上機(jī)測(cè)試，重復(fù)測(cè)試10 次，要求Angle和ΜΑ的CV值< 10%。測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表8和表9:
[0098] 表8 L1精密度測(cè)試結(jié)果
[0099]
[1
[1
[0102]
[
[0104] 由上述測(cè)試結(jié)果可知：質(zhì)控品L1和L2的批間差CV值均在規(guī)定的范圍內(nèi)。均值±2倍 標(biāo)準(zhǔn)差的范圍區(qū)間范圍已經(jīng)非常狹窄了，可以認(rèn)為達(dá)到"標(biāo)準(zhǔn)品"的范疇了。
[0105] 三、血栓彈力圖儀質(zhì)控品的穩(wěn)定性檢測(cè)
[0106] 1、開(kāi)瓶穩(wěn)定性檢測(cè)
[0107] 將實(shí)施例中制得的質(zhì)控品用lml純化水準(zhǔn)確復(fù)溶在室溫(15-25Γ)條件下保存，定 時(shí)取樣一次，檢測(cè)四項(xiàng)凝血參數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表10和表11。
[0108] 表10 L1的開(kāi)瓶穩(wěn)定性測(cè)試數(shù)據(jù)
[0109]
[0110] 表11 L2的開(kāi)瓶穩(wěn)定性測(cè)試數(shù)據(jù)
[0111]
[
[0113] 由上表可知，產(chǎn)品在開(kāi)瓶9小時(shí)以內(nèi)，產(chǎn)品質(zhì)量還是較穩(wěn)定的。24小時(shí)以內(nèi)雖有降 解，但還在質(zhì)控品有效的范圍內(nèi)。因此廣品的開(kāi)瓶穩(wěn)定性完全符合臨床正常檢驗(yàn)時(shí)限（8小 時(shí)）的預(yù)期要求。
[0114] 2、長(zhǎng)期穩(wěn)定性檢測(cè)
[0115] 將實(shí)施例中制備的質(zhì)控品凍干品在2-8°C條件下儲(chǔ)存，分別于0、3、6、9、12、15、18、 21、24個(gè)月時(shí)取出復(fù)溶測(cè)試，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表12和表13。
[0116] 表12 L1長(zhǎng)期穩(wěn)定性測(cè)試數(shù)據(jù) 「01171
[0118]表13 L2長(zhǎng)期穩(wěn)定性測(cè)試數(shù)據(jù)
[0119]
[0121] 統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明：本發(fā)明制備的質(zhì)控品凍干品在2_8°C條件下，保存24個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。 長(zhǎng)期穩(wěn)定性好。
[0122] 本發(fā)明制備的血栓彈力圖質(zhì)控品滿足臨床檢驗(yàn)儀器質(zhì)量控制要求，產(chǎn)品穩(wěn)定性 好，制備工藝相對(duì)簡(jiǎn)單，成本低廉，同時(shí)生物危害風(fēng)險(xiǎn)低。
[0123] 以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以作出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng) 視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟： 步驟1，采集新鮮豬全血，分離血漿； 步驟2,將所述血漿分成2部分，第1部分用于提取纖維蛋白原和凝血因子，第2部分進(jìn)行 適當(dāng)稀釋得到稀釋血漿； 步驟3,將提取的纖維蛋白原和凝血因子加入稀釋血漿中，得到母液，調(diào)節(jié)R值、K值、 Angle值、MA值在L1和L2的范圍內(nèi)，其中L1質(zhì)控品的范圍為R值0-3min、K值0-3min、Angle值 77-89 deg、MA值44-63 mm;L2質(zhì)控品的范圍為R值0-3min、K值0-4min、Angle值68-85 deg、 ΜΑ值24-43 mm; 步驟4，將步驟3得到的溶液進(jìn)行分裝，凍干即得。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于：步驟2所述的 提取纖維蛋白原和凝血因子的方法為:將第1部分血漿置于-20 ± 10°C的環(huán)境下24-48小時(shí)， 然后置于2-8°C的環(huán)境下放置12-24小時(shí)解凍，再將析出的凝塊用絲網(wǎng)過(guò)濾，得纖維蛋白原 粗品，沖洗溶解凍干備用； 上述絲網(wǎng)過(guò)濾液離心，收集下部沉淀，得凝血因子粗品，溶解凍干備用。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:第2部分血漿 的稀釋方法為:取稀釋液與血漿以（1-2) :(2-3)的體積比混合，控制MA值在40±4mm;稀釋液 為梓檬酸鈉和氯化鈉的混合溶液，濃度為3.8wt%的梓檬酸鈉溶液和濃度為0.9wt%的氯化鈉 溶液以1:9的體積混合即得。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于：步驟3所述的 纖維蛋白原和凝血因子加入方法:將纖維蛋白原的干燥品配制成lg/ml的溶液，按照稀釋血 漿體積10%加入纖維蛋白原溶液;凝血因子配制成0.3g/ml的溶液，按照稀釋血漿體積5%加 入凝血因子溶液。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:所配制得母液 的R、K、Ang 1 e、MA四個(gè)參數(shù)值在L1的范圍內(nèi)，對(duì)母液:稀釋液以體積比2:1進(jìn)行稀釋?zhuān)频肔2。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于：步驟1中的豬 全血為生豬屠宰時(shí)割破動(dòng)脈時(shí)采集的新鮮血液，抗凝劑為3.8wt%的檸檬酸鈉溶液，按血液 體積和抗凝劑體積比為9:1輕柔混合均勻。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于該方法具體為： 步驟1獲得豬血漿 在生豬屠宰時(shí)，割破動(dòng)脈取得豬全血，將此豬全血和3.8%wt檸檬酸鈉抗凝劑按9:1的體 積比例混合;混勻后的全血在2-8 °C條件下放置24-48小時(shí)分層，吸取上層血漿;或者是將全 血通過(guò)離心機(jī)分離血漿，離心力3000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，得到上層血漿； 步驟2提取纖維蛋白原和凝血因子 首先取步驟1所得的血漿，置于_20°C冷凍庫(kù)中24小時(shí)，直至凍成冰塊，然后將其置于4-8 °C冷藏12-24小時(shí)，恪融的血漿中出現(xiàn)白色凝塊，用絲網(wǎng)將此白色凝塊從血漿中過(guò)濾分離， 分離的白色凝塊即為纖維蛋白原，將此纖維蛋白原沖洗后溶解于生理鹽水中，凍干備用； 上述絲網(wǎng)過(guò)濾液，用冷凍離心機(jī)2-4°C9000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘收集沉淀物，即得凝血因 子粗品，將此沉淀物溶解于生理鹽水中，凍干備用； 步驟3配制基質(zhì)血漿 取步驟1所得的血漿，首先用血栓彈力圖儀復(fù)鈣測(cè)試R、K、Angle、MA四項(xiàng)參數(shù)基礎(chǔ)值，然 后根據(jù)MA值的大小，用稀釋液進(jìn)行適當(dāng)稀釋?zhuān)沟孟♂屟獫{的MA值在40±4mm之間； 步驟4配制質(zhì)控品母液 將所得的纖維蛋白凍干粉末用純化水溶解，配制成濃度為〇.5-2g/ml的溶液，即為纖維 蛋白溶液； 將所得的凝血因子凍干粉末用純化水溶解，配制成濃度為〇. 1-0.5g/ml的溶液，即為凝 血因子溶液； 按照稀釋血漿使用體積的5-10%加入纖維蛋白溶液，攪勻后得混合溶液1，取樣測(cè)試，控 制混合溶1的MA值控制在55-60mm之間，K值控制在0.5-1.5min之間； 將已調(diào)制符合要求的混合溶液1，按照稀釋血漿使用體積的0.5-2%加入凝血因子溶液， 攪勻后得混合溶液2;取樣測(cè)試，控制混合溶2的R值在0.5-1.5min之間，K值控制在0-1.5min 之間，Angle值控制在77-89deg之間，MA值控制在55-63mm之間。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:所得的混合溶 液2用稀釋液進(jìn)行適當(dāng)稀釋?zhuān)旃春?，取樣測(cè)試，使R值在0_3min之間，K值控制在0-3min之 間，Angle值控制在77-89deg之間，MA值控制在44-63mm之間。9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:所得的混合溶 液2用稀釋液進(jìn)行適當(dāng)稀釋?zhuān)旃春?，取樣測(cè)試，使R值在0_3min之間，K值控制在0-4min之 間，Angle值控制在68-85deg之間，MA值控制在24-43mm之間。10. -種根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制備獲得的血栓彈力圖儀血質(zhì)控品。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及臨床血栓彈力圖儀凝血檢測(cè)項(xiàng)目質(zhì)量控制領(lǐng)域，特別涉及一種血栓彈力圖儀質(zhì)控品及其制備方法。一種血栓彈力圖儀質(zhì)控品的制備方法，該方法包括以下步驟：步驟1，采集新鮮豬全血，分離血漿；步驟2，將所述血漿分成2部分，第1部分用于提取纖維蛋白原和凝血因子，第2部分進(jìn)行適當(dāng)稀釋得到稀釋血漿；步驟3，將提取的纖維蛋白原和凝血因子加入稀釋血漿中，得到母液，調(diào)節(jié)R值、K值、Angle值、MA值在L1和L2的范圍內(nèi)；步驟4，將步驟3得到的溶液進(jìn)行分裝，凍干即得。本發(fā)明所制備的質(zhì)控品有？L1和L？2兩種規(guī)格，穩(wěn)定性好，可滿足檢驗(yàn)室模擬正常和異常兩種血樣質(zhì)控需求。
【IPC分類(lèi)】G01N33/96, G01N1/28
【公開(kāi)號(hào)】CN105652022
【申請(qǐng)?zhí)枴?br>【發(fā)明人】趙蕾, 嚴(yán)靜, 楊柄飛
【申請(qǐng)人】浙江盛域醫(yī)療技術(shù)有限公司
【公開(kāi)日】2016年6月8日
【申請(qǐng)日】2015年12月31日