xì)胞到青海、西藏等野生冬蟲夏草原產(chǎn)地獲取野生菌株，在無菌條件下接種，采用上述培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。2、馴化菌株降低培養(yǎng)箱內(nèi)氧氣含量20-30%，溫度18-22°C，濕度55-70%模擬野生菌株的自然環(huán)境。3、提純?nèi)コ跣【昕裹c，保留活性較高生長正常的菌絲，生長期25-35天。4、復(fù)壯對經(jīng)提純的菌絲進(jìn)行轉(zhuǎn)管2-3次，生長期35-40天，獲取優(yōu)良的蟲草母種。本發(fā)明的積極效果是菌株P(guān)DA培養(yǎng)基營養(yǎng)成分合理，菌株活性高，不易受霉菌、細(xì)菌污染，菌種質(zhì)量穩(wěn)定，菌種不變異。蟲草有效營養(yǎng)成分含量高，獲得優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)子實體。
具體實施例方式本發(fā)明技術(shù)方案具體實施步驟如下
1、選取活體細(xì)胞到青海、西藏等野生冬蟲夏草原產(chǎn)地獲取野生菌株，在無菌條件下接種，所采用培養(yǎng)基組分配比為水970、馬鈴薯310、蛋白胨5、磷酸二氫鉀4、硫酸鎂2、瓊脂 20、葡萄糖18，ph值6。2、馴化菌株降低培養(yǎng)箱內(nèi)氧氣含量20%，溫度19°C，濕度60%，模擬野生菌株的自然環(huán)境，生長期15天左右。3、提純?nèi)コ跣【昕裹c，保留活性較高生長正常的菌絲，生長期30天左右。4、復(fù)壯對經(jīng)提純的菌絲進(jìn)行轉(zhuǎn)管2-3次，生長期40天，獲取優(yōu)良的蟲草菌種母種。
權(quán)利要求
1. 一種野生冬蟲夏草菌種無性繁殖方法，其特征是采用野生冬蟲夏草的活體細(xì)胞為菌株，利用特制的PDA培養(yǎng)基，通過克隆技術(shù)，獲得適宜人工栽培的蟲草菌種；其PDA培養(yǎng)基組分及配比為水950-1050g、馬鈴薯280-320g、蛋白胨4_8g、磷酸二氫鉀3_5g、硫酸鎂l_2g、 瓊脂15-20g、葡萄糖18-23g，ph值6. 0-7. 0，其菌株制作工藝如下(1)選取活體細(xì)胞到青海、西藏等野生冬蟲夏草原產(chǎn)地獲取野生菌株，在無菌條件下接種，采用上述培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；(2)馴化菌株降低培養(yǎng)箱內(nèi)氧氣含量20-30%，溫度18-22°C，濕度55-70%模擬野生菌株的自然環(huán)境；(3)提純?nèi)コ跣【昕裹c，保留活性較高生長正常的菌絲，生長期25-35天；(4)復(fù)壯對經(jīng)提純的菌絲進(jìn)行轉(zhuǎn)管2-3次，生長期35-40天，獲取優(yōu)良的蟲草母種。
全文摘要
一種野生冬蟲夏草菌種無性繁殖方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。該繁育方法采用野生冬蟲夏草的活體細(xì)胞為菌株，利用特制的PDA培養(yǎng)基，通過克隆技術(shù)，獲得適宜人工栽培的蟲草菌種；其PDA培養(yǎng)基組分及配比為水950-1050g、馬鈴薯280-320g、蛋白胨4-8g、磷酸二氫鉀3-5g、硫酸鎂1-2g、瓊脂15-20g、葡萄糖18-23g，ph值6.0-7.0。經(jīng)(1)選取活體細(xì)胞、(2)馴化菌株、(3)提純、(4)復(fù)壯獲取優(yōu)良的蟲草母種。本發(fā)明菌株P(guān)DA培養(yǎng)基營養(yǎng)成分合理，菌株活性高，不易受霉菌、細(xì)菌污染，菌種質(zhì)量穩(wěn)定，菌種不變異。蟲草有效營養(yǎng)成分含量高，獲得優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)子實體。
文檔編號A01G1/04GK102187786SQ201110073128
公開日2011年9月21日 申請日期2011年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月25日
發(fā)明者杜保華 申請人:杜保華