專(zhuān)利名稱(chēng)：蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁殖方法和所使用的培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
蝎尾蕉原屬于旅人蕉科(Strelitziaceae)蝎尾蕉屬(Heliconia)，現(xiàn)多數(shù)學(xué)者將其獨(dú)立為蝎尾蕉科(Heliconiaceae)。蝎尾蕉為多年生草本植物，本屬植物原生種有80多種，變種、園藝栽培種、雜交種等的數(shù)量400種以上，主要分布于美洲熱帶地區(qū)和太平洋諸島，其中許多種類(lèi)其花序具有鮮艷的色彩和奇特的造型，是觀賞價(jià)值極高的花卉，是道路、公園、庭院的高檔綠化樹(shù)種，可叢植、列植，也可單株種植；較矮生的蝎尾蕉也可盆栽，一些種類(lèi)由于它們有較強(qiáng)的耐陰性，又可在室內(nèi)盆栽觀賞；同時(shí)，由于蝎尾蕉的花色艷麗、保存時(shí)間長(zhǎng)，又是不可多得的室內(nèi)高檔切花材料，適合于作花籃、壁瓶、掛籃等，可用來(lái)裝飾賓館、舞廳、酒店和商場(chǎng)櫥窗等，也可用于家庭觀賞。目前我國(guó)市場(chǎng)產(chǎn)品數(shù)量少，種苗奇缺。
蝎尾蕉的繁殖常采用分株繁殖方法，繁殖系數(shù)低，而進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)外植體去污難，不定芽誘導(dǎo)生長(zhǎng)慢，增殖系數(shù)不高。本發(fā)明專(zhuān)利利用特殊的外植體處理方法對(duì)外植體進(jìn)行處理，并利用獨(dú)特的培養(yǎng)基進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)和叢生芽增殖及壯苗生根等，能進(jìn)行工廠化生產(chǎn)并獲得大量試管苗，為滿(mǎn)足市場(chǎng)的需要進(jìn)行推廣提供一條有效的途徑。
目前國(guó)內(nèi)外僅對(duì)少數(shù)蝎尾蕉品種進(jìn)行了組織培養(yǎng)的初步實(shí)驗(yàn)研究，未有大規(guī)模生產(chǎn)和專(zhuān)利申請(qǐng)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明對(duì)10多種蝎尾蕉屬植物的組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)研究。提供了蝎尾蕉屬植物的組織培養(yǎng)繁殖方法和所使用的培養(yǎng)基。其外植體消毒方法、培養(yǎng)基成分獨(dú)特且簡(jiǎn)單實(shí)惠，應(yīng)用價(jià)值高。蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁殖方法，本發(fā)明所提供的蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁殖方法包括下述步驟1.材料此發(fā)明已實(shí)驗(yàn)的材料有10種蝎尾蕉垂序蝎蕉蕉(Heliconia rostrataRuiz & Pavon)、扇形蝎尾蕉(H.librata Griggs)、紅黃蝎尾蕉(H.latispatha Benthamcv.Red-Yellow Gyro)、金火炬蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.X H.spathocircinataAristeguieta cv.Golden Torch)、桔紅蝎尾蕉(H.psittacorum X H.marginata)、火鳥(niǎo)蝎尾蕉(H.Stricta Huber cv.Fire Bird)、彩虹蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.cv.Sassy)、圣溫紅蝎尾蕉(H.Psittacorum L.f.cv.St.Vincent Red)、多色蝎尾蕉(H.psittacorum L.f.cv.Andromeda)、火紅蝎尾蕉(H.Densiflora Verlot cv. Fire Flash)10種材料均取自華南植物園蝎尾蕉園。
2.外植體誘導(dǎo)材料消毒的方法從田間挖取生長(zhǎng)旺盛的垂序蝎尾蕉根狀莖，除去根與葉，用自來(lái)水沖洗干凈后，用0.1％的高錳酸鉀溶液浸泡5分鐘，取出毛巾將根狀莖抹干，再放入0.1％的多菌靈溶液浸泡5分鐘，帶少量藥劑用黑色的塑料袋包裝好放在30℃左右的恒溫箱中暗培養(yǎng)，在莖節(jié)處能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做為初步滅菌的外植體。將外植體在超凈工作臺(tái)上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分鐘，無(wú)菌水沖洗3次，用解剖刀剝除芽鱗片，每剝一層鱗片，用0.1％升汞浸泡1分鐘，無(wú)菌水沖洗三次，直至剝至露出生長(zhǎng)點(diǎn)為止。剝?nèi)〉纳L(zhǎng)點(diǎn)越小，污染率越少，但出芽速度較慢。
3.不定芽誘導(dǎo)切取5立方厘米左右的帶生長(zhǎng)點(diǎn)的組織塊接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基MS+6-芐基嘌呤5-10毫克/升+萘乙酸0.5-1.0毫克/升+15％椰子水上誘導(dǎo)不定芽，30天左右有不定芽形成。培養(yǎng)基均含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，瓊脂0.7％。培養(yǎng)溫度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小時(shí)/天。椰子水由新鮮上市的椰子中的汁水經(jīng)過(guò)濾而來(lái)。加入椰子汁能明顯提高不定芽的出芽速度和不定芽的生長(zhǎng)速度。
4.繼代增殖培養(yǎng)40天左右將不定芽轉(zhuǎn)移到MS+6-芐基嘌呤5-10毫克/升+萘乙0.5-1.0毫克/升培養(yǎng)基上繼代增殖，一般40天左右為一個(gè)繼代周期。在增殖過(guò)程中去除椰子汁主要是為了降低成本。
5.壯苗培養(yǎng)增殖到一定代數(shù)后接種到壯苗培養(yǎng)基MS+6-芐基嘌呤1-2毫克/升+萘乙酸0.1-0.2毫克/升上壯苗。
6.生根培養(yǎng)壯苗后，當(dāng)苗高2-3厘米高時(shí)可用于生根，在生根培養(yǎng)基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株。加入活性炭根數(shù)增多，能防止部分切口褐變。
7.試管苗移栽當(dāng)試管苗能長(zhǎng)至4-5厘米高時(shí)，轉(zhuǎn)移到自然光下煉苗10天，當(dāng)試管苗能長(zhǎng)至5-6厘米高時(shí)，將其從玻璃瓶中取出，洗凈根部的培養(yǎng)基，移入泥炭加河沙的混合基質(zhì)中，保持適當(dāng)通風(fēng)和足夠的濕度，1周左右試管苗可恢復(fù)生長(zhǎng)，移栽的成活率均可達(dá)90％-100％。進(jìn)行煉苗處理有利于試管苗角質(zhì)層的形成和對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力，移栽成活率增高。
本發(fā)明提供的蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁發(fā)明具有外植體去污成功率較高，出苗快，穩(wěn)定性高，苗壯，種苗品質(zhì)好、抗性強(qiáng)、生長(zhǎng)良好等優(yōu)勢(shì)。
2.外植體誘導(dǎo)材料消毒的方法從田間挖取生長(zhǎng)旺盛的垂序蝎尾蕉根狀莖，除去根與葉，用自來(lái)水沖洗干凈后，用0.1％的高錳酸鉀溶液浸泡5分鐘，取出毛巾將根狀莖抹干，再放入0.1％的多菌靈溶液浸泡5分鐘，帶少量藥劑用黑色的塑料袋包裝好放在30℃左右的恒溫箱中暗培養(yǎng)，在莖節(jié)處能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做為初步滅菌的外植體。將外植體在超凈工作臺(tái)上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分鐘，無(wú)菌水沖洗3次，用解剖刀剝除芽鱗片，每剝一層鱗片，用0.1％升汞浸泡1分鐘，無(wú)菌水沖洗三次，直至剝至露出生長(zhǎng)點(diǎn)為止。
3.不定芽誘導(dǎo)切取5立方厘米左右的帶生長(zhǎng)點(diǎn)的組織塊接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基MS+6-芐基嘌呤10毫克/升+萘乙酸1.0毫克/升+15％椰子水上誘導(dǎo)不定芽，30天左右有不定芽形成。培養(yǎng)基均含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，瓊脂0.7％。培養(yǎng)溫度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小時(shí)/天。椰子水由新鮮上市的椰子中的汁水經(jīng)過(guò)濾而來(lái)。
4.繼代增殖培養(yǎng)40天左右將不定芽轉(zhuǎn)移到MS+6-芐基嘌呤10毫克/升+萘乙酸1.0毫克/升培養(yǎng)基上繼代增殖，一般40天左右為一個(gè)繼代周期。
5.壯苗培養(yǎng)增殖到一定代數(shù)后接種到壯苗培養(yǎng)基MS+6-芐基嘌呤2毫克/升+萘乙酸0.2毫克/升上壯苗。
6.生根培養(yǎng)壯苗后，當(dāng)苗高2-3厘米高時(shí)可用于生根，在生根培養(yǎng)基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株。
7.試管苗移栽當(dāng)試管苗能長(zhǎng)至4-5厘米高時(shí)，轉(zhuǎn)移到自然光下煉苗10天，當(dāng)試管苗能長(zhǎng)至5-6厘米高時(shí)，將其從玻璃瓶中取出，洗凈根部的培養(yǎng)基，移入泥炭加河沙的混合基質(zhì)中，保持適當(dāng)通風(fēng)和足夠的濕度，1周左右試管苗可恢復(fù)生長(zhǎng)，移栽的成活率均可達(dá)90％以上。
權(quán)利要求
1.一種蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁殖方法，其特征在于該方法包括如下的步驟1)外植體誘導(dǎo)材料消毒從田間挖取生長(zhǎng)旺盛的垂序蝎尾蕉根狀莖，除去根與葉，用自來(lái)水沖洗干凈后，用0.1％的高錳酸鉀溶液浸泡5分鐘，取出毛巾將根狀莖抹干，再放入0.1％的多菌靈溶液浸泡5分鐘，帶少量藥劑用黑色的塑料袋包裝好放在30℃-35℃的恒溫箱中暗培養(yǎng)，在莖節(jié)處能形成4-6厘米的新芽，以此新芽做為初步滅菌的外植體；將外植體在超凈工作臺(tái)上用酒精浸泡30秒后，再用0.1％升汞浸泡10分鐘，無(wú)菌水沖洗3次，用解剖刀剝除芽鱗片，每剝一層鱗片，用0.1％升汞浸泡1分鐘，無(wú)菌水沖洗三次，直至剝至露出生長(zhǎng)點(diǎn)為止；2)，不定芽誘導(dǎo)切取5立方厘米左右的帶生長(zhǎng)點(diǎn)的組織塊接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基MS+6-芐基嘌呤5-10毫克/升+萘乙酸0.5-1.0毫克/升+15％椰子水上誘導(dǎo)不定芽，30天左右有不定芽形成。培養(yǎng)基均含蔗糖30克/升，pH 5.5-5.8，瓊脂0.7％。培養(yǎng)溫度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照1 2小時(shí)/天。椰子水由新鮮上市的椰子中的汁水經(jīng)過(guò)濾而來(lái)。加入椰子汁能明顯提高不定芽的出芽速度和不定芽的生長(zhǎng)速度。3)，繼代增殖培養(yǎng)40天左右將不定芽轉(zhuǎn)移到MS+6-芐基嘌呤5-10毫克/升+萘乙0.5-1.0毫克/升培養(yǎng)基上繼代增殖，一個(gè)周期；4)，壯苗培養(yǎng)增殖到一定代數(shù)后接種到壯苗培養(yǎng)基MS+6-芐基嘌呤1-2毫克/升+萘乙酸0.1-0.2毫克/升上壯苗；5)，生根培養(yǎng)壯苗后，當(dāng)苗高2-3厘米高時(shí)可用于生根，在生根培養(yǎng)基MS+萘乙酸0.5毫克/升+吲哚丁酸2.0毫克/升+0.5％活性炭上能形成完成植株；6)，試管苗移栽當(dāng)試管苗能長(zhǎng)至4-5厘米高時(shí)，轉(zhuǎn)移到自然光下煉苗10天，當(dāng)試管苗能長(zhǎng)至5-6厘米高時(shí)，將其從玻璃瓶中取出，洗凈根部的培養(yǎng)基，移入泥炭加河沙的混合基質(zhì)中，保持適當(dāng)通風(fēng)和足夠的濕度，1周后試管苗可恢復(fù)生長(zhǎng)；
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁殖方法，其特征在于所述的培養(yǎng)基均含蔗糖30克/升，pH5.5-5.8，瓊脂0.7％，培養(yǎng)條件為溫度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照12小時(shí)/天，培養(yǎng)基中所含的椰子水由新鮮上市的椰子中的汁組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁殖方法，其特征在于所述的材料蝎尾蕉是垂序蝎蕉蕉Heliconia rostrata Ruiz & Pavon、扇形蝎尾蕉H.librata Griggs、紅黃蝎尾蕉H.latispatha Bentham cv.Red-Yellow Gyro、金火炬蝎尾蕉H.psittacorum L.f.X H.spathocircinata Aristeguieta cv.Golden Torch、桔紅蝎尾蕉H.psittacorum X H.marginata、火鳥(niǎo)蝎尾蕉H.Stricta Huber cv.Fire Bird、彩虹蝎尾蕉H.psittacorum L.f.cv Sassy、圣溫紅蝎尾蕉H.Psittacorum L.f.cv.St.Vincent Red、多色蝎尾蕉H.psittacorum L.f.cv.Andromeda、火紅蝎尾蕉H.Densiflora Verlot cv. FireFlash。
全文摘要
本發(fā)明涉及蝎尾蕉的組織培養(yǎng)繁殖方法和所使用的培養(yǎng)基。蝎尾蕉是一種新型的熱帶高檔花卉，其株形美觀，花序具有鮮艷的色彩和奇特的造型，觀賞價(jià)值極高，可做園林綠化、盆栽或切花觀賞，應(yīng)用范圍廣，市場(chǎng)潛力大，目前市場(chǎng)產(chǎn)品數(shù)量少，種苗奇缺。蝎尾蕉的繁殖常采用分株繁殖方法，繁殖系數(shù)低，以組織培養(yǎng)法可以加速其繁殖速度獲得大量試管苗，為滿(mǎn)足種苗市場(chǎng)的需要提供一條有效的途徑。目前國(guó)內(nèi)外僅對(duì)少數(shù)蝎尾蕉品種進(jìn)行了組織培養(yǎng)的初步實(shí)驗(yàn)研究，未有大規(guī)模生產(chǎn)和專(zhuān)利申請(qǐng)的報(bào)道。本項(xiàng)目對(duì)10多種蝎尾蕉屬植物的組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)研究。提供了蝎尾蕉屬植物的組織培養(yǎng)繁殖方法和所使用的培養(yǎng)。其外植體消毒方法、培養(yǎng)基成分獨(dú)特且簡(jiǎn)單實(shí)惠，應(yīng)用價(jià)值高。
文檔編號(hào)A01H4/00GK1442045SQ03114209
公開(kāi)日2003年9月17日 申請(qǐng)日期2003年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月14日
發(fā)明者曾宋君, 吳坤林, 張奕奇, 段俊 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院華南植物研究所