專利名稱：抗微生物組合物的制作方法
抗微生物組合物本發(fā)明涉及抗微生物組合物，也稱為防腐劑或消毒劑的領(lǐng)域。理想地，防腐劑或消毒劑應(yīng)當(dāng)顯示出寬抗微生物譜，具有有效力的殺菌活性和快速活性開始，并結(jié)合持久的作用。這樣的制劑對(duì)于宿主組織應(yīng)當(dāng)是無毒的，并且不應(yīng)當(dāng)干擾受感染宿主中的痊愈或恢復(fù)效果。使用包括銀化合物的不同殺生物劑的研究推斷出離子銀在較低濃度下殺滅寬范圍的微生物。因此，將銀化合物用于臨床實(shí)踐中。在其他研究中，細(xì)胞毒性和微生物活性的聯(lián)合評(píng)價(jià)表明了銀化合物損害宿主細(xì)胞比損害測(cè)試生物體更嚴(yán)重。然而，這種毒性強(qiáng)烈地依賴于所用的介質(zhì)。不過降低殺生物劑對(duì)宿主組織的脅迫是重要的。與過氧化物結(jié)合的銀通常會(huì)誘發(fā)對(duì)宿主的氧化應(yīng)激。因此，重要的是引入不改變殺生物活性的應(yīng)激降低化合物。 不同的含有銀鹽、銀納米顆粒和銀化合物的裝置已經(jīng)顯示出寬譜抗微生物活性。銀鹽還顯示出令人感興趣的不同于對(duì)宿主組織的抗微生物作用的生物作用。還證明了硝酸鹽在不同的小麥栽培品種中促進(jìn)了從成熟胚的植物再生，這證實(shí)了在蕓苔、石榴、黃瓜、水稻、玉米、 梨、黍和大麥的許多雙子葉植物中對(duì)體細(xì)胞胚發(fā)生和植物再生的作用。之前，證明了硝酸鹽促進(jìn)了從源自不成熟胚的愈傷組織培養(yǎng)物的枝條再生，以及通過競(jìng)爭(zhēng)其結(jié)合位點(diǎn)而不是導(dǎo)致乙烯合成來抑制乙烯的生理作用。已經(jīng)將氧化銀摻入顯示出抗細(xì)菌活性的納米合成物中。不同的氧化銀攜帶如殼聚糖、藻酸鹽、蛋白質(zhì)、多糖、樹膠、纖維素和已經(jīng)用作降低穩(wěn)定劑的其他物質(zhì)。推想銀離子的抗微生物作用的機(jī)理與對(duì)硫氫基基團(tuán)的作用相關(guān)。半胱氨酸或其他具有硫醇基團(tuán)的化合物的加入可中和銀離子作用，但還存在對(duì)氫鍵合和一些引起鉀離子從細(xì)菌中釋放出來必需的酶的作用。已經(jīng)報(bào)道了細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜是銀的最主要的靶。銀離子作為顆粒沉積在液泡和細(xì)胞壁中，在生長(zhǎng)過程中抑制細(xì)胞分裂和引起細(xì)胞損傷。還猜想存在與DNA堿基的其他相互作用，抑制細(xì)胞分裂和干擾質(zhì)子轉(zhuǎn)運(yùn)。檢測(cè)到銀和銅離子之間的協(xié)同作用。銅離子普遍存在于不同類型的水中。硝酸鹽也用來對(duì)抗疣。銀化合物已經(jīng)使用了數(shù)千年。它們作為清潔化合物，消毒劑，作為改善傷口愈合、 糖尿病性潰瘍的化合物等，在許多疾病中顯示出良好的結(jié)果和有益的作用。最令人感興趣的活性是控制活組織、食品和飼料產(chǎn)品上的微生物生長(zhǎng)。將銀化合物加入到水中可控制藻類生長(zhǎng)，致病細(xì)菌和真菌的發(fā)展，管道系統(tǒng)中、植入物、插管、橡膠上的生物膜形成等。無論如何，微生物的銀抗性菌株正在進(jìn)化中。因此，將銀化合物與過氧化物或過氧化物的組合相結(jié)合來防止抗性形成是令人感興趣的。使用銀化合物的主要優(yōu)點(diǎn)在于寬PH范圍內(nèi)的持久抗微生物活性。過氧化氫和硝酸鹽的結(jié)合導(dǎo)致協(xié)同作用，與單獨(dú)的過氧化氫相比，在更寬的pH范圍下具有更高的抗微生物活性。不僅過氧化氫，而且其他有機(jī)或無機(jī)過氧化物，甚至不同過氧化物的混合物都可以與銀化合物相結(jié)合。測(cè)定所產(chǎn)生的抗微生物活性，并在體外評(píng)價(jià)不同組合對(duì)抗不同微生物的抗微生物活性。通常認(rèn)為銀-過氧化物組合是用于消毒或凈化的有利生態(tài)系統(tǒng)，并且許多研究者建議使用這些制劑作為含氯抗微生物劑的實(shí)際替代品。銀化合物是非常活躍的，并且最終作為金屬銀、氧化銀或銀鹽沉淀。通常，由于環(huán)境和所有種類的處理水中氯離子的普遍存在以及這種鹽的極低的溶解性，形成了氯化銀。納米顆粒形式的銀鹽也顯示出抗微生物活性。過氧化物和銀化合物主要作用于微生物細(xì)胞質(zhì)膜，并因此引起氧化應(yīng)激。使酶變性，并且膜顯示出滲漏，釋放出細(xì)胞質(zhì)成分，導(dǎo)致微生物死亡。當(dāng)將這樣的組合應(yīng)用于“生物表面”(植物、葉子、根、動(dòng)物或人的皮膚、水果、蔬菜、種子、肉或魚制品)上時(shí)，發(fā)生氧化應(yīng)激，導(dǎo)致自由基啟動(dòng)的鏈反應(yīng)，造成生物材料的變質(zhì)。 對(duì)照這種復(fù)雜的背景，現(xiàn)在令人驚訝地發(fā)現(xiàn)了可以提出新的抗微生物組合物，基于與銀化合物相關(guān)聯(lián)的過氧化物的協(xié)同活性，其導(dǎo)致在更寬的PH范圍下更高的殺生物活性，其中這種協(xié)同作用進(jìn)一步被屬于含氮分子和所謂“相容性溶質(zhì)”類別的意義明確的化合物補(bǔ)充。令人驚訝地，發(fā)現(xiàn)這種組合不僅導(dǎo)致對(duì)細(xì)菌提高的活性，可能由于細(xì)胞質(zhì)充盈的標(biāo)準(zhǔn)化作用，而且還導(dǎo)致更好的宿主細(xì)胞和宿主組織針對(duì)由使用過氧化物引起的氧化應(yīng)激以及其他來源的生物和非生物應(yīng)激的保護(hù)。在現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)報(bào)道了含有過氧化物和銀來源以及各種添加劑的抗微生物組合物。例如，WO 00/62618A在實(shí)施例II中公開了使用亮氨酸以及過氧化物和銀源來制備對(duì)于含水體系具有殺菌功效的產(chǎn)品的用途。已知亮氨酸(非甲基化含氮化合物)是蛋白性化合物，但不作為相容性溶質(zhì)，也不作為滲透劑(實(shí)際上，亮氨酸添加劑與銀反應(yīng)，并且不能執(zhí)行任何滲透或其他活性)。GB 2189394A在實(shí)施例2中公開了使用苯甲酸鈉或苯甲酸鉀以及過氧化物和銀源來制備非常適于游泳池消毒的濃縮物的用途。苯甲酸鈉或苯甲酸鉀在酸性條件下是殺生物劑，而不是相容性溶質(zhì)(滲透溶質(zhì))。WO 2006/070953A公開了包含硝酸銀、過氧化鈉和硼砂/碳酸鈉混合物的液體凈化劑。硼砂是公知的殺生物劑，而不是相容性溶質(zhì)。本發(fā)明提供了一種新的抗微生物組合物，其包含以下物質(zhì)的組合-至少一種有機(jī)過氧化物和/或無機(jī)過氧化物，-至少一種銀源，和-至少一種含氮化合物，其是非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)，并且其選自?；撬?、 N-甲基化氨基酸、N-甲基化氨基醇、N-甲基化氧化胺、N-甲基化脒和聚氨基烴化合物以及這些的任意混合物。根據(jù)本發(fā)明的基本特征，以上所提到的N-甲基化氨基酸優(yōu)選地選自甜菜堿(三甲基甘氨酸=TMG)、二甲基甘氨酸、肌氨酸、肉毒堿、N-甲基丙氨酸和三甲基氨基-丁酸、丁酰甜菜堿、脯氨酸甜菜堿和其他氨基酸甜菜堿；N-甲基化氨基醇優(yōu)選地選自膽堿和膽堿衍生物，如膽堿-ο-磷酸鹽、磷酸甘油膽堿(GPC) ；N-甲基化氧化胺優(yōu)選地是三甲基胺-氧化物 (TMAO) ；N-甲基化脒優(yōu)選地選自ectoine和羥基ectoine ；和聚氨基烴化合物優(yōu)選選自腐胺、尸胺、精胺和亞精胺，以及來自真核細(xì)胞的聚胺生長(zhǎng)因子。因此，根據(jù)本發(fā)明的含氮、非生成葡萄糖的、相容性溶質(zhì)化合物具體地選自?；撬?，膽堿和膽堿衍生物，三甲基胺-氧化物(TMAO)，ectoine 和輕基 ectoine,
N-甲基化氨基酸甜菜堿、二甲基甘氨酸、肌氨酸、肉毒堿、N-甲基丙氨酸、三甲基氨基-丁酸、丁酰甜菜堿和脯氨酸甜菜堿，和聚氨基烴化合物腐胺、尸胺、精胺和亞精胺，以及這些的任意混合物。觀察到根據(jù)本發(fā)明的合適的協(xié)同化合物，用于補(bǔ)充銀+過氧化物的已知抗微生物作用，因此包括“甜菜堿”衍生物。關(guān)于這一點(diǎn)特別承認(rèn)在現(xiàn)有技術(shù)中(例如，CN 1729787, GB 2354771, EP 1225887，EP 1036511，和化妝品制劑)已經(jīng)提出了將銀和過氧化物與作為表面活性劑的特定的張力活性“甜菜堿”結(jié)合。必須強(qiáng)調(diào)在后一種情況下以更寬泛意思使用的表述“甜菜堿”完全不同于根據(jù)本發(fā)明的關(guān)于N-甲基化氨基酸中所用的狹義表述“甜菜堿”。根據(jù)本發(fā)明，N-甲基化氨基酸， 甜菜堿型衍生物，用作相容性溶質(zhì)，而不是表面活性劑。根據(jù)本發(fā)明，銀源優(yōu)選地選自金屬銀和銀化合物。根據(jù)本發(fā)明的抗微生物組合物的非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)不應(yīng)當(dāng)中和銀化合物的活性，并且濃度應(yīng)當(dāng)受到限制并與銀濃度相關(guān)聯(lián)。如本文中所用的表述“相容性溶質(zhì)”指的是其最寬接受意思的有機(jī)化合物， 該化合物用作細(xì)胞質(zhì)溶質(zhì)來平衡生長(zhǎng)在高鹽或糖環(huán)境中的細(xì)胞的水比例關(guān)系(或， 如 Pedro Lamosa 等的論文中(在 Appl. Environ. Microbiol. 1998 年 10 月；64 (10) 3591-3598) “l(fā)ow-molecular-weight organic compounds that accumulate to high intracellular levels under osmotic stress and that are compatible with the metabolism of the cell，，)中特意記載的)。因此，根據(jù)本發(fā)明的相容性溶質(zhì)是有機(jī)滲透溶質(zhì)或滲透保護(hù)劑。如本文中所用的表述“生成葡萄糖的”指的是通過導(dǎo)致從非碳水化合物碳基質(zhì)生成葡萄糖的代謝途徑可以轉(zhuǎn)化成葡萄糖的化合物。相容性溶質(zhì)是在細(xì)胞質(zhì)中以高濃度累積的有機(jī)分子，使細(xì)胞適應(yīng)改變的鹽濃度。 它們是不帶電荷的、高水溶性的并且必須維持與周圍介質(zhì)的滲透平衡。這些化合物中的一些還顯示出第二種功能，如大分子(例如，酶)的支持和保護(hù)。細(xì)胞可以從周圍介質(zhì)中或通過合成累積這些化合物。小的生成葡萄糖的分子(甘油、麥芽糖、海藻糖、蔗糖、氨基酸等) 也可以起著相容性溶質(zhì)的作用。除了這些化合物以外，大多數(shù)相容性溶質(zhì)是含N化合物或多元醇。據(jù)報(bào)道含N化合物通常比其它化合物更有效。細(xì)胞必須裝備運(yùn)輸系統(tǒng)，以從外部富集“便宜的”相容性溶質(zhì)化合物。相容性溶質(zhì)，如氨基酸和糖類，可以在葡萄糖生成中用于ATP產(chǎn)生。還報(bào)道了高級(jí)聚胺可作為水果和蔬菜中的合成代謝生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，并涉及貨架期。植物通過它們的葉子是可被微生物定居的巨大面積。然而，由于蠟質(zhì)層上的持續(xù)水應(yīng)力條件，這種面積對(duì)于微生物是沒有吸引力的。溫度變化和UV照射對(duì)于微生物也是應(yīng)力因素。為了更好的條件，致病微生物將嘗試進(jìn)入葉子中。在攻擊植物之前，孢子必須萌發(fā)。 孢子的萌發(fā)是高能量依賴性過程并且費(fèi)時(shí)。因此，用過氧化物/銀組合定期噴灑植物來殺滅植物微生物并抑制孢子形成是令人感興趣的。
相容性溶質(zhì)，除了脲以外，不與大分子相互作用，并且它們對(duì)細(xì)胞功能的影響很小。這與在相對(duì)高濃度下結(jié)合有機(jī)分子(如，蛋白質(zhì)和核酸)并使其失去穩(wěn)定性的無機(jī)離子相反。相容性溶質(zhì)在生理PH下是中性的(或兩性離子)。一些細(xì)菌相容性溶質(zhì)是陰離子的，但與陽(yáng)離子配合。細(xì)胞可以同時(shí)利用不同的相容性溶質(zhì)。它們是可互換的。三甲基甘氨酸(TMG)可以替代真核或原核細(xì)胞中的山梨糖醇或其他多元醇，以在高滲條件下恢復(fù)生活力。排除脲的使用，因?yàn)樗墒勾蠓肿邮シ€(wěn)定性。也排除未甲基化的氨基酸，因?yàn)閾?jù)報(bào)道它們?nèi)颗c銀離子反應(yīng)，并且大多數(shù)是生成葡萄糖或生成酮的。非生成葡萄糖的化合物在細(xì)胞中不進(jìn)行能量?jī)?chǔ)備。這些化合物中的大多數(shù)還在植物中顯示出抗氧化活性或其他不同于其滲透活性的生物活性。根據(jù)環(huán)境條件，相容性溶質(zhì)還可以顯示出不同的作用。在胞內(nèi)富集后，海藻糖在高溫下保護(hù)酶，但在正常溫度下抑制酶。它們?cè)趐erturbant (溫度)的不存在下可能是有害的。因此，重要的是不要使用高相容性溶質(zhì)濃度。如果在不需要它們的非滲透特性(如，抗氧化活性、氧化還原平衡活性、鈣調(diào)節(jié)、解毒活性、對(duì)抗酶抑制或補(bǔ)償性活性)的情況下使用，它們可能特別有害。這對(duì)于微生物和宿主細(xì)胞(植物、人或動(dòng)物)可能是不同的。葉子、根或皮膚上的微生物大部分在滲透應(yīng)激下，而細(xì)胞的宿主細(xì)胞或組織在其他種類的應(yīng)激，如氧化應(yīng)激下。文獻(xiàn)中常常引用干旱條件下作 物中滲透溶質(zhì)的累積。然而，測(cè)試滲透溶質(zhì)和作物產(chǎn)量相關(guān)性的農(nóng)田研究表明沒有一致的益處。除了為了獲得水而維持細(xì)胞膨脹或根部發(fā)展的推測(cè)益處外，觀察到作物產(chǎn)量沒有明顯增加。滲透溶質(zhì)的間接活性(抗氧化)導(dǎo)致植物中一定的缺水耐受性。相容性溶質(zhì)的過多累積甚至可能是損傷的癥狀。在使用非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)的微生物中可看到相似的作用在滲透應(yīng)力條件下，維持膨壓，但沒有明顯的生長(zhǎng)刺激。隨著反應(yīng)開始和滲透上調(diào)(up chock)，細(xì)胞通常合成相容性溶質(zhì)，但隨后并且滲透下調(diào)(down chock)，細(xì)胞降解相容性溶質(zhì)。當(dāng)胞外相容性溶質(zhì)通過運(yùn)輸系統(tǒng)被吸收或釋放至介質(zhì)中來替代從頭合成時(shí)，最初的反應(yīng)大部分是較快的。當(dāng)我們仔細(xì)地閱讀關(guān)于相容性溶質(zhì)對(duì)微生物或微生物生長(zhǎng)的作用的文獻(xiàn)時(shí)，我們遇到很多矛盾。這主要是由于使用復(fù)雜的生長(zhǎng)培養(yǎng)基引起的，在這種培養(yǎng)基中摻入了大量的相容性溶質(zhì)。簡(jiǎn)單分子，如單糖和雙糖、氨基酸和多元醇，存在于大多數(shù)培養(yǎng)基中，并且不僅具有作為相容性溶質(zhì)的功能，而且首先是產(chǎn)能功能。它們是生成葡萄糖的，并且產(chǎn)生ATP。 它們不僅有助于滲透調(diào)節(jié)，而且有助于過氧化物和銀化合物的ATP-依賴性排出以及非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)的吸收或排出。金黃色葡萄球菌的菌株顯示出在生長(zhǎng)期過程中膜流動(dòng)性的明顯提高，但使進(jìn)入靜止期的流動(dòng)性降低，并且使對(duì)殺生物劑的敏感性降低。很多微生物能夠從外部介質(zhì)中積累 N-甲基化或聚胺相容性溶質(zhì)。因?yàn)門MG是優(yōu)于多元醇的相容性溶質(zhì)，因此抗應(yīng)激相容性溶質(zhì)的積累可達(dá)到較高的胞內(nèi)水平，并且比從頭合成多元醇和二肽需要的能量低。此外，在真菌中，多元醇的合成也是耗能的，尤其是在水活度降低的固態(tài)發(fā)酵中。加入生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)將幫助這些生物體合成新的相容性溶質(zhì)和維持針對(duì)過氧化物和銀化合物的排出活性。大多數(shù)相容性溶質(zhì)是在生命樹王國(guó)中廣泛分布的，一些限于少量的生物體。TMG、聚胺和ectoine能夠在應(yīng)激條件下在原核和真核細(xì)胞中恢復(fù)正常的膨壓。當(dāng)過氧化物耗盡時(shí)，一些生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)可以啟動(dòng)微生物生長(zhǎng)。在大多數(shù)公開的體外實(shí)驗(yàn)中，使用微生物懸浮液，而不是普遍存在的微生物生物膜(處理水管道系統(tǒng)、容器、葉子和根上、污染的表面上，等)。生物膜包埋的微生物使用“群體效應(yīng)”分子作為一個(gè)整體來抵抗提高濃度的作為抗生素、消毒劑或殺生物劑的抗微生物化合物。它們使得“整體”決定通過生物膜中防御網(wǎng)絡(luò)的確立和新酶的形成來排出這樣的分子。生物膜變得越來越強(qiáng)，并且整個(gè)增加。令人感興趣的是使用非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)結(jié)合使用抗微生物化合物誤導(dǎo)內(nèi)部微生物。小的相容性溶質(zhì)分子是中性的并且滲透生物膜基質(zhì)。在生物膜基質(zhì)之下的宿主組織(受感染的組織)也能受益于這些相容性溶質(zhì)并更好地抵抗氧化應(yīng)激條件。對(duì)微生物細(xì)胞質(zhì)膜的膨壓的標(biāo)準(zhǔn)化可以提高過氧化物和銀化合物的進(jìn)入。我們發(fā)現(xiàn)了使用非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)對(duì)于生物膜處理中的過氧化物-銀組合物的抗微生物活性是有益的。在含有非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)的介質(zhì)中，過氧化物能夠通過氧化將有機(jī)基質(zhì)分解成無害的物質(zhì)。銀化合物激活它們的抗微生物活性，由于有機(jī)材料存在下過氧化物的快速消耗，這種情況是理想的。我們還檢測(cè)到使用螯合劑，如EDTA，聚丙烯酸酯和膦酸鹽，降低了過氧化物-銀組合物的活性。這與各種出版物和專利中使用螯合劑是相反的。除了滲透活性以外，非生成葡萄糖相容性溶質(zhì)還顯示出令人感興趣的間接活性，其不同于ATP產(chǎn)生。這種活性對(duì)于宿主組織是有益的。沒有打算將本發(fā)明與任何具體的解釋相聯(lián)系，假定出于不同的原因，使用相容性溶質(zhì)可能是合適的A)抗微生物活性的激活，可能是由于細(xì)胞質(zhì)膨壓的標(biāo)準(zhǔn)化引起的B)降低了生物宿主組織中的氧化應(yīng)激 C)相容性溶質(zhì)是無毒的并且在介質(zhì)中消失，因?yàn)榄h(huán)境中的大多數(shù)生物體能夠富集這些分子。選定的相容性溶質(zhì)被許多生物體吸收，并且在應(yīng)激條件下能夠替代內(nèi)部產(chǎn)生的溶質(zhì)D)殘余的相容性溶質(zhì)被共生的生物體吸收。特別地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了使用低濃度的非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)沒有刺激微生物生長(zhǎng)，相反，激活了過氧化物_銀組合物的抗微生物活性。生成葡萄糖的溶質(zhì)主要由單糖和雙糖以及氨基酸來表示。在生物和非生物應(yīng)激下的植物更易受到感染的攻擊，并且顯示出生長(zhǎng)和發(fā)育的降低，并因此需要精心設(shè)計(jì)更高的相容性溶質(zhì)濃度，用于整個(gè)植物，包括根和周圍的共生生物體。海藻糖，一種在不同生物體中發(fā)現(xiàn)的非還原性雙糖，在這樣的條件下合成，作為相容性溶質(zhì)，穩(wěn)定酶和膜，并保護(hù)結(jié)構(gòu)以免干燥。其在患病的植物或定居的植物中以較高的濃度存在。相容性溶質(zhì)在應(yīng)激條件下合成，但在正常條件下再次被破壞。植物中滲透溶質(zhì)的濃度還可以用作完成的發(fā)芽(麥芽質(zhì)量、種子收獲前的發(fā)芽，等)的指示劑。由于水供給中鐵和銅離子的存在引起的氧化應(yīng)激刺激了植物中聚胺的產(chǎn)生。還發(fā)現(xiàn)了相容性溶質(zhì)干擾銀/過氧化物對(duì)病原體的作用。銀/過氧化物還顯示了對(duì)植物的抗氧化活性。這種新的組合物在動(dòng)物飼養(yǎng)(家禽、豬、馬等)中也是有用的，除了降低導(dǎo)致動(dòng)物疾病的微生物壓力的影響，還導(dǎo)致更高的產(chǎn)量、更好的飼料轉(zhuǎn)化。對(duì)病原體和宿主同時(shí)使用非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)。在沒有誘導(dǎo)導(dǎo)致過氧化物耗盡的微生物生長(zhǎng)的有限濃度下使用相容性溶質(zhì)，過氧化物耗盡是由于過氧化氫酶和過氧化物酶的微生物形成引起的。銀化合物的存在增強(qiáng)了過氧化物的活性并與過氧化物滅活酶反應(yīng)。在合適濃度下使用的過氧化物、銀化合物和相容性溶質(zhì)的組合物，比大部分的農(nóng)藥或殺生物劑的有害性低。 殘留量對(duì)水果和植物是可忽視的。尤其是兒童，容易受到農(nóng)藥、清潔產(chǎn)品和張力活性化合物的有害作用的影響。在早期暴露于農(nóng)藥的兒童中發(fā)現(xiàn)了更高發(fā)生率的癌癥、出生缺陷、白血病。通常，農(nóng)藥、殺生物劑和張力活性化合物在其宿主中引起了氧化應(yīng)激。因此，令人感興趣的是將生物活性相容性溶質(zhì)(低濃度的非生成葡萄糖的)加入微生物中，可能使膨壓正常化并由此提高用于殺生物劑的目標(biāo)表面。同時(shí)，注意到了對(duì)宿主組織的積極作用，降低炎癥或組織損傷的應(yīng)激或后果。根據(jù)本發(fā)明的新的抗微生物組合物可以在所有種類的水中稀釋，并可將該稀釋液用作消毒劑、抗微生物殺生物劑、清潔化合物、農(nóng)藥(殺藻劑、殺細(xì)菌劑、殺真菌劑、殺線蟲劑和殺病毒劑)、凈化化合物或作為抗生物污著化合物。組合物是有利生態(tài)的，并且藥物制劑也可以用于人和動(dòng)物的局部應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明另外的優(yōu)選特征，抗微生物組合物的銀源最合適地選自a)金屬銀、膠體銀或銀納米顆粒b)氯化銀納米顆粒或在含有氯離子的天然載體上原位制得或通過添加氯離子、膠體銀鹽/載體、氧化銀/載體或離子銀/載體(載體是低硫醇的)或其混合物制得的氯化銀納米顆粒，c)硝酸銀、氟化銀、氯化銀、氧化銀、銀沸石、磷酸鋯氫鈉銀、碳酸銀、硫化銀、硒酸銀、硫酸銀或其混合物，d)銀氨基酸復(fù)合物，e)碘化銀、氯酸銀、鉻酸銀、氫氧化銀、碘酸銀、鉬酸銀、草酸銀、高氯酸銀、磺胺嘧啶銀、弱蛋白銀、硫代硫酸銀或其混合物，f)羧酸和二羧酸的銀鹽或其混合物，或這些的任意混合物。本發(fā)明的抗微生物組合物的更多的優(yōu)選特征在于-含氮化合物或相容性溶質(zhì)的濃度(w/v)低于過氧化物濃度，并且是銀濃度的不超過100倍；-總過氧化物濃度為60%至0.1 %過氧化物(在濃縮的溶液中)；-有機(jī)過氧化物選自氫過氧化物、過氧酸、過酸酯類型、過氧-甲氧基酸或過氧-苯基酸，或其組合，然而過氧酸優(yōu)選是過氧羧酸、過氧二羧酸、過氧三羧酸、過氧羥基酸或其酯及其組合；過氧酸是過氧乳酸、過氧丙酸、過氧檸檬酸、過氧醋酸、過氧甲酸、過氧苯基醋酸、 單或二過氧二羧酸、其單或二 -酯，或其組合，通過獲得過氧羧酸氧化，用過氧化氫或氫過氧化物氧化乳酸、丙酸、檸檬酸、草酸、 醋酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、戊二酸、庚二酸、辛二酸、琥珀酸、壬二酸、己二酸、癸二酸或其衍生物及其酯；-無機(jī)過氧化物是無機(jī)過氧酸或其鹽，然而過氧酸是
a)過氧單硫酸或過氧二硫酸，其鈉、鉀或銨鹽及其混合物，b)過氧亞硝酸及其鹽，c)過硝酸鹽及其鹽，d)脲過氧化物或脲過氧化氫，e)過碳酸鹽(實(shí)例過碳酸鈉)，f)鈣、鈉、鋇或鎂過氧化物及其混合物，g)過氧化氫或活化過氧化氫(無機(jī)鹽的氫過氧化物復(fù)合物)，h)高錳酸鹽i)過硼酸及其鹽(實(shí)例過硼酸鈉)，或這些的任意混合物，-無機(jī)過氧化物的濃度為50%至0.1 % (w/v)過氧化物(在濃縮的組合物中)；-銀濃度范圍為IOmg/升至IOOOmg/升(在濃縮的組合物中)。本發(fā)明還特別涉及如上所述的抗微生物組合物的用途，作為即可使用的制劑或待稀釋于水或水溶液、乳液或懸浮液中的濃縮制劑中的消毒劑、抗微生物殺生物劑、清潔化合物、殺藻劑、殺細(xì)菌劑、抗微生物農(nóng)藥、殺真菌劑、殺線蟲劑、殺病毒劑、去污劑或抗生物污著化合物。本發(fā)明還涉及這些抗微生物組合物的用途，作為濃縮或稀釋后的局部組合物，或作為膏劑、凝膠、霜?jiǎng)┗蛉魏慰山邮艿木植克幬镏苿┲苽渲械某煞?。本發(fā)明還涉及這樣的抗微生物組合物，其包含一種或多種附加的真菌孢子抑制化合物，如多元醇、萜烯、羧酸、糖酸、硼酸、金屬鹽及其組合。從以下具體的、非限制的根據(jù)本發(fā)明的抗微生物組合物和抗微生物應(yīng)用的實(shí)施例，將清楚本發(fā)明的更多特征和詳細(xì)內(nèi)容?？刮⑸锝M合物的實(shí)施例實(shí)施例1 H2O2 50%AgNO3 :350mg Ag/升TMG :0.05% (w/v)實(shí)施例2 H2O2 :38-40%含有350mg Ag/升的膠體銀/載體(低硫醇載體)TMG 0. 1% (w/v)實(shí)施例3 H2O2 50%AgNO3 :250mg Ag/ 升TMG 0. 2% (w/v)實(shí)施例4 H2O2 -AO %AgNO3 :350mg Ag/升TMAO 0. 1% (w/v)
實(shí)施例5 H2O2 -AO %AgNO3 :400mg Ag/升?；撬?·3% (w/v)實(shí)施例6 H2O2 50%AgNO3 :300mg Ag/升肉毒堿0· 25% (w/v)實(shí)施例7 H2O2 -AO %作為膠體的氧化銀(II) (AgO) :250mg Ag/升過硫酸氫鉀5%TMG 0. 5% (w/v)實(shí)施例8 H2O2 40%，用 0. IN HCl 酸化的在天然載體上原位制得的AgCl (450mg Ag/升)TMG 2. 5% (w/v)實(shí)施例9 H2O2 -AO %硫代硫酸銀(350mg Ag/升)TMAO 0. 1% (w/v)實(shí)施例10 H2O2 -AO % 過醋酸1.5% 硝酸銀300mgAg/升TMG 0. 2%實(shí)施例11 H2O2 -AO % 過醋酸1.0% 硝酸銀360mgAg/升PEG400 或 PEG800 10 %TMAO 0. 2%實(shí)施例12 H2O2 50% 硝酸銀200mgAg/升TMG 0. 05%在純水中稀釋后可以使用該溶液(作為噴霧)，用于去污和消毒(納米或微米液滴)。實(shí)施例13
H2O2 AOVo過一硫酸氫鉀10%硝酸銀250mgAg/升PEG200 10%TMG 0. 1%實(shí)施例14 H2O2 50%在樹膠載體上原位制得的氯化銀380mg Ag/升TMG 1 %實(shí)施例15 H2O2 50%在低硫醇天然載體上原位制得的氯化銀340mg Ag/升GPC 0. 05%實(shí)施例16 H2O2 50%含有325mg Ag/升的膠體銀/載體(載體必須是低硫醇的)TMG 1 %實(shí)施例17 H2O2 7. 9%含有70mg Ag/升的膠體銀/載體(載體必須是低硫醇的)TMG 0. 1%以上實(shí)施例的所有抗微生物組合物，含有提及的過氧化物，已經(jīng)作為在來源水 (含有150mg/l氯化物)中稀釋200倍的溶液來使用(在實(shí)施例17的情況下為70倍)，并且在25°C下培養(yǎng)2小時(shí)后，導(dǎo)致金黃色葡萄球菌減少至少51og滴定度。實(shí)施例18 過氧化鈣35%氧化銀0. 2%銀TMG 3% (w/v)磷酸鹽緩沖液20%過碳酸鈉10%硅石直至100%在使用前，制備該混合物的2%溶液，用于土壤處理或作物上。首先在去礦物質(zhì)的水中稀釋。實(shí)施例19 丙二醇55%過硼酸鈉單水合物25%硝酸銀0.3%銀TMG 3%加入熱解硅石直至100%
恰在使用前在水中稀釋。無機(jī)過氧化物可以用于水產(chǎn)業(yè)中，以防止厭氧微生物和其他細(xì)菌的生長(zhǎng)；用于家禽中的飼料去污、生產(chǎn)力提高和蛋品質(zhì)的改善；用于牛中抑制小牛的腹瀉和作為抗微生物化合物，使消化道和消化正常化。實(shí)施例20

45% H2O25%多元醇550mg Ag/ 升，作為 AgNO30.2% TMG實(shí)施例21 45% H2O22. 5%多元醇0.3% 蘋果酸0. 15% 過醋酸580mg Ag/升，作為 AgNO30. 3% TMG實(shí)施例22 45% H2O22. 5%多元醇2% 硼酸560mg Ag/ 升,作為 AgNO30. 3 %薄荷醇或丁子香酚0. 3% TMG實(shí)施例23 45% H2O23% 硼酸半乳糖醛酸550mg Ag/ 升，作為 AgNO3山梨糖0.3% TMG抗微生物應(yīng)用的實(shí)施例實(shí)施例24將實(shí)施例2的抗微生物組合物(標(biāo)記為“SN025-B”的組合物)應(yīng)用于大米上，用于控制稻瘟病、紋枯病、褐斑病(稻瘟霉菌、絲核菌屬、蠕孢菌屬)。測(cè)量?jī)蓚€(gè)試驗(yàn)的平均值。以14天的間隔應(yīng)用3次。在2007年12月評(píng)估，播種45_50天。結(jié)果顯示于


圖1中未處理中強(qiáng)烈感染(對(duì)于稻瘟病、紋枯病&褐斑病，各自為64%、52% &50% )。
組合物SN025-B獲得了 33_55 %的功效(對(duì)于使用2_噻唑的參照程序?yàn)?44-60%)。實(shí)施例25應(yīng)用標(biāo)記為“SN025-B”的相同組合物來控制橄欖樹上的葉斑病(Cyclonium οleaginum)。在2008年5月8日評(píng)價(jià)(200片葉子的落葉％ )。應(yīng)用預(yù)防性噴霧進(jìn)度表(秋天應(yīng)用2次，春天應(yīng)用2次)。結(jié)果顯示于圖2中。SN025-B獲得了 47%的功效(與銅相比較)。

實(shí)施例26應(yīng)用標(biāo)記為“SN025-B”的相同組合物來控制冬小麥上的殼針孢屬葉斑病(殼針孢屬)。2008年5月2日評(píng)價(jià)(L4上的殼針孢％ )在TO —次應(yīng)用(2008年4月7日)結(jié)果顯示于圖3中SN025-B 獲得了 58%功效。實(shí)施例27應(yīng)用標(biāo)記為“SN025-B”的相同組合物來控制蘋果上的黑斑病(黑星病菌)。2007年12月14日和2008年2月3日評(píng)價(jià)。應(yīng)用預(yù)防性噴霧進(jìn)度表(在最初污染過程中以7-14天間隔，然后14-28天間隔)。結(jié)果顯示于圖4中SN025-B獲得了 65%的功效(與有機(jī)殺真菌劑相比)。實(shí)施例28應(yīng)用標(biāo)記為“SN025-B”的相同組合物來控制草莓上的灰葡萄孢。以7天的間隔評(píng)價(jià)，在最后一次應(yīng)用后開始7天(總共4次應(yīng)用)。結(jié)果顯示于圖5中SN025-B獲得了 80%功效(與有機(jī)殺真菌劑相比)。相對(duì)未處理，產(chǎn)量高18. 8%，相對(duì)甲基托布津處理的地區(qū)，高7. 9%。
權(quán)利要求
1.一種抗微生物組合物，其包含以下物質(zhì)的組合 -至少一種有機(jī)過氧化物和/或無機(jī)過氧化物， -至少一種銀源，和-至少一種含氮化合物，其是非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)，并且其選自?；撬?， 膽堿和膽堿衍生物， 三甲基胺-氧化物(TMAO)， ectoine 禾口輕基 ectoine，N-甲基化氨基酸甜菜堿、二甲基甘氨酸、肌氨酸、肉毒堿、N-甲基丙氨酸、三甲基氨基_ 丁酸、丁酰甜菜堿和脯氨酸甜菜堿，和聚氨基烴化合物腐胺、尸胺、精胺和亞精胺。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的抗微生物組合物，其包含選自下列物質(zhì)的銀源a)金屬銀、膠體銀或銀納米顆粒，b)氯化銀納米顆?；蛟诤新入x子的天然載體上原位制得或通過添加氯離子、膠體銀鹽/載體、氧化銀/載體或離子銀/載體或其混合物制得的氯化銀納米顆粒，c)硝酸銀、氟化銀、氯化銀、氧化銀、銀沸石、磷酸鋯氫鈉銀、碳酸銀、硫化銀、硒酸銀、硫酸銀或其混合物，d)銀氨基酸復(fù)合物，e)碘化銀、氯酸銀、鉻酸銀、氫氧化銀、碘酸銀、鉬酸銀、草酸銀、高氯酸銀、磺胺嘧啶銀、 弱蛋白銀、硫代硫酸銀或其混合物，f)羧酸和二羧酸的銀鹽或其混合物， 或這些物質(zhì)中任意物質(zhì)的混合物。
3.根據(jù)在前任一項(xiàng)權(quán)利要求的抗微生物組合物，其中含氮化合物的濃度(w/v)低于過氧化物的濃度并且是銀濃度的不超過100倍。
4.根據(jù)在前任一項(xiàng)權(quán)利要求的抗微生物組合物，其中總過氧化物濃度為60%至0.1% 過氧化物。
5.根據(jù)在前任一項(xiàng)權(quán)利要求的抗微生物組合物，其中有機(jī)過氧化物是氫過氧化物、過氧酸、過酸酯類型、過氧-甲氧基酸或過氧-苯基酸，或其組合。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的抗微生物組合物，其中過氧酸是過氧羧酸，優(yōu)選過氧乳酸、過氧丙酸、過氧檸檬酸、過氧醋酸、過甲酸、過苯甲酸、乙烷過氧酸、過氧甲氧基醋酸或過氧苯 基醋酸；單或二過氧二羧酸；過氧三羧酸；過氧羥酸；或其酯及其組合，而過氧羧酸優(yōu)選通過氧化獲得，用過氧化氫或氫過氧化物氧化乳酸、丙酸、檸檬酸、草酸、醋酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、戊二酸、庚二酸、辛二酸、琥珀酸、壬二酸、己二酸、癸二酸或其衍生物及其酯。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的抗微生物組合物，其中無機(jī)過氧化物是弱或強(qiáng)無機(jī)過氧酸或其鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的抗微生物組合物，其中過氧酸是a)過氧單硫酸或過氧二硫酸，其鈉、鉀或銨鹽及其混合物，b)過氧亞硝酸及其鹽，c)過硝酸鹽及其鹽，d)脲過氧化物或脲過氧化氫，e)過碳酸鹽，f)過氧化氫或活化過氧化氫，g)高錳酸鹽，h)過硼酸及其鹽，或這些物質(zhì)中的任意物質(zhì)的混合物。
9.根據(jù)在前任一項(xiàng)權(quán)利要求的抗微生物組合物，其中銀濃度范圍為IOmg/升至 IOOOmg/ 升。
10.根據(jù)在前任一項(xiàng)權(quán)利要求的抗微生物組合物，用作即可使用的制劑或待稀釋于水或水溶液、乳液或懸浮液中的濃縮制劑中的消毒劑、抗微生物殺生物劑、清潔化合物、殺藻齊U、殺細(xì)菌劑、抗微生物農(nóng)藥、殺真菌劑、殺線蟲劑、殺病毒劑、去污劑或抗生物污著化合物。
11.根據(jù)在前任一項(xiàng)權(quán)利要求的抗微生物組合物，用作濃縮的或稀釋后的局部組合物， 或用作膏劑、凝膠、霜?jiǎng)┗蛉魏慰山邮艿木植克幬镏苿┲苽渲械某煞帧?br> 12.根據(jù)在前任一項(xiàng)權(quán)利要求的抗微生物組合物，其包含一種或多種附加的真菌孢子抑制化合物，如多元醇、萜烯、羧酸、糖酸、硼酸、金屬鹽及其組合。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的抗微生物組合物，其包含至少一種有機(jī)和/或無機(jī)過氧化物、至少一種銀源和至少一種含氮化合物的組合，所述含氮化合物是非生成葡萄糖的相容性溶質(zhì)，選自?；撬?，膽堿和膽堿衍生物，三甲基胺-氧化物(TMAO)，ectoine和羥基ectoine，N-甲基化氨基酸甜菜堿、二甲基甘氨酸、肌氨酸、肉毒堿、N-甲基丙氨酸、三甲基氨基-丁酸、丁酰甜菜堿和脯氨酸甜菜堿，和聚氨基烴化合物腐胺、尸胺、精胺和亞精胺。
文檔編號(hào)A01N33/04GK102159083SQ200980136284
公開日2011年8月17日 申請(qǐng)日期2009年9月1日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月17日
發(fā)明者J·德塞戈赫, J-M·拉巴瑟, M·德姆恩克, P·盧斯 申請(qǐng)人:塔明克公司