專利名稱：一種鐵皮石斛組織培養(yǎng)的光調(diào)控方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鐵皮石斛種苗的組織培養(yǎng)的光調(diào)控方法，屬生物工程技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是傳統(tǒng)名貴中藥，具有滋陰 清熱、益氣生津、止咳潤肺及清咽明月之功效。石斛含有多糖及生物堿等多種化學(xué)成分。現(xiàn) 代藥理研究證明，石斛藥用活性強(qiáng)弱與多糖量高低相關(guān)，石斛多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能 及顯著提高機(jī)體殺傷腫瘤細(xì)胞的能力，是一種腫瘤免疫治療的調(diào)節(jié)劑。目前，鐵皮石斛種苗的培養(yǎng)主要是在室內(nèi)以組織培養(yǎng)的方式進(jìn)行，整個(gè)培養(yǎng)過程 主要采用日光燈作為光源。研究表明[李兆奎等海峽藥學(xué)2005. 03]，鐵皮石斛與幾種常 用混淆品的紅外吸收頻率、吸收峰的峰形和相對(duì)強(qiáng)度都存在較顯著的差異。表明鐵皮石斛 種苗在組織培養(yǎng)的不同階段，對(duì)光質(zhì)、光強(qiáng)的需求不盡相同。然而由于日光燈的發(fā)射光譜不 能很好地滿足鐵皮石斛不同生長階段生長對(duì)光的選擇性需求，是鐵皮石斛種苗培育周期較 長的主要原因之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有鐵皮石斛組織培養(yǎng)光源光效低，種苗培育周期長等不 足，提供一種與鐵皮石斛種苗在組織培養(yǎng)不同生長階段需光選擇特性相適應(yīng)的、簡便高效 的光調(diào)控方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明所設(shè)計(jì)的一種鐵皮石斛種苗培養(yǎng)的光調(diào)控方法，包括 由鐵皮石斛果實(shí)消毒后取得粉末狀種子，粉末狀種子通過種子萌發(fā)培養(yǎng)基培養(yǎng)，萌發(fā)形成 原球莖的過程，其特征在于鐵皮石斛種苗的組織培養(yǎng)過程中，以LED (半導(dǎo)體發(fā)光二極管) 植物生長照明系統(tǒng)作為光源，根據(jù)鐵皮石斛種苗在組織培養(yǎng)的不同生長階段，實(shí)施不同的 光照處理A 種子萌發(fā)階段光質(zhì)為白光、光強(qiáng)為10-15 μ mol · m_2 · s—1、光照時(shí)間12小時(shí)/ 天；B 種苗生長階段胚芽萌發(fā)后，光照處理選用光質(zhì)為紅光或紅、藍(lán)混合光；作為優(yōu)選的方案，在種苗生長階段，光照處理再分為兩個(gè)階段，第一階段為從胚形 成胚芽后的第1天至第30天，光照處理選用光質(zhì)為紅光，光強(qiáng)為45-50 μ mol · m-2 · s—1，光 照時(shí)間12小時(shí)/天；第二階段為從胚形成胚芽后的第31天后，光質(zhì)選用紅、藍(lán)混合光，紅 光藍(lán)光為4 1，光強(qiáng)為45-50 μ mol · m-2 · s—1，光照時(shí)間16小時(shí)/天。本發(fā)明的有益技術(shù)效果是鐵皮石斛幼苗通過采用不同生長階段實(shí)施不同光 照處理，使種苗能最大限度地利用光能供其光合作用，從而獲得最大生長量，試驗(yàn)結(jié)果表 明本發(fā)明的技術(shù)方案可有效地縮短鐵皮石斛種苗的培育周期，從種子到生根成品苗僅需 150-180天，比普通日光燈下培養(yǎng)生長周期縮短了 30-60天，降低了生產(chǎn)成本，而且本發(fā)明 培育的種苗遺傳性狀穩(wěn)定，品質(zhì)好。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，作為種子萌發(fā)培養(yǎng)基，配制完成后裝入試管中滅 菌消毒待用；取鐵皮石斛果實(shí)，用70-75%乙醇溶液消毒8分鐘，然后從乙醇溶液中撈出放 在無菌濾紙上，切開果實(shí)，把粉末狀種子抖落到種子萌發(fā)培養(yǎng)基，將完成接種的培養(yǎng)基置 入由LED(半導(dǎo)體發(fā)光二極管)植物生長照明系統(tǒng)作為光源的培養(yǎng)箱內(nèi)，光質(zhì)為白光、 10-15 μ mol - πι-2 · S"1的光強(qiáng)、光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)溫度25士2°C。胚萌發(fā)形成原球 莖后，經(jīng)約2-3個(gè)月的培養(yǎng)，長成l-2cm高的小苗。將長成l-2cm的試管小苗轉(zhuǎn)移到種苗生長培養(yǎng)基(基本培養(yǎng)基為1/2MS，每升培養(yǎng) 基含花寶1號(hào)0. Sg,花寶3號(hào)0. 5g，香蕉75g，白砂糖30g,瓊脂4. 5g，PH值6-6. 2)上，將完 成移苗的培養(yǎng)基置于光質(zhì)為紅光，光強(qiáng)45-50 μ mol · m_2 · s—1，光照時(shí)間12小時(shí)/天的培養(yǎng) 箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)90天后，試管苗可達(dá)到鐵皮石斛優(yōu)質(zhì)試管苗的標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)施例2:以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，作為種子萌發(fā)培養(yǎng)基，配制完成后裝入試管中滅 菌消毒待用；取鐵皮石斛果實(shí)，用70-75%乙醇溶液消毒8分鐘，然后從乙醇溶液中撈出放 在無菌濾紙上，切開果實(shí)，把粉末狀種子抖落到種子萌發(fā)培養(yǎng)基，將完成接種的培養(yǎng)基置 入由LED(半導(dǎo)體發(fā)光二極管)植物生長照明系統(tǒng)作為光源的培養(yǎng)箱內(nèi)，光質(zhì)為白光、 10-15 μ mol ·πΓ2 · s—1的光強(qiáng)、光照時(shí)間12小時(shí)/天，培養(yǎng)溫度25士2°C。胚萌發(fā)形成原球 莖后，經(jīng)約2-3個(gè)月的培養(yǎng)，長成l-3cm高的小苗。將長成2-3cm的試管小苗轉(zhuǎn)移到種苗生長培養(yǎng)基(基本培養(yǎng)基為1/2MS，每升培養(yǎng) 基含花寶1號(hào)0. Sg,花寶3號(hào)0. 5g，香蕉75g，白砂糖30g,瓊脂4. 5g，PH值6-6. 2)上，將完 成移苗的培養(yǎng)基置于光質(zhì)為紅光，光強(qiáng)45-50 μ mol · m_2 · s—1，光照時(shí)間12小時(shí)/天的培養(yǎng) 箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。試管小苗的培養(yǎng)再分為兩個(gè)階段第一階段為從胚形成胚芽后的第1天至第30 天，光照處理選用光質(zhì)為紅光，光強(qiáng)為45-50 μ mol ·πι-2 · s—1，光照時(shí)間12小時(shí)/天；第二 階段為從胚形成胚芽后的第31天后，光質(zhì)選用紅、藍(lán)混合光，紅光藍(lán)光為4 1，光強(qiáng)為 45-50 μ mol · m_2 · s—1，光照時(shí)間16小時(shí)/天。培養(yǎng)70天后，試管苗的高度達(dá)5-7cm，莖粗 3-5mm,根數(shù)3_5根，根長3_5cm，達(dá)到鐵皮石斛優(yōu)質(zhì)試管苗的標(biāo)準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種鐵皮石斛組織培養(yǎng)的光調(diào)控方法，包括將鐵皮石斛果實(shí)消毒后取得粉末狀種 子，粉末狀種子通過種子萌發(fā)培養(yǎng)基培養(yǎng)，萌發(fā)形成原球莖的過程，其特征在于鐵皮石斛種 苗的組織培養(yǎng)過程中，以LED(半導(dǎo)體發(fā)光二極管)植物生長照明系統(tǒng)作為光源，根據(jù)鐵皮 石斛組織培養(yǎng)的不同階段，實(shí)施不同的光照處理A 種子萌發(fā)階段光質(zhì)為白光、光強(qiáng)為10-15 μ mol · m_2 · s—1、光照時(shí)間12小時(shí)/天；B 種苗生長階段胚芽萌發(fā)后，光照處理選用光質(zhì)為紅光或紅、藍(lán)混合光。
2.如權(quán)利要求1所述的鐵皮石斛組織培養(yǎng)的光調(diào)控方法，其特征還在于，在所述的種 苗生長階段，光照處理再分為兩個(gè)階段，第一階段為從胚形成胚芽后的第1天至第30天， 光照處理選用光質(zhì)為紅光，光強(qiáng)為45-50 μ mol ·πΓ2· s—1，光照時(shí)間12小時(shí)/天；第二階 段為從胚形成胚芽后的第31天后，光質(zhì)選用紅、藍(lán)混合光，紅光藍(lán)光為4 1，光強(qiáng)為 45-50 μ mol · πΓ2 · s、，光照時(shí)間16小時(shí)/天。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種鐵皮石斛種苗的組織培養(yǎng)的光調(diào)控方法，包括由鐵皮石斛果實(shí)消毒后取得粉末狀種子，粉末狀種子通過種子萌發(fā)培養(yǎng)基培養(yǎng)，萌發(fā)形成原球莖的過程，其特征在于鐵皮石斛種苗的組織培養(yǎng)過程中，以LED(半導(dǎo)體發(fā)光二極管)植物生長照明系統(tǒng)作為光源，根據(jù)鐵皮石斛組織培養(yǎng)的不同階段，實(shí)施不同的光照處理。本發(fā)明通過采用不同生長階段實(shí)施不同光照處理，使鐵皮石斛種苗能最大限度地利用光能供其光合作用，從而獲得最大生長量。試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明的技術(shù)方案可有效地縮短鐵皮石斛種苗的培育周期，從種子到生根成品苗僅需150-180天，比普通日光燈下培養(yǎng)生長周期縮短了30-60天，且本發(fā)明培育的種苗遺傳性狀穩(wěn)定，品質(zhì)好。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102057867SQ20091015422
公開日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2009年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月14日
發(fā)明者周泓, 斯金平, 朱玉球, 潘學(xué)冬, 謝彬彬, 黃華宏 申請(qǐng)人:斯金平