專利名稱：黃芩提取物作為農(nóng)用殺菌劑的應(yīng)用以及含有之的農(nóng)用殺菌組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及黃芩提取物作為農(nóng)用殺菌劑的應(yīng)用，以及涉及含有黃芩提取物與嘧霉胺、乙霉威或腐霉利的組合作為活性成分的農(nóng)用殺菌組合物。
背景技術(shù)：
農(nóng)作物由于病蟲害造成作物產(chǎn)量損失巨大，為此每年均需要施用大量的農(nóng)藥進(jìn)行病蟲害防治以挽回作物產(chǎn)量損失。近年來病蟲害對(duì)農(nóng)作物上的危害越來越重，而且由于農(nóng)藥濫用，是作物病原對(duì)農(nóng)藥產(chǎn)生了越來越嚴(yán)重的抗性，造成病蟲害防治效果逐年降低，同時(shí)由于施藥量過大，對(duì)環(huán)境造成一定程度的污染。因此，仍就需要具有更好的病原控制效果的農(nóng)藥品種。
將能夠有效控制植物病原生長的植物提取物應(yīng)用于農(nóng)業(yè)病害防治，或者將之與其他殺菌化合物混配，從而最大限度降低農(nóng)藥殘留，提供更安全有效的農(nóng)用化學(xué)產(chǎn)品，一直是研究人員所追求的，但現(xiàn)有的殺菌劑在殺菌活性和殘留等方面都并不能令人滿意。
本發(fā)明人從大量的植物中篩選可以用于農(nóng)業(yè)病害防治的一系列提取化合物，發(fā)現(xiàn)黃苓提取物具有良好的農(nóng)業(yè)病害防治效果，并通過大量的藥效試驗(yàn)加以證實(shí)。同時(shí)，本發(fā)明人還將黃苓提取物與已知的殺菌化合物組合，篩選出一些增效的農(nóng)用殺菌組合物，結(jié)果證實(shí)，本發(fā)明殺菌組合物對(duì)許多農(nóng)作物病害具有很好的防治作用，并且對(duì)環(huán)境友好，具有殘留低、防效高、殺菌譜廣等特點(diǎn)，于是完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容所解決的技術(shù)問題本發(fā)明的目的是提供黃芩提取物作為農(nóng)用殺菌劑的應(yīng)用。
本發(fā)明的另一目的是提供一種含有黃芩提取化合物與與嘧霉胺、乙霉威或腐霉利的組合作為活性成分的農(nóng)用殺菌組合物，它具有寬廣的殺菌譜和優(yōu)異的增效防治效果。
本發(fā)明的再一目的是提供所述殺菌組合物防治農(nóng)作物病害的應(yīng)用。
技術(shù)方案本發(fā)明提供黃苓提取物作為農(nóng)用殺菌劑防治農(nóng)作物病害的應(yīng)用。
在本發(fā)明中，黃芩提取物主要含有至少一種下列黃苓提取化合物黃芩甙(Baicalin，又名黃芩苷)、漢黃芩甙(Wogonoside，又名漢黃芩苷)、黃芩素(Baicalein)、漢黃芩素(Wogonin)、黃芩新素I(SkullcapflavoneI，又名黃芩黃酮I)和黃芩新素II(Skullcapflavone II，又名黃芩黃酮II)。上述黃苓提取化合物的具體結(jié)構(gòu)可參見例如《中藥化學(xué)成分提取分離手冊(cè)》(楊云、馮衛(wèi)生主編，北京，中國中醫(yī)藥出版社，1998)。優(yōu)選的是例如黃芩甙。黃苓提取物可以是上述提取化合物的混合物，也可是其單體。通常它們可以從市場上購得，例如黃芩甙單體可從浙江寧波雙林中藥有限公司購得。
顯然，黃苓提取物也可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法從黃芩中直接提取。例如將黃芩干粉加入乙醚進(jìn)行提取，得到乙醚提取物和藥渣，乙醚提取物經(jīng)過聚酰胺柱層析，氯仿洗脫后，第二黃色帶經(jīng)甲醇重結(jié)晶得到黃芩素，第一黃色帶再經(jīng)過聚酰胺柱層析和60％乙醇洗脫后出現(xiàn)的第一黃色帶經(jīng)甲醇重結(jié)晶得到黃芩新素，出現(xiàn)的第二黃色帶經(jīng)80％乙醇重結(jié)晶得到漢黃芩素；乙醚提取黃芩干粉時(shí)得到的藥渣經(jīng)95％乙醇回流提取后趁熱過濾，將濾液放冷后再過濾得到的沉淀溶于水，用聚酰胺柱層析，水洗脫后出現(xiàn)的黃色帶用50％的乙醇重結(jié)晶得到漢黃芩甙，乙醚提取黃芩干粉時(shí)得到的藥渣經(jīng)乙醇回流提取后過濾，得到的濾渣再加水煮沸并過濾，得到的濾液加HCl至不再生成沉淀，過濾取沉淀用含2％HCl的乙醇液洗滌，再以甲醇重結(jié)晶即可得到黃芩甙。
黃苓提取物可用于防治多種農(nóng)作物病害，例如可以例舉由下列病原引起的農(nóng)作物病害立枯絲核菌、小麥根腐病菌、小麥赤霉病菌、玉米大斑病菌、馬鈴薯晚疫病菌、棉花枯萎病菌、番茄早疫病菌、棉花炭疽病菌或番茄灰霉病菌。優(yōu)選的是，立枯絲核菌、小麥根腐病菌、小麥赤霉病菌、玉米大斑病菌或番茄灰霉病菌。
本發(fā)明還提供一種增效的農(nóng)用殺菌組合物，它含有a)黃芩提取物與b)嘧霉胺、乙霉威或腐霉利中任意一種化合物作為活性成分，組分a)與組分b)的比例可以是任意的，只要能產(chǎn)生增效作用即可。一般而言，所述的組分a)與組分b)的重量比為1∶0.01-100，優(yōu)選的是1∶0.1-10，更優(yōu)選的是1-3∶3-1。
在本發(fā)明組合物中，黃芩提取物主要含有至少一種下列黃苓提取化合物黃芩甙、漢黃芩甙、黃芩素、漢黃芩素、黃芩新素I和黃芩新素II。優(yōu)選的是例如黃芩甙。黃苓提取物可以是上述提取化合物的混合物，也可是其單體。
黃苓提取物和含有之的本發(fā)明組合物可以轉(zhuǎn)換成常規(guī)制劑如乳油、可濕性粉劑、粒劑、可溶性粉劑、水分散粒劑、油懸浮劑、水懸浮劑、水乳劑、微乳劑、乳劑、粉劑、粗粉劑、泡騰劑、膏劑和水面漂浮劑劑型。
施用形式取決于特定的使用；在各種情況下，須保證它們的分散盡可能的細(xì)微和均勻。
這些制劑可以用已知的方式制備，例如通過將活性化合物與溶劑和/或載體混合，如果需要，可以采用乳化劑和分散劑來填充，當(dāng)用水作稀釋劑時(shí)，也可以同時(shí)采用其它的有機(jī)溶劑作助溶劑。
適合用于此目的的助溶劑主要是-溶劑如芳族化合物(例如二甲苯)、氯代芳族化合物(例如氯苯)、石蠟(例如石油餾份)、醇類(例如甲醇、丁醇)、酮類(例如環(huán)已酮)、胺類(例如乙醇胺、二甲基甲酰胺)和水；-載體如研碎的天然礦物質(zhì)(例如高嶺土、礬土、滑石、白堊)和研碎的合成礦物質(zhì)(例如高分散的硅酸、硅酸鹽)；-乳化劑如非離子和陰離子乳化劑(例如聚氧乙烯脂肪醇醚、烷基磺酸鹽和芳基磺酸鹽)；-分散劑如木素亞硫酸鹽廢液或甲基纖維素。
適合的表面活性物質(zhì)是芳族磺酸(例如木素磺酸、苯酚磺酸、萘磺酸和二丁基萘磺酸)和脂肪酸的堿金屬、堿土金屬和銨鹽，烷基磺酸鹽和烷基芳基磺酸鹽，烷基硫酸鹽、月桂基醚硫酸和脂肪醇硫酸鹽，以及硫酸化的十六-、十七-和十八醇以及脂肪醇醚的鹽，磺化萘和其衍生物與甲醛的的縮合產(chǎn)物，萘或萘磺酸與苯酚和甲醛的縮合產(chǎn)物，聚氧乙烯辛基酚醚、乙氧基烷化的異辛基-、辛基-或壬基酚，烷基苯酚或三丁基苯基聚乙二醇醚，烷基芳基聚醚醇，異三癸基醇、脂肪醇環(huán)氧乙烷縮合物，乙氧基化蓖麻油，聚氧乙烯-或聚氧丙烯烷基醚，月桂醇聚乙二醇醚乙酸酯、失水山梨醇酯，木素亞硫酸鹽廢液或甲基纖維素。
含水的施用形式可以通過加水，例如由乳油、分散液、膏劑、可濕性粉劑、泡騰劑或水可分散顆粒劑制備。制備乳劑、膏劑、油分散液或液態(tài)水面漂浮劑時(shí)，通過加入潤濕劑、粘合劑、分散劑或乳化劑，將物質(zhì)于水中均質(zhì)化或溶于油或溶劑中。而且，也可以制備由活性物質(zhì)、潤濕劑、粘合劑、分散劑或乳化劑和可能的溶劑或油組成的濃縮物，該濃縮物適合于用水稀釋。
粉劑、撒施粉劑、泡騰劑、固態(tài)水面漂浮劑組合物可以通過將活性物質(zhì)與固體載體混合或一起研磨而生產(chǎn)。
顆粒劑(例如，涂敷、浸漬或均質(zhì)顆粒劑)可以通過將活性化合物粘合到固體載體上而制備。
固體載體是礦石土如硅膠、硅酸、硅酸鹽、滑石、高嶺土、石灰石、石灰、白堊、紅玄武土、黃土、陶土、白云石、硅藻土、硫酸鈣和硫酸鎂、氧化鎂，研碎的合成材料、化肥，如硫酸銨、磷酸銨、硝酸銨、尿素和植物產(chǎn)物如面粉、樹皮粉、木粉和堅(jiān)果殼粉、纖維素粉和其它固體載體。在直接可用制劑中的活性化合物濃度可以在相對(duì)寬的范圍內(nèi)變化。
通常，組合物含有按重量計(jì)0.01至90％的活性成分，且通常根據(jù)制劑類型的不同，優(yōu)選含有按重量計(jì)0.5至50％的活性成分。
防治農(nóng)作物病害時(shí)，制劑含有按重量計(jì)0.0001至10％，優(yōu)選按重量計(jì)0.01至1％的活性化合物是優(yōu)選的。
本發(fā)明組合物施用劑量，根據(jù)不同的作物、施用時(shí)間、氣候條件等因素的不同，一般為1-1000g a.i./ha，優(yōu)選為5-300g a.i./ha。一般采用葉面施用，例如葉面噴霧處理。也可以做其他處理如拌種、灌根等，在這種情況下，可以根據(jù)需要調(diào)整施用劑量。例如在土壤處理防治時(shí)，施用劑量介于10-3000g a.i./ha的范圍內(nèi)。
本發(fā)明殺菌組合物可用于防治多種農(nóng)作物病害，特別是對(duì)于番茄灰霉病的防治具有顯著增效作用。
有益效果黃苓提取物及含有之的本發(fā)明殺菌組合物對(duì)許多農(nóng)作物病害具有很好的防治作用，并且對(duì)環(huán)境友好，具有殘留低、防效高、殺菌譜廣等特點(diǎn)。
具體實(shí)施例本發(fā)明用下列實(shí)施例進(jìn)行說明，但不限制本發(fā)明。
制劑實(shí)施例制劑實(shí)施例11.5％乳油原料 用量(重量份)黃芩甙0.5嘧霉胺1脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉10
氮酮 5氯仿 83.5稱取活性成分溶解于溶劑氯仿中，然后再加入乳化劑和滲透劑，攪拌均勻，即制得所述的1.5％乳油。
制劑實(shí)施例22％乳油原料 用量(重量份)黃芩甙 0.5乙霉威 1.5農(nóng)乳2201 10YZ-901 15二甲苯 73稱取活性成分溶解于溶劑中，然后再加入乳化劑和滲透劑，攪拌均勻，即制得所述的2％乳油。
制劑實(shí)施例310％乳油原料 用量(重量份)漢黃芩甙 4腐霉利 6農(nóng)乳2201 15YZ-901 10二甲苯 65稱取活性成分溶解于溶劑中，然后再加入乳化劑和滲透劑，攪拌均勻，即制得所述的10％乳油。
制劑實(shí)施例48％乳油原料 用量(重量份)漢黃芩甙 2黃芩新素II 2腐霉利 4農(nóng)乳2201 15YZ-901 10二甲苯 67稱取活性成分溶解于溶劑中，然后再加入乳化劑和滲透劑，攪拌均勻，即制得所述的8％乳油。
制劑實(shí)施例56％乳油原料 用量(重量份)黃芩甙 0.5漢黃芩甙 0.5黃芩新素I0.5黃芩新素II 0.5漢黃芩素 1黃芩素 1乙霉威 2農(nóng)乳2201 10YZ-901 15二甲苯 69稱取活性成分溶解于溶劑中，然后再加入乳化劑和滲透劑，攪拌均勻，即制得所述的6％乳油。
制劑實(shí)施例612％可濕性粉劑原料 用量(重量份)黃芩新素I2嘧霉胺 10白炭黑 2十二烷基苯磺酸鈉 5輕質(zhì)碳酸鈣 81先將輕質(zhì)碳酸鈣預(yù)粉碎，然后將之與上述其他成分充分混合，再采用氣流粉碎法加工，即制得所述得12％可濕性粉劑。
制劑實(shí)施例72％可濕性粉劑原料用量(重量份)黃芩甙 0.5乙霉威 1.5十二烷基苯磺酸鈉8NNO 5白炭黑 10陶土75先將陶土預(yù)粉碎，然后將之與上述其他成分充分混合，再采用氣流粉碎法加工，即制得所述得2％可濕性粉劑。
制劑實(shí)施例85％油懸浮劑原料用量(重量份)漢黃芩素3嘧霉胺 2
鄰苯二甲酸二甲脂 20脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉 15礦物油 60稱取活性成分，加入礦物油和上述加工輔助成分，經(jīng)過球磨、砂磨處理，即制得所述的5％由懸乳劑。
制劑實(shí)施例915％水懸浮劑原料 用量(重量份)黃芩素 5腐霉利 10乙二醇 5脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉 15水 60稱取活性成分，加入水和上述加工輔助成分，經(jīng)過球磨、砂磨處理，即制得所述的15％水懸乳劑。
制劑實(shí)施例1020％可濕性粉劑原料 用量(重量份)黃芩甙 20十二烷基苯磺酸鈉 8NNO 5白炭黑 10陶土 57先將陶土預(yù)粉碎，然后將之與上述其他成分充分混合，再采用氣流粉碎法加工，即制得所述得20％可濕性粉劑。
生物實(shí)施例黃芩提取物的制備稱取20g黃芩干粉，加入100ml 80％乙醇，置于25℃的搖床上振蕩2天，然后400rmp離心20分鐘，四層紗布過濾，40℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，然后用50％的乙醇定容至20ml，即為提取原液保存?zhèn)溆谩?br> 生物實(shí)施例1黃芩提取物抑菌譜試驗(yàn)取1ml黃芩提取物原液與100ml PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂12g，水1000ml)混合均勻，倒皿，待冷卻后，在8.5cm平皿中央接一直徑0.6cm的供試菌菌盤。每處理重復(fù)4次，以混有50％乙醇1ml的PDA和純PDA培養(yǎng)基作為對(duì)照。置于25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)5天(其中棉花黃萎病菌培養(yǎng)10天，馬鈴薯晚疫病菌在18℃下培養(yǎng)10天)，觀察記錄菌落大小，用十字交叉法測量菌落直徑，計(jì)算抑菌率。
抑菌率(％)＝(CK凈生長量-處理凈生長量)/CK凈生長量×100(注凈生長量＝菌落直徑-菌盤直徑)試驗(yàn)結(jié)果見表1。
表1.黃芩提取物對(duì)11種植物病原真菌菌絲生長的抑制作用結(jié)果
從表1中可以看出，黃芩提取物原液100倍液對(duì)供試的11種真菌中的10種均有不同程度的抑制作用，其中對(duì)立枯絲核菌、小麥根腐病菌、小麥赤霉病菌、玉米大斑病菌這4種病原菌的抑制率在60％以上，其中對(duì)小麥根腐病菌的抑菌率為78.65％，對(duì)立枯絲核菌的抑菌率最高為82.21％。因此說明黃芩提取物對(duì)植物病原的殺菌譜廣。
生物實(shí)施例2黃芩提取物對(duì)番茄灰霉病的防治試驗(yàn)將提取分離的黃芩甙、漢黃芩甙、黃芩素、黃芩新素、漢黃芩素測定對(duì)番茄灰霉病的防治效果，結(jié)果如表2所示。
表2.黃芩提取物中活性成分防效測試
注ns表示處理與乙霉威之間差異不顯著(5％顯著水平)；*表示處理與乙霉威之間差異顯著。
從表2數(shù)據(jù)中可以看出黃芩提取物中幾種主要成分對(duì)番茄灰霉病都具有很好的防治效果。
生物實(shí)施例3黃芩提取物與乙霉威組合的毒力測定試驗(yàn)通過黃芩提取物與乙霉威在不同配比下對(duì)番茄灰霉病菌(Botrytiscinerea Pers.)的毒力測定結(jié)果如表3所示。
表3.黃芩提取物與乙霉威配比測試結(jié)果
注表中黃芩提取物都以黃芩甙的量計(jì)量根據(jù)表3所示，由共毒系數(shù)可知，黃芩提取物與乙霉威按1∶3～3∶1的比例配比對(duì)番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)具有明顯的增效作用，二者可按比例混配。
雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基本上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
權(quán)利要求
1.黃苓提取物作為農(nóng)用殺菌劑防治農(nóng)作物病害的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中，所述的黃芩提取物主要含有至少一種下列黃芩提取化合物黃芩甙、漢黃芩甙、黃芩素、漢黃芩素、黃芩新素I和黃芩新素II。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的應(yīng)用，其中，所述的農(nóng)作物病害的病原為下列立枯絲核菌、小麥根腐病菌、小麥赤霉病菌、玉米大斑病菌、馬鈴薯晚疫病菌、棉花枯萎病菌、番茄早疫病菌、棉花炭疽病菌或番茄灰霉病菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3之任一的應(yīng)用，其中，所述的農(nóng)作物病害的病原為下列立枯絲核菌、小麥根腐病菌、小麥赤霉病菌、玉米大斑病菌或番茄灰霉病菌。
5.一種農(nóng)用殺菌組合物，其特征在于，它含有a)黃芩提取物與b)嘧霉胺、乙霉威或腐霉利的組合作為活性成分，組分a)與組分b)的重量比為1∶0.01-100。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殺菌組合物，其特征在于，組分a)與組分b)的重量比為1∶0.1-10。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的殺菌組合物，其中，黃芩提取物主要含有至少一種下列黃苓提取化合物黃芩甙、漢黃芩甙、黃芩素、漢黃芩素、黃芩新素I和黃芩新素II。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的殺菌組合物，其中，組分a)為黃芩甙，組分b)為乙霉威。
9.權(quán)利要求5-8之任一所述的殺菌組合物防治農(nóng)作物灰霉病的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的應(yīng)用，其中，所述的農(nóng)作物灰霉病是番茄灰霉病。
全文摘要
本發(fā)明涉及黃芩提取物作為農(nóng)用殺菌劑防治農(nóng)作物病害的應(yīng)用，以及涉及含有黃芩提取物和嘧霉胺、乙霉威和腐霉利中任意一種化合物的組合作為活性成分的殺菌組合物。黃苓提取物及含有之的農(nóng)用殺菌組合物對(duì)多種農(nóng)作物病害有很好的防治效果，并且對(duì)環(huán)境友好，具有殘留低、防效高、殺菌譜廣等特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A01N43/16GK1618285SQ20031011531
公開日2005年5月25日 申請(qǐng)日期2003年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月18日
發(fā)明者李正先, 曹克強(qiáng), 王菊林, 胡同樂, 肖富生, 紀(jì)莉景, 甄文超 申請(qǐng)人:河北宣化農(nóng)藥有限責(zé)任公司, 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)