專利名稱：魚皮魚鱗制備微生物發(fā)酵液的方法及含該發(fā)酵液的菌肥的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種微生物發(fā)酵液的制備方法并涉及含該發(fā)酵液的菌肥。 ( 二 )、背景技術(shù)隨著我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和水產(chǎn)品加工業(yè)的迅速發(fā)展，伴隨的水產(chǎn)品 加工廢棄物也逐漸增多，尤其沿海地區(qū)，廢棄的魚鱗、魚皮、貝類、海藻裙邊占水產(chǎn)品總重的 1/3，資源非常豐富。目前，這些廢棄物多數(shù)未經(jīng)任何處理便丟棄了 ，既浪費了資源又污染了 環(huán)境。 另一方面，土壤狀況是影響農(nóng)作物產(chǎn)量和品質(zhì)的重要因素。近年來，隨著我國設施 農(nóng)業(yè)迅速發(fā)展，集約化程度不斷提高，連茬種植，大量化學農(nóng)藥和肥料的使用，對土壤的掠 奪性使用，導致土壤狀況嚴重惡化，土壤酸化，重金屬超標，有機質(zhì)含量偏低，土壤板結(jié)，通 透性變差。改善土壤狀況的最有效方式是向土壤中施用既含有機營養(yǎng)又有復合微生物菌劑 的復合微生物菌肥進行有機營養(yǎng)的補充和土壤修復。(三)、發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種魚皮魚鱗制備微生物發(fā)
酵液的方法及含該發(fā)酵液的菌肥，利用酶解技術(shù)，以水產(chǎn)品加工下腳料為原料，經(jīng)過酸堿處 理和酶解制得膠原蛋白母液作為發(fā)酵培養(yǎng)基的主要成分，再進行復合微生物發(fā)酵后制成復
合微生物發(fā)酵液；利用制備的復合微生物發(fā)酵液與其它營養(yǎng)元素進行混配制得復合微生物 菌肥。 本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案如下
—種魚皮魚鱗制備微生物發(fā)酵液的方法，其特征在于
( — )、用魚皮或者酸洗的魚鱗制備膠原蛋白母液 在水中加入水重量50% 100%的魚皮或者酸洗過的魚鱗，進行酶解，制成膠原 蛋白母液； ( 二 )、用膠原蛋白母液制備培養(yǎng)基將膠原蛋白母液20% 60%，海帶粉1% 2%，紅糖3% 5%，黃腐酸0. 3% 0.5%，磷酸二氫鉀0. 2 % 0. 5 % ，輕質(zhì)碳酸鈣0. 5 % 1 % ，水31 % 75 %混合均勻并調(diào) 節(jié)ra7.2±0. 2，制得培養(yǎng)基;
(三)、復合微生物發(fā)酵液的制備 (1)、制備一級種子液培養(yǎng)基32% 67%，解磷菌5% 10%，硅酸鹽細菌5% 10%，固氮菌5% 10%，枯草芽胞桿菌5% 10%，酵母菌4% 8%，乳酸菌2% 5%， 光合菌2% 5%，木霉菌5% 10% ; (2)、制備二級種子液在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量2% 5%的一級種子液，溫度 控制在30 33t:，攪拌轉(zhuǎn)速150 180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48 60 小時，制成二級種子液； (3)、微生物發(fā)酵液的制備在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量10% 12%的二級種子 液，溫度控制在30 33t:，攪拌轉(zhuǎn)速150 180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng) 48 60小時，制成復合微生物發(fā)酵液。 所述的魚鱗酸洗工藝如下使用濃度為10% 15%的濃鹽酸浸泡魚鱗中10 12小時后，水洗至PH6 7。 所述的酶解工藝如下在水中加入水重量50% 100%的魚皮或者酸洗過的魚 鱗，調(diào)節(jié)PH9 11 ，升溫到45。C 60°C ，加入水重量1 % 2%的堿性蛋白酶酶解3 6小 時，制得膠原蛋白母液。
—種含有所述的微生物發(fā)酵液的菌肥，其特征在于其由以下組分混合而成復 合微生物發(fā)酵液50% 55%，檸檬酸鉀18% 20%，尿素8% 10%，磷酸一銨4% 5%， 黃腐酸3% 5%，己酸二乙氨基乙醇酯0. 2% 0. 5%，水4. 5% 16. 8%。
所述的百分比均為重量百分比。 本發(fā)明的積極效果在于以魚鱗、魚皮為原料酶解制得的膠原蛋白肽具有營養(yǎng)機 體、增強免疫力、提高抗病性等功能。經(jīng)多種微生物復合發(fā)酵后制得復合微生物菌劑，不僅 可以補充土壤有機質(zhì)，為作物提供營養(yǎng)，剌激作物生長，而且可以增加土壤的通透性，改良 土壤。另外，試驗證明，本發(fā)明的菌肥具有更高的肥效，施肥后作物的品質(zhì)更好。
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實例進一步說明本發(fā)明。
以下是制備實例
微生物發(fā)酵液制備例一( — )、用魚皮或者酸洗的魚鱗制備膠原蛋白母液 在水中加入水重量75X的魚皮或者酸洗過的魚鱗，調(diào)節(jié)PH9 11，升溫到52t:，加 入水重量1. 5%的堿性蛋白酶酶解3 6小時，制得膠原蛋白母液。 所述的魚鱗酸洗工藝如下使用濃度為10% 15%的濃鹽酸浸泡魚鱗中10 12
小時后，水洗至PH6 7 ; ( 二 )、用膠原蛋白母液制備培養(yǎng)基 將膠原蛋白母液40 % ，海帶粉1. 5 % ，紅糖4% ，黃腐酸0. 4% ，磷酸二氫鉀0.4%， 輕質(zhì)碳酸鈣0. 8%，水52. 9%混合均勻并調(diào)節(jié)2±0. 2，制得培養(yǎng)基；
(三)、復合微生物發(fā)酵液的制備 (1)、制備一級種子液培養(yǎng)基50 % ，解磷菌8 % ，硅酸鹽細菌7 % ，固氮菌8 % ，枯草 芽胞桿菌7%，酵母菌6%，乳酸菌4%，光合菌3%，木霉菌7% ; (2)、制備二級種子液在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量4%的一級種子液，溫度控制 在30 33°C ，攪拌轉(zhuǎn)速150 180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48 60小時， 制成二級種子液； (3)、微生物發(fā)酵液的制備在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量11%的二級種子液，溫度 控制在30 33t:，攪拌轉(zhuǎn)速150 180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48 60 小時，制成復合微生物發(fā)酵液。
微生物發(fā)酵液制備例二( — )、用魚皮或者酸洗的魚鱗制備膠原蛋白母液 在水中加入水重量100%的魚皮或者酸洗過的魚鱗，升溫到45t:，調(diào)節(jié)ra2. 5
4. 5，加入水重量2. 5%的酸性蛋白酶酶解3 6小時，制得膠原蛋白母液。 所述的魚鱗酸洗工藝如下使用濃度為10% 15%的濃鹽酸浸泡魚鱗中10 12小時后，水洗至PH6 7。(二 )、用膠原蛋白母液制備培養(yǎng)基 將膠原蛋白母液20 % ，海帶粉2 % ，紅糖3 % ，黃腐酸0. 5 % ，磷酸二氫鉀0. 2 % ，輕 質(zhì)碳酸鈣1%，水73. 3%混合均勻并調(diào)節(jié)2±0. 2，制得培養(yǎng)基；
(三)、復合微生物發(fā)酵液的制備 (1)、制備一級種子液培養(yǎng)基32%，解磷菌10%，硅酸鹽細菌10%，固氮菌10%， 枯草芽胞桿菌10 % ，酵母菌8 % ，乳酸菌5 % ，光合菌5 % ，木霉菌10 % ;
(2)、制備二級種子液在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量5%的一級種子液，溫度控制 在30 33°C ，攪拌轉(zhuǎn)速150 180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48 60小時， 制成二級種子液； (3)、微生物發(fā)酵液的制備在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量10%的二級種子液，溫度 控制在30 33t:，攪拌轉(zhuǎn)速150 180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48 60 小時，制成復合微生物發(fā)酵液。
微生物發(fā)酵液制備例三( — )、用魚皮或者酸洗的魚鱗制備膠原蛋白母液 在水中加入水重量50%的魚皮或者酸洗過的魚鱗，調(diào)節(jié)0 7. 5，升溫到
6(TC，加入水重量2%的中性蛋白酶酶解3 6小時，制得膠原蛋白母液。 所述的魚鱗酸洗工藝如下使用濃度為10% 15%的濃鹽酸浸泡魚鱗中10 12
小時后，水洗至PH6 7。 ( 二 )、用膠原蛋白母液制備培養(yǎng)基 將膠原蛋白母液60 % ，海帶粉1 % ，紅糖5 % ，黃腐酸0. 3 % ，磷酸二氫鉀0. 5 % ，輕 質(zhì)碳酸鈣0. 5%，水32. 7%混合均勻并調(diào)節(jié)2±0. 2，制得培養(yǎng)基；
(三)、復合微生物發(fā)酵液的制備 (1)、制備一級種子液培養(yǎng)基67% ，解磷菌5% ，硅酸鹽細菌5% ，固氮菌5% ，枯草 芽胞桿菌5%，酵母菌4%，乳酸菌2%，光合菌2%，木霉菌5% ; (2)、制備二級種子液在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量2%的一級種子液，溫度控制 在30 33°C ，攪拌轉(zhuǎn)速150 180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48 60小時， 制成二級種子液； (3)、微生物發(fā)酵液的制備在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量12%的二級種子液，溫度 控制在30 33t:，攪拌轉(zhuǎn)速150 180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48 60 小時，制成復合微生物發(fā)酵液。
菌肥制備例一 由以下組分混合而成復合微生物發(fā)酵液53%，檸檬酸鉀19%，尿素9%，磷酸一 銨4. 5%，黃腐酸4%，己酸二乙氨基乙醇酯O. 3%，水10. 2%;所述的百分比為重量百分比。
菌肥制備例二 由以下組分混合而成復合微生物發(fā)酵液50%，檸檬酸鉀18%，尿素10%，磷酸一 銨4%，黃腐酸5%，己酸二乙氨基乙醇酯0.2%，水12.8% ;所述的百分比為重量百分比。
菌肥制備例三 由以下組分混合而成復合微生物發(fā)酵液55%，檸檬酸鉀20%，尿素8%，磷酸一銨5 % ，黃腐酸3 % ，己酸二乙氨基乙醇酯0. 5 % ，水8. 5 % ;所述的百分比為重量百分比。
本發(fā)明的各種原菌種均從中國普通微生物菌種保藏管理中心(CGMCC)或農(nóng)業(yè)微 生物菌種保藏管理中心(ACCC)引進，確保了各菌種的安全性、存活和質(zhì)量。其中解磷菌選 擇的是巨大芽孢桿菌，也可以選擇蠟樣芽孢桿菌。硅酸鹽細菌選擇的是膠凍樣芽孢桿菌，也 可以選擇蠟樣芽孢桿菌。固氮菌選擇的是成團泛菌?？莶菅堪麠U菌選擇的是枯草芽胞桿菌 LY35。酵母菌選擇的是啤酒酵母，還可以選擇產(chǎn)朊假絲酵母。乳酸菌選擇的是嗜酸乳酸菌， 還可以選擇植物乳桿菌。光合菌選擇的是紅螺菌。木霉菌選擇的是里氏木霉，還可以選擇 綠色木酶。 本發(fā)明所述的百分比均為重量百分比。
以下是應用實例 本發(fā)明的復合微生物菌肥在我國的部分地區(qū)進行了試驗，使用效果良好，列舉如 下試用結(jié)果 應用實例一 使用復合微生物菌肥對甘藍進行灌根。 2009年6月，對山東省煙臺市萊山區(qū)官莊村的1. 5畝甘藍進行了灌根施肥，試驗效 果在同樣的施肥管理情況下可比對照增產(chǎn)36.9%，而且果實葉片翠綠，結(jié)球飽滿，不易爆 裂，耐儲存。 應用實例二使用復合微生物菌肥對蘋果樹進行灌根，檢測對蘋果果實膨大的影 響。 2009年9月，對山東省棲霞市西城鎮(zhèn)和蓬萊市大辛店鎮(zhèn)兩處的各2畝蘋果園進行 了土壤施肥，試驗效果棲霞市西城鎮(zhèn)果園，對照組的蘋果果實平均膨大率為4. 12%，而施 用復合微生物菌肥的蘋果果實平均膨大率為4. 87%，比對照的膨大效果高18. 2% ;蓬萊市 大辛店鎮(zhèn)果園，對照組的蘋果果實平均膨大率為3. 38%，而施用復合微生物菌肥的蘋果果 實平均膨大率為5. 27%，比對照的膨大效果高55. 9% 。 應用實例三使用復合微生物菌肥對蘋果樹進行灌根，檢測對果實糖度和硬度等 品質(zhì)的影響。 2009年9月，對山東省煙臺市萊山區(qū)黃家疃村和棲霞市西城鎮(zhèn)兩處的各3. 5畝蘋 果園進行了土壤施肥，試驗效果萊山區(qū)黃家疃村果園，對照組蘋果果實平均硬度和平均糖 度分別為7. 392kg/cm2和13度，而施用復合微生物菌肥的蘋果果實平均硬度和平均糖度分 別為8. 309kg/cm2和15. 4度，分別比對照高12. 4%和18. 4% ;棲霞市西城鎮(zhèn)果園，對照組 蘋果果實平均硬度和平均糖度分別為8. 409kg/cm2和13. 1度，而施用復合微生物菌肥的蘋 果果實平均硬度和平均糖度分別為9. 173kg/cm2和15度，分別比對照高9. 1%和14. 5% 。
果肉硬度是判別其貯藏運輸性能和品質(zhì)的指標，果汁中可溶性固形物的多少(糖 度)是衡量果實品質(zhì)的重要指標，從兩地的實驗效果看，復合微生物菌肥對提高果實硬度 和糖度效果均較好，尤其是管理水平差的果園見效最明顯。
權(quán)利要求
一種魚皮魚鱗制備微生物發(fā)酵液的方法，其特征在于(一)、用魚皮或者酸洗的魚鱗制備膠原蛋白母液在水中加入水重量50％～100％的魚皮或者酸洗過的魚鱗，進行酶解，制成膠原蛋白母液；(二)、用膠原蛋白母液制備培養(yǎng)基將膠原蛋白母液20％～60％，海帶粉1％～2％，紅糖3％～5％，黃腐酸0.3％～0.5％，磷酸二氫鉀0.2％～0.5％，輕質(zhì)碳酸鈣0.5％～1％，水31％～75％混合均勻并調(diào)節(jié)PH7.2±0.2，制得培養(yǎng)基；所述的百分比為重量百分比；(三)、復合微生物發(fā)酵液的制備(1)、制備一級種子液培養(yǎng)基32％～67％，解磷菌5％～10％，硅酸鹽細菌5％～10％，固氮菌5％～10％，枯草芽胞桿菌5％～10％，酵母菌4％～8％，乳酸菌2％～5％，光合菌2％～5％，木霉菌5％～10％；所述的百分比為重量百分比；(2)、制備二級種子液在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量2％～5％的一級種子液，溫度控制在30～33℃，攪拌轉(zhuǎn)速150～180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48～60小時，制成二級種子液；(3)、微生物發(fā)酵液的制備在培養(yǎng)基中接種培養(yǎng)基重量10％～12％的二級種子液，溫度控制在30～33℃，攪拌轉(zhuǎn)速150～180rpm，好氧發(fā)酵24小時后，再進行厭氧培養(yǎng)48～60小時，制成復合微生物發(fā)酵液。
2. 如權(quán)利要求1所述的魚皮魚鱗制備微生物發(fā)酵液的方法，其特征在于所述的魚鱗酸洗工藝如下使用濃度為10X 15X的濃鹽酸浸泡魚鱗中10 12小時后，水洗至PH6 7。
3. 如權(quán)利要求1所述的魚皮魚鱗制備微生物發(fā)酵液的方法，其特征在于所述的酶解工藝如下在水中加入水重量50% 100X的魚皮或者酸洗過的魚鱗，調(diào)節(jié)PH9 ll，升溫到45°C 6(TC，加入水重量1% 2%的堿性蛋白酶酶解3 6小時，制得膠原蛋白母液。
4. 一種含有權(quán)利要求1或2或3所述的微生物發(fā)酵液的菌肥，其特征在于其由以下組分混合而成復合微生物發(fā)酵液50 % 55 % ，檸檬酸鉀18 % 20 % ，尿素8 % 10 % ，磷酸一銨4% 5%，黃腐酸3% 5%，己酸二乙氨基乙醇酯O. 2% 0. 5%，水4. 5% 16. 8%;所述的百分比為重量百分比。
全文摘要
本發(fā)明是一種魚皮魚鱗制備微生物發(fā)酵液的方法及含該發(fā)酵液的菌肥。以水產(chǎn)品加工下腳料的魚皮或者魚鱗為原料，經(jīng)過酸堿處理和酶解制得膠原蛋白母液作為發(fā)酵培養(yǎng)基的主要成分，再進行復合微生物發(fā)酵后制成復合微生物發(fā)酵液；利用制備的復合微生物發(fā)酵液與其它營養(yǎng)元素進行混配制得復合微生物菌肥。經(jīng)多種微生物復合發(fā)酵后制得復合微生物菌劑，不僅可以補充土壤有機質(zhì)，為作物提供營養(yǎng)，刺激作物生長，而且可以增加土壤的通透性，改良土壤。試驗證明，本發(fā)明的菌肥具有更高的肥效，施肥后作物的品質(zhì)更好。
文檔編號C05F1/00GK101734956SQ20091025577
公開日2010年6月16日 申請日期2009年12月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月26日
發(fā)明者孫志強, 張曉靜 申請人:煙臺綠云生物化學有限公司