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技術(shù)編號：514645

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專利摘要本發(fā)明公開了一種，所述方法步驟為正向引物5’端引入XhoI，對應(yīng)Kex2識別區(qū)域P1’位點(diǎn)分別引入20種氨基酸密碼子，反向引物5’端引入NotI，得20對引物；以目標(biāo)基因CDS序列cDNA或DNA為模板擴(kuò)增，TA克隆得載體群P1’-CDS-pMD20-T；構(gòu)建酵母真核表達(dá)載體群P1’-CDS-pPICZαA；轉(zhuǎn)化載體群至酵母，篩選陽性轉(zhuǎn)化子，并接到Y(jié)PD平板，得相同拷貝數(shù)的轉(zhuǎn)化子群甲醇誘導(dǎo)，分析蛋白產(chǎn)量，即得表達(dá)水平最高的轉(zhuǎn)化子。本發(fā)明制備方法通過對Kex2的P1’氨基酸殘基的優(yōu)選以提高Kex2蛋白酶識別底...
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