專(zhuān)利名稱(chēng)：高產(chǎn)sod云芝菌絲體深層培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種能提高食用菌菌絲體中SOD活性的方法，具體地說(shuō)，涉及通過(guò)深層培養(yǎng)獲得高產(chǎn)SOD云芝菌絲體的方法。
背景技術(shù)：
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，簡(jiǎn)稱(chēng)SOD)是一種能夠清除超氧陰離子的酶，在機(jī)體的抗氧化防御體系中占有重要的地位，廣泛存在于動(dòng)物、植物、所有好氧微生物及少數(shù)厭氧微生物體內(nèi)。SOD可以提高人體對(duì)自由基損傷而誘發(fā)疾病的抵抗能力及對(duì)自由基外界誘發(fā)因子的抵抗能力，消除肌體疲勞，增強(qiáng)對(duì)超負(fù)荷的適應(yīng)力，具有抗炎、抗衰老和抗輻射作用，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、保健、食品及日用化學(xué)工業(yè)等方面。目前，SOD主要來(lái)源于動(dòng)物血液，但其來(lái)源有限。
云芝(Coriolus versicolor)是能夠治療疾病、具有很高藥用價(jià)值的一類(lèi)藥用真菌，在提高人體免疫功能、滋補(bǔ)、抗衰老以及對(duì)預(yù)防、抑制或治療疾病等方面的作用，早已受到我國(guó)歷代醫(yī)藥學(xué)家的關(guān)注，其醫(yī)療價(jià)值和保健作用也已引起了世界各國(guó)的廣泛重視。選擇云芝作為產(chǎn)SOD菌株具有發(fā)酵周期短、產(chǎn)量高、SOD活力較高、藥用價(jià)值高、產(chǎn)品風(fēng)味清香等優(yōu)點(diǎn)，開(kāi)發(fā)前景廣闊。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)上述問(wèn)題，提供一種通過(guò)深層培養(yǎng)獲得高產(chǎn)SOD云芝菌絲體的方法。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下高產(chǎn)SOD云芝菌絲體深層培養(yǎng)方法，采用云芝菌絲體進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)基組成為馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH；培養(yǎng)條件為接種量10％，菌齡3天，培養(yǎng)溫度為23～25℃，采用微弱光照，發(fā)酵周期為4天。
本發(fā)明還包括物理方法對(duì)培養(yǎng)結(jié)束的云芝菌絲體進(jìn)行應(yīng)激的步驟。如將培養(yǎng)結(jié)束的菌絲體進(jìn)行30℃熱處理2小時(shí)后再進(jìn)行10℃冷處理1.5小時(shí)，或用38kHz超聲波對(duì)培養(yǎng)結(jié)束的云芝菌絲體處理40分鐘。
本發(fā)明選取云芝進(jìn)行菌絲體的液體發(fā)酵培養(yǎng)，通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)工藝，包括培養(yǎng)基成分和含量以及改變菌絲體培養(yǎng)的環(huán)境條件、培養(yǎng)方式等提高菌絲中SOD活性。并可通過(guò)物理應(yīng)激方法對(duì)云芝菌絲體產(chǎn)SOD進(jìn)行誘導(dǎo)，使菌絲中SOD活性得到進(jìn)一步提高。
本發(fā)明成本低、后處理工藝簡(jiǎn)單，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，并可借助本發(fā)明開(kāi)發(fā)一種富含SOD的藥用真菌類(lèi)功能保健食品或藥劑，為新型SOD保健食品或藥劑的開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例方式
下述菌種均為云芝菌株。
對(duì)比例采用常用的馬鈴薯綜合培養(yǎng)基馬鈴薯(去皮)200g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂1.5g，維生素B15～10mg，瓊脂20g，水1000mL，24℃、150r/min。
培養(yǎng)條件普通光照，2天菌齡菌種接種，接種量為10％，培養(yǎng)4天后收獲菌絲體。
獲得4.1g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為1.1U/gDW，單位體積發(fā)酵液SOD總活力為4.5U/ml。
實(shí)施例1培養(yǎng)基馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH。24℃、150r/min。
培養(yǎng)條件普通光照，2天菌齡菌種接種，接種量為10％，培養(yǎng)4天后收獲菌絲體。
獲得12.0g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為4.5U/gDW，單位體積發(fā)酵液SOD總活力為54.0U/ml。
實(shí)施例2培養(yǎng)基馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH。
培養(yǎng)條件接種量10％，菌齡3天，培養(yǎng)溫度為23～25℃，采用微弱光照，發(fā)酵周期4天。
獲得18.0g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為4.3U/gDW，單位體積發(fā)酵液SOD總活力為77.4U/ml。
實(shí)施例3培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件同實(shí)例3，當(dāng)培養(yǎng)結(jié)束后，對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行30℃熱處理2h后再進(jìn)行10℃冷處理1.5h。
獲得17.6g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為6.6U/gDW，單位體積發(fā)酵液SOD總活力為116.2U/ml。
實(shí)施例4培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件同實(shí)例3，培養(yǎng)結(jié)束后，用38kHz超聲波處理云芝發(fā)酵液40min。
獲得17.9g干菌體，每克云芝干菌體SOD活力為6.3U/gDW，單位體積發(fā)酵液SOD總活力為112.8U/ml。
權(quán)利要求
1.高產(chǎn)SOD云芝菌絲體深層培養(yǎng)方法，其特征是采用云芝菌絲體進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)基組成為馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH；培養(yǎng)條件為接種量10％，菌齡3天，培養(yǎng)溫度為23～25℃，采用微弱光照，發(fā)酵周期為4天。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)SOD云芝菌絲體深層培養(yǎng)方法，其特征是對(duì)培養(yǎng)結(jié)束的云芝菌絲體采用物理應(yīng)激方法進(jìn)行應(yīng)激。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高產(chǎn)SOD云芝菌絲體深層培養(yǎng)方法，其特征是所述物理應(yīng)激方法為將培養(yǎng)結(jié)束的菌絲體進(jìn)行30℃熱處理2小時(shí)后再進(jìn)行10℃冷處理1.5小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高產(chǎn)SOD云芝菌絲體深層培養(yǎng)方法，其特征是所述物理應(yīng)激方法為用38kHz超聲波對(duì)培養(yǎng)結(jié)束的云芝菌絲體處理40分鐘。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種能提高食用菌菌絲體中SOD活性的方法，公開(kāi)了一種通過(guò)深層培養(yǎng)獲得高產(chǎn)SOD云芝菌絲體的方法。它采用云芝菌絲體進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)基組成為馬鈴薯160g/L，葡萄糖16g/L，黃豆粉18g/L，麩皮10g/L，自然pH；培養(yǎng)條件為接種量10％，菌齡3天，培養(yǎng)溫度為23～25℃，采用微弱光照，發(fā)酵周期為4天。本發(fā)明還包括物理應(yīng)激步驟。本發(fā)明成本低、后處理工藝簡(jiǎn)單，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，并可借助本發(fā)明開(kāi)發(fā)一種富含SOD的藥用真菌類(lèi)功能保健食品或藥劑，為新型SOD保健食品或藥劑的開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)A01G1/04GK1568652SQ20041002712
公開(kāi)日2005年1月26日 申請(qǐng)日期2004年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月10日
發(fā)明者黃志立 申請(qǐng)人:深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院